Bagian Patologi Klinik

FK UNHAS

Pengamatan Pada :
- Eritrosit, Lekosit, Trombosit
- Manifestasi : Anemia, lekositosis /lekopeni dan DIC
Lekositosis
- Umumnya Netrofil
, bentuk muda
- Netrofilia lanjut infeksi kronik
- Netrofilia menghebat + sel muda reaksi leukemoid
* Non-Ganas > 25-30 x 106/l
* Inflamasi, Stress, Trauma.

Lekopeni
* Netropenia, mis Demam Tifoid, Brucellosis
* Infeksi hebat netropenia hebat prognosis
buruk
Perubahan morfologik pada sepsis
* Dohle Bodies
* Granulasi Toksik
* Vakuolisasi
Eosinofilia :
* Non-bakterial, biasanya alergi/infeksi parasit

Anemia
* Bisa timbul sekalipun cadangan besi cukup
* Anemia akut : perdarahan / destruksi eritrosit
(misalnya : cold aglutinin sehubungan dengan
Mycoplasma pneumoniae)
* Anemia kronik, dengan :
- Cadangan besi yang normal atau meninggi
di sistem retikuloendotelial
- Penurunan besi dalam plasma
- Penurunan TIBC

Infeksi serius + bakteremia

* Gram negatif DIC (gram positif kurang)
- Trombus
- PT memanjang
- FDP
- Fibrinogen
Trombositopenia bisa juga menjadi tanda sepsis
bakterial dan bisa bermanfaat dalam
mengobservasi respon pasien terhadap terapi.

Tes Laboratorium
* Hematologi
- Leukopenia
- Trombocytopenia
- serum aminotransferase (AST, ALT) elevations
* Diagnosis seroloimmunology
1. Hemaglutination tests
2. Complement Fixation test
3. Neutralization Test
- IgM ELISA or
- paired serology during recovery or
- by antigen-detection ELISA or
- RT-PCR during the acute phase

Gambar. 4 Respon imun terhadap infeksi dengue

Tes Laboratorium Diagnosis DD dan DBD

Hari Demam

Jenis Pemeriksaan

Catatan / Interpretasi

HEMATOLOGI
Hemoglobin (Hb)
Hematokrit (Ht)
Hitung Leukosit
Hitung Trombosit

* Biasanya normal

HEMATOLOGI
Hemoglobin (Hb)
Hematokrit (Ht)
Hitung Leukosit
Hitung Trombosit

* Umumnya :
Hemoglobin meningkat.
Hemokonsentrasi (peningkatan Ht>20%
Leukopenia
Limfositosis relatif (> 45% dari total leukosit)
Limfosit plasma biru (> 15% dari total leukosit / > 4% dari total limfosit)
Trombositopenia (<100.000/uL)/penurunan serial trombosit
Trombosit <2/100 eri/LPB (minimal dilihat 10 lapang pandang)
* Ht/Hb > 3,5 dipertimbangkan DBD

47

HEMATOLOGI
Hemoglobin (Hb)
Hematokrit (Ht)
Hitung Leukosit
Hitung Trombosit
Apusan Darah Tepi
IMUNOLOSEROLOGI
Anti Dengue IgM, IgG
Tes HI
KIMIA

* Waspadai DIC
(PT >, APTT >, D Dimer (+), Fibrinogen Monomer (+), Fibrinogen <)
* Golongan Darah dan Uji Cocok Serasi
* Indikasi pemberian darah:
FFP: perdarahan masif, APTT > 1,5 N
Trombosit: bila perdarahan masif
IgM Pos, IgG Neg: Inf Primer
IgM Pos & IgG Pos: Inf Sekunder
IgM Neg & IgG Pos: Dugaan / Permulaan Inf Sekunder, Periode Konvalesen
IgM Neg & IgG Neg: Bukan inf flavivirus, ulangi 3-5 hari bila curiga.
> 1 : 2560 inf sekunder flavivirus
* SGOT/SGPT , albumin
* AGD (Syok >: asidosis metabolik), Elektrolit
* Ureum , Kreatinin (Nekrosis Tubuler akut)

