PERHITUNGAN MPN

(MOST PROBABLE
NUMBER)

Fitria Dhenok Palupi, S.S.T., M.Gz

VISI PRODI D3 GIZI

“Menjadi Program Diploma Tiga

Gizi yang Berwawasan Kesehatan
Dalam Bidang Asuhan Gizi Dan
Kedirgantaraan Pada Tahun 2023”
MISI PRODI D3 GIZI

 Menyelenggarakan pendidikan yang

berwawasan kesehatan dalam bidang asuhan
gizi dan penyelenggaraan makanan berorientasi
pada kedirgantaraan.
 Mengembangkan penelitian di bidang gizi
kesehatan, gizi kedirgantaraan, dan pangan
melalui kerjasama dan kemitraan dengan
institusi terkait.
 Mengembangkan pengabdian masyarakat
berbasis hasil penelitian yang mendukung
asuhan gizi dan gizi kedirgantaraan.
 Melaksanakan kerjasama lintas sektor untuk
mendukung pelaksanaaan Tridharma.
 Coliform
• grup bakteri yang digunakan sebagai indikator
adanya polusi kotoran dan kondisi sanitasi yang
tidak baik terhadap air, makanan, susu, dan
produk-produk susu.
• Adanya bakteri Coliform di dalam makanan atau
minuman menunjukkan kemungkinan adanya
mikroorganisme yang bersifat enteropatogenik
dan atau toksigenik yang berbahaya bagi
kesehatan
 Macam Bakteri Coliform
Coliform fecal Coliform non fecal
• Indikator • tidak patogen,
pencemaran mempunyai sifat
bakteri patogen. seperti E coli
Ex : E. coli namun lebih
banyak
ditemukan dalam
tanah dan air
daripada usus. Ex
: Enterobacter
Aerogenes
 BAKTERI E CHOLI

• Gram negatif
• berbentuk batang
• tidak membentuk spora
• tumbuh pada suhu 10-40ᵒC,
dengan suhu optimum 37ᵒC
• pH optimum pertumbuhannya
adalah 7,0-7,5.
• sensitif terhadap panas
• inaktif pada suhu pasteurisasi
 PERHITUNGAN MPN

• Penentuan jumlah total bakteri coliform dengan

menggunakan metode MPN (Most Probable Number)
atau Metode Angka Paling Mungkin (APM).
• Rumus MPN coliform
• = nilai MPN x
 Media Uji MPN
Lactose Broth
• Deteksi koliform
• Komposisi : ekstrak beef, pepton, dan laktosa dengan pH 6,9 ± 0,2 pada suhu
25ᵒC.
• Ada dua jenis Lactose Broth Tunggal (LBT) & Lactose Broth Ganda (LBG)

Eosin Methylen Blue Agar (EMBA)

• isolasi bakteri coliform fekal
• Komposisi : pepton, laktosa, kalium hidrogen fosfat, eosin Y, methylene blue
dan agar dengan pH 6,8± 0,2 pada suhu 25ᵒC
• Pewarna menghambat pertumbuhan organisme Gram positif dalam kondisi
asam &memproduksi kompleks ungu gelap disertai dengan kilap hijau
metalik (indikator hasil fermentasi laktosa oleh bakteri coliform fekal)

Brilian Green Lactose Broth (BGLB)

• Media penyubur bakteri koliform dan media selektif bagi bakteri lain
• Komposisi : dalam 1 liter mengandung = 10 gr peptone, 20 gram oxgall, 10
gram lactosa, 0,0133 gram briliant green
 KELEBIHAN METODE MPN

• Sederhana
1.

• Organisme spesifik dapat ditentukan

2. dengan media selektif dan diferensial

• Metode yang digunakan untuk

3. menghitung jumlah coliform fekal
 KEKURANGAN METODE MPN
1. Sampel air yang digunakan hanya sedikit untuk sekali
pengujian
2. Dibutuhkan waktu beberapa hari untuk mendapatkan
kultur yang baik
3. Jumlah coli yang dihitung hanya dalam jumlah kasar
4. Membutuhkan banyak media dan perlengkapan
5. Tidak dapat dilakukan di lapangan tempat
pengambilan sampel, sehingga membutuhkan sistem
angkutan tertentu agar meminimalisir perubahan coli
pada sampel
PRINSIP PENGENCERAN MPN
 TAHAPAN UJI COLIFORM
Uji penduga (presumptive test)

• uji pendahuluan untuk melihat kehadiran bakteri

coliform → adanya asam & gas → fermentasi
laktosa oleh bakteri golongan coli.

• Asam → kekeruhan pada media laktosa

• gas → gelembung udara sebanyak 10% atau lebih

dari volume di dalam tabung durham

• Inkubasi 1 x 24 jam & 2 x 24 jam pd suhu 37ᵒC

 TAHAPAN UJI COLIFORM

Uji penguat (confirmed test)

• Hasil tabung positif (asam & gas) pd masa

inkubasi 1x24 jam ditanam pada media EMBA

• Koloni bakteri E. coli tumbuh berwarna merah

kehijauan dengan kilat metalik atau koloni
berwarna merah muda dg lendir untuk kelompok
coliform lainnya
 TAHAPAN UJI COLIFORM

Uji pelengkap (completed test)

• Hasil positif pd uji penguat diinokulasi ke medium

brilian green lactose broth pada suhu 37ᵒC selama
1 x 24 jam (bila positif sampel ada e coli) inokulasi
di NA (pewarnaan)

• Menentukan bakteri golongan coli fekal (berasal

dari tinja hewan berdarah panas) = inkubasi media
LB pada suhu 37ᵒC dan 42ᵒC. bakteri coli fekal
tumbuh baik pada suhu 42ᵒC
 TAHAPAN
UJI PENDUGA

• Dapat menggunakan 3
seri tabung atau 5 seri
tabung tiap
pengenceran

• 0,1; 0,01; dan 0,001 g

inokulum atau 10 ml;
1 ml; 0,1 ml
 TAHAPAN
UJI PENGUAT
 TAHAPAN
UJI PELENGKAP
SKEMA UJI
MPN PADA
SAMPEL PADAT
HASIL UJI
PENDUGA
HASIL UJI
PENGUAT
 HASIL UJI
PELENGKAP
• TUGAS
• 1. MEMBUAT RINGKASAN UJI MPN
• 2. MENCARI STANDAR BAKTERI PADA AIR,
LAUK HEWANI, LAUK NABATI, DAN SUSU