Cara Pewarnaan Gram, fungsi gram, dan metodelogin pewarnaan Gram

Pada tahun 1884, seorang bakteriologiwan Denmark secara kebetulan menemukan

prosedur pewarnaan Gram. Pewarnaan ini mungkin merupakan salah satu prosedur yang amat penting
dan paling banyak digunakan dalam klasifikasi bakteri. Dengan metode ini, bakteri dapat dipisahkan
secara umum menjadi dua kelompok besar yaitu 1)organisme yang dapat menajahan kompleks pewarna
primer ungu kristal iodium sampai pada akhir prosedur (sel-sel tampak biru gelap atau ungu), disebut
Gram positive; 2) organisme yang kehilangan kompleks warna ungu kristal pada waktu pembilasan
dengan alkohol namun kemudian terwarnai oleh pewarna tandingan, safranin (sel-sel tampak merah
muda), disebut Gram negative (Hadieotomo,1988).

Pewarnaan Gram (+-)

Dalam bidang medis misalkan, masih dibutuhkannya sistem sterilisasi temperatur rendah yang mampu
membasmi bervariasi mikroorganisme yang tergolong dalam Gram negative bacteria, Gram positive
bacteria dan yeast. Bidang medis inilah bidang yang setiap saat mengalami kontaminasi oleh berbagai
jenis bakteri dan yeast. Mikroorganisme ini menempati permukaan peralatan medis (health care
facilities) pada hampir semua tempat dirumah sakit. Peralatan-peralatan tersebut kini banyak yang
terbuat dari bahan-bahan yang tidak tahan terhadap termik seperti plastik, kertas, dll
(Nufailah,et,al,2005).

Pada pewarnaan Gram terdapat 2 jenis bakteri yaitu bakteri positive dan bakteri negative. Bakteri
positive berwarna ungu karena didalamnya mengikat zat warna kristal ungu iodium. Sedangkan bakteri
Gram negative berwarna merah karena mengikat warna sekunder. Pada dinding sel bakteri Gram
positive dinding selnya tebal sedangkan pada bakteri Gram negative dinding selnya tipis.

Tujuan Pewarnaan Gram

Menurut Waluyo (2008), tujuan dari pewarnaan adalah :
 Memudahkan melihat mikrobe dengan mikroskop
 Memperjelas ukuran dan bentuk mikrobe
  Melihat struktur dalam bakteri , seperti dinding sel dan vakuola
 Menghasilkan sifat-sifat fisik dan kimia khas dari bakteri dengan zat warna

Menurut Volk (1992), pewarnaan Gram pada tahun 1884 seorang dokter berkebangsaan Denmark
Christian Gram membuat zat pewarna khusus yang barang kali terpenting penggunaannya dalam
bakteriologi. Zat pewarna tersebut adalah pewarna dieferensial, karena dapat membagi bakteri sejati
menjadi 2 kelompok fisiologi, dengan demikian sangat memudahkan identifikasi jenis.

Macam dan fungsi pewarnaan

Menurut Hadieotomo (1988), pewarnaan ini merupakan salah satu yang amat penting dan paling
banyak digunakan dalam klasifikasi bakteri. Dengan metode ini, bakteri dapat dipisahkan secara umum
menjadi dua kelompok besar, yaitu : 1) organisme yang dapat menajahan kompleks pewarna primer
ungu kristal iodium sampai pada akhir prosedur (sel-sel tampak biru gelap atau ungu), disebut Gram
positive; 2) organisme yang kehilangan kompleks warna ungu kristal pada waktu pembilasan dengan
alkohol namun kemudian terwarnai oleh pewarna tandingan, safranin (sel-sel tampak merah muda),
disebut Gram negative.

Menurut Volk (1992), pewarnaan mungkin merupakan salah satu prosedur yang paling banyak
digunakan dalam klasifikasi bakteri. Ada 5 macam pewarnaan, yaitu : 1)Pewarnaan sederhana,
memungkinkan untuk melihat bakteri dengan jelas, tetapi tidak dapat membedakan jenis-jenis bakteri
yang berbeda dalam morfologi yang sama, 2)Pewarnaan tahan asam, untuk pewarnaan bakteri yang
mengandung sejumlah besar besar zat lipoid (berlemak) didalam dinding selnya yang menyebabkan
tidak permeabel terhadap zat warna yang umum, 3)Pewarnaan spora, untuk pewarnaan bakteri yang
membentuk endospora yang tahan terhadap kondisi ekstrim sehingga dibutuhkan perlakuan yang keras,
4)Pewarnaan kapsul, 5)Pewarnaa negative, metode ini bukan untuk mewarnai bakteri tetapi mewarnai
latar belakangnya hitam gelap.

Perbedaan gram positif dan gram negatif

Menurut Hadioetomo (1988), diketahui bahwa komposisi dinding sel bakteri Gram positive berbeda
dengan bakteri Gram negative. Dinding sel yang lebih yang tebal pada bakteri Gram positive menyusul
oleh perlakuan alkohol karena terjadi dehidrasi. Sedangkan sel-sel Gram negative mempunyai
kandungan lipid yang lebih tinggi pada dinding selnya dan lipid pada umumnya larut dalam alkohol dan
aseton. Contoh dari Gram positive adalah S.aureus dan Gram negative adalah E.coli.

