Bagian Patologi Klinik

FK UNHAS
 Pengamatan Pada :
- Eritrosit, Lekosit, Trombosit
- Manifestasi : Anemia, lekositosis /lekopeni dan DIC
Lekositosis
- Umumnya Netrofil , bentuk muda
- Netrofilia lanjut infeksi kronik
- Netrofilia menghebat + sel muda reaksi leukemoid
* Non-Ganas > 25-30 x 106/l
* Inflamasi, Stress, Trauma.
 Lekopeni
* Netropenia, mis Demam Tifoid, Brucellosis
* Infeksi hebat netropenia hebat prognosis
buruk
Perubahan morfologik pada sepsis
* Dohle Bodies
* Granulasi Toksik
* Vakuolisasi
Eosinofilia :
* Non-bakterial, biasanya alergi/infeksi parasit
 Anemia
* Bisa timbul sekalipun cadangan besi cukup
* Anemia akut : perdarahan / destruksi eritrosit
(misalnya : cold aglutinin sehubungan dengan
Mycoplasma pneumoniae)
* Anemia kronik, dengan :
- Cadangan besi yang normal atau meninggi
di sistem retikuloendotelial
- Penurunan besi dalam plasma
- Penurunan TIBC
 Infeksi serius + bakteremia
* Gram negatif DIC (gram positif kurang)
- Trombus
- PT memanjang
- FDP
- Fibrinogen
Trombositopenia bisa juga menjadi tanda sepsis
bakterial dan bisa bermanfaat dalam
mengobservasi respon pasien terhadap terapi.
 Tes Laboratorium
* Hematologi
- Leukopenia
- Trombocytopenia
- serum aminotransferase (AST, ALT) elevations
* Diagnosis seroloimmunology
1. Hemaglutination tests
2. Complement Fixation test
3. Neutralization Test
- IgM ELISA or
- paired serology during recovery or
- by antigen-detection ELISA or
- RT-PCR during the acute phase
Gambar. 4 Respon imun terhadap infeksi dengue
 Tes Laboratorium Diagnosis DD dan DBD
Hari Demam Jenis Pemeriksaan Catatan / Interpretasi
HEMATOLOGI * Biasanya normal
Hemoglobin (Hb)
Hematokrit (Ht)
Hitung Leukosit
Hitung Trombosit
3 HEMATOLOGI * Umumnya :
Hemoglobin (Hb) Hemoglobin meningkat.
Hematokrit (Ht) Hemokonsentrasi (peningkatan Ht>20%
Hitung Leukosit Leukopenia
Hitung Trombosit Limfositosis relatif (> 45% dari total leukosit)
Limfosit plasma biru (> 15% dari total leukosit / > 4% dari total limfosit)
Trombositopenia (<100.000/uL)/penurunan serial trombosit
Trombosit <2/100 eri/LPB (minimal dilihat 10 lapang pandang)
* Ht/Hb > 3,5 dipertimbangkan DBD

47 HEMATOLOGI * Waspadai DIC

Hemoglobin (Hb) (PT >, APTT >, D Dimer (+), Fibrinogen Monomer (+), Fibrinogen <)
Hematokrit (Ht) * Golongan Darah dan Uji Cocok Serasi
Hitung Leukosit * Indikasi pemberian darah:
Hitung Trombosit FFP: perdarahan masif, APTT > 1,5 N
Apusan Darah Tepi Trombosit: bila perdarahan masif
IMUNOLOSEROLOGI IgM Pos, IgG Neg: Inf Primer
Anti Dengue IgM, IgG IgM Pos & IgG Pos: Inf Sekunder
Tes HI IgM Neg & IgG Pos: Dugaan / Permulaan Inf Sekunder, Periode Konvalesen
KIMIA IgM Neg & IgG Neg: Bukan inf flavivirus, ulangi 3-5 hari bila curiga.
> 1 : 2560 inf sekunder flavivirus
* SGOT/SGPT , albumin
* AGD (Syok >: asidosis metabolik), Elektrolit
* Ureum , Kreatinin (Nekrosis Tubuler akut)

