I.

Judul
Hematologi: Profil Eritrosit dan Profil Leukosit
II. Tujuan
1. Mengetahui profil eritrosit dan leukosit.
2. Mempelajari cara menghitung jumlah eritrosit, kadar hemoglobin, jumlah leukosit,
dan penentuan persentase leukosit differensial.
3. Mengetahui kisaran normal jumlah eritrosit, kadar hemoglobin, jumlah leukosit dan
persentase leukosit differensial dengan hasil percobaan.
4. Mengetahui kemungkinan sebab dan akibat jika jumlah eritrosit, kadar jumlah
leukosit, dan persentase leukosit differensial lebih tinggi atau lebih rendah dari kisaran
normal.
5. Mengetahui faktor-faktor yang berpengaruh terhadap jumlah eritrosit, kadar
hemoglobin, jumlah leukosit, dan persentase leukosit differensial.

III. Dasar Teori

Darah terbentuk pada jaringan ikat lalu terbawa oleh plasma. Lebih berat dan lebih
kental dibandingkan air. Rasa cenderung asin karena membawa garam-garam mineral bau
khas (anyir). Darah memiliki pH 7,35 7, 45. Warna darah adalah merah terang sampai
kebiruan tergantung kadar oksigen yang dibawa. Volume darah total 5 liter pada laki-laki
dewasa, tergantung ukuran tubuh, dan konsentrasi elektrolit dalam tubuh. Ada 3 tipe unsurunsur darah ialah sel-sel darah merah atau eritrosit, sel-sel darah putih atau leukosit dan
keping-keping darah atau trombosit (Kimball, 1993).
Eritrosit (sel darah merah) pada dasarnya adalah suatu kantong hemoglobin yang
terbungkus plasma, berupa lempeng bikonkaf dengan garis tengah 8m, tepi luar tebalnya 2
m, dan tengahnya setebal 1 m. Setiap millimeter darah mengandung rata-rata sekitar 5
miliar eritrosit (5 juta sel per l).
Struktur eritrosit terdiri atas membran sel yang merupakan dinding sel substansi
seperti spons yang stroma. Sel darah merah berisi substansi yang bermacam-macam
diantaranya enzim, glukosa, garam-garam organik dan anorganik ( Dahelmi, 1991).
Fungsi utama eritrosit adalah mengangkut hemoglobin yang selanjutnya hemoglobin
ini mengangkut oksigen dari paru-paru ke jaringan (Guyton dan Hall, 1997). Faktor yang
mempengaruhi jumlah eritrosit dalam sirkulasi antara lain hormon eritropoietin yang
berfungsi merangsang eritropoiesis dengan memicu produksi proeritroblas dari sel-sel
1

hemopoietik dalam sumsum tulang. Vitamin B12 dan asam folat mempengaruhi eritropoiesis
pada tahap pematangan akhir dari eritrosit.Sedangkan hemolisis dapat mempengaruhi jumlah
eritrosit yang berada dalam sirkulasi (Meyer dan Harvey 2004).
Hemoglobin merupakan protein yang mengandung zat besi dan memiliki afinitas
terhadap oksigen untuk mmebentuk oksihemaglobin didalam eritrosit. Dari mekanisme
tersebut dapat berlangsung proses distribusi oksigen dari pulma menuju jaringan (Pearce,
2002).
Kurang dari 1 % darah manusia adalah leukosit. Ukuran leukosit lebih besar daripada
eritrosit. Leukosit tidak mengandung haemoglobin, memiliki nucleus dan pada dasarnya
dijumpai dalam keadaan tidak berwarna (Kimball, 1993).
Ada 2 macam tipe leukosit yaitu granular dan agranular. Granulosit adalah leukosit
sirkular dan memiliki granule pada sitoplasmanya. Sedangkan agranulosit tidak memiliki
granule pada sitoplasmanya. Granulosit terdiri atas 3 tipe yaitu sel metrofil, dimana paling
banyak dijumpai, mewarnai dirinya dengan pewarna netral atau campuran pewarna asam basa
dan tampak berwarna ungu; sel eusinofil, dimana sel ini sedikit dijumpai, penyerap warna
yang bersifat asam atau eosin dan kelihatan merah; sel basofil yang menyerap pewarna basa
dan menjadi biru. Sedangkan agranulosit terdiri atas monosit, yang berfungsi untuk menutup
daerah luka, membungkus dan memfagosit setelah netrofil dan basofil (Pearce, 2002).
Leukosit merupakan unit yang mobil/aktif dari sistem pertahanan tubuh. Luekosit ini
sebagian dibentuk di sumsum tulang (granulosit dan monosit serta sedikit limfosit) dan
sebagian lagi di jaringan limfe (limfosit dan sel-sel plasma). Setelah dibentuk, sel-sel ini
diangkut dalam darah menuju

