Pertemuan 2
Pertemuan 2
DAN KALIBRASI
SABTU, 16 September 2023 PENGUJIAN HALAL
01
01
Kebijakan Analisa Laboratorium
Analisis Porcine
02
01
Analisis Alkohol
03
01
PART Kebijakan Analisa Laboratorium
1
֍ Kebijakan Analisa Laboratorium
❑ Salah satu dokumen pendukung dalam sertifikasi halal adalah autentifikasi melalui uji laboratorium untuk
memastikan tidak terjadinya kontaminasi dan pencampuran bahan haram maupun pemalsuan produk
Click here to add a title
menggunakan bahan haram.
Click here
❑ Surat Keputusan Lembaga Pengkajian Pangan, Obat-obatan Dan Kosmetika to Ulama
Majelis add aIndonesia
title Nomor :
SK49/Dir/LPPOM MUI/XII/14 Tentang Kebijakan Analisa Laboratorium menyatakan bahwa beberapa produk
termasuk sediaan obat dan eksipien yang digunakan dalam pembuatanTitle
obat numbers,
wajibetc., can be changed
dilakukan by clicking
analisa laboratorium
and re-entering, and fonts, font sizes, colors,
dengan target uji berupa protein babi, DNA babi, kadar etanol pada saatleadings,
proses andsertifikasi
so on can beoleh LPPOM
modified MUI.
in the top
Start panel. Suggested
❑ Protein babi diperiksa dengan metode analisa PDK (Pork Detection Kit),body12Number,1.3Double
DNA babi diperiksaworddengan metode PCR
spacing.
(Polymerase Chain Reaction), dan kadar etanol diperiksa dengan metode GC (Gas Chromatography).
❑ Pengujian laboratorium tidak bersifat wajib (mandatory) pada saat pengajuan produk halal, namun lebih untuk
mendukung data jika ada keraguan saat pengambilan ketetapan untuk kehalalan suatu produk karena pengujian
laboratorium memerlukan biaya besar yang justru dapat memberatkan perusahaan.
֍ Analisa Laboratorium
4 Produk yang mengandung gelatin, contoh kapsul, coklat, permen, cake,and re-entering, and fonts, font sizes, colors,
DNA
leadings, and so babi
on can Bahan
be modified in thebaku
top (gelatin)
vitamin, obat, resin, kosmetik Start panel. Suggested
2
֍ Analisa Porcine
Metode Prinsip Jenis Metode Standar
Analisa
Berbasis Protein Interaksi antibodi- enzime linked immunosorbent assay (ELISA),
antigen SDS PAGE dan rapid kit (Porcine Detection
Kit) Click here to add a title
Berbasis DNA Teknologi amplifikasi PCR, Real Time PCR, Digital PCR serta SNI ISO/TS 20224-3:2020 tentang Analisis
DNA LAMP (Loop mediated isothermal
Click here to add a title
biomarker molekuler Deteksi bahan turunan
amplification), hibridisasi DNA, sequensing hewan pada bahan pangan dan bahan pakan
DNA dan microarray DNA menggunakan real-time PCR
Title numbers, etc., can be changed by clicking
Metode Prinsip Sampel Deteksi and re-entering, and fonts, font sizes, colors,
Analisa leadings, and so on can be modified in the top
Start panel. Suggested
FTIR dan Vibrasi molekul Daging dan gelatin Gugus fungsi Amide-I (1700–1600 cm−1) dan Amida-II
body12Number,1.3Double (1565–1520 cm−1)
word spacing.
kemometrik yang aktif IR
HPLC/MS Kepolaran Gelatin kulit dan Peptida spesifik dengan urutan GPPGSAGSPGK dan GPPGSAGAPGK
tulang
GC/MS Kepolaran Daging Asam lemak Analisis metabolisme metabolit di otot, lemak intramuskular, dan lemak
intermuskular dalam daging
Note: Verifikasi dan Validasi Metode
֍ Analisa Porcine
▪ Pita khusus untuk gelatin sapi memiliki berat molekul yang lebih tinggi (125 kDa dan 140 kDa) dari pada pita-pita
digelatin babi (110 kDa dan 125 kDa). Oleh karena itu, pita protein pada140 kDa dapat digunakan untuk penanda
bovine gelatine sedangkan pita protein pada 110 kDa digunakan untuk penanda gelatin babi.