8 -10 HEMATOLOGI * Normal pada fase penyembuhan

Hb (Hemoglobin)
Ht (Hematokrit)
Hitung Leukosit
Hitung Trombosit
Apusan Darah Tepi
11-12 IMUNOSEROLOGI * Peningkatan titer > 4 x:
HI test (serum fase konsvalesen) < 1 : 1280 inf flavivirus akut primer
> 1 : 2560 inf flavivirus akut sekunder

Perhimpunan Dokter Spesialis Patologi Klinik Indonesia (PDS-PATKLIN) 2004 dengan tambahan dari WHO 2003

Suspicion of dengue infection

Delay after onset of fever

Unknown or 5 days >5 hari

NS1 Antigen Antisipated Diagnosis IgM/IgG Serologis

Improve patient Management
+ - + -

Confirmed early IgM serology Late acute or Dengue

infection
Acute infection past-infection is
unlikely
+ -

Presumably early early acute infection

Acute infection is unlikely A second sample isrequested for confirmation
EARLY DIAGNOSIS LATE DIAGNOSIS
Gambar. 5. Perjalanan penyakit infeksi HIV1
J---J hit. sel T CD4,, K----K titer viremia
TES LABORATORIUM
Mencari virus dalam darah penderita
kultur/biakan virus
deteksi antigen ; p24
PCR (polymerase chain reaction)
Mencari adanya antibodi terhadap berbagai
komponen virion HIV dalam serum penderita
(tes serologik)
Tes Enzime Linked Immunosorbent Assay
(EIA/ELISA)
Tes sederhana / cepat (tes imunokromatografi)

Tes konfirmasi sepert Western Blot (WB), Indirect

immunofluorescence assay (IFA)

 Rekomendasi pemakaian strategi tes HIV dari UNAIDS dan
WHO pada berbagai tujuan tes dan prevalensi infeksi dalam
populasi

Prevalensi
Tujuan tes Strategi tes
infeksi
Keamanan
Semua
transfusi/transpla I
prevalensi
ntasi
> 10% I
Surveilans
10% II
Terdapat
I
gejala klinik > 30%
infeksi HIV 30% II
Diagnosis Tanpa gejala
klinik infeksi > 10% II
HIV
LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: TESTING STRATEGIES)

Strategy I:
All samples are tested with one ELISA or rapid/simple assay.
Samples that is reactive is considered HIV Ab positive.

Strategy II:
All samples are first tested with one test.
Any reactive samples are subjected to second test based on
different principle and/or a different antigen preparation.

Strategy III:
All samples are first tested with one test.
Any reactive samples are subjected to second test based on
different principle and/or a different antigen preparation.
Requires a third test if samples are found reactive on the second
test.
LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST)

POSITIVE
High Risk Group (WHO 2-tests strategy)
ELISA - Reactive
PA - Detected

Low Risk Group (WHO 3-tests strategy)

ELISA - Reactive
PA - Detected
Immunoblot - Positive

NEGATIVE
Both screening tests: EIA - non-reactive and
PA - not-detected
Ket. Algoritme :

