Laporan Praktikum Genetika

ANALISIS STATISTIK HASIL PENYILANGAN MONOHIBRID DAN DIHIBRID

Drosophila melanogaster
Nafa Febrianti Mutia Dewi*, A.S. Nariswari, D. Sioe, J. Liadi, L. Djamilah, M.N. Latifa, Yosafat, F. S.
Arifudin, N.M. Rizqi
Universitas Indonesia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Departemen Biologi
November 2019

Abstrak
Penyilangan monohibrid merupakan penyilangan dengan satu sifat beda, sedangkan penyilangan dihibrid merupakan
penyilangan dua sifat yang berbeda. Hukum Mendel I dan II mengenai sangat berkaitan erat dengan monohibrid dan
dihibrid karena membahas mengenai pewarisan sifat. Hukum Mendel I membahas tentang segregasi gen, sedangkan
hukum Mendel II membahas tentang asortasi bebas gen. Percobaan dengan menyilangkan Drosophila melanogaster
merupakan salah satu pembuktian bekerjanya hukum mendel. Pemilihan Drosophila melanogaster sebagai subjek
penyilangan karena Drosophila melanogaster memiliki siklus hidup yang relatif pendek, variasi mutan yang banyak,
mudah didapatkan dan mudah dipelihara. Langkah untuk membuktikan adanya kesesuaian data percobaan penyilangan
Drosophila melanogaster dengan hukum Mendel I dan II adalah dengan uji “goodness of fit” (Chi-square). Hasil yang
telah diperoleh berdasarkan percobaan yang telah dilakukan menunjukkan adanya kesesuaian antara rasio data
pengamatan dengan rasio hukum Mendel I, sedangkan pada studi kasus yang diberikan H0 ditolak yang berarti kedua gen
sa ling terpaut dan adanya deviasi.

Kata kunci: dihibrid; Drosophila melanogaster; Hukum mendel; monohibrid; uji chi-square