Perbedaan struktur dinding sel bakteri Gram positive dan Gram negative sehingga menyebabkan
perbedaan reaksi dalam permeabilitas zat warna dan penambahan larutan pemucat. Sebagian besar
dinding sel bakteri Gram positive terdiri dari peptidoglikan, sedangkan dinding sel bakteri Gram negative
mempunyai kandungan lipida yang tinggi dibandingkan dinding sel bakteri Gram negative (Lay,1994).

Metodelogi pewarnaan gram

Alat dan fungsi
 Alat yang digunakan dalam praktikum Mikrobiologi Dasar tentang Pewarnaan Gram sebagai berikut :
· Incase : menginkubasi alat dan media pada suhu kamar 25-27’C

Jarum loop : untuk inokulasi dari media pada ke cair atau sebaliknya
Objek glass : untuk tempat bakteri
Mikroskop : untuk mengamati mikroorganisme yang tidak dapat dilihat oleh mata telanjang
Sprayer : untuk wadah alkohol 0,70%
Nampan : untuk tempat alat dan bahan
Pipet tetes : untuk mengambil larutan dalam skala kecil ukuran 1-10ml
Cover glass : untuk menutup objek glass
Bunsen : sebagai pemanas dalam skala kecil dan pengkondisian steril
Rak tabung reaksi : untuk tempat tabung reaksi

Bahan dan fungsi

Bahan yang digunakan dalam praktikum Mikrobiologi Dasar tentang Pewarnaan Gram sebagai berikut:
Aquadest : untuk membilas larutan
Etanol : indikator untuk melunturkan lemak
Safranin : Indikator untuk pewarna sekunder
Kristal ungu : indikator untuk pewarna primer
Iodium : indikator untuk memperkuat warna
Kertas label : untuk menandai alat atau bahan
Tissue : untuk membersihkan alat dan bahan
Alkohol 70% : untuk mensterilkan tangan dan daerah pengamatan.

Cara kerja

Pada praktikum Mikrobiologi Dasar materi pewarnaan Gram yang pertama kali dilakukan adalah
menyiapkan alat dan bahan. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, objek glass, bunsen, jarum
loop, pipet tetes, dan mikroskop. Sedangkan bahan-bahan yang digunakan adalah NA, kristal ungu,
iodium, etanol 70%, safranin, dan aquadest.

Langkah selanjutnya adalah diambil bakteri dari media isolasi menggunakan jarum loop karena apabila
menggunakan jarum ose dapat merusak media. Jarum loop juga terlebih dahulu dipanaskan diatas
bunsen agar kondisinya aseptis. Setelah itu disentuhkan pada medium yang tidak ada bakterinya, karena
jika kondisi terlalu panas bakteri bisa mati. Setelah itu diambil bakteri dan digoreskan pada objek glass.
Kemudian objek glass difiksasi di dekat bunsen untuk mengkondisikan aseptis dan untuk memperluas
struktur internal dan eksternal dari sel dan mikroorganisme. Kemudian ditetesi dengan kristal ungu
menggunakan pipet tetes dan didiamkan selama 1 menit. Hal ini bertujuan karena pada saat 1 menit
diasumsikan sudah mengunci kristal ungu dan fungsi dari kristal ungu sendiri adalah sebagai pewarna
primer.

Setelah itu dibilas dengan aquadest, hal ini bertujuan agar sisa kristal ungu yang dapat luntur dan
memperjelas pengamatan. Setelah dibilas dengan aquadest, lalu ditetesi dengan iodium dan dibiarkan
selama 2 menit, iodium berfungsi sebagai penguat warna kristal ungu, dan didiamkan selama 2 menit
karena pada waktu diasumsikan telah cukup jelas memberikan warna ungu pada bakteri. Setelah itu
dibilas lagi dengan aquadest, hal ini bertujuan untuk membersihkan sisa iodium pada bakteri. Kemudian
dicuci dengan etanol 70% berfungsi untuk melarutkan lemak, kemudian dibilas kembali dengan
aquadest. Hal ini bertujuan untuk memperjelas pengamatan. Setelah itu ditetesi dengan safranin.
 Safranin berfungsi sebagai pewarna sekunder dan sebagai tanda bahwa bakteri tersebut merupakan
Gram negatrif. Dibiarkan menit karena waktu tersebut diasumsikan bahwa dinding sel telah mengunci
safranin. Kemudian dibilas dengan aquadest, hal ini bertujuan untuk membilas sisa safranin dan untuk
memperjelas pengamatan. Kemudian diamati preparat dibawah mikroskop lalu digambar sesuai hasil
yang diamati.
Analisa Hasil
Pada praktikum Mikrobiologi Dasar tentang pewarnaan Gram didapatkan hasil sebagai berikut:
Gambar yang diambil dari mikroskop ini setelah proses pewarnaan Gram pada media NA10-5B. Hasilnya
berwarna ungu (Gram positif) karena bakteri tersebut mengikat kompleks zat warna kristal ungu iodium.
Gambar ini diambil dari mikroskop setelah proses pewarnaan Gram, bakteri yang diambil berasal dari
media NA 10-4A. Hasilnya berwarna merah Gram negatif karena mengikat warna sekunder.

Menurut Hadieotomo (1988), bakteri dapat dipisahkan secara umum 2 kelompok besar yaitu: 1)
1)organisme yang dapat menajahan kompleks pewarna primer ungu kristal iodium sampai pada akhir
prosedur (sel-sel tampak biru gelap atau ungu), disebut Gram positive; 2) organisme yang kehilangan
kompleks warna ungu kristal pada waktu pembilasan dengan alkohol namun kemudian terwarnai oleh
pewarna tandingan, safranin (sel-sel tampak merah muda), disebut Gram negative.