8 -10

HEMATOLOGI
Hb (Hemoglobin)
Ht (Hematokrit)
Hitung Leukosit
Hitung Trombosit
Apusan Darah Tepi

* Normal pada fase penyembuhan

11-12

IMUNOSEROLOGI
HI test (serum fase konsvalesen)

* Peningkatan titer > 4 x:

< 1 : 1280 inf flavivirus akut primer
> 1 : 2560 inf flavivirus akut sekunder

Perhimpunan Dokter Spesialis Patologi Klinik Indonesia (PDS-PATKLIN) 2004 dengan tambahan dari WHO 2003

Suspicion of dengue infection

Delay after onset of fever

Unknown or 5 days
NS1 Antigen
+

Confirmed early
infection
Acute infection
+

>5 hari

Antisipated Diagnosis
IgM/IgG Serologis
Improve patient Management
+

IgM serology

Late acute or

Dengue

past-infection

is
unlikely

Presumably early early acute infection

Acute infection
is unlikely
A second sample isrequested for confirmation
EARLY DIAGNOSIS
LATE DIAGNOSIS

Gambar. 5. Perjalanan penyakit infeksi HIV1

J---J hit. sel T CD4,, K----K titer viremia

TES LABORATORIUM
Mencari virus dalam darah penderita
kultur/biakan

virus
deteksi antigen ; p24
PCR (polymerase chain reaction)

Mencari adanya antibodi terhadap berbagai

komponen virion HIV dalam serum penderita
(tes serologik)
Tes Enzime Linked Immunosorbent Assay
(EIA/ELISA)
Tes sederhana / cepat (tes imunokromatografi)
Tes konfirmasi sepert Western Blot (WB), Indirect
immunofluorescence assay (IFA)

Rekomendasi pemakaian strategi tes HIV dari UNAIDS dan

WHO pada berbagai tujuan tes dan prevalensi infeksi dalam
populasi

Tujuan tes

Prevalensi
infeksi

Strategi tes

Keamanan
transfusi/transpla
ntasi

Semua
prevalensi

> 10%

10%

II

Surveilans

Diagnosis

Terdapat
gejala klinik
infeksi HIV
Tanpa gejala
klinik infeksi
HIV

> 30%
30%
> 10%

I
II
II

LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: TESTING STRATEGIES)

Strategy I:
All samples are tested with one ELISA or rapid/simple assay.
Samples that is reactive is considered HIV Ab positive.
Strategy II:
All samples are first tested with one test.
Any reactive samples are subjected to second test based on
different principle and/or a different antigen preparation.
Strategy III:
All samples are first tested with one test.
Any reactive samples are subjected to second test based on
different principle and/or a different antigen preparation.
Requires a third test if samples are found reactive on the second
test.

LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST)

POSITIVE
High Risk Group (WHO 2-tests strategy)
ELISA - Reactive
PA - Detected
Low Risk Group (WHO 3-tests strategy)
ELISA - Reactive
PA - Detected
Immunoblot - Positive
NEGATIVE
Both screening tests: EIA - non-reactive and
PA - not-detected

Ket. Algoritme :
A1,A2 dan A3 adalah tes inisial dengan menggunakan dasar/prinsip tes yang berbeda dan/atau menggunakan preparasi antigen yang berbeda.
Reagensia yang dipilih untuk dipakai pada tes didasarkan pada sensitivitas dan spesifisitas tiap jenis reagen. Reagen yang dipakai pada tes
pertama adalah reagensia yang memiliki sensitivitas tertinggi, sebaiknya > 99%, sedangkan reagensia pada tes selanjutnya (kedua dan ketiga)
memiliki spesifisitas yang lebih tinggi dari yang pertama, untuk tujuan surveilans harus memiliki spesifisitas minimal sebesar 95% dan untuk
tujuan diagnosis memiki spesifisitas minimal sebesar 98%2.

