*t*
I fJ/.:
-)
PROSES STERILISASI DAN PENANGANAN KONTA,UNVNST
PENDAHULUAN
Sterilisasi mempunyai peranana penting dalam keberhasilan teknik kultur
jaringan Guna mencegah terjadinya kontaminasi maka perlu dirancang suatu
laboratorium/ruang kerja kultur jarmgan yang khusus, terpisah arrtara bagian
persiapan, pembuatan media dan ruang penabur (penanamarf
eksplant yang diambil dari lapangan. Hindarkan tempat tersebut dari genangan air
maupun lembab.
Sterilisasi media yang mengandung bahan kimia tidak mudah rusak dilakukan
sterilisasi dengan menggunakan aoutoklaf pada temperalw 121 'C dengan tekanan
anatara 15 - 17,5 psi dengan waktu antara 20 - 25 menit tergantung dari volume
wadah dan media.
Bahan-bahan yang bersifal heat labile dalam bentuk larutmy sterilisasi
dilakukan dengan cara menyaling dengan menggunakan filter yang berukuran 0,2 -
0,22 trtJr{, contoh bahan kimia yang bersifat heat labile antwa lain GA3, thiamin HCI
media yang banyak mengandung karbohidrat, vitamin dan berbagai mineral akan
segera ditumbuhi bakteri maupun cendawan. Dalam beberapa hari saja eksplan yang
telah ditanam akan tertutupi oleh kontaminan tersebut, sehingga eksplan akan mati.
Bahan yang digunakan untuk sterilisasi eksplant bermacam-macarrL
bergantung pada jenis tmamanny4 bahan tanaman yang akan digunakaa lingkungan
tempat tumbuh, musirq umur tanaman dan kondisi tanaman. Dalam stedlisasi bahan
tanaman hal penting yang harus diperhatikan adalah bahwa sel tanaman dan sumber
bio.unsoed.ac.id
(detergen) dengan tujuan memperluas permukaan kontak arfiatu bahan kimia
(desinfektan) dengan bahan tanaman.
Jenis bahan kimia Konsentrasi Waktu untuli sterilisni
steril dan hidup selanjutnya di tanam dalam media steril. Perlu diperhatikan bahwa
pekerjaan tersebut di atas dilakukan di dalam Laminaier air JIow atau enkas yang
telah disetrilkan.
memasuki ruangan tersebut matikan lampu UV, karena lampu UV mempunyai energi
cukup besar dapat menyebabkan irritasi pada organ yang sensitive. Setelah lampu lfV
dimatikan semprotkan dengan menggunakan alcohol 70Ya atau formalin. Gunakan
laminaier atau kotak penabur setelah diperkirakan uap formalin hilang.
bio.unsoed.ac.id
PENUTUP
Keberhasilan dalam sterilisasi kotak penabur, media dan bahan ymg dm
jaringan
ditanam (eksplan) sangat menentukan keberhasilan dalam teknik kutur
tanaman, oleh karena itu teknik sterilisasi harus dilakukan dengan benar.
DAFTAR PUSTAKA
George, AS dar P.D. Sherington. 1984. Plarrt Propagation by Tissue culture'
Exegenic Limited. England.
bio.unsoed.ac.id