A1,A2 dan A3 adalah tes inisial dengan menggunakan dasar/prinsip tes yang berbeda dan/atau menggunakan preparasi antigen yang berbeda.
Reagensia yang dipilih untuk dipakai pada tes didasarkan pada sensitivitas dan spesifisitas tiap jenis reagen. Reagen yang dipakai pada tes
pertama adalah reagensia yang memiliki sensitivitas tertinggi, sebaiknya > 99%, sedangkan reagensia pada tes selanjutnya (kedua dan ketiga)
memiliki spesifisitas yang lebih tinggi dari yang pertama, untuk tujuan surveilans harus memiliki spesifisitas minimal sebesar 95% dan untuk
tujuan diagnosis memiki spesifisitas minimal sebesar 98%2.
Kadar T4 (Nilai Gambaran klinik Keputusan terapi Interval Tujuan monitoring
normal 500-
1000)
1000-500 Acute retroviral sindrom/asimptomatik, Terapi Setiap 6 Memutuskan kapan
gejala intermitten, kandidiasis/ulkus simptomatik bulan penanganan terapi anti
mulut, limpadenopati, xerosis, rash retroviral
(dermatitis seboroik, follikulitis
500-200 Asimptomatik/simptomatik, gejala kronik Mulai terapi Setiap 3-6 Monitoring respons
atau intermitten, limpadenopati, antiretroviral bulan ART dan dan putuskan
kandidiasis/lesi mulut, nause, vomiting, (ART) untuk memulai
diare, demam, keringat malam, profilaksis terhadap
tuberkulosis, xoster, nocardia, sarkoma pneumocystic
kaposis mungkin nampak pneumonia dan infeksi
lain
200-50 Peningkatan gejala berat dan persisten, ART dan Setiap 2-3 Evaluasi untuk
berkurangnya daya ingat, ancaman profilaksis. bulan memulai perubahan
infeksi, peningkatan insidens kanker Pertimnangkan ART, pertimbangkan
kelainan paru, peningkatan resiko perubahan ART profilaksis lain dan
penyebaran penyakit. Pneumocystis jika im unoklinik memperkirakan resiko
carinii pneumonia (PCP), toksoplasma, menurun terhadap infeksi
histoplasmosis, cryptococcosis opotunistik
< 50 Peningkatan infeksi oportunistik dan Tergantung ? Monitoring
kematian, PML, demensia AIDS, CMV, proses penderita kemungkinan
MAC dan proses tahap lanjut yang lain dan penyakit, peningkatan
penderita tetap kecemasan penderita.
dengan ART dan Pertimbangkan
terapi profilaksis. menggunakan viral
Pertimbangkan load untuk evaluasi
perubahan ART progressifitas
dan kombinasi
ELISA for HIV antibody

Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells

indicate reactivity
LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: ELISA)

ELISA Test Kit ELISA Machine

LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: SIMPLE TEST)
HIV RAPID TEST KIT
LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: RAPID TEST)
LABORATORY DIAGNOSIS (ANTIBODY TEST: RAPID TEST)

A woman demonstrates the use of the HIV rapid test

Sediaan darah malaria
Kegunaan sediaan darah malaria :
Menentukan ada tdknya parasit malaria
Menentukan spesies & stadium plasmodium
Dapat melacak 10 100 parasit/L darah
Menentukan kepadatan parasit

23
Sediaan darah tebal
Cara terbaik menemukan parasit malaria
Mudah dibuat
Diperiksa paling sedikit 100 lapangan pandang
Sediaan darah tipis
Digunakan utk identifikasi jenis Plasmodium bila
dgn sediaan darah tebal sulit ditentukan
Diperiksa paling sedikit 200 lapangan pandang

24
Kelebihan sediaan darah tebal
Lebih banyak sel darah yg diperiksa
Parasit lebih mudah ditemukan
Kekurangan sediaan darah tebal
Tdk dpt membandingkan ukuran Plasmodium dgn
ukuran eritrosit
Spesies Plasmodium sukar ditentukan

25
Kelebihan sediaan darah tipis
Morfologi eritrosit jelas
Spesies Plasmodium bisa ditentukan
Perbandingan ukuran Plasmodium terhdp ukuran
eritrosit bisa dilihat
% parasitemia bisa dihitung
Kekurangan sediaan darah tipis
Jumlah parasit dlm lap. pandang sangat sedikit.

26
Bentuk Tropozoit
Cincin kecil ( eritrosit normal)
Sitoplasma biru
Kromatin inti merah
Bentuk Skizon
Jarang ada dlm sirkulasi darah tepi
Jk ditemukan dlm darah tepi tanda
malaria berat

27
Bentuk Gametosit
Sgt khas yaitu elips (crescent)
Berpigmen warna hitam
Sitoplasma kuning

28
Teknik Quantitative Buffy Coat (QBC)
Prinsip : Tes Fluoresensi
Eritrosit yg terinfeksi Plasmodium akan terlihat
berfluoresensi di bwh mikroskop fluoresensi
Cepat namun peralatannya mahal
Tdk dpt membedakan spesies
Plasmodium & tdk dpt digunakan utk
hitung parasit.