Kadar T4 (Nilai
normal 5001000)
1000-500

Gambaran klinik

Acute retroviral sindrom/asimptomatik,

gejala intermitten, kandidiasis/ulkus
mulut, limpadenopati, xerosis, rash
(dermatitis seboroik, follikulitis

Keputusan terapi

Interval

Tujuan monitoring

Terapi
simptomatik

Setiap 6
bulan

Memutuskan kapan
penanganan terapi anti
retroviral

500-200

Asimptomatik/simptomatik, gejala kronik Mulai terapi

atau intermitten, limpadenopati,
antiretroviral
kandidiasis/lesi mulut, nause, vomiting, (ART)
diare, demam, keringat malam,
tuberkulosis, xoster, nocardia, sarkoma
kaposis mungkin nampak

200-50

Peningkatan gejala berat dan persisten,

berkurangnya daya ingat, ancaman
infeksi, peningkatan insidens kanker
kelainan paru, peningkatan resiko
penyebaran penyakit. Pneumocystis
carinii pneumonia (PCP), toksoplasma,
histoplasmosis, cryptococcosis
Peningkatan infeksi oportunistik dan
kematian, PML, demensia AIDS, CMV,
MAC dan proses tahap lanjut yang lain

< 50

ART dan
profilaksis.
Pertimnangkan
perubahan ART
jika im unoklinik
menurun
Tergantung
proses penderita
dan penyakit,
penderita tetap
dengan ART dan
terapi profilaksis.
Pertimbangkan
perubahan ART
dan kombinasi

Setiap 3-6 Monitoring respons

bulan
ART dan dan putuskan
untuk memulai
profilaksis terhadap
pneumocystic
pneumonia dan infeksi
lain
Setiap 2-3 Evaluasi untuk
bulan
memulai perubahan
ART, pertimbangkan
profilaksis lain dan
memperkirakan resiko
terhadap infeksi
opotunistik
?
Monitoring
kemungkinan
peningkatan
kecemasan penderita.
Pertimbangkan
menggunakan viral
load untuk evaluasi
progressifitas

ELISA for HIV antibody

Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells

indicate reactivity

LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: ELISA)

ELISA Test Kit

ELISA Machine

LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: SIMPLE TEST)

HIV RAPID TEST KIT

LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: RAPID TEST)

LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: RAPID TEST)

A woman demonstrates the use of the HIV rapid test

Sediaan darah malaria

Kegunaan sediaan darah malaria :
Menentukan ada tdknya parasit malaria
Menentukan spesies & stadium plasmodium
Dapat melacak 10 100 parasit/L darah
Menentukan kepadatan parasit

23

Sediaan darah tebal

Cara terbaik menemukan parasit malaria
Mudah dibuat
Diperiksa paling sedikit 100 lapangan pandang

Sediaan darah tipis

Digunakan utk identifikasi jenis Plasmodium bila
dgn sediaan darah tebal sulit ditentukan
Diperiksa paling sedikit 200 lapangan pandang

24

Kelebihan sediaan darah tebal

Lebih banyak sel darah yg diperiksa
Parasit lebih mudah ditemukan

Kekurangan sediaan darah tebal

Tdk dpt membandingkan ukuran Plasmodium dgn
ukuran eritrosit
Spesies Plasmodium sukar ditentukan

25

Kelebihan sediaan darah tipis

Morfologi eritrosit jelas
Spesies Plasmodium bisa ditentukan
Perbandingan ukuran Plasmodium terhdp ukuran
eritrosit bisa dilihat
% parasitemia bisa dihitung

Kekurangan sediaan darah tipis

Jumlah parasit dlm lap. pandang sangat sedikit.

26

Bentuk Tropozoit
Cincin kecil ( eritrosit normal)
Sitoplasma biru
Kromatin inti merah

Bentuk Skizon
Jarang ada dlm sirkulasi darah tepi
Jk ditemukan dlm darah tepi
tanda
malaria berat

27

Bentuk Gametosit
Sgt khas yaitu elips (crescent)
Berpigmen warna hitam
Sitoplasma kuning

28

Teknik Quantitative Buffy Coat (QBC)

Prinsip : Tes Fluoresensi
Eritrosit yg terinfeksi Plasmodium akan terlihat
berfluoresensi di bwh mikroskop fluoresensi

Cepat namun peralatannya mahal

Tdk dpt membedakan spesies
Plasmodium & tdk dpt digunakan utk
hitung parasit.