֍ Analisa Porcine
Interpretasi hasil
pengujian menggunakan
Pork Detection
Test/Porcine Test
• Kelemahan metode berbasis protein adalah sifat protein yang tidak stabil terhadap panas dan perlakuan
lain pada proses produksi
• Metode berbasis DNA memberikan hasil yang lebih sensitif danClick
spesifik dibandingkan
here to add a dengan title metode
berbasis protein
• Spesifik karena setiap spesies memiliki fragmen sekuen DNA yangClick
conseve dapat
here to add menjadi
a titleDNA
penanda/marker.
• Sensitif karena mampu mendeteksi DNA dalam jumlah yang sangat sedikit melalui proses amplifikasi DNA.
Kandungan DNA spesifik spesies masih dapat dideteksi meskipun produknya telah
Title numbers, etc., mengalami
can be proses
changed by clicking
and re-entering, and fonts, font sizes, colors,
pengolahan yang kompleks karena sifat DNA yang tahan panas. leadings, and so on can be modified in the top
Start panel. Suggested
Metode Berbasis DNA body12Number,1.3Double word spacing.
a. Metoda PCR
▪ Metode PCR adalah metode amplifikasi urutan fragmen DNA tertentu secara in-vitro menggunakan sepasang
primer (oligonukleotida) yang komplementer dengan urutan cetakan DNA tertentu dengan bantuan enzim
DNA polymerase
▪ Metode PCR banyak digunakan untuk mendeteksi DNA spesifik spesies tertentu seperti
spesifik porcine (babi), bovine (sapi), ovine (domba) atau bahkan spesifik manusia.
֍ Analisa Porcine
▪ Tiga tahap utama dalam PCR yaitu: Click here to add a title
yang mengandung :
5 Mm KPO4 pH 8.0 atau similar, 80% EtOH.
֍ PCR adalah metode teknik amplifikasi untuk memperbanyak urutan DNA tertentu
Title numbers, etc., can be changed by clicking
(fragmen DNA ) secara in vitro (dalam tabung ) menggunakan sepasang primer
and re-entering, and fonts, font sizes, colors,
yang komplementer dengan urutan template DNA. leadings, and so on can be modified in the top
Start panel. Suggested
bufer reaksi, MgCl2, melalui siklus yang terdiri dari denaturasi, penempelan
primer (annealing) dan pemanjangan
֍ Analisa Porcine
qPCR Components
Click here to add a title
▪ Fourier-transform infrared spectroscopy (FTIR) adalah teknik yang digunakan untuk mengukur seberapa banyak
cahaya yang diserap sampel pada setiap panjang gelombang infra merahClick here molekul
pada vibrasi to addyang a title
mengalami
perubahan momen dipol (aktif IR).
▪ Kemometrik yaitu ilmu turunan dari matematika atau statistik kedalam data
Clickkimia.
here to add a title
▪ Pada Analisa porcine puncak terkait dengan gugus fungsi Amide-I (1700–1600 cm−1) dan Amida-II (1565–1520 cm−1)
▪ Ada tiga teknik pengambilan sampel utama dalam spektroskopi FTIR: transmisi, transfleksi (pemantulan), dan
reflektansi (ATR). Title numbers, etc., can be changed by clicking
and re-entering, and fonts, font sizes, colors,
leadings, and so on can be modified in the top
Start panel. Suggested
body12Number,1.3Double word spacing.
֍ Analisa Porcine
▪ Sampel dideteksi dengan spektrometri massa yang akan menganalisis analit berdasarkan rasio masa terhadap muatan (m/z).
֍ Analisa Porcine
(A) = spektrum MS/MS pada m/z 911.6 sesuai dengan urutan peptida
dalam gelatin sapi (GPPGSAGSPGK)
(B) = Spektrum MS/MS pada m/z 895,4 sesuai dengan urutan peptida
dari gelatin babi (GPPGSAGAPGK) (Zhang dkk., 2009)
֍ Analisa Porcine
❖ Fase gerak.Title
Merupakan gas
numbers, etc., canyang memiliki
be changed sifat inert seperti helium
by clicking
GC/MS. and re-entering, anddan fonts, font sizes, colors,
nitrogen.
leadings, and so on can be modified in the top
Sample Injection System
Start panel. Suggested
❖ Fase diam. Merupakan lapisan cairan mikroskopis atau polimer
body12Number,1.3Double word spacing.