1. Pendahuluan penyilangan seperti pautan dan pindah silang, pemetaan

Praktikum analisis statistik hasil penyilangan gen, pautan sex, epistasis, maupun perubahan kromosom
monohibrid dan dihibrid dilakukan untuk memahami yang ada pada makhluk hidup (Redfield & Kerfeld
lebih dalam mengenai konsep-konsep dasar tentang 2012: 1). Penyilangan monohibrid merupakan
*) Kelompok 5B 1
perkawinan antara dua individu yang keduanya memiliki
gen heterozigot identik pada suatu lokus sehingga hanya
memiliki satu trait berbeda, contohnya kasus
penyilangan 𝐴𝑎 × 𝐴𝑎. Penyilangan dihibrid merupakan
penyilangan yang dilakukan pada dua individu dengan
gen heterozigot pada dua lokus sehingga memiliki dua
trait berbeda. Contoh dari kasus dihibrid
digambarkan oleh Mendel yang menemukan bahwa
persilangan garis murni kacang ercis yang berbeda trait
menghasilkan keturunan F1 yang secara genetik seragam
dihibrid. Bila F1 tersebut disilangkan akan menghasilkan
tipe parental dan rekombinan pada populasi F2 (King
dkk. 2006: 122).
Mendel merupakan tokoh yang berperan dalam
perkembangan ilmu genetika khususnya mengenai
pewarisan sifat. Eksperimen-eksperimen yang dilakukan
oleh Mendel menghasilkan 2 hukum yang dikenal
dengan Hukum Mendel I dan Hukum Mendel II kedua
hukum ini membahas mengenai kromosom
pewarisan sifat. Hukum Mendel I berbunyi, “Ketika
pembetukan gamet, terjadi pemisahan pasangan alel
sehingga setiap gamet mendapat salah satu pasangan alel
(segregation)”, sedangkan Hukum Mendel II berbunyi
“Ketika pembentukan sel gamet, alel akan berpasangan
secara acak sehingga sifat yang muncul akan bervariasi
(independent assortment)” (Hartl&Jones 2006: 40−45).
Hukum Mendel I menjelaskan mengenai bagaimana
suatu gen tunggal memisahkan diri dalam pewarisan.
Hukum Mendel I ini didapat dari percobaan penyilangan
monohibrid tanaman ercis tinggi dengan tanaman ercis
kerdil. Penyilangan monohibrid tersebut menghasilkan
keturunan dengan perbandingan sifat tinggi dan sifat
kerdil senilai 2,84:1 yang dibulatkan menjadi 3:1. Hasil
penyilangan tersebut menunjukkan bahwa sifat tinggi
merupakan sifat dominan dan sifat kerdil merupakan
sifat resesif pada tanaman ercis. Spesifiknya Hukum
Mendel II menjelaskan bagaimana dua pasang gen
memisahkan diri satu sama lain dalam peristiwa meiosis
maka separuh gamet membawa satu sifat dan separuh
lainnya membawa sifat yang lain. Hukum mendel II
didapat dari hasil percobaan penyilangan dihibrid yang
ini menghasilkan rasio senilai 9:3:3:1 (Hartl&Jones 2006:
62).
Alasan penggunaan Drosophila melanogaster
dalam praktikum genetika memiliki banyak keuntungan
teknis. Drosophila melanogaster mudah untuk
dipelihara, memiliki siklus hidup yang singkat, jantan
dan betinanya dapat mudah dibedakan, bertelur secara
eksternal, menghasilkan banyak keturunan, mudah
ditemukan serta memiliki variasi mutan yang beragam.
Kromosom yang dimiliki oleh Drosophila. melanogaster
berukuran cukup besar namun dengan jumlah sedikit,
yang terdiri dari 3 pasang kromosom autosom dan 1
dan pasang kromosom genosom (Suryo 2005: 176−179).
Siklus hidup Drosophila melanogaster rata-rata
selesai dalam kurun waktu 10 hari pada suhu kamar.
Embrio berkembang sekitar 24 jam sebelum memasuki
tahap larva. Tiga tahap larva yaitu L1 dan L2 yang
berlangsung masing-masing sekitar 1 hari serta L3 yang
berlangsung sekitar 3 hari. Tahap kepompong sekitar 4
hari sebelum menjadi imago. Lalat dewasa matang
secara seksual setelah 2-4 hari dan betina yang telah