29
Mendeteksi Ab/Ag spesifik terhadap parasit
malaria atau eritrosit yg terinfeksi Plasmodium
Tes imunoserologis yg melacak Ab tdk dipakai
utk keperluan diagnosis
Tes imunoserologis malaria :
Radioimmunoassay (RIA)
Enzyme Linked Immunoassay (ELISA)
Immunochromatographi (ICT)
Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT)

30
Radioisotop sebagai label
Kadar Ag atau Ab pada sampel dpt ditentukan scr
kuantitatif
Low detection limit 50 parasit/L darah
Sensitif
Kurang praktis & berbahaya

31
Lebih praktis dibanding RIA
Enzyme direaksikan dgn substrat kromogen
intensitas warna sebanding dgn kadar bahan
Mendeteksi Ag & Ab spesifik terhadap Plasmodium

32
Rapid Diagnostic Test
Melacak Ag parasit malaria melalui pengikatan
Ag oleh Ab monoklonal
Ada 3 jenis Ag utama yg sering dijadikan
target ICT utk mendiagnosis malaria yaitu :
Histidine-rich protein (HRP)
Parasite specific lactate dehydrogenase (pLDH)
Plasmodium Aldolase

33
Keunggulan tes ICT
Praktis
Tdk membutuhkan alat pembantu lain
Tdk memerlukan tenaga terampil
Kelemahan tes ICT
Hanya dpt melacak parasit > 100 parasit/L darah
Membutuhkan biaya pemeriksaan yg relatif sdg
Tdk dpt memberi informasi derajat parasitemia

34
Mendeteksi Ab spesifik terhdp Plasmodium
Keadaan dimana parasit sangat minimal
Tdk utk menentukan infeksi baru
Mendeteksi keempat spesies Plasmodium
Manfaat utk penelitian epidemiologi

35
Mendeteksi DNA spesifik terhadap parasit
Plasmodium dlm darah penderita malaria
Teknik Polymerase chain reaction (PCR)
Dpt melacak sampai 5 parasit/L drh
Dpt mengidentifikasi spesies Plasmodium
Waktu pemeriksaan cepat
Sensitivitas & spesifisitasnya tinggi
Mahal

36
 Jenis tes laboratorium untuk tuberkulosis
terdiri dari:
Tes Mikrobiologi, terdiri dari:
Tes seluler:
Tes BTA Sputum
Tes Biakan dan Identifikasi M.tuberculosis
Tes Kepekaan Antibiotika
Tes molekuler: PCR
Tes Serologis, terdiri dari:
Semirapid: TB-Dot, ELISA, Tb-kompleks
Rapid: Mycodot, ICT-TB
 Anamnesis
Pemeriksaan Fisis
Pemeriksaan Radiologis
Tes Laboratorium
Tes Mikrobiologi
Tes seluler: Tes Apusan BTA
Tes Biakan & Identifikasi
Tes Kepekaan Antibiotika
Tes molekuler: PCR
Tes Serologis
Semirapid: TB-Dot, ELISA, Tb-kompleks
Rapid: Mycodot, ICT-TB seperti Mycotec TB
Ujian Akhir Magister/Ujian Lokal 26 Maret 07 38
 Mikroskopik
Ziehl Neelsen
Dekontaminasi

Kultur (pembiakan)
medium Lowenstein-Jensen

PCR
Isolasi DNA: Metode Boom
Proses : denaturasi, annealing, elongasi
IS6110

Ujian Akhir Magister/Ujian Lokal 26 Maret 07 39

 Tes Imunoserologi
Deteksi Ab terhadap Ag mikobakterial spesifik
atau gabungan beberapa antigen
Ag60: ELISA
Ag16 : 16 kDa,
spesies-spesific epitop imunodominan
stadium awal infeksi M.tbc & TB primer
38kDa
spesies-spesific epitop imunodominan
ESAT-6
kontak baru terjadi, konversi & meningkatnya risiko
penyakit