Materi genetik meliputi kromosom, gen, DNA, RNA. Proses pewarisan sifat kepada keturunannya
melibatkan materi genetik
1. Kromosom
Kromosom tersusun dari DNA dan protein. Protein pada kromosom disebut histon. Kromosom
terbentuk dari untaian DNA yang dipintal dalam suatu protein histon kemudian menjadi nukleosom.
Setelah itu nukleosom satu dengan nukleosom lainnya bergabung membentuk benang yang lebih padat
dan menjadi lipatan-lipatan yang disebut solenoid. Kemudian setelah itu solenoid bergabung dengan
solenoid lainnya membentuk suatu benang yang disebut kromatin. Kromatin ini bentuknya seperti
seperti benang-benang halus seperti jala yang dapat menyerap warna dan berada pada nukleus. Ketika
sel akan membelah, kromatin akan menebal dan memendek yang kemudian disebut kromosom.
Kromosom mengandung dua struktur dua struktur utama yaitu sentrosom dan telomer.
Sentromer berbentuk bulat dan tidak mengandung gen, berfungsi untuk pergerakan kromosom dari
daerah ekuator ke kutub masing-masing pada saat pembelahan terjadi. Sentromer merupakan bagian
kromosom yang menghubungkan dua kromatid ( kromosom anak ). Pada sentromer biasanya menempel
benang-benang spindel selama pembelahan mitosis dan meiosis. Benang-benang spindel akan
menggerakkan sentromer sekaligus kromosom menuju tempat yang sesuai.
Telomer merupakan urutan DNA khusus yang dapat ditemukan pada agian ujung kromoso.
Telomer berfungsi menjaga panjang kromosom anak konstan seperti pada sel induk.
Berdasarkan letak sentromernya, kromosom dibedakan menjadi beberapa tipe yaitu :
§ Kromosom metasentrik
Yaitu kromosom yang sentromernya terletak persis ditengah-tengah lengan kromosom.
§ Kromosom submetasentrik
yaitu kromosom yang sentromernya terletak hampir ditengah-tengah lengan kromosom
§ Kromosom akrosentrik
yaitu kromosom yang sentromrnya terletak hampir di ujung lengan kromosom
§ Kromosom telosentrik
Yaitu kromosom yang sentromernya terletak dibagian ujung lengan kromosom.

Tipe dan jumlah kromosom:

Pada sel rubuh manusia terdapat 46 kromosom (2n) yang dibedakan menjadi :
§ Autosom
Yaitu kromosom tubuh yang tidak ada hubungannya dengan penentuan jenis kelamin. Yang terdiri dari
22 pasang autosom atau 44 buah.
§ Genosom
 Yaitu kromosom yang menentukan jenis kelamin yang terdiri atas 1 pasang kromosom kelamin.
Dibedakan menjadi 2 macam yaitu kromosom-X dan kromosom-Y.
Suatu pasang kromosom kelamin dapat bertanda XX atau XY. Kombinasi tersebut bisa terjadi
ketika sel telur dengan kromosom X dibuahi oleh sel sperma dengan kromosom X atau Y. Nah, jika
dibuahi sel sperma dengan kromosom X maka dihasilkan satu pasang kromosom kelamin bertanda X,
berjenis kelamin wanita. Jika sel telur dibuahi sel sperma dengan kromosom Y, maka dihasilkan
sepasang kromosom kelamin bertanda XY, dan berjenis kelamin laki-laki.
Pada autosom, masing-masing pasangan kromosomnya merupakan pasangan homolog yang
artiya kedua pasangan kromosom mempunyai bentuk,ukuran maupun jenis gen yang ada di dalamnya.
Pada kromosom kelamin wanita atau kromosom XX merupakan pasangan homolog tetapi tidak untuk
pasangan kromosom kelamin X dan Y pada pria karena pada kromosom kelamin pria ada sebagian
lengan kromosom yang tidak membawa gen-gen yang sejenis.

