DASAR-DASAR DIAGNOSTIK

MIKROBIOLOGI KLINIK
 TERAPI TEPAT

PENYAKIT INFEKSI
DIAGNOSE TEPAT

PENGENDALIAN
 SPECIMEN METHODE
Tepat Spesifik
Sensitif

DIAGNOSE
MIKROBIOLOGI
TEPAT

ALAT/REAGENSIA SDM
Teruji Terlatih
Berdedikasi tinggi
SPECIMEN: BAIK
Tepat bahan
Tepat waktu pengambilan
Tepat lokasi pengambilan
Tepat cara pengambilan
Tepat cara simpan dan transportasi
Tepat jumlah
PENGAMBILAN SPECIMEN
1. CARA
Steril : lokasi pengambilan, alat untuk mengambil, wadah
2. WAKTU
- sebelum terapi antibiotic
- pd stad peny ttt dimana mikroba penyebab bisa
ditemukan.
- tifoid : isolasi Salmonella dari darah → mg pertama
penyakit
- furunkel: matang, atau pada saat insisi
- Sewaktu, pagi hari, atau dikumpulkan 24 jam
3. LOKASI
kemungkinan ditemukan penyebab : paling jelek
paling dalam
4. JUMLAH : sesuai kebutuhan.
PENYIMPANAN SPECIMEN
- Wadah: steril dan bisa ditutup rapat
(botol bertutup sekrup).
- Waktu penyimpanan : harus segera
diproses, tdk boleh lebih dari 24 jam.
- Temperatur: tergantung bakteri yg
dicurigai : 4oC, suhu kamar → (perlu
gambaran klinik)
- Bl perlu : medium transport
TRANSPORTASI SPECIMEN
- Harus dalam lingkungan yang cocok untuk
bakteri yang dicurigai.
- medium transport
- Suhu kamar atau termos berisi es
- Wadah tidak boleh dibawa dengan tangan
telanjang.
- Jarak jauh : “ BERISI BAHAN YG
MENGANDUNG PENYEBAB PENY “.
IDENTIFIKASI BAKTERIOLOGIS
SPECIMEN
BAKTERI MAKROMOLEKUL

Ag Ab DNA
Preparat Botol/med.
langsung transpor

Mikroskopis Isolasi
A. Pemeriksaan Mikroskopis
SPECIMEN

PREPARAT
LANGSUNG

PREPARAT BASAH PEWARNAAN

GRAM TAHAN ASAM FLUORESCENCE

Preparat langsung
1. Preparat basah
- morfologi
- gerakan
2. Preparat diwarnai
a. Gram: morfologi, sifat Gram
b. Tahan asam: morfologi, sifat TA
c. Fluorescence: me↑ sensitivitas
Pewarnaan Gram
Pewarnaan Tahan Asam
Pewarnaan Fluorescence
Medium :
lingkungan buatan yang dipakai untuk
mempertahankan kehidupan dan
mengembang-biakkan bakteri di luara tubuh
inang

Menurut komposisi
- Medium padat: agar (bukan untuk
makanan bakteri)
- Medium cair
- Medium semisolid : agar 0,8%
Medium: menurut fungsi
1. Basic medium : BHI, Nutrient
2. Transport medium = carrier medium:
Carry and Blair, Stuart
3. Enriched medium: Blood agar
4. Enrichment medium
5. Selective medium
6. Differential medium
7. Special medium
8. Anaerobic medium
Menanam pd medium padat
• Koloni :
massa pertumbuhan bakteri di atas
permukaan medium padat

• Koloni tersendiri (isolated colony):

koloni yg terpisah, yg merupakan turunan dri
satu sel bakteri.
Koloni:
massa pertumbuhan bakteri di atas medium
padat yg berasal dr satu sel bakteri
C. Identifikasi dari biakan
1. Gambaran koloni
2. Gram: Morfologi & sifat Gr
3. Gerakan pd medium padat
atau semi-solid
4. Sifat-sifat biokimia
5. Identifikasi makromolekul:
Ag, Ab dan DNA/RNA
Gambaran koloni
1. Tepi dan bentuk
2. Besar
3. Elevasi
4. Kejernihan
5. Warna : pigmen, rx kimia
6. Hemolisis : α, ß, & γ
Gambaran koloni
Warna koloni : pigmen
Hemolisis ß & non-hemolisis
Buat biakan murni
Tes-tes biokimia
1. Metabolisme KH
- Tes peragian gula-gula, Tes VP-MR
2. Metabolisme protein
- Tes indol
3. Metabolisme lemak (jarang)
4. Penggunaan zat tertentu
- Tes citrat
5. Dihasilkannya zat tertentu
- Tes katalase, tes koagulase
Tes Peragian gula-gula
glukosa laktosa
Triple Sugar Iron (TSI) Agar
Peragian gula-gula, pemecahan protein
Pemakaian Citrat sbgi sumber E
tes citrat
Dihasilkan enzim
DNAse test
D. IDENTIFIKASI AG & AB
Prinsip = reaksi ag-ab invitro:
1. Reaksi agglutinasi
2. Reaksi presipitasi & flokkulasi
3. Reaksi ikatan komplemen
4. Immuno-fluoresensi
5. Radio-immuno assay (RIA)
6. Enzyme linked immunosoebent assay
(ELISA)
7. Blotting immuno assay
Reaksi Agglutinasi
1. Agglutinasi dgn. Sel bakteri utuh :
- Widal
- Gol. Darah
2. Aggl. dgn Ag partikel halus = particle aggl.
a. Agglutinasi lateks (deteksi bakteri)
b. Koagglutinasi (deteksi bakteri)
c. Agglutinasi partikel gelatin (MLPA)
d. Hemagglutinasi (TPHA)
Reaksi presipitasi & flokkulasi
1. Tes flokkulasi
- VDRL
- RPR
Deteksi reagin dlm serum pend suspek sifilis

2. Tes presipitasi dlm gel

1. Immuno-double diffusion : deteksi Ag
atau Ab.
2. Radial immunodiffusion: deteksi Ag atau Ab
secara kualitatif &kuantitatif.
ELISA
(Enzym-linked immunosorbent Assay)
1. Solid phase ELISA
a. Direct : menentaaukan Ag
b. Indirect: menentukan Ab
Kualitatif dan kuantitatif
2. Membrane bound SPIA
Lebih mudah & murah
Kualitatif
DETEKSI DNA / RNA
1. Gen-Probe (Hibridisasi)
- DNA tidak diperbanyak
- banding PCR kurang sensitif
2. Polymerase chain reaction (PCR)
- DNA diperbanyak
- sangat sensitif
- Lebih mahal dari Gen-Probe