berbagai bagian tubuh untuk digunakan. Manfaat

sesungguhnya dari sel darah putih ialah bahwa kebanyakan ditranspor secara khusus ke
daerah yang terinfeksi dan mengalami peradangan serius, jadi, menyediakan pertahanan yang
cepat dan kuat terhadap setiap bahan infeksius yang mungkin ada (Guyton, 1997).
Monosit dan neutrofil adalah fagosit, yang menelan dan mencerna bakteri dan
serpihan sel- sel mati dari tubuh. Sel darah putih menghabiskan sebagian besar waktu di luar
system sirkulasi, berkeliling di dalam cairan interstitial dan system limfatik untuk melawan
pathogen (Campbell, 2008).

IV. Alat, Bahan dan Cara Kerja

A. Alat dan Bahan yang digunakan:
1. Alat dan Bahan yang digunakan pada perhitungan Eritrosit.
-

Haemocytometer ( pipet pencampur 1-101)

Mikroskop

Hand counter

Darah kapiler (Tikus Putih)

Larutan Hayem

2. Alat dan Bahan yang digunakan pada perhitungan kadar Hemoglobin

-

Haemometer

Pipet tetes

Batang pengaduk

Pipet haemoglobin

HCl 0,1 N

Darah kapiler (Tikus Putih)

Aquadest

3. Alat dan Bahan yang digunakan pada perhitungan jumlah Leukosit

-

Haemocytometer ( pipet pencampur 1-101)

Mikroskop

Hand counter

Darah kapiler (Tikus Putih)

Larutan turk

4. Alat dan Bahan yang digunakan pada Hemogram (Penentuan persentase leukosit
differensial)
-

Hand counter

Rak pewarnaan

Pipet tetes

Gelas benda

Darah kapiler (Tikus Putih)

Larutan turk

Pemulas Giemsa 3%

Metanol

B. Cara Kerja
1. Cara kerja perhitungan Eritrosit.
-

Diisap cuplikan darah dengan pipet pencampur eritrosit sampai angka 1,0.

Dibersihkan ujungnya dengan tisu.

Diisap larutan hayem secara perlahan sampai angka 101.

Dilepas alat penghisap pada dari pipet pencampur.

Dikocok pipet pencampur selama 2 menit

Dibuang 2-3 tetesan pertama

Disiapkan mikroskop yang telah dipasang Haemocytometer

Ditempelkan ujung pipet pada bilik hitung yang ditutup dengan gelas penutup.

Dihitung dan dicatat jumlah eritrosit yang terdapat dibagian tengah bilik hitung dengan
menggunakan mikroskop.

Hasil tersebut dihitung dengan menggunakan rumus:

Jumlah eritrosit per mm3 =

x4000x100 = 5000 E

2. Cara kerja perhitungan kadar Hemoglobin

-

Dilepas tabung pengencer/pengukur pada Haemometer

Diisi HCl 0,1 kedalam tabung pengencer sampai angka 2 pada skala

Diisap darah kapiler dengan pipet hemoglobin yang telah disediakan sampai 20 angka.

