PRAKTIKUM I

A. JUDUL
Sterilisasi dengan Pembakaran
B. TUJUAN
Setelah mempelajari laporan ini mahasiswa dapat mengetahui cara sterilisasi berbagai alat
dengan pembakaran.
C. DASAR TEORI
Pemijaran langsung digunakan untuk mensterilkan spatula logam, batang gelas, filter logam
bekerfield dan filter bakteri lainnya. Mulut botol, vial, dan labu ukur, gunting, jarum logam dan
kawat, dan alat-alat lain yang tidak hancur dengan pemijaran langsung. Papan salep, lumping dan
alu dapat disterilisasi dengan metode ini. Dalam semua kasus bagian yang paling kuat 20 detik.
Dalam keadaan darurat ampul dapat disterilisasi dengan memposisikan bagian leher ampul
kearah bawah lubang kawat keranjang dan dipijarkan langsung dengan api dengan hati-hati.
Setelah pendinginan, ampul harus segera diisi dan disegel.

D. ALAT DAN BAHAN

1. Jarum ose
2. Tabung reaksi
3. Lampu Bunsen
4. Korek api
5. Media padat dalam cawan Petri

E. LANGKAH KERJA
1. Menyalakan lampu Bunsen dan mengatur nyala apinya secara maksimal.
2. Untuk sterilisasi jarum ose. Mengambil jarum ose kemudian melakukan pembakaran dengan
api Bunsen mulai dari bagian pangkal kawat ose secara perlahan menuju ke ujung kawat jarum
ose. Pembakaran jarum ose dilakukan sampai kawatnya merah membara. Jarum ose yang dibakar
dibiarkan dingin, selanjutnya siap digunakan untuk mengambil/ menginokulasi mikrobia.
3. Untuk sterilisasi mulut tabung reaksi. Membuka sumbat kapas kemudian melewatkan mulut
tabung pada api. Hal ini dilakukan sebelum dan setelah mengambil/menginokulasi biakan.
Menutup kembali mulut tabung dengan kapas.
4. Untuk sterilisasi cawan petri. Sebelum cawan petri dibuka untuk diinokulasi maupun cawan
petri ditutup setelah diinokulasi, tepi cawan dilewatkan di api Bunsen.

F. HASIL PENGAMATAN
Alat yang digunakan telah disterilkan terlebih dahulu. Pada saat penggunaan alat ini sudah dalam
keadaan steril.

