Pengecatan Gram Syt
Pengecatan Gram Syt
Ambil gelas obyek yang bersih dan steril, bebaskan dari lemak dengan
memanaskan di atas nyala api spiritus. Ambil kuman dari biakan cair (yang sebelumnya
telah diaduk secara steril) dengan menggunakan ose steril, ratakan pada gelas obyek
sehingga membentuk diameter kira-kira 1-2 cm. Preparat yang sudah dibuat kemudian
dikeringkan dan ditetesi formalin dengan cara seperti pembuatan preparat langsung.
a.3. Bahan dari media pertumbuhan padat
Ambil gelas obyek yang bersih dan steril, bebaskan dari lemak dengan
memanaskan di atas nyala api spiritus. Teteskan satu ose kaldu atau NaCl pada gelas
obyek tersebut. Dengan ose steril, ambil satu koloni kuman dan ratakan pada gelas
obyek sehingga membentuk diameter 1 2 cm, campur dengan kaldu tadi sampai
homogen kemudian tipiskan. Selanjutnya dikerjakan sebagaimana membuat preparat
dengan bahan berasal dari penderita.
b. Cat Gram
Cat Gram yang digunakan terdiri dari 4 macam, yaitu cat Gram A, B, C dan D.
Masing-masing mempunyai komposisi dan fungsi yang berbeda. Komposisi dan fungsi
masing-masing cat Gram, adalah sebagai berikut :
1. Cat Gram A
Cat ini terdiri atas :
Kristal violet
: 2 gram
Etil alkohol 95
: 20 ml
Ammonium oksalat : 0,8 gram
Akuades
: 80 ml
Cat Gram A berwarna ungu (karena mengandung kristal violet). Cat Gram A merupakan
cat primer yang akan memberi warna mikroorganisme target. Pada saat diberi cat ini,
semua mikroorganisme akan berwarna ungu sesuai warna cat Gram A.
2. Cat Gram B
Cat ini terdiri atas :
Yodium
: 1 gram
Kalium Yodida
: 2 gram
Akuades
: 300 ml
Cat Gram B berwarna coklat. Cat Gram B merupakan cat Mordan, yaitu cat atau bahan
kimia yang berfungsi memfiksasi cat primer yang diserap mikroorganisme target. Akibat
pemberian cat Gram B, maka pengikatan warna oleh bakteri akan lebih baik (lebih kuat).
3. Cat Gram C
Cat ini terdiri atas :
Aseton
: 50 ml
Etil alkohol 95 %
: 50 ml
Cat Gram C tidak berwarna. Cat ini berfungsi untuk melunturkan cat sebelumnya.
Akibat pemberian cat C akan terjadi 2 kemungkinan :
Preparat
siap
diamati
dibawah mikroskop