06/03/2013

VISUALISASI SEL

BIOSEL 2013

Visualisasi Sel
Sel itu kecil dan kompleks
Memahami organisasi struktural sel

merupakan syarat penting untuk memahami

bagaimana sel itu berfungsi. Perlu alat bantu
mikroskop.
Mikroskop optik akan menjadi titik awal kita
karena biologi sel dimulai dengan mikroskop
cahaya.
BIOSEL 2013

06/03/2013

Pengembangan metode mikroskop makin

maju pesat
Dengan komponen sel penandaan khusus,
dengan penanda fluoresen, seperti protein
fluorescent hijau (GFP), sehingga kita
dapat melihat gerakan sel dan interaksi
dalam sel hidup dan organisme.

BIOSEL 2013

Visualisasi sel kulit ibu jari

BIOSEL 2013

06/03/2013

MIKROSKOP
Mikroskop adalah sebuah alat untuk

melihat objek yang terlalu kecil untuk

dilihat dengan mata telanjang. Kata
mikroskopik berarti sangat kecil, tidak
mudah dilihat dengan mata.

BIOSEL 2013

Macam-macam mikroskop

Mikroskop cahaya
bright-field microscope

dark-field microscope
fluorescent microscope
phase-contrast microscope

BIOSEL 2013

06/03/2013

Mikroskop elektron

Transmission
Electron
Microscope
(TEM), untuk mengamati detail struktur
internal sel
Scanning Electron Microscope (SEM),
untuk studi detil arsitektur permukaan sel

BIOSEL 2013

BIOSEL 2013

06/03/2013

Perbedaan mikroskop cahaya

dan mikroskop elektron

BIOSEL 2013

Mikroskop Cahaya
- memiliki perbesaran maks 1000 kali
- memiliki tiga dimensi lensa yaitu lensa
objektif, lensa okuler dan lensa kondensor
- menggunakan energi jauh lebih sedikit dan
radiasi elektromagnetik yang lebih panjang
dibandingkan mikroskop elektron
- Sumber cahaya matahari atau sinar lain

BIOSEL 2013

06/03/2013

Sistem lensa pada mikroskop memiliki daya

resolusi, atau mampu menunjukkan detail

obyek yang berdekatan satu sama lain
Mikroskop cahaya memiliki kemampuan
resolusi sampai 0,1 m. Artinya mampu
membedakan 2 titik yang berjarak 0,1 m.
Daya resolusi mikroskop tergantung pada
numerical aperture (NA), panjang
gelombang ( )penyinaran yang digunakan
dan komponen fisik lensa mikroskop (yang
terbuat dari gelas pada mikroskop cahaya),
BIOSEL 2013

Batasan kemampuan resolusi (D) dapat

dihitung dengan rumus:

D = 0,61
NA
Jika NA meningkat karena pengaruh sudut

masuknya cahaya oleh lensa gelas, maka

kemampuan lensa mengumpulkan sinar,
juga meningkat
BIOSEL 2013

06/03/2013

panjang gelombang pendek (misalnya sinar

biru ungu) akan memberikan resolusi yang

lebih baik daripada sinar dengan panjang
gelombang lebih panjang (misalnya sinar
tampak merah)
elektron memiliki panjang gelombang yang

jauh lebih pendek dibandingkan dengan

foton,
sehingga
tidak
heran
kalau
kemampuan resolusi mikroskop elektron
ribuan kali jauh lebih tinggi dibanding
dengan mikroskop cahaya
BIOSEL 2013

A Light microscope.
Diagram showing the
light path in a
compound
microscope. Light is
focused on the
specimen by lenses in
the condenser. A
combination of
objective lenses and
eyepiece lences are
arranged to focus an
image of the
illuminated specimen
in the eye.
B. A modern research
light microscope

BIOSEL 2013

06/03/2013

Mikroskop Elektron
mampu untuk melakukan pembesaran

objek sampai 2 juta kali, memp. bentuk

yang lebih besar daripada mikroskop
cahaya
menggunakan elektro statik dan
elektro magnetik untuk mengontrol
pencahayaan dan tampilan gambar.

BIOSEL 2013

Mikroskop Elektron
memiliki kemampuan pembesaran objek
serta resolusi yang jauh lebih bagus
daripada mikroskop cahaya
menggunakan jauh lebih banyak energi
dan radiasi elektromagnetik yang lebih
pendek dibandingkan mikroskop cahaya

BIOSEL 2013

06/03/2013

Resolving power. Sizes of cells and their component

are drawn on logaritmic scale. Indicating the range of
object that can be readily resolved by the naked eye
and in the light and electron microscope.
BIOSEL 2013

The principal features of a light microscope and

transmission electron microscope
BIOSEL 2013

06/03/2013

Living cells
Sel

hidup dapat terlihat jelas dengan

menggunakan Phase-contrast Microscope
atau
Differential-Interference-Contrast
Microscope.

BIOSEL 2013

Four types of light microscopy. Four images are shown of the

same fibroblast cell in culture. All images can be obtained
with most modern microscopes by interchanging optical
components. (A) Bright-field microscopy. (B) Phase-contrast
microscopy. (C) Nomarski differential-Interference-contrast
microscopy. (D) Dark-field microscopy.
BIOSEL 2013

10

06/03/2013

Cellular Staining?
Mikroskop cahaya tidak dapat menghasilkan

kontras yang baik pada spesimen segar,

oleh karena itu untuk memperoleh kontras
yang lebih baik digunakan pewarna jaringan
spesimen
Pewarnaan sel adalah teknik yang dapat
digunakan untuk lebih memvisualisasikan
sel dan komponen sel di bawah mikroskop
BIOSEL 2013

Sel juga dapat diwarnai untuk mempelajari

proses
metabolisme
atau
untuk
membedakan antara sel hidup dan mati
dalam sampel
Teknik pewarnaan sel dan persiapan
tergantung pada jenis pewarna dan analisis
yang digunakan.

BIOSEL 2013

11

06/03/2013

Tingkatan resolusi tergantung tidak hanya

pada sistem optik, tapi juga faktor lain

seperti ketebalan spesimen
Untuk
meningkatkan
resolusi
atau
ketajaman obyek yang diamati seringkali
mikroskop juga dilengkapi dengan filter.
Untuk
specimen tebal, maka harus
dilakukan
pengirisan
jaringan/organ.
Specimen disiapkan dengan Metode
Embedding (penyelubungan)
BIOSEL 2013

Making tissue sections. This illustration shows how an

embedded tissue is sectioned with a microtome in
preparation for examination in the light microscope
BIOSEL 2013

12

06/03/2013

Staining of cellular components

BIOSEL 2013

Multiple-fluorescent-probe microscopy
BIOSEL 2013

13

06/03/2013

Immunofluorescence. (A) transmission electron

microscope; (B) The same area stained with fluorescent
antobodies against tubulin
BIOSEL 2013

A three-dimensional reconstruction from serial sections of

mitochondrial compartment of a live yeast cell.
BIOSEL 2013

14

06/03/2013

The scanning electron microscope (SEM)

BIOSEL 2013

Selamat Belajar
Terima Kasih

BIOSEL 2013

15