Praktikum KBA II

“Cara Mengkolom Menggunakan Kolom Vlc”

Kelompok 11 :

Putri Aulia (1801065)

Putri Zahra (1801066)
Syalshabillah (1801074)

Dosen pengampu : Apt. Haiyul Fadhli, M.Sc

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI RIAU
Apa itu kolom vlc?
Kromatografi cair vacum (KCV) atau kromatografi Suction Column atau
Vacum liquid chromatography (VLC) adalah bentuk kromatografi kolom yang
khususnya berguna untuk fraksinasi kasar yang cepat terhadap suatu ekstrak.
Kondisi vakum adalah alternatif untuk mempercepat aliran fase gerak dari atas ke
bawah.

Kromatografi Cair Vakum (KCV) merupakan salah satu metode fraksinasi yaitu
dengan memisahkan crude extract menjadi fraksi-fraksinya yang lebih sederhana.
Pemisahan tersebut memanfaatkan kolom yang berisi fasa diam dan aliran fasa
geraknya dibantu dengan pompa vakum. Fasa diam yang digunakan dapat berupa
silika gel atau alumunium oksida (Ghisalberti, 2008).
Kromatografi vakum cair dilakukan
untuk memisahkan golongan senyawa
metabolit sekunder secara kasar dengan
menggunakan silika gel sebagai
absorben dengan berbagai
perbandingan yaitu pelarut n-heksana :
etil asetat : metanol (elusi gradien) dan
menggunakan pompa vakum untuk
memudahkan penarikan eluen
(Helfman, 1983).
Prinsipnya yaitu adsorpsi dan partisi
yang dipercepat bantuan pompa
vakum. Keuntungan dari metode ini
adalah prosesnya cepat dan senyawa
tertarik secara sempurna. Kerugiannya
adalah pemisahanya tidak sempurna
karena senyawa yang ditampung
bercampur dalam suatu penampungan
tidak seperti pada kolom konvensional
yang dipisahkan berdasarkan warna,
sehingga pemisahannya lebih maksimal
VLC

Alat yang digunakan terdiri

dari corong G-3, sumbat
karet, pengisap yang
dihubungkan dengan pompa
vakum serta wadah
penampung fraksi
 Alat dan Bahan
Alat :

Kertas saring

Batang pengaduk Botol cokelat Gelas kimia

Pompa vakum

Pipet tetes
Cawan porselen
Statif dan klem
Bahan

• Ekstrak sampel
• Aluminium foil
• Etil-asetat
• Metanol
• N-hexana
• Silica gel halus dan kasar
 Cara Kerja

Cara kerja

Prosedur Kerja
Penyiapan Kolom Penyiapan Ekstrak Kromatografi Cair Vacum
 Cara kerja
Penyiapan Kolom

 Alat-alat perangkat kromatografi kolom dicuci

dengan metanol dan dikeringkan
 Dirangkai alat kolom dan ditegakkan dengan
bantuan statif dan klem.
Penyiapan Ekstrak

1 •Disiapkan alat dan bahan

2 •Ditimbang ekstrak sebanyak 1 gram

•Ekstrak dilarutkan dengan sedikit suspensi silika

3 dalam n-hexana

•Ekstrak dihomogenkan sampai tercampur merata

4 dan pelarutnya menguap, ekstrak siap digunakan.
 Prosedur Kerja Kromatografi Cair Vacum

Kolom yang telah dipasang dimasukkan kaca

pada ujung kolom (dasar kolom),
Disiapkan alat dan dimasukkan silika yang telah disiapkan
bahan secara perlahan-lahan, kemudian
dimampatkan, lalu dimasukkan kertas saring
dan dimasukkan sampel perlahan-lahan.

Dimasukkan perbandingan eluen satu persatu

mulai dari non-polar hingga polar,
Cairan yang keluar perbandingannya yaitu heksan:etil asetat (50:0)
ditampung sebagai ditambahkan melalui dinding kolom dan pompa
fraksi dan dipisahkan vakum dijalankan sehingga eluen turun dan
berdasarkan konsentrasi mengelusi komponen kimia. Kemudian
eluen dan diuapkan serta di dilanjutkan dengan cairan yang kepolarannya
profil KLT. lebih tinggi, berturut-turut yaitu heksan:etil asetat
(15:1), (10:1), (5:1), (1:1), (0:50),
(1:1), (1:5), dan (50:0). 
 Faktor-faktor yang perlu diperhatikan
dalam kromatografi kolom vakum cair
adalah :

1. Cara penyiapan kolom 2. Penambahan sampel

Pemilihan kolom dan cara-cara
penyiapannya harus benar
supaya diperoleh kolom yang
baik dan serba sama yang dapat
menjamin terjadinya elusi yang
baik. 
kedalam kolom.
Sampel yang telah disiapkan
dengan benar baru ditambahkan
secara kuantitatif kedalam
kolom.
Lanjutan…

3. Kolom yang digunakan harus

dalam keadaan kering agar tidak
mengganggu pada saat proses
elusi. Sebelum digunakan harus
dibilas terlebih dahulu dengan
metanol, agar dinding kolom
kering.
 THANKS!
CREDITS: This presentation template was created by ​Slidesgo​,
including icons by Flaticon​, infographics & images by ​Freepik