dibuahi mulai bertelur. Waktu perkembangan dapat
bervariasi hingga beberapa hari karena pengaruh latar
belakang genetik serta kondisi lingkungan seperti
temperatur, kepadatan populasi, dan kualitas makanan
(Chyb & Gompel 2013: 18).
Goodness of fit merupakan uji kesesuaian hasil
observasi dengan ekspetasi berdasarkan teori. Metode
chi-square (x2) digunakan untuk menghitung nilai
2
goodness of fit. Uji goodness of fit menggunakan chi- melakukan penyilangan antara monohibrid Drosophila
square digunakan ketika ada satu variabel nominal yang melanogaster normal dan mutan, membuktikan
ingin diketahui apakah jumlah observasi dalam setiap kesesuaian hasil penyilangan monohibrid Drosophila
kategorinya sesuai dengan harapan teoritis. Hipotesis nol melanogaster dengan uji “goodness of fit” (Chi-
statistik (H0) yaitu jumlah pengamatan dalam setiap squares), serta melakukan perhitungan studi kasus
kategori sama dengan yang diprediksikan teori biologi penyilangan dihibrid Drosophila melanogaster dengan
dan hipotesis alternatif (Ha) yaitu jumlah yang diamati uji “goodness of fit” (Chi-square).
berbeda dari yang diharapkan. Hipotesis nol biasanya
merupakan hipotesis ekstrinsik, yaitu proporsi yang 2. Metodologi
diharapkan sudah diketahui sebelum melakukan Alat yang digunakan dalam praktikum analisis
percobaan. Bila proporsi perlu dihitung terlebih dahulu, statistik hasil penyilangan monohibrid dan dihibrid
hipotesis tersebut merupakan hipotesis intrinsik Drosophila melanogaste diantaranya adalah botol
(McDonald 2014: 45—47). medium, botol etherizer, pipet tetes, kertas tisu, lup,
Tahapan uji statistik ditempuh melalui cawan petri, kuas, alat tulis, kalkulator, dan tabel chi-
perhitungan jumlah yang diamati (O) dikurangi jumlah square dengan nilai 0,05 (5%)). Bahan yang dibutuhkan
yang diharapkan (E) lalu hasilnya dikuadratkan. dalam praktikum adalah Drosophila melanogaster
Semakin besar penyimpangan dari hipotesis nol, normal dan mutan, dietil eter, dan medium pemeliharaan
semakin besar perbedaan antara yang diamati dan yang bahan yang perlu dipersiapkan untuk membuat medium
diharapkan serta semakin besar pula nilai uji statistik yaitu, akuades 500 ml, agar-agar 7 gr, gula aren 150 gr,
(𝑂𝑖 −𝐸𝑖 )2 pisang ambon 500 gr, yeast 10 gr, asam sorbat 2,5 gr,
yang didapatkan. Rumus uji yaitu χ2 = ∑𝑘𝑖=1 𝐸
.
dan methyl paraben 2,5 gr (dalam alkohol 95% 250 ml).
Tahap terakhir analisis chi-square adalah
Perlengkapan tambahan yang juga perlu dipersiapkan
menginterpretasikan hasil dari x2 untuk menenukan hasil
yaitu, masker penutup untuk menjaga agar tubuh tidak
df atau derajat kebebasan. Df dihitung dengan rumus
terkontaminasi dengan dietil eter berlebih yang bersifat
n−1, n merupakan angka dari kategori yang berbeda dari
korosif (Collins 2012: 162).
setiap data atau jumlah total fenotipe. Derajat kebebasan
Cara kerja praktikum tahap pertama adalah untuk
harus dihitung, karena semakin besar jumlah kategori
mendapatkan parental dengan dipindahkannya masing-
banyak deviasi yang dapat diprediksi untuk
masing koloni Drosophila melanogaster normal dan
menghasilkan kesempata. Hasil x2 hitung dibandingkan
mutan white ke botol etherizer, kemudian Drosophila
dengan x2 tabel (nilai standar probabilitas x2 tabel yang
melanogaster yang ada di botol etherizer dibius dengan
sering digunakan dengan nilai 0,05 (5%)) (Hartl&Jones
menggunakan dietil eter. Drosophila melanogaster yang
2006: 109−110).
sudah pingsan dipindahkan ke cawan petri dan dipilih 3