29

Mendeteksi Ab/Ag spesifik terhadap parasit

malaria atau eritrosit yg terinfeksi Plasmodium
Tes imunoserologis yg melacak Ab tdk dipakai
utk keperluan diagnosis
Tes imunoserologis malaria :
Radioimmunoassay (RIA)
Enzyme Linked Immunoassay (ELISA)
Immunochromatographi (ICT)
Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT)

30

Radioisotop sebagai label

Kadar Ag atau Ab pada sampel dpt ditentukan scr
kuantitatif
Low detection limit 50 parasit/L darah
Sensitif
Kurang praktis & berbahaya

31

Lebih praktis dibanding RIA

Enzyme direaksikan dgn substrat kromogen
intensitas warna sebanding dgn kadar bahan
Mendeteksi Ag & Ab spesifik terhadap Plasmodium

32

Rapid Diagnostic Test

Melacak Ag parasit malaria melalui pengikatan
Ag oleh Ab monoklonal
Ada 3 jenis Ag utama yg sering dijadikan
target ICT utk mendiagnosis malaria yaitu :
Histidine-rich protein (HRP)
Parasite specific lactate dehydrogenase (pLDH)
Plasmodium Aldolase

33

Keunggulan tes ICT

Praktis
Tdk membutuhkan alat pembantu lain
Tdk memerlukan tenaga terampil

Kelemahan tes ICT

Hanya dpt melacak parasit > 100 parasit/L darah
Membutuhkan biaya pemeriksaan yg relatif sdg
Tdk dpt memberi informasi derajat parasitemia

34

Mendeteksi Ab spesifik terhdp Plasmodium

Keadaan dimana parasit sangat minimal
Tdk utk menentukan infeksi baru
Mendeteksi keempat spesies Plasmodium
Manfaat utk penelitian epidemiologi

35

Mendeteksi DNA spesifik terhadap parasit

Plasmodium dlm darah penderita malaria
Teknik Polymerase chain reaction (PCR)
Dpt melacak sampai 5 parasit/L drh
Dpt mengidentifikasi spesies Plasmodium
Waktu pemeriksaan cepat
Sensitivitas & spesifisitasnya tinggi
Mahal

36

Jenis tes laboratorium untuk tuberkulosis

terdiri dari:

Tes Mikrobiologi, terdiri dari:

Tes seluler:

Tes BTA Sputum

Tes Biakan dan Identifikasi M.tuberculosis
Tes Kepekaan Antibiotika

Tes molekuler: PCR

Tes Serologis, terdiri dari:

Semirapid: TB-Dot, ELISA, Tb-kompleks

Rapid: Mycodot, ICT-TB

Anamnesis
Pemeriksaan Fisis
Pemeriksaan Radiologis
Tes Laboratorium
Tes Mikrobiologi
Tes seluler: Tes Apusan BTA
Tes Biakan & Identifikasi
Tes Kepekaan Antibiotika

Tes molekuler: PCR

Tes Serologis
Semirapid: TB-Dot, ELISA, Tb-kompleks
Rapid: Mycodot, ICT-TB seperti Mycotec TB
Ujian Akhir Magister/Ujian Lokal

26 Maret 07

38

Mikroskopik

Kultur (pembiakan)

Ziehl Neelsen
Dekontaminasi
medium Lowenstein-Jensen

PCR

Isolasi DNA: Metode Boom

Proses : denaturasi, annealing, elongasi

IS6110

Ujian Akhir Magister/Ujian Lokal

26 Maret 07

39

Tes Imunoserologi

Deteksi Ab terhadap Ag mikobakterial spesifik

atau gabungan beberapa antigen

Ag60: ELISA
Ag16 : 16 kDa,
spesies-spesific epitop imunodominan
stadium awal infeksi M.tbc & TB primer
38kDa
spesies-spesific epitop imunodominan
ESAT-6
kontak baru terjadi, konversi & meningkatnya risiko
penyakit