Ujian Akhir Magister/Ujian Lokal 26 Maret 07 40

Pemeriksaan lab. meliputi :
1. Pemeriksaan bakteriologik
- menegakkan diagnosis dan memantau pengobatan
- kerokan kulit/mukosa hidung (pewarnaan Ziehl Neelsen)
- negatif : bukan berarti tdk mengandung M. leprae
- indeks bakteriologi (IB) dan indeks morfologi (IM)
- IB : banyaknya kuman M. leprae tiap satuan lap. tertentu
- IM : prosentase basil utuh dlm semua basil yg dihitung

1
Cara menghitung IB dan IM :

IB : total kepadatan
jumlah tempat pengambilan

IM : jumlah basil utuh x

jumlah basil yang diperiksa 100%

1
Penilaian skala algoritme Ridley :
- negatif (-) : tdk ditemukan BTA pd 100 lap.
penglihatan (LP)
- 1 (+) : 1 10 basil/100 LP
- 2 (+) : 1 10 basil / 10 LP
- 3 (+) : 1 10 basil/1LP
- 4 (+) : 10 - 100 basil/1 LP
- 5 (+) : 101 1000 basil/1 LP
- 6 (+) : > 1000 basil/LP

1
2. Pemeriksaan histopatologik
- menegakkan diagnosis (manifestasi klinik tdk jelas)
- biopsi kulit & imunohistokimia
3.Pemeriksaan imunologik
- tdk utk diagnosis menentukan klasifikasi &
perjalanan peny. kusta

1
3.1 Tes lepromin
- kemampuan individu bereaksi scr seluler thd M. leprae
- lepromin : suspensi steril dr jaringan yg dihancurkan &
sbg tes kulit secara intradermal
a.lepromin Mitsuda : lepromin dr suspensi jaringan,
mengandung kuman M. leprae yg sdh disterilkan dlm
autoklaf (manusia / binatang)
b.Lepromin Dharmendra : dr ekstraksi fraksi protein dgn
kloroform eter (tipe lepromatous)

1
Reaksi kulit terhadap lepromin :
1. reaksi dini (reaksi Fernandez)
- berbentuk infiltrat eritematosa (12 72 jam)
- hipersensitivitas yg telah ada thd antigen
- pembacaan : 48 jam sth penyuntikan
2. reaksi lambat (reaksi Mitzuda)
- btk noduler, tampak pd hr ke-21 30 (paling jelas)
- respon thd imunitas seluler
- pembacaan : sth hr ke-21

1
3.2 Tes histamin
- secara intradermal pd kulit normal dilatasi kapiler
- bintul berwarna merah (histamin flare)
- ukuran bintul merah derajat kerusakan saraf
3.3 Tes serologis
- ELISA mendeteksi antibodi phenolic glicolipid-1
(PGL-1)
reaksi antigen antibodi dgn enzim sbg label
- imunokromatografi menggunakan antigen PGL-1
neoglycoconjugate, sensitivitas 91,7%, spesivisitas 78,1%

1
3.4 Polymerase Chain Reaction (PCR)
- mendeteksi adanya organisme dgn cepat dan tepat
- mendeteksi sejumlah kecil basil dr biopsi kulit
- kolonisasi M. leprae pd mukosa/apusan hidung
penderita atau orang sehat
- diagnosis pasti tipe tuberkuloid
- follow-up hasil pengobatan
- menggantikan pemeriksaan adanya BTA

2
Tes lain:
1. Tes pengeluaran keringat
- mengetahui integritas saraf kulit
- tergantung pd saraf parasimpatik
- respon kelenjar keringat thd obat kolinergik
berkurang
2. Tes pilokarpin
- melihat perubahan warna pada kulit setelah ditaburi
tepung amilum
- warna amilum tetap (ada kerusakan saraf)

2
Diagnosis : pemeriksaan Klinik (bakteriologi, histopatologi,
imunologi)
Tanda-tanda kardinal :
1. Anestesi
2. Penebalan saraf di daerah yang terkena
3. Adanya lesi kulit berupa hipopigmentasi, eritema,
infiltrat, nodul
4. Ditemukannya kuman tahan asam (BTA positif)
Diagnosis : 2 dari 3 tanda kardinal I, terlebih BTA positif