2. Gen
Gen merupakan satu seri triplet basa nitrogen yang terdapat pada pita DNA. Seri triplet ini akan
mengode satu rantai polipeptida yang kemudian akan menjadi bagian dari satu enzim atau protein
lainnya. Gen terdiri atasa materi genetika yang berisi pesan-pesan kimia. Gen tersebut dapat diwariskan
dari satu generasi ke generasi berikunya sehingga mempunyai sejumlah ciri individu yang sama dengan
induknya.
Gen memiliki beberapa fungsi, antara lain:
§ Sebagai zarah tersendiri pada kromosom. Zarah adalah zat terkecil dan tidak dapat dibagi-bagi.
§ Menyimpan informasi genetik dari induk kepada keturunannya.
§ Mengatur proses metabolisme dan perkembangan.
Gen terletak didalam kromosom pada lokasi khusu yang disebut dengan lokus. Gen mempunyai
bentuk alternatif atau bentuk lain yang dikenal dengan istilah alel. Alel dapat memiliki tugas yang sama
atau berlawanan untuk suatu pekerjaan tertentu. Alel yang memiliki tugas yang sama disebut alel
homozigot. Sedangkan alel yang mempunyai tugas yang berlawanan disebut alel heterozigot. Gen dan
alel dilambangkan dengan huruf latin besar dan kecil. Jadi, gen juga mempunyai pasangan seperti
halnya kromosom.
3. DNA
DNA ( deoxyribonucleic acid ) atau disebut juga asam deoxyribosa nukleat (ADN). DNA
membawa informasi yang diperlukan untuk sintesis protein dan replikasi. Sintesis protein merupakan
proses penyusunan protein yang diperlukan oleh sel maupun virus yang akan digunakan untuk aktivitas
dan pertumbuhan. Replikasi merupakan proses DNA yang mengopi diri sendiri untuk diberikan pada
masing-masing sel anak maupun virus. Sekaligus menyampaikan informasi yang diperlukan untuk
sintesis protein. Dari berbagai penelitian mengungkapkan bahwa DNA adalah pembawa sebagian atau
seluruh sifat-sifat genetik didalam kromosom. DNA terdapat didalam nukleus, selain didalam nukleus
molekul DNA juga terdapat didalam mitokondria, plastid dan sentriol.
Susunan kimia DNA adalah sebuah makromolekul yang kompleks. Molekul DNA disusun oleh
dua rantai polinukleotida yang amat panjang. Satu rantai polinukleotida terdiri atas rangkaian
nukleotida. Nukleotida menghubungkan masing-masing pita DNA pada satu molekul DNA. Molekul DNA
terdiri atas dua pita atau berpita ganda. Dengan adanya nukleotida yang menghubungkan pita DNA
sehingga membentuk struktur rantai ganda yang tersusun seperti tangga berpilin. Struktur demikian
dikenal dengan istilah double helix.
Menurut struktur DNA double helix, setiap nukleotida terdiri atas tiga unit yaitu satu molekul
gula pentosa deoksiribosa, satu gugus fosfat dan satu dari empat jenis basa nitrogen. Keempat basa
nitrogen tersebut adalah kelompok purin : adenin (A) dan uanin (G) serta kelompok pirimidin : timin (T)
dan sitosin (S). Nukleotida yang mengandung (A) atau adenin selalu berpasangan dengan timin (T).
Sedangkan sitosin (S) selalu berpasangan dengan guanin (G).
4. RNA
Merupakan materi genetik yang terdapat pada virus tertentu (virus RNA), serta sel dan molekul yang
mengarah kepada tahap sintesis protein. Struktur RNA hampir sama dengan DNA, dibangun oleh suatu
molekul gula pentosa, satu gugus fosfat dan satu dari empat jenis basa nitrogen. Gula pentosa pada RNA
berupa ribosa bukan deoksiribosa. Pada RNA terdapat basa urasil (U) sebagai pengganti timin (T) pada
DNA. Kemudian RNA bukan dibangun oleh rantai polinukleotida berpeptida ganda melainkan
polinukleotida berpita tunggal.

Pertumbuhan merupakan proses bertambahnya ukuran atau subtansi atau masa zat suatu
organisme, misalnya kita makhluk makro ini dikatakan tumbuh ketika bertambah tinggi, bertambah
besar atau bertambah berat. Pada organisme bersel satu pertumbuhan lebih diartikan sebagai
pertumbuhan koloni, yaitu pertambahan jumlah koloni, ukuran koloni yang semakin besar atau subtansi
atau masssa mikroba dalam koloni tersebut semakin banyak, pertumbuhan pada mikroba diartikan
sebagai pertambahan jumlah sel mikroba itu sendiri.
Pertumbuhan merupakan suatu proses kehidupan yang irreversible artinya tidak dapat dibalik
kejadiannya. Pertumbuhan didefinisikan sebagai pertambahan kuantitas konstituen seluler dan struktur
organisme yang dapat dinyatakan dengan ukuran, diikuti pertambahan jumlah, pertambahan ukuran sel,
pertambahan berat atau massa dan parameter lain. Sebagai hasil pertambahan ukuran dan pembelahan
sel atau pertambahan jumlah sel maka terjadi pertumbuhan populasi mikroba.
Istilah pertumbuhan bakteri lebih mengacu kepada pertambahan jumlah sel bukan mengacu
kepada perkembangan individu organisme sel. Bakteri memiliki kemampuan untuk menggandakan diri
secara eksponensial dikarenakan sistem reproduksinya
Dalam makalah ini, penulis akan membahas mengenai kurva sigmoid pertumbuhan bakteri yang
akan dijelaskan secara lebih mendalam pada Bab II.

BAB II
PEMBAHASAN

A. Pertumbuhan Bakteri
Pertumbuhan dapat diamati dari meningkatnya jumlah sel atau massa sel (berat kering sel). Pada
umumnya bakteri dapat memperbanyak diri dengan pembelahan biner, yaitu dari satu sel membelah
menjadi 2 sel baru, maka pertumbuhan dapat diukur dari bertambahnya jumlah sel.
Waktu yang diperlukan untuk membelah diri dari satu sel menjadi dua sel sempurna disebut
waktu generasi. Waktu yang diperlukan oleh sejumlah sel atau massa sel menjadi dua kali jumlah/massa
sel semula disebut doubling time atau waktu penggandaan. Waktu penggandaan tidak sama antara
berbagai mikrobia, dari beberapa menit, beberapa jam sampai beberapa hari tergantung kecepatan
pertumbuhannya. Kecepatan pertumbuhan merupakan perubahan jumlah atau massa sel per unit
waktu. Pada kondisi lingkungan yang memungkinkan, bakteri akan membelah diri dengan cepat.
Pembelahan terjadi setiap 15-20 menit. Sehingga dalam waktu kurang lebih 7-8 jam bakteri sudah
menjadi jutaan.
Berikut ini adalah tahap-tahap pembelahan sel bakteri:
1. Fase pertama, dimana sitoplasma terbelah oleh sekat yang tumbuh tegak lurus pada arah memanjang.
2. Sekat tersebut diikuti oleh suatu dinding melintang. Dinding melintang ini tidak selalu merupakan
penyekat yang sempurna,ditengah-tengah sering ketinggalan suatu lubang kecil, dimana protoplasma
kedua sel baru masih tetap berhubung-hubungan. Hubungan protoplasma ini disebut plasmodesmida.
3. Fase terakhir ialah terpisahnya kedua sel. Ada bakteri yang segera berpisah, yaitu yang satu terlepas
sama sekali dari pada yang lain, setelah dinding melintang menyekat secara sempurna. Bakteri yang
semacam ini merupakan koloni yang merata, jika dipiara pada medium yang padat. Sebaliknya, bakteri-
bakteri yang dindingnya lebih kokoh tetap bergandeng-gandengan setelah pembelahan. Bakteri macam
ini merupakan koloni yang kasar permukaannya.