Dihapus darah yang ada diujung pipet dengan tisu

Dimasukkan darah kedalam tabung pengencer

Diisap HCl dalam tabung pengencer dengan pipet untuk membersihkan pipet

Didiamkam selama 3 menit

Ditambahkan aquadest sedikit demi sedikit dan diaduk dengan batang pengaduk

Diamati sampai warna larutan darah uji sama dengan warna larutan standar

Dicatat angka yang ada pada tabung pengencer Haemometer.

3. Cara kerja perhitungan jumlah Leukosit

-

Diisap cuplikan darah dengan pipet pencampur eritrosit sampai angka 1,0.

Dibersihkan ujungnya dengan tisu.

Diisap larutan turk secara perlahan sampai angka 101.

Dilepas alat penghisap pada dari pipet pencampur.

Dikocok pipet pencampur selama 2 menit

Dibuang 2-3 tetesan pertama

Disiapkan mikroskop yang telah dipasang Haemocytometer

4

Ditempelkan ujung pipet pada bilik hitung yang ditutup dengan gelas penutup.

Dihitung dan dicatat jumlah leukosit yang terdapat di keempat bujur sangkar pojok bilik
hitung dengan menggunakan mikroskop.

Hasil tersebut dihitung dengan menggunakan rumus:

Jumlah leukosit per mm3 =

x160x10 = 25 L

4. Cara kerja Hemogram (Penentuan persentase leukosit differensial)

a. Pembuatan sediaan apus
-

Disediakan 2 gelas benda

Diteteskan darah sedikit pada ujung gelas benda 1

Ujung gelas benda 2 disentuhkan pada gelas 1 tepat didepan tetesan darah sehingga
gelas 1 dan 2 membentuk sudut 45o.

Digeser gelas 2 dengan cepat sehingga tetesan darah membntuk apusan darah tipis.

Dibiarkan sampai kering

b. Pengecatan sediaan apus

-

Difiksasi sediaan apusan darah dengan methanol

Dibiarkan selama 5 menit

Ditetes pemulas giemsa dan dibiarkan selama 30 menit

Dicuci sediaan dengan akuadest lalu dibiarkan kering dengan suhu ruangan.

c. Pengamatan
-

Dipasang sediaan dibawah mikroskop lalu diamati

Ditentukan 5 bidang secara acak dan merata

Dihitung jumlah leukosit yang ada pada 5 bidang tersebut

Dicatat dalam tabel berdasarkan jenis leukosit

Dihitung jumlah persentase tiap jenis leukosit

V. Hasil Percobaan
1. Hasil perhitungan eritrosit
Jumlah eritrosit/mm3 =

x 4000 x 100 = 5000 x 1387

= 6.935.000/mm3

2. Hasil perhitungan kadar Hemoglobin

Kadar Hemoglobin = 12,1 g/100 mL
3. Hasil perhitungan Leukosit
Jumlah leukosit/mm3 =

x 160 x 10 = 25 x 278
= 6950 /mm3

4. Persentase Leukosit Differensial

No

Jenis Leukosit

1.

Jumlah

Persentase (%)

