LABORATORIUM BALAI KARANTINA PERTANIAN KELAS I JAYAPURA

FORMULIR TEKNIS
Nomor Bagian : FT 7.6.1-2 Terbitan / Revisi ke : 1/0 1 dari 1Paraf :
Halaman ke : 1 dari 1 Tanggal Terbit/Revisi : 10 Nov 2021

KETIDAKPASTIAN PENGUKURAN PENGUJIAN METODE KUANTITATIF

METODE UJI : Real Time PCR AI

Tanggal : 25 September 2023

Laboratorium : Serologi
Pelaksana : drh. Fikri
Jenis Sampel : Ekstraksi RNA

Perhitungan ketidakpastian:

Metode yang digunakan untuk mengestimasi ketidakpastian untuk uji RT PCR adalah metode pendekatan
sampel kontrol atau ‘top-down’. Metode ini dapat digunakan untuk monitoring keseluruhan performa
prosedur dan dapat secara langsung mengestimasi ketidakpatian kombinasi dari prosedur uji.
Sampel yang digunakan adalah RNA positif kontrol yang biasa digunakan, lalu diuji 10 kali. Cycle threshold
(CT) yang dihasilkan kemudian dihitung dalam bentuk log.

Tabel 1. Nilai CT hasil pengujian RT PCR

Pengujian
Hasil (x) Log x
(n)
1 22,28 1,347915187
2 22,06 1,343605508
3 22,52 1,352568386
4 22,34 1,349083169
5 22,41 1,350441857
6 22,57 1,353531559
7 22,38 1,349860082
8 22,98 1,361350024
9 22,51 1,352375495
10 22,07 1,343802333

Dari data diatas kemudian dihitung

Rata-rata (X) = 1,35045336
Standar deviasi (SD) = 0,00486
Relative Standard Deviation (RSD) = 0,00360
Ketidakpastian diperluas (U95) = 0,00720

Data estimasi ini kemudian dapat diaplikasikan pada tingkat ambang. Pada uji ini positive cut off CT adalah
< 37. Sedangkan negatif cut off CT adalah > 40
Perhitungan tingkat ambang (level threshold) untuk hasil positif adalah sebagai berikut :
95% CI = 37 ± (50 x U95)
= 37 ± (50 x 0,00720)
= 37 ± 0,35
 LABORATORIUM BALAI KARANTINA PERTANIAN KELAS I JAYAPURA

FORMULIR TEKNIS
Nomor Bagian : FT 7.6.1-2 Terbitan / Revisi ke : 1/0 1 dari 1Paraf :
Halaman ke : 1 dari 1 Tanggal Terbit/Revisi : 10 Nov 2021

Sedangkan perhitungan tingkat ambang (level threshold) untuk hasil negatif adalah sebagai berikut :
95% CI = 40 ± (50 x U95)
= 40 ± (50 x 0,00720)
= 40 ± 0,35

Interpretasi : Setiap hasil positif (CT<37) yang lebih dari 37,35 tidak positif dengan kepercayaan 95%. Begitu pula
sebaliknya, setiap hasil negatif (CT>40) yang tidak kurang dari 40,35 tidak negatif pada level kepercayaan 95%.