Tujuan praktikum analisis statistik hasil
jantan dan 9 betina. Drosophila melanogaster yang
penyilangan monohibrid dan dihibrid Drosophila
sudah dipilih dimasukkan ke dalam botol medium yang
melanogaster yaitu untuk memahami hukum pewarisan
diberi label. Langkah kerja ini dilakukan untuk
sifat Mendel pada penyilangan monohibrid dan dihibrid,
3
mendapatkan parental normal dan mutan white. Langkah
kerja tahap kedua adalah untuk mengisolasi betina
virgin, dengan dilepaskan semua Drosophila
melanogaster dari botol medium jika didalamnya sudah
terdapat pupa. Sebelum 8 jam, lalat betina yang baru
keluar dari pupa harus diisolasi untuk mendapatkan
betina yang virgin. Lalat yang baru keluar dari pupa
dibius dengan dietil eter. Setelah lalat pingsan, lalat
dipindahkan ke cawan petri untuk diidentifikasi. Tahap
ini dilakukan untuk memastikan hasil penyilangan yang
didapat merupakan penyilangan murni.
Langkah kerja tahap ketiga adalah untuk
menyilangkan parental. Lalat betina virgin dengan lalat
jantan disilangkan dengan rasio perbandingan 1 jantan
normal : 3 betina mutan dan 1 jantan mutan : 3 betina
normal. Lalat-lalat yang siap disilangkan kemudian
dipindahkan ke dalam botol medium yang sudah diberi
tanggal dan notasi. Langkah kerja terakhir yaitu
penghitungan total keturunan (F2) hasil penyilangan.
Tahap terakhir yaitu, dilakukan penghitungan
menggunakan prinsip-prinsip mendel. Cara kerja studi
kasus yaitu, kasus-kasus persilangan dicermati dan
dianalisis apakah terjadi pautan pada persilangan
menggunakan tabel chi-square. Lalu frekuensi
rekombinasi antara gen terpaut dihitung bila pautan
terjadi pada kasus yang telah dianalisis. Kemudian peta
pautan disusun berdasarkan data frekuensi rekombinasi.
3. Hasil dan Pembahasan
Praktikum penyilangan Drosophila melanogaster
harus melalui tahap pembiusan guna mempermudah
proses pemindahan dan pengidentifikasian jenis kelamin
maupun jenis mutan lalat. Pembiusan dilakukan dengan
cara meneteskan dietil eter ke kertas tisu yang kemudian
dimasukkan ke dalam botol etherizer yang sudah berisi
4
koloni Drosophila melanogaster. Penggunaan betina
virgin dalam praktikum penyilangan dimaksudkan agar
mendapatkan penyilangan yang murni sehingga
pengamatan anakan dapat dicocokan dengan
perhitungan. Isolasi lalat betina virgin dapat dilakukan
dengan melepas semua lalat dewasa ketika sudah
terdapat pupa di botol medium. Lalat betina virgin akan
keluar dari pupa dalam jangka waktu sekitar 6−10 jam
(Geiger. 2002: 3). Penyilangan monohibrid merupakan
perkawinan antara dua individu yang keduanya memiliki
gen heterozigot identik pada suatu lokus sehingga hanya
memiliki satu trait berbeda, contohnya kasus
penyilangan 𝐴𝑎 × 𝐴𝑎 (King dkk. 2006: 122).
Tabel pengamatan siklus hidup Drosophila
melanogaster yang kelompok kami amati menunjukkan
bahwa telur baru dapat terlihat di hari ketiga, sedangkan
menurut literatur, Drosophila melanogaster dapat
menghasilkan telur semenjak dilakukan penyilangan
dalam waktu sekitar 24 jam hingga menetas menjadi
larva instar 1 dalam siklus hidupnya (Dahmann. 2008:
27 – 28). Ketidaksesuaian siklus hidup Drosophila
melanogaster hasil pengamatan kelompok kami dengan
literatur mungkin dikarenakan saat hari pertama dan
kedua telur-telur lalat belum terlalu teramati sehingga
dianggap tidak ada. Selain itu, larva instar II dan III
berhasil diamati pada hari kempat setelah penyilangan
dilakukan. Drosophila melanogaster membutuhkan
waktu sekitar enam sampai tujuh hari untuk mencapai