36

36%

5%

3%

5%

51

51%

100

100%

Neutrofil

2.
Eosinofil

3.
Basofil

4.
Monosit

5.
Limfosit
Total

VI. Pembahasan
Perhitungan Jumlah Eritrosit
Pada praktikum perhitungan jumlah eritrosit ini bertujuan untuk mengetahui cara
menghitung eritrosit dan mengetahui jumlah eritrosit dalam darah dengan menggunakan
larutan Hayem. Larutan Hayem adalah larutan isotonis yang dipergunakan sebagai pengencer
darah dalam penghitungan sel darah merah. Apabila sampel darah dicampur dengan larutan
Hayem maka sel darah putih akan hancur, sehingga yang tinggal hanya sel darah merah saja.
Larutan Hayem terdiri dari 5gr Na-sulfat, 1 gr NaCl, 0,5gr HgCl2 dan 200 ml
aquadest. Larutan Natrium clorit 1 gr bersifat isotonis pada eritrosit. Kandungan lain adalah
formalin 40 % yang berfungsi untuk mengawetkan/mempertahankan bentuk discoid eritrosit.
Kandungan larutan Hayem ini mengakibatkan larutan Hayem dikenal sebagai larutan
Formasitrat. Larutan hayem yang memiliki fungsi antara lain mengencerkan darah, merintangi
pembekuan, bentuk bentuk eritrosit terlihat jelas, sedangkan bayangan leukosit dan trombosit
lenyap, mempertahankan bentuk diskoid eritrosit dan tidak menyebabkan aglutinasi,
(Syaifuddin, 1997).
Setelah darah dicampurkan dengan larutan hayem dalam pipet, 2-3 tetes dalam pipet
dibuang atau di teteskan pada tissu hal ini dilakukan agar dalam hemocytometer benar-benar
mengandung sel darah merah bukan larutan hayem saja. Campuran darah dan hayem
dimasukkan kedalam hemocytometer untuk diamati dan dihitung jumlah eritrositnya.
sehingga diketahui jumlah eritrosit dari Tikus putih yaitu 6.935.000/mm3.
Perhitungan Kadar Hemoglobin
Pada perhitungan hemoglobin, metode yang digunakan adalah metode sahli, metode
sahli mengandalkan pembentukan asam hematin yang kemudian diukur kadarnya dengan cara
membandingkan warna hasil pengenceran dengan warna standar. Menurut Wijayanti at. al.,
(2011) cara kerja penghitungan hemoglobin dengan metode sahli yaitu: tabung pengencer
diisi HCl 0,1 sampai angka 2 pada skala, ditambahkan 20 ml darah dengan cara
mengambilnya menggunakan pipet hisap, didiamkan selama 5 menit, kemudian ditambahkan
lagi aquades tetes demi tetes hingga warna sesuai dengan standar. Penggunaan HCl
dipraktikum ini, bertujuan untuk meliliskan eritrosit sehingga Hb yang terdapat dalam eritrosit
dapat keluar dan bereaksi dengan HCl membentuk asam hematin. Dari hasil praktikum
penentuan kadar HB menggunakan metode sahli, didapatkan hasil 12,1 g/100 mL (normal).
Metode sahli membutuhkan ketelitian visualisasi praktikan dalam mmebandingkan warna
yang diperoleh dari pengenceran dengan warna standar.
7