G. PEMBAHASAN
Sterilisasi dan penyiapan media adalah salah satu proses yang sangat penting dalam penelitian
tentang mikroorganisme. Sebab kedua factor ini adalah kunci utama kesuksesan dalam tahap
pengamatan. Kita ketahui bahwa dialam semesta ini banyak sekali bertebaran mikroorganisme,
mereka hampir terdapat disemua tempat. Tidak heran jika kita bisa terkontaminasi dimana saja,
meskipun kita menganggap tempat tersebut sudah steril.
Dalam proses praktikum sebelum kita menuju kepersiapan media, maka yang harus kita lakukan
lebih dahulu adalah sterilisasi. Sterilisasi ini berlaku dimana saja terutama yang berkaitan dengan
kesehatan dan mikroorganisme. Dalam pelaksanaan operasi dalam dunia kedokteran, semua alat
yang akan digunakan disterilisasi terlebih dahulu. Tujuanya agar alat-alat tersebut benar-benar
steril dan bersih dari mikroorganisme yang membahayakan, terutama bagi pasien yang akan
dioperasi.
Sterilisasi yang kita lakukan dalam pengamatan ini ditujukan agar alat-alat tersebut steril dari
mikroorganisme lain yang akan menjadi kontaminan bagi mikroba yang akan kita tumbuhkan.
Sterilisasi yang kita lakukan adalah sterilisasi dengan pembakaran. Sterilisasi ini selain bertujuan
untuk menjaga mutu kebersihan dan pengamatan dilaboratorium juga bertujuan untuk menjaga
agar mikroba yang akan kita amati adalah benar-benar mikroba yang kita inginkan.
Masalah yang sering kita hadapi dalam laboratorium adalah tingkat kesterilan alat-alat yang akan
digunakan, bahkan yang lebih parah lagi adalah alat yang akan digunakan untuk mensterilkan
benda-benda tersebut juga malah tidak berfungsi dengan baik. Sehingga dalam hal ini akan
memacu tingkat kegagalan dalam pengamatan.
Seperti yang telah dikemukakan diatas tadi bahwa sterilisasi yang dipakai pada praktikum ini
adalah sterilisasi dengan pembakaran dengan tujuan mengetahui cara sterilisasi berbagai alat
dengan pembakaran. Pada praktikum ini terlebih dahulu yang di lakukan adalah menyalakan
lampu Bunsen dan mengatur nyala api secara maksimal. Kemudian setelah itu, ambil jarum ose
yang telah tersediah kemudian lakukan pembakaran dengan api Bunsen mulai dari bagian
pangkal kawat ose secara parlahan menuju ke ujung kawat jarum ose. Pembakaran ini dilakukan
sampai jarum osenya merah membara. Setelah itu dinginkan jarum ose, selanjutnya jarum ose
siap di gunakan untuk mengambil / menginokulasi bakteri. Tujuan untuk mendinginkan jarum
ose yaitu agar mikroba yang kita ambil tidak mati dengan jarum ose yang panas. Sehingga itu di
perlukan jarum ose yang sudah dingin. Kemudian untuk mensterilisasi mulut tabung reaksi, buka
sumbat kapas kemudian lewatkan mulut tabung pada api. Hal ini dilakukan sebelum dan setelah
mengambil / menginokulasikan biakan. Kemudian tutup kembali mulut tabung dengan kapas.
Kemudian untuk sterilisasi cawan petrik, sebelum cawan Petri dibuka untuk diinokulasi maupun
cawan petrin ditutup setelah inokulasi, tepi cawan dilewatkan di api bunsen. Keberhasilan dalam
pengamatan mikroba ini sangat bergantung pada bagaimana kita mensterilakan alat, dan
bagaimana komposisi media yang kita buat. Sebab komposisi media juga menentukan tingkat
keberhasilan mikroba tersebut tumbuh dalam media. Sehingga kedua hal ini harus benar-benar
diperhatikan ketika kita akan membiakkan mikroba didalam laboratorium, sebab jika
terkontaminasi sedikit saja, maka kemungkinan gagal akan angat besar.
Tehnik pembakaran langsung merupakan tehnik sterilisasi yang tercepat dan 100 % efektif.
Kelemahan tehnik ini terbatas penggunaannya. Caranya adalah dengan membakar peralatan
sampai pijar. Proses ini di laboratorium untuk mensterilkan alat penamaan bakteri ( ose, tugal ),
mulut tabung reaksi sewaktu membuat kultur, dan lain-lain. Prosedur ini sangat efektif
membunuh bentuk spora maupun toksin yang dihasilkan oleh bakteri.
Peralatan laboratorium yang dapat disterilkan dengan cara pembakaran langsung hanya alat-alat
yang terbuat dari logam dan kaca. Pembakaran langsung dapat juga dilakukan terhadap bangakai
binatang percobaan yang telah mati. Tehnik ini ini dapat digunakan untuk mensterilkan bahan-
bahan terbuat dari karet, plastik, kertas, dan media mikrobiologis.
H. KESIMPULAN
Metode sterilisasi yaitu :
Pemanasan kering
Prinsipnya adalah protein mikroba pertama-tama akan mengalami dehidrasi sampai kering.
Selanjutnya teroksidasi oleh oksigen dari udara sehingga menyebabkan mikrobanya mati.
- Pemijaran langsung
Digunakan untuk sterilisasi alat logam, bahan yang terbuat dari porselen, tidak cocok untuk alat
yang berlekuk karena pemanasannya tidak rata. Suhu yang digunakan 500-600oC dalam waktu
beberapa detik, untuk alat logam sampai berpijar.
I. JAWABAN PERTANYAAN
1. Mengapa semua alat di atas harus dilewatkan pada api Bunsen?
Jawaban :
sterilisasi dalam mikrobiologi merupakan pembebasan tiap benda atau substansi dari semua
kehidupan dalam bentuk apapun.
Semua alat yang digunakan pada saat akan melakukan sterilisasi harus dilewatkan pada api
bunsen, agar alat yang akan dipakai dalam keadaan steril. Prosedur ini sangat efektif membunuh
bentuk spora maupun toksin yang dihasilkan oleh bakteri.

J. DAFTAR PUSTAKA
Lay. B. W. 1994. Analisis Mikrobiologi da Laboraorium. Raja Grafindo Persada. Jakarta
Muhiddin, 2007. Penuntun Praktikum Mikrobiologi. Laboratorium Biologi FMIPA Universitas
Haluoleo. Kendari
Pelczar, Michael J. 1988. Dasar-Dasar Mikrobiologi. UI Press. Jakarta
Waluyo. 2005. Mikrobiologi Umum. UMPress. Malang
Wesley & Wheeler. 1993. Mikrobiologi Dasar jilid I. Erlangga. Jakarta
Diposkan oleh warna di 01:54