tahap dewasa sepenuhnya hal ini sesuai dengan yang
didapatkan oleh kelompok 5 siang dimana lalat sudah
siap disilangkan dan sudah dewasa pada hari ke delapan
(Jean & Alexander 2018: 1).
Hasil penyilangan monohibrid Drosophila
melanogaster kelompok 5 siang tidak berhasil dihitung
karena Drosophila melanogaster mati pada tahap F1,
untuk mengganti data perhitungan, kelompok 5 siang
menggunakan data dari kelompok 3 paralel pagi karena
berhasil mendapatkan keturunan hingga tahap F2.
Kelompok 3 pagi menyilangkan lalat normal dengan
lalat mutan ebony. Data yang diperoleh menunjukan
bahwa terdapat 48 ekor lalat yang terdiri dari 31 lalat
normal dan 17 lalat mutan ebony. Berdasarkan hasil
persilangan monohibrid tersebut dengan uji “goodness of
fit” didapatkan X2 hitung sebesar 2,777. Hasil tersebut
menunjukkan bahwa H0 atau hipotesis diterima karena
karena X2 hitung < X2 tabel dan hasil sesuai dengan
Hukum Mendel.
Penghitungan hasil penyilangan dihibrid studi kasus
penyilangan monohibrid dan dihibrid tidak sesuai dengan
hukum mendel. Hal ini dibuktikan dengan hasil x2 hitung
2 2
melebihi nilai x tabel, yang mana hasil x hitung
2
dibandingkan dengan x tabel (nilai standar probabilitas
x2 tabel yang sering digunakan 0,05 (5%)) (Klug dkk
2011: 59). Nilai x2 yang didapat dari studi kasus
2
penyilangan dihibrid 72,148 dan melebihi nilai x tabel,
yaitu 7,815. Hasil tersebut menunjukkan bahwa hasil
penyilangan kedua studi kasus tersebut menunjukkan
perbedaan hasil penyilangan dengan Hukum Mendel
karena adanya deviasi.
4. Kesimpulan
Terdapat dua hukum yang dinyatakan oleh Mendel
mengenai pewarisan sifat pada penyilangan monohibrid
dan dihibrid, yaitu hukum Mendel I mengenai segregasi
dan hukum Mendel II mengenai asortasi bebas. Kedua
hukum Mendel ini berlaku pada penyilangan monohibrid
dan dihibrid, tetapi menyimpang bila ada gen yang
terpaut satu sama lain atau terpaut dengan kromosom X.
Penyilangan monohibrid Drosophila melanogaster
normal dan mutan berhasil dilakukan dan menghasilkan
5
keturunan dengan sifat parental atau rekombinan. Hasil
perhitungan studi kasus penyilangan dihibrid Drosophila
melanogaster menunjukkan bahwa H0 ditolak yang
berarti kedua gen saling terpaut.
Daftar Acuan
Chyb, S. & N. Gompel. 2013. Atlas of Drosophila
Morphology: Wild-type and Classical Mutants.
Academic Press, Massachusetts: xviii+ 242 hlm.
Collins, A.M. 2012. Nanotechnology Cookbook:
Pratical, Reliable, and Jargon-free Experimental.
Elsevier, Oxford: viii + 312 hlm.
Geiger, P. 2002. Care, maintenance and manipulation of
Drosophila. 20 Mei 2012: 4 hlm.
Hartl, D.L. dan Jones, E.W. 2006. Genetics: Principles
and Analysis, 4 th ed. Jones and Bartlett Publishers,
Sudbury, Massachusetts. xxiv + 829 hlm.
Jean & Alexander Heard Libraries. 2018. Life Cycle and
Anatomy of Drosophila. 1 hlm.
King R. C., W. D. Stansfield, & P. K. Mulligan. 2006. A
Dictionary of Genetics. 7th ed. Oxford
University Press, New York: x + 596 hlm.
Klug, S.W., Cummings, M.R., Spencer, A.C., Palladino,
M.A. 2001. Concepts of Genetics, 10th ed. Benjamin
Cummingsm San Fransisco. 876 hlm.
McDonald, J.H. 2014. Handbook of Biological
Statistics. 3rd ed. Sparky House Publishing,
Baltimore, Maryland: 296 hlm.
Redfield, R.J & C.A. Kerfeld. 2012. “Why Do We Have
to Learn This Stuff?”—A New Genetics for 21st
Century Students. PLoS Biology 10(7):
e1001356, 1—4.
Suryo. 2005. Genetika manusia. Gadjah Mada
University Press, Yogyakarta: xvi + 540 hlm.
Lampiran
Tabel 1