Ujian Akhir Magister/Ujian Lokal

26 Maret 07

40

Pemeriksaan lab. meliputi :

1. Pemeriksaan bakteriologik
- menegakkan diagnosis dan memantau pengobatan
- kerokan kulit/mukosa hidung (pewarnaan Ziehl Neelsen)
- negatif : bukan berarti tdk mengandung M. leprae
- indeks bakteriologi (IB) dan indeks morfologi (IM)
- IB : banyaknya kuman M. leprae tiap satuan lap. tertentu
- IM : prosentase basil utuh dlm semua basil yg dihitung

Cara menghitung IB dan IM :

IB :

IM :

total kepadatan
jumlah tempat pengambilan
jumlah basil utuh
x
jumlah basil yang diperiksa 100%

Penilaian
- negatif (-)
penglihatan
- 1 (+)
- 2 (+)
- 3 (+)
- 4 (+)
- 5 (+)
- 6 (+)

skala algoritme Ridley :

:
tdk ditemukan BTA pd 100 lap.
(LP)
: 1 10 basil/100 LP
: 1 10 basil / 10 LP
: 1 10 basil/1LP
: 10 - 100 basil/1 LP
: 101 1000 basil/1 LP
: > 1000 basil/LP

2.

Pemeriksaan histopatologik
- menegakkan diagnosis (manifestasi klinik tdk jelas)
- biopsi kulit & imunohistokimia
3.Pemeriksaan imunologik
- tdk utk diagnosis
menentukan klasifikasi &
perjalanan peny. kusta

3.1 Tes lepromin

- kemampuan individu bereaksi scr seluler thd M. leprae
- lepromin : suspensi steril dr jaringan yg dihancurkan &
sbg tes kulit secara intradermal
a.lepromin Mitsuda : lepromin dr suspensi jaringan,
mengandung kuman M. leprae yg sdh disterilkan dlm
autoklaf (manusia / binatang)
b.Lepromin Dharmendra : dr ekstraksi fraksi protein dgn
kloroform eter (tipe lepromatous)

Reaksi kulit terhadap lepromin :

1. reaksi dini (reaksi Fernandez)
- berbentuk infiltrat eritematosa (12 72 jam)
- hipersensitivitas yg telah ada thd antigen
- pembacaan : 48 jam sth penyuntikan
2. reaksi lambat (reaksi Mitzuda)
- btk noduler, tampak pd hr ke-21 30 (paling jelas)
- respon thd imunitas seluler
- pembacaan : sth hr ke-21

3.2 Tes histamin

- secara intradermal pd kulit normal
dilatasi kapiler
bintul berwarna merah (histamin flare)
- ukuran bintul merah
derajat kerusakan saraf
3.3 Tes serologis
- ELISA
mendeteksi antibodi phenolic glicolipid-1
(PGL-1)
reaksi antigen antibodi dgn enzim sbg label
- imunokromatografi menggunakan antigen PGL-1
neoglycoconjugate, sensitivitas 91,7%, spesivisitas 78,1%

3.4 Polymerase Chain Reaction (PCR)

- mendeteksi adanya organisme dgn cepat dan tepat
- mendeteksi sejumlah kecil basil dr biopsi kulit
- kolonisasi M. leprae pd mukosa/apusan hidung
penderita atau orang sehat
- diagnosis pasti tipe tuberkuloid
- follow-up hasil pengobatan
- menggantikan pemeriksaan adanya BTA

Tes lain:
1. Tes pengeluaran keringat
- mengetahui integritas saraf kulit
- tergantung pd saraf parasimpatik
- respon kelenjar keringat thd obat kolinergik
berkurang
2. Tes pilokarpin
- melihat perubahan warna pada kulit setelah ditaburi
tepung amilum
- warna amilum tetap (ada kerusakan saraf)

Diagnosis : pemeriksaan Klinik (bakteriologi, histopatologi,

imunologi)
Tanda-tanda kardinal :
1. Anestesi
2. Penebalan saraf di daerah yang terkena
3. Adanya lesi kulit berupa hipopigmentasi, eritema,
infiltrat, nodul
4. Ditemukannya kuman tahan asam (BTA positif)
Diagnosis : 2 dari 3 tanda kardinal I, terlebih BTA positif