B. Penghitungan Waktu Generasi

Dari hal tersebut dapat dirumuskan menjadi:
Dari hasil pembelahan sel secara biner:
1 sel menjadi 2 sel
2 sel menjadi 4 sel 21 menjadi 22 atau 2 x 2
4 sel menjadi 8 sel 22 menjadi 23 atau 2 x 2 x 2
Dari hal tersebut dapat dirumuskan menjadi:
N = N0. 2n
0’ 15’ 30’ 45’ 60’ 75’ 90’ 105’
1 sel 2 sel 4 sel 8 sel 16 sel 32 sel 64 sel 128 sel
0 1 2 3 4 5 6
2 2 2 2 2 2 2 27

N: jumlah sel akhir, N0: jumlah sel awal, n: jumlah generasi

Waktu Generasi = t/n
t: waktu pertumbuhan eksponensial
n: jumlah generasi
Dalam bentuk logaritma, rumus N = N0 2n menjadi:
log N = log N0 + n log 2
log N – log N0 = n log 2
n = (log N – log N0) / log 2 = (log N – log N0) / 0,301
Waktu generasi juga dapat dihitung dari slope garis dalam plot semilogaritma kurva pertumbuhan
eksponensial, yaitu dengan rumus:
slope = 0,301/ waktu generasi

Berikut ini adalah beberapa contoh Mikroorganisme beserta waktu generasinya

Jenis Mikroorganisme Waktu Generasi (jam)
Bakteri Heterotrofik
Bacillus megatarium
Escherichia coli 0,58
Rhizobium meliloti 0,28
Treponema pallidum 1,80
34,0
Bakteri Fotosintetik
 Chloropseupdomonas 7,0
Ethylicum Rhodopseudomonas spheroids 2,4
Rhodospirillum rubrum 5,0

Ragi/Jamur

Saccharomyces cerevisiae 2,0

3. Kurva Sigmoid Pertumbuhan Bakteri

Suatu bakteri yang dimasukkan ke dalam medium baru yang sesuai akan tumbuh memperbanyak
diri. Jika pada waktu-waktu tertentu jumlah bakteri dihitung dan dibuat grafik hubungan antara jumlah
bakteri dengan waktu maka akan diperoleh suatu grafik atau kurva pertumbuhan.
Kurva pertumbuhan bakteri dapat dipisahkan menjadi empat fase utama :
1. Fase lag (fase lamban atau lag phase)
2. Fase pertumbuhan eksponensial (fase pertumbuhan cepat atau log phase)
3. Fase stationer (fase statis atau stationary phase)

4. Fase penurunan populasi (decline).

Fase-fase tersebut mencerminkan keadaan bakteri dalam kultur pada waktu tertentu. Di antara
setiap fase terdapat suatu periode peralihan dimana waktu dapat berlalu sebelum semua sel memasuki
fase yang baru.

1. FASE LAG.
Setelah inokulasi, terjadi peningkatan ukuran sel, mulai pada waktu sel tidak atau sedikit
mengalami pembelahan. Fase ini, ditandai dengan peningkatan komponen makromolekul, aktivitas
metabolik, dan kerentanan terhadap zat kimia dan faktor fisik. Fase lag merupakan suatu periode
penyesuaian yang sangat penting untuk penambahan metabolit pada kelompok sel, menuju tingkat yang
setaraf dengan sintesis sel maksimum.

2. FASE LOG/PERTUMBUHAN EKSPONENSIAL.

 Pada fase eksponensial atau logaritmik, sel berada dalam keadaan pertumbuhan yang seimbang.
Selama fase ini, masa dan volume sel meningkat oleh faktor yang sama dalam arti rata-rata komposisi
sel dan konsentrasi relatif metabolit tetap konstan. Selama periode ini pertumbuhan
seimbang, kecepatan peningkatan dapat diekspresikan dengan fungsi eksponensial alami. Sel membelah
dengan kecepatan konstan yang ditentukan oleh sifat intrinsik bakteri dan kondisi lingkungan. Dalam hal
ini terdapat keragaman kecepatan pertumban berbagai mikroorganisme. Waktu lipat dua
untuk Escherichia coli dalam kultur kaldu pada suhu 37oC, sekitar 20 menit, sedangkan waktu lipat dua
minimal sel mamalia sekitar 10 jam pada temperatur yang sama.