Perhitungan Jumlah Leukosit

Pada praktikum ini menghitung jumlah leukosit mengunakan metode kamar hitung
atau cara manual. Pada metode ini haruslah teliti dalam melihat leukosit dibawah mikroskop,
karena terkadang kamar hitung yang terlihat tidak terlalu jelas sehingga sangat dibutuhkan
ketelitian yang tinggi. Jika dilakukan tidak teliti terkadang ada kesalahan dalam menentukan
kamar hitung. Selain itu, kesalahan yang mungkin terjadi, misalnya leukosit yang sudah
dihitung kemungkinan bisa dihitung kembali. Oleh sebab itu, dalam perhitungan leukosit
dilakukan secara teratur dan sesuai dengan kesepakatan atau ketentuan yang sudah disetujui.
Selain itu, yang harus diperhatikan dalam praktikum perhitungan leukosit adalah
dalam melakukan pengocokan sampel darah dengan larutan Turk. Larutan Turk merupakan
larutan yang digunakan untuk mengencerkan darah pada pengamatan sel darah putih. Seperti
larutan Hayem, yang digunakan pada pengamatan sel darah merah, larutan Turk juga
berfungsi untuk menjaga bentuk sel darah putih tetap utuh dan dapat diamati menggunakan
mikroskop. Kale dan Kale (2008) menjelaskan bahwa komposisi larutan Turk adalah: Asam
asetat glasial : 3 ml, Larutan gentian violet 1% : 1 ml, dan Akuades : 100 ml.
Jika pengocokan tidak dilakukan dengan benar kemungkinan darah tidak bisa
bercampur sempurna dengan reagen sehingga jika dilihat dibawah mikroskop leukosit tidak
dapat terlihat. Hasil perhitungan leukosit yang didapat pada darah tikus putih adalah
6950/mm3. Jumlah tersebut menunjukkan bahwa jumlah leukosit tikus putih tersebut normal.
Kisaran jumlah leukosit normal tikus, yaitu 5.000-25.000 sel/l (Aboderin & Oyetayo, 2006).
Persentase Leukosit Differensial
Apusan darah digunakan untuk mengamati perbedaan sel darah putih (Keir et. al.,
2003). Dalam membuat apusan darah diperlukan dua kaca objek. Bahan yang digunakan
dalam pembuatan apusan darah adalah serum darah, larutan methanol, dan larutan giemsa.
Berdasarkan praktikum yang dilakukan didapatkan hasil yaitu jenis leukosit yang ditemukan
dalam darah tikus putih adalah basophil 3%, eosinophil 5%, neutrofil 36%, limfosit 51% dan
monosit 5%. Menurut data tersebut, jumlah yang paling besar adalah limfosit dengan
presentase 51%. Menurut Tobin (1994), jumlah leukosit dipengaruhi oleh kondisi tubuh,
stress, kurang makan atau disebabkan oleh faktor lain. Faktor-faktor yang mempengaruhi
jumlah eritrosit dan leukosit yaitu tergantung pada spesies dan kondisi pakannya, selain itu
juga bahan organik yang terkandung seperti glukosa, lemak, urea, asam urat, dan lainnya.

Ada bermacam-macam leukosit dengan berbagai fungsi (Dorland, 1995). Berdasarkan ada
atau tidaknya granula di dalam plasma, leukosit dibagi menjadi dua yaitu:
1. Leukosit bergranula (granulosit):
-

Neutrofil, plasmanya bersifat netral, inti selnya seringkali berjumlah banyak dengan
bentuk bermacam-macam, bersifat fagositosis terhadap eritrosit, kuman dan jaringan
mati. Selain itu juga menghasilkan interferon, yaitu suatu protein yang membantu
melindungi sel-sel tubuh yang sehat terhadap serangan virus. fungsi interferon adalah
menghambat perkembangbiakan virus.

Eosinofil, plasmanya bersifat asam sehingga akan berwarna merah tua bila ditetesi eosin,
bersifat fagosit dan jumlahnya akan meningkat jika tubuh terkena infeksi.

Basofil, plasmanya bersifat basa sehingga akan berwarna biru jika ditetesi larutan basa,
jumlahnya bertambah banyak jika terjadi infeksi, bersifat fagosit, mengandung heparin,
yaitu zat kimia anti penggumpalan.

2. Leukosit tidak bergranula (agranulosit):

-

Limfosit, tidak dapat bergerak, berinti satu, ukuran ada yang besar dan ada yang kecil,
berfungsi untuk membentuk antibodi.

Monosit, dapat bergerak seperti amoeba, mempunyai inti yang bulat atau bulat panjang,
diproduksi pada jaringan limfa dan bersifat fagosit. Monosit juga menghasilkan lisozim
yang berfungsi untuk menghancurkan sel mikroba dan makromolekul.

Makrofag, merupakan sel pembersih yang akan memakan mikroba dan menyerahkan
kepada limfosit untuk dihancurkan melalui proses kekebalan.