Generally not necessary

Gram stain and C&S to confirm the diagnosis
when the clinical presentation is unclear
Sedimentation rate parallel to activity of the
disease
Anti-DNAse B and anti hyaluronidase
Urinalysis : hematuria with erytrocyte casts
and proteinuria in patients with acute
nephritis

Diagnosis definitif tergantung pada isolasi

C.diphtheriae yang diambil dari bahan lesilesi lokal
Pihak laboratorium harus diberitahukan
bahwa bahan disangka diphteri.
Gram stains of secretion :
club-shaped

letters

organism, appear as Chinese

CSF :
* Aseptic meningitis
* Elevated WBCs
* Elevated protein
* Normal glucose

Kultur :
* Darah : positif dalam 10 hari pertama
* Tinja & urin positif dalam minggu 3-5
* Sumsum tulang
Serologi :
* Tes Widal : Serum sembuh 4x
drpada sakit
Darah rutin : lekopeni

Isolasi vibrio cholerae dari bahan tinja

identifikasi serogroup 01 atau 139
Serologi :
* tes agglutinasi menggunakan antiserum spesifik

Lab studies:

Confirm diagnosis
Epidemiologic investigations

Direct microscopy:
Dark

field microscopy: at least 104 org/ml to be able to

see 1 spirochete per HPF.
Silver staining
DF using mouse monoclonal AB
IP
Insitu hybridisation using DNA probes
Electron microscopy

Mandell, Douglas, and Bennett's Principles and Practice of Infectious Diseases, 5th Edition, 2000

Leptospira

Kulit lecet/mukosa utuh

Mukosa mulut
Konjungtiva
Hidung
Oro/nasofaring
BerkembangGastrointestinal
biak darah dan jaringan

Organ / jaringan tubuh

Hati

Nekrosis
sel hepar

Ginjal

Nefritis
,nekrosis
tubulus

Paru

Keru-sakan
din
ding

Otot skelet

Nekrosis
fokal dan
vakuolisasi
miofibril

alveolar

Gangguan
fungsi hati
ikterus

Gannguan faktor
pembekuan
perdarahan

GGA

Hemoptisis,
udem paru
dan sindrom
gagal napas

P.darah

vaskulitis

Perdarahan
Mialgia,
atrhritis

Otak / saraf

Neuritis,meni
ngitis dan
ensefalitis

Tes laboratoium untuk leptospirosis dibagi atas :

1. Tes saring :
- darah lengkap , urin lengkap ( tes penunjang)
- tes urin dengan mikroskop lapangan gelap
- tes leptodipstick (Immunokromatografi)
2. Tes diagnostik :
- tes kultur ( darah dan CSF )
- tes serologi:
Enzyme immunosorbent assay (EIA),
Enzyme linked immune sorbent assay (ELISA)
Microscopic Agglutination test (MAT) adalah baku emas
pemeriksaan serologi
- PCR untuk mendeteksi DNA leptospira.

3. Tes komplikasi/Tes monitoring

- darah lengkap, urin lengkap
- tes fungsi hati : transaminase, bilirubin,
alkali fosfatase, keratin fosfokinase.
- tes fungsi hemostasis: jumlah trombosit,
bleeding
time,protrombin time
- tes fungsi ginjal : ureum, kreatinin, BUN
- tes serologi

Penderita suspek
leptospirosis

Tes saring
-Darah lengkap
-Urin lengkap
-Mikroskop lapangan gelap
-Tes Immunokromatografi (ICT)
Positip (probable)

Negatip (konfirmasi)

Tes diagnostik
-Tes kultur
-Tes serologi : microscopic agglutination test (MAT),
enzyme linked immunesorbent assay (ELISA)
-PCR

positip
Tes monitoring /
komplikasi :
- Darah lengkap
- Urin lengkap
- Tes fungsi hati
- Tes fungsi ginjal
- Tes serologi

LEPTOSPIROSIS

negatip

BUKAN
LEPTOSPIROSIS