3. FASE STASIONER.
Pada saat digunakan kondisi biakan rutin, akumulasi produk limbah, kekurangan nutrien,
perubahan pH, dan faktor lain yang tidak diketahui akan mendesak dan mengganggu biakan,
mengakibatkan penurunan kecepatan pertumbuhan. Selama fase ini, jumlah sel yang hidup tetap
konstan untuk periode yang berbeda, bergantung pada bakteri, tetapi akhirnya menuju periode
penurunan populasi. Dalam beberapa kasus, sel yang terdapat dalam suatu biakan yang populasi selnya
tidak tumbuh dapat memanjang, membengkak secara abnormal, atau mengalami penyimpangan, suatu
manifestasi pertumbuhan yang tidak seimbang.
Alasan bakteri tidak melakukan pembelahan sel pada fase statis bermacam-macam. Beberapa
alasan yang dapat dikemukan akan adalah :
a. Nutrien habis
b. Akumulasi metabolit toksik (misalnya alkohol,asam, dan basa)
c. Penurunan kadar oksigen
d. Penurunan nilai aw (ketersediaan air)

4. FASE PENURUNAN POPULASI ATAU FASE KEMATIAN.

Pada saat medium kehabisan nutrien maka populasi bakteri akan menurun jumlahnya, Pada saat
ini jumlah sel yang mati lebih banyak daripada sel yang hidup.
Penyebab utama kematian adalah autolisis sel dan penurunan energi seluler. Beberapa bakteri
hanya mampu bertahan beberapa jam selama fase statis dan akhirnya masuk ke dalam fase kematian,
sementara itu beberapa bakteri hanya mampu bertahan sampai harian dan mingguan pada fase statis
dan akhirnya masuk ke fase kematian. Beberapa bakteri bahkan mampu bertahan sampai puluhan tahun
sebelum mati, yaitu dengan mengubah sel menjadi spora.

BAB III
PENUTUP

Kesimpulan
Pertumbuhan adalah peningkatan jumlah dan masa sel. Pada bakteri ditandai dengan adanya
pertambahan jumlah sel. Bakteri bereproduksi dengan cara pembelahan biner, yaitu 1 sel bakteri akan
membelah menjadi 2 sel, kemudian 2 sel bakteri tersebut mengalami pembelahan menjadi 4 sel dan
seterusnya. Sehingga jumlah bakteri dapat dicari dengan menggunakan rumus N = N0. 2n.
Pertumbuhan bakteri dalam suatu medium meleati beberapa fase yaitu :

1. Fase lag
Bakteri sedang menyesuaikan diri dengan lingkungan medium.

2. Fase eksponen

Bakteri melakukan pertumbuhan secara aktif yaitu dengan membelah diri

3. Fase stasioner.

Tidak terjadi perubahan populasi bakteri karena jumlah bakteri yang hidup=jumlah bakteri yang mati.

4. Fase kematian

Terdapat penumpukan sisa metabolism bakteri serta nutrient dalam medium sudah habis maka bakteri
akan mati

Berdasarkan kondisi habitatnya dikenal 2 tipe habitat, yaitu habitat mikro dan habitat makro. Habitat
makro merupakan habitat bersifat global dengan kondisi lingkungan yang bersifat umum dan luas.
Sebaliknya habitat mikro merupakan habitat local dengan kondisi lingkungan yang bersifat setempat
yang tidak terlalu luas, misalnya, kolam, rawa payau berlumpur lembek dan dangkal, danau, dan
sebagainya.