yang akan menempati kolom
Click
Ekstrakhere
yang to add
larut a title
dalam air benar-benar
dikeringkan sentrifugal
Ekstrak yang larut dalam air benar-benar dikeringkan menggunakanpengeringan menggunakanpengeringan
selama 60 menit sentrifugal
dan
selama 60 menit dan pengeringan beku selama16
pengeringan beku selama16 jam Sampel kering dilarutkan dalam 80 Title
L ofpiridin yang
numbers, etc., canmengandung 20 mg/mL
be changed by clicking
jam Sampel kering dilarutkan dalam 80 L piridin
methoxyaminehidroklorida selama 30 menit dengan pengocokan padaand re-entering,
1200 and fonts,
rpmoleh font sizes, colors,
pengocok. Campuran
yang mengandung 20 mg/mL
leadings, and so on can be modified in the top
diderivatisasi dengan 40L MSTFA selama 30 menit dengan pengocokan pada 1200 rpm pada37°C.selama
methoxyaminehidroklorida Setelah 30sentrifugasi
menit
Start panel. Suggested
sampel pada 16.000 × gselama 5 menit pada 4°C, 50 L supernatan yangdengan
dihasilkandigunakan
pengocokan pada
body12Number,1.3Double
untuk
word1200
analisis GC/MS.
rpm. Campuran
spacing.
diderivatisasi dengan 40L MSTFA selama 30 menit
dengan pengocokan pada 1200 rpm pada 37°C.
Setelah sentrifugasi sampel pada 16.000 × g
selama 5 menit pada 4°C, 50 L supernatan yang
dihasilkan digunakan untuk analisis GC/MS.
(Ueda dkk., 2018)
֍ Analisa Porcine
PCA (Principal Component Analysis) Metode yang mereduksi dimensi dengan menggunakan
beberapa garis/bidang yang disebut dengan principle components
Catatan:
Click here to add a title
- Pahami polaritas sampel, fasa gerak dan fasa diam (polar berinteraksi baik dengan polar, non polar
berinteraksi baik dengan non polar)
Click here to add a title
- Pemahaman polaritas akan menentukan pilihan fasa gerak, kolom (fasa diam) yang digunakan dalam HPLC
dan GC.
- Pahami pengaturan kecepatan aliran fasa gerak, karena menentukan bagus
Title numbers,tidaknya pemisahan
etc., can be changed by clicking
- HPLC digunakan untuk analisis zat yang tidak menguap (volatile) sedangkan
and re-entering,pada gasfont
and fonts, kromatografi
sizes, colors,
sampel mudah menguap dan stabil terhadap panas. leadings, and so on can be modified in the top
Start panel. Suggested
- Perbedaan paling spesifik antara HPLC dan GC adalah pada fase geraknya. Fase gerak HPLC menggunakan
body12Number,1.3Double word spacing.
media cair dengan tekanan tinggi oleh pompa, sedangkan fase gerak pada GC menggunakan gas tanpa
pompa yang dilewatkan ke kolom oven.
PART ANALISIS ALKOHOL
3
֍ Analisa Alkohol
❑ Kadar alkohol/etanol diperiksa dengan metode HPLC (High Performance Liquid Chromatography) dan GC (Gas
Chromatography) (Metode Deteksi dan Kuantifikasi Etanol pada Produk Minuman (SNI 8965:2021))
Bahan, Peralatan, dan Kondisi (SNI 8965:2021) Click here to add a title
Bahan
▪ Etanol kualitas standar atau minimal kualitas kromatografi Click here to add a title
▪ 1-Propanol atau n-Propanol kualitas standar atau minimal kualitas kromatografi
▪ Gas helium kualitas ultra high purity (UHP)
▪ Gas hidrogen kualitas UHP Title numbers, etc., can be changed by clicking
and re-entering, and fonts, font sizes, colors,
Peralatan untuk preparasi contoh dan standar leadings, and so on can be modified in the top
▪ Neraca analitik dengan ketelitian 0.1 mg Start panel. Suggested
▪ Labu takar (volumetric flask) 10-mL, 25-mL, 50-mL body12Number,1.3Double word spacing.
▪ Labu distilasi dengan ukuran yang sesuai
▪ Pipet Mohr
▪ Pipet tetes
Skema Rangkaian
Distilasi
c. Kondisi GC-FID:
▪ Mode operasi: split (split ratio 30:1)
TEXT
TEXT
TEXT
TEXT
֍ TUGAS
TEXT
TEXT
THANK
2023 YOU!