6
Tabel 2

7
 Tabel 3

Table of Chi-square (x2) 5% Critical Values

8
Diagram penyilangan monohibrid

P1 ♂ w+ w+ X ♀ ww
Normal mutan white

Gamet: w+ w

w+w
normal
P2 ♂ w+w X ♀ w+w
Normal mutan white

Gamet:
Sperma w+w ovum: w+w

Data kelompok 3
Tabel notasi genotipe Drosophila melanogaster P (wildtype)

Jumlah Seks Warna/Benintuk mata Bentuk Sayap Warna Tubuh

6 Betina Merah bata [Tidak teramati] Coklat keabuan

2 Jantan Merah bata [Tidak teramati] Coklat keabuan

Total:8

Tabel notasi genotipe Drosophila melanogaster P (Mutan)

Jumlah Seks Warna/Bentuk mata Bentuk Sayap Warna Tubuh

6 Betina Normal [Tidak teramati] ebony

2 Jantan Normal [Tidak teramati] ebony

Total: 8

9
Tabel notasi genotipe Drosophila melanogaster F1

Jumlah Seks Warna/Bentuk mata Bentuk Sayap Warna Tubuh

2 Jantan Merah bata Normal Coklat keabuan

6 Betina Merah bata Normal Coklat keabuan

2 Betina Merah bata Taxi Coklat keabuan Botol 1

Total:10

Jumlah Seks Warna/Bentuk mata Bentuk Sayap Warna Tubuh

3 jantan Merah bata Normal Coklat keabuan

9 betina Merah bata Normal Coklat keabuan

Botol 2

Total:12

10
Tabel notasi genotipe Drosophila melanogaster F2

Jumlah Seks Warna/Bentuk mata Bentuk Sayap Warna Tubuh

3 jantan normal normal ebony

1 betina normal taxi ebony

3 betina [tidak teramati] normal ebony Botol 1

1 jantan normal normal Coklat keabuan

4 betina [tidak teramati] normal Coklat keabuan

Total:12

Jumlah Seks Warna/Bentuk mata Bentuk Sayap Warna Tubuh

3 jantan normal normal ebony

7 betina normal normal ebony

14 betina normal normal Coklat keabuan Botol 2

12 jantan normal Normal Coklat keabuan

Total:36

Total seluruh mutan F2 = 17 dan total seluruh normal F2 = 31

Perhitungan x2
(𝑂−𝐸)2
x2 = ∑
Observed: 𝐸

(31−36)2 (17−12)2
• Total ebony = 17 x2 =
36
+
12
• Total normal = 31
25 25
x2 = +
Expected: 36 12

3 x2 = 0,694 + 2,083
• normal = x 48 = 36
4
1 x2 = 2,777
• ebony = x 48 = 12
4

11
 Soal Studi Kasus

1. Hasil penyilangan dihibrid Drosophila melanogaster tx+txb+b dengan genotipe sejenis menghasilkan f2 dengan
progeni 300 individu yang terdiri dari 200 sayap normal dan badan normal, 25 taxy dan badan normal, 30 black dan
sayap normal, dan 45 black dan sayap taxy. Apakah hasil penyilangan tersebut sesuai hukum mendel?

Jawaban:

Hipotesis

H0: tidak terdapat perbedaan antara hasil observasi dan ekspektasi

Kriteria keputusan:

X2hitung > X2(df, a); H0 ditolak

Berdasarkan hukum mendel maka perbandingan yang seharusnya didapat adalah 9:3:3:1 dengan fenotipe normal, taxi
normal, normal black, dan black. Jumlah berdasarkan soal normal = 900, taxi normal = 25, normal black = 30, dan taxi
black = 45. Jumlah n = 4

Perhitungan:

3/16 x 300 = 56,5

1/16 x 300 = 18,75

9/16 x 300 = 168,75

X2= (25-56,25)2/56,25 + (30-56,25)2/56,25 + (45-18,75)2/18,75 + (200-168,75)2/168,75

X2= (17,361 + 12,25 + 36,75 + 5,787)

X2= 72,148

Kesimpulan : H0 ditolak karena X2hitung > X2tabel

12