Relung atau niche merupakan tempat makhluk hidup berfungsi di habitatnya, bagaimana cara
hidup, atau peran ekologi makhluk hidup tersebut. Jadi pada dasarnya makhluk hidup secara alamiah
akan memilih habitat dan relung ekologinya sesuai dengan kebutuhannya, dalam arti bertempat tinggal,
tumbuh berkembang dan melaksanakan fungsi ekologi pada habitat yang sesuai dengan kondisi
lingkungan (misalnya iklim), nutrien, dan interaksi antara makhluk hidup yang ada.
Niche atau nicia atau di Indonesia kita sebut relung memiliki arti tidak hanya tempat atau ruang
yang di tinggali makhluk hidup tetapi sebuah profesi makhluk hidup atau organisme dalam habitatnya
atau fungsi makhluk hidup atau peranannya dalam lingkungan hidupnya.
Ruang fisik (habitat) yang ditempati ataupun peran fungsional organisme dalam komunitas
disebut niche (nicia atau relung). Dalam pengertiannya, nicia ini diperhitungkan juga apa yang dilakukan
organisme, misalnya bagaimana mengubah energi, berperilaku, bereaksi terhadap lingkungan fisik
maupun biotik atau memengaruhi dan mengubah lingkungannya. Odum mengemukakan habitat adalah
alamat organisme, dan nicia (relung) adalah profesi atau pekerjaan organisme.
Parasit merupakan organisme yang hidup pada organisme lain yang mengambil makanan dari
tubuh organisme tersebut, sehingga organisme yang tempatnya makan (inang) akan mengalami
kerugian. Parasitisme adalah hubungan dengan salah satu spesies parasit dimana inangnya sebagai
habitat dan merupakan tempat untuk memperoleh makanan atau nutrisi, tubuh inang adalah
lingkungan utama dari parasit sedangkan lingkungan sekitarnya merupakan lingkungan keduanya
(Kabata, 1985).
Penyakit pada ikan didefinisikan sebagai sesuatu yang dapat mengganggu proses kehidupan ikan,
sehingga pertumbuhan menjadi tidak normal. Secara umum penyakit dibedakan menjadi 2 kelompok
yaitu penyakit infeksi dan non infeksi. Penyakit infeksi disebabkan oleh organisme hidup seperti parasit,
 jamur, bakteri, dan virus dan penyakit non infeksi disebabkan oleh faktor non hidup seperti pakan,
lingkungan, keturunan dan penanganan (Afrianto dan Liviawaty, 2003).
Infeksi dari berbagai parasit biasanya melalui media air dimana ikan akan berinteraksi dengan
ikan yang lain, sehingga parasit akan berpindah dari ikan yang satu ke ikan yang lain dan populasi parasit
akan semakin banyak.
Penyakit akibat infeksi parasit menjadi ancaman utama keberhasilan akuakultur. Pemeliharaan
ikan dalam jumlah besar dan padat tebar tinggi pada area yang terbatas, menyebabkan kondisi
lingkungan tersebut sangat mendukung perkembangan dan penyebaran penyakit infeksi. Kondisi dengan
padat tebar tinggi akan menyebabkan ikan mudah stress sehingga menyebabkan ikan menjadi mudah
terserang penyakit, selain itu kualitas air, volume air dan alirannya berpengaruh terhadap
berkembangnya sutu penyakit.
Populasi yang tinggi akan mempermudah penularan karena meningkatnya kemungkinan kontak
antara ikan yang sakit dengan ikan yang sehat. Daelami (2002), mengatakan bahwa parasit ikan terdapat
pada lingkungan perairan yang ada ikannya, tetapi belum tentu menyebabkan ikan menderita sakit. Ikan
sebenarnya mempunyai daya tahan terhadap penyakit selama berada dalam kondisi lingkungan yang
baik dan tubuhnya tidak diperlemah oleh berbagai sebab.
Parasit pada hewan akuatik memiliki aspek ekologi dan epidemiologi yang unik. Parasit ini
memiliki dua lingkungan yang dapat mempengaruhi perkembangannya yaitu lingkungan makro
(lingkungan sekunder) dimana ikan hidup dan lingkungan mikro (lingkungan utama) dimana parasit
hidup pada inangnya. Sebagai salah satu bentuk adaptasi dalam parasitisme adalah adanya
kecenderungan parasit untuk lebih cenderung menginfeksi jenis inang tertentu (species specificity),
kecenderungan untuk menempati organ/habitat tertentu dalam inang (mikrohabitat).

BAB II
ISI

A. Pengertian Mikrohabitat Parasit

 Menurut Williams dalam Nurhayati (2003) Mikrohabitat parasit adalah lingkungan atau tempat
yang mendukung kehidupan parasit pada inangnya. Dimana lingkungan atau tempat tinggal tersebut
tersedia makanan, oksigen dan faktor lainnya termasuk didalamnya kompetisi antar spesies.
Daelami (2002), mengatakan bahwa parasit ikan terdapat pada lingkungan perairan yang ada
ikannya, tetapi belum tentu menyebabkan ikan menderita sakit. Ikan sebenarnya mempunyai daya
tahan terhadap penyakit selama berada dalam kondisi lingkungan yang baik dan tubuhnya tidak
diperlemah oleh berbagai sebab.
Kadang-kadang larva parasit menempati organ tertentu pada inangnya dan tumbuh menjadi
dewasa pada lokasi tersebut. Namun demikian, banyak jenis parasit yang menempati microhabitat yang
berbeda pada tahap larva maupun dewasa dari parasit. Sebagai contoh adalah larva parasit golongan
Copepoda Caligus diaphanous. Golongan ini awalnya menginfeksi filament insang, tetapi pada tahap
dewasa menempati rongga mulut ikan.
Kasus lainnya adalah parasit golongan monogenea yang memperlihatkan mikrohabitat yang
berbeda antara fase larva dan fase dewasanya. Banyak jenis monogenea memperlihatkan
kecenderungan untuk menempati organ tertentu pada inangnya/mikrohabitat. Sebagai
contoh monopisthocotyleans Pseudodactylogyrus bini and P. anguillae yang menginfeksi European
eel Anguilla anguilla hanya ditemukan pada insang dan keduanya memperlihatkan lokasi spesifik
masing-masing dalam mikrohabitatnya pada insang. Contoh lainnya adalah microcotylid
polypisthocotyleans, Metamicrocotyla cephalus and Microcotyle mugilis, ditemukan pada insang
striped mullet Mugil cephalus dan keduanya memiliki microhabitat spesifik pada insang. Beberapa
spesies Gyrodactylus menempati microhabitats selain insang. Sebagai contoh, mayoritas specimens
Gyrodactylus salaris ditemukan pada sirip, dan lainnya ditemukan pada filament insang dan
kepala/tubuh Atlantic salmon Salmo salar (Appleby and Mo, 1997), sedangkan G. callariatis terutama
menempati gill arches, rongga mulut dan pharynx, and sebagian kecil ditemukan pada tubuh, kepala dan
sirip dari Atlantic cod Gadus morhua (Appleby, 1996a).
Faktor yang menyebabkan terjadinya microhabitat yang spesifik pada golongan monogenea
adalah belum terlalu jelas. Namun banyak factor kemungkinan terlibat termasuk faktor extrinsic dan
intrinsic (Rohde, 1993).
Arus air yang melewati insang merupakan salah satu factor yang mempengaruhi mikrohabitats,
karena kemampuan parasit menahan arus yang keras kemungkinan bervariasi diantara individu parasit
sebagaimana yang terlihat pada Pseudodactylogyrus bini dan P. anguillae pada ikan sidat (see
Buchmann, 1989) dan Dactylogyrus amphibothrium pada ruffe Gymnocephalus cernua (see Wootten,
1974). Kecendrungan Gyrodactylus derjavini untuk menepati microhabitat tertentu, terutama pada
permukaan kornea sirip ekor rainbow trout Oncorhynchus mykiss pada tahap akhir infeksi berasosiasi
dengan densitas sel mukus, dimana immunoglobulin, complement factor C3, interleukin IL-1 and
carbohydrates memainkan peranan penting terhadap dynamika infeksi parasite (Buchmann and
Bresciani, 1998).
 Tetapi pada lokasi dimana microhabitat tidak terpengaruh oleh jenis cell (seperti daerah yang
berbeda pada permukaan insang), niche yang sempit akan meningkatkan peluang kontak antar spesies
parasit untuk kawin, sehingga hal ini menyebabkan terjadinya pengumpulan parasit pada microhabitat
tertentu (Rohde, 1993).
Pelekatan pada bagian subcutaneous juga dapat dilihat pada parasit Callorhynchicola
multitesticulatus yang menginfeksi inang holocephalan Calloryhnchus milii; dimana stadia tidak dewasa
ditemukan pada lamella insang sekunder dan selanjutnya menginfeksi jaringan inang ketika dewasa.
Migrasi parasit ini hanya terjadi pada bagian insang saja.
Sebaliknya, tahap tidak dewasa parasit Heterobothrium okamotoi ditemukan pada lamella insang
sekunder ikan tiger puffer Takifigu rubripes dan bermigrasi bagian branchial cavity ketika
dewasa. Neoheterobothrium hirame yang menginfeksi ikan Japanese flounder memperlihatkan
kesamaan dengan H. okamotoi tentang cara melekat pada inang. Padaawalnya tahap tidak dewasa N.
hirame melekat pada lamella sekunder dan kemudian bermigrasi ke buccal cavity wall melalui gill
arches/rakers untuk menjadi dewasa. Migrasi kedua spesies parasit ini berasosiasi dengan tingkat
kedewasaan parasit, dimana keduanya menjadi dewasa setelah mencapai target organ akhirnya.