VII. Kesimpulan
Kesimpulan dari praktikum ini adalah:
1. Menghitung jumlah eritrosit dilakukan dengan mencampur darah dengan Larutan
Hayem dan diteliti dengan alat Haemocytometer.
2. Jumlah eritrosit dari Tikus putih yaitu 6.935.000/mm3.
3. Penggunaan HCl pada metode sahli bertujuan untuk meliliskan eritrosit sehingga Hb
yang terdapat dalam eritrosit dapat keluar dan bereaksi dengan HCl membentuk asam
hematin.
4. Prinsip alat Haemocytometer adalah menghitung jumlah eritrosit dalam menggunakan
kamar hitung , dihitung dalam volume tertentu dengan menggunakan faktor konversi.
5. Larutan Hayem berfungsi untuk mengencerkan darah, merintangi pembekuan,
membuat

bentuk-bentuk eritrosit terlihat jelas, sedangkan bayangan leukosit dan

trombosit lenyap, mempertahankan bentuk diskoid eritrosit dan tidak menyebabkan

aglutinasi.
6. Leukosit dibagi menjadi 2, yaitu granulosit (neutrofil, eosinofil dan basofil) dan
agranulosit (limfosit, makrofag dan monosit).
7. Larutan Turk merupakan larutan yang digunakan untuk mengencerkan darah pada
pengamatan sel darah putih
8. Hasil perhitungan leukosit yang didapat pada darah tikus putih adalah 6950/mm3.
9. Berdasarkan praktikum yang dilakukan didapatkan hasil yaitu jenis leukosit yang
ditemukan dalam darah tikus putih yaitu basofil 3%, eosinofil 5%, neutrofil 36%,
limfosit 51% dan monosit 5%.

10

Daftar Pustaka

Aboderin, F. I. & V.O. Oyetayo. 2006. Haematological Studies of Rats Fed Diff erent Doses
of Probiotic, Lactobacillus plantarum, isolated from fermenting corn slurry. Pakistan
J of Nutrition 5: 102-105.
Anonimous, 2013. Petunjuk Praktikum Fisiologi Hewan. Laboratorium Fisiologi hewan.
Fakultas Biologi. Universitas Gajah mada. Yogyakarta.
Campbell et all. 2008. Biology Eight Edition.Benjamin Cummings: San Fransisco
Dahelmi.1991. Fisiologi Hewan. UNAND Padang.
Dorland. 1995. Pocket Medical Dictionary. Philadelphia: Saunders Company.
Guyton dan Hall. 1997. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Irawati Stiawan, penerjemah.
Jakarta: EGC. Terjemahan dari: Textbook of Medical Physiology.
Kale, S. R., dan Kale, R., R, 2008. Practical Human Anatomy and Physiology. Pune: Nirali
Prakashan.
Keir, L., Wise, B. A., Krebs, C. 2003. Medical Assisting: Essentials of Administrative and
Clinical Competencies. Singaphore: Thomson Learning
Kimball, Jhon W, (1993).Biologi, Jilid 2, Erlangga, Jakarta
Meyer D J and Harvey JW. 2004.Veterinary Laboratory Medicine Interpretation &
Diagnosis.Third edition. USA: Saunders.
Pearce, C.E. 1991. Anatomi dan Fisiologi Untuk Paramedis. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka
Utama.
Pearce, Evelyn. (2002).Anatomi dan Fisiologi untuk Paramedis. Gramedia, Jakarta
Syaifuddin.1997. Anatomi Fisiologi untuk Siswa Perawat. Jakarta : EGC
Tobin, M. 1994. Fisiologi Hewan : Mekanisme Fungsi Tubuh. Yogyakarta: Angkasa.
Wijayanti, F., Solihin, D. D., Alikodra, H. S., Maryanto, I. 2011. Eritrosit dan Hemoglobin
pada Kelelawar Gua di Kawasan Karst Gombong, Kebumen, Jawa Tengah. Jurnal
Biologi Indonesia 7(1): 89-98.

11

Lampiran:

Gambar: Haemocytometer

Gambar: cara membuat preparat apusan darah

Gambar: Larutan Apusan darah

Gambar: Leukosit

Gambar: Haemometer

Gambar: Larutan Hayem dan Turk

12