2
 Generally not necessary
Gram stain and C&S to confirm the diagnosis
when the clinical presentation is unclear
Sedimentation rate parallel to activity of the
disease
Anti-DNAse B and anti hyaluronidase
Urinalysis : hematuria with erytrocyte casts
and proteinuria in patients with acute
nephritis
 Diagnosis definitif tergantung pada isolasi
C.diphtheriae yang diambil dari bahan lesi-
lesi lokal
Pihak laboratorium harus diberitahukan
bahwa bahan disangka diphteri.
Gram stains of secretion :
club-shaped organism, appear as Chinese
letters
 CSF :
* Aseptic meningitis
* Elevated WBCs
* Elevated protein
* Normal glucose
 Kultur :
* Darah : positif dalam 10 hari pertama
* Tinja & urin positif dalam minggu 3-5
* Sumsum tulang
Serologi :
* Tes Widal : Serum sembuh 4x drpada sakit

Darah rutin : lekopeni

 Isolasi vibrio cholerae dari bahan tinja
identifikasi serogroup 01 atau 139
Serologi :
* tes agglutinasi menggunakan antiserum spesifik
 Lab studies:
Confirm diagnosis
Epidemiologic investigations

Direct microscopy:
Dark field microscopy: at least 104 org/ml to be able to
see 1 spirochete per HPF.
Silver staining
DF using mouse monoclonal AB
IP
Insitu hybridisation using DNA probes
Electron microscopy
Mandell, Douglas, and Bennett's Principles and Practice of Infectious Diseases, 5th Edition, 2000
 Leptospira

Kulit lecet/mukosa utuh

Mukosa mulut

Konjungtiva

Hidung

Oro/nasofaring

BerkembangGastrointestinal
biak darah dan jaringan

Organ / jaringan tubuh

Hati Ginjal Paru Otot skelet P.darah Otak / saraf

Nekrosis Nefritis Keru-sakan Nekrosis vaskulitis Neuritis,meni

sel hepar ,nekrosis din fokal dan ngitis dan
tubulus vakuolisasi ensefalitis
ding
miofibril
alveolar
Perdarahan
Gangguan
fungsi hati
GGA
Hemoptisis, Mialgia,
ikterus
udem paru atrhritis
dan sindrom
gagal napas
Gannguan faktor
pembekuan
perdarahan
Tes laboratoium untuk leptospirosis dibagi atas :
1. Tes saring :
- darah lengkap , urin lengkap ( tes penunjang)
- tes urin dengan mikroskop lapangan gelap
- tes leptodipstick (Immunokromatografi)

2. Tes diagnostik :
- tes kultur ( darah dan CSF )
- tes serologi:
Enzyme immunosorbent assay (EIA),
Enzyme linked immune sorbent assay (ELISA)
Microscopic Agglutination test (MAT) adalah baku emas
pemeriksaan serologi
- PCR untuk mendeteksi DNA leptospira.
3. Tes komplikasi/Tes monitoring
- darah lengkap, urin lengkap
- tes fungsi hati : transaminase, bilirubin,
alkali fosfatase, keratin fosfokinase.
- tes fungsi hemostasis: jumlah trombosit,
bleeding
time,protrombin time
- tes fungsi ginjal : ureum, kreatinin, BUN
- tes serologi
 Penderita suspek
leptospirosis

Tes saring
-Darah lengkap
-Urin lengkap
-Mikroskop lapangan gelap
-Tes Immunokromatografi (ICT)

Positip (probable) Negatip (konfirmasi)

Tes diagnostik
-Tes kultur
-Tes serologi : microscopic agglutination test (MAT),
enzyme linked immunesorbent assay (ELISA)
-PCR

positip negatip

Tes monitoring /
komplikasi :
- Darah lengkap
- Urin lengkap LEPTOSPIROSIS BUKAN
- Tes fungsi hati LEPTOSPIROSIS
- Tes fungsi ginjal
- Tes serologi