Secara bahasa virus yang merupakan bahasa latin yaitu dari kata virion yang memiliki arti
racun. Pengertian virus adalah parasit mikroskopik yang mampu menginfeksi sel organisme. Virus hanya
dapat bereproduksi di dalam material hidup dengan cara menginvasi dan memanfaatkan sel makhluk
hidup, hal itu dikarenakan virus tidak memiliki perlengkapan selular untuk bereproduksi sendiri.
Oleh karena itu virus disebut juga parasit obligat karena sifatnya tersebut. Umumnya virus memiliki
sejumlah asam nukleat yang DNA ataupun RNA (namun tidak kombinasi keduanya). Asam nukleat
tersebut diselubungi bahan yang mampu melindungi bagian virus yang terdiri dari glikoprotein, protein
dan lipid (bisa juga kombinasi ketiganya)
STRUKTUR DAN ANATOMI VIRUS
Setelah memahami apa pengertian virus, selanjutnya perlu diketahui juga susunan dari virus. Struktur
virus sendiri terdiri dari kepala, kapsid, isi tubuh dan ekor. Pada bagian kepala, terdapat DNA atau asam
nukleat. Sedangkan kapsid merupakan selubung yang berbentuk protein.
Fungsi dari kapsid adalah memberi bentuk virus sekaligus melindungi virus dari kondisi lingkungan yang
mampu merugikan virus. Isi tubuh virus yang disebut virion ini terdiri dari asam inti yang merupakan
materi generik berisi kode-kode pembawa sifat virus. Sedangkan ekor virus merupakan alat yang
digunakan untuk menempel pada makhluk hidup (inang).
CIRI-CIRI VIRUS

Virus dapat diidentifikasi melalui beberapa ciri-ciri berikut ini. Pertama, virus berukuran sangat kecil
yaitu sekitar 20-300 milimikron. Kedua, virus tidak memiliki sel/ asesuler.
Ketiga, sebagian besar virus berupa kristal/ hablur. Keempat, virus bisa berbentuk oval, silinder,
kompleks atau polyhedral, kelima, hanya memiliki salah satu asam nukleat saja. Keenam, tidak dapat
membelah diri dan bergerak. Ketujuh, mampu hidup di sel makhluk hidup jenis apa saja.
PERANAN VIRUS
Kebanyakan dari jenis virus memang merugikan, dimana virus yang menyerang tumbuhan juga
menyebabkan kerusakan atau matinya tumbuhan. Contohnya pada daun tembakau yang diserang
tobacco Mozaic virus. Selain itu virus juga dapat menginfeksi pada hewan, contohnya cacar pada sapi
Vicinia Virus.
Disisi lain, manusia juga sangat mudah terserang oleh virus yang menyebabkan penyakit Influensa, AIDS,
SARS, Flu burung dan masih banyak lagi. Namun peranan virus disini tidak hanya merugikan saja.
Pasalnya virus yang telah dilemahkan dapat dimanfaatkan dalam bidang kesehatan, diantaranya
membuat antitoksin, melemahkan bakteri, memproduksi vaksin dan menyerang patogen. Nah
itulah pengertianvirus dan penjelasan singkatnya, semoga bermanfaat.