Beta HCG dan

Progesteron
disusun oleh :
Linda Ayu(32)
Widia Utami(33)
Dian Lisnawati (34)
Meisya Trinita (35)
Salisa Husnul(36)

HCG (Human Chorionic

Gonadotropin)

- Hormon glikoprotein yang biasanya dihasilkan oleh plasenta selama

kehamilan
- HCG disekresi syncytiotrophoblast kedalam sirkulasi darah ibu pertama kali
saat implantasi hari keenam sampai ketujuh setelah fertilisasi
- HCG mendukung korpus luteum menghasilkan hormon progesteron untuk
mempertahankan kehamilan
- HCG juga diproduksi oleh cancer pada GIT, UGT, bronchial dan mammae
juga limfoma

Sub unit
HCG

ALFA HCg => tidak spesifik

karena hampir identik dengan subunit
alpha hormon glikoprotein lainnya,
seperti Thyroid Stimulating Hormone
(TSH), Luteinizing Hormone (LH), dan
Follicle Stimulating Hormone (FSH):

Beta HCg=> Spesifik

Sehingga beta-hCG
memungkinkan deteksi dini
kehamilan

Pemeriksaan dilakukan untuk :

Chorio-carsinoma
Evaluasi mola
hidatidosa

Kehamilan

Bahan pemeriksaan: Serum. Jangan gunakan hemolitik, ikterik atau spesimen lipaemic.
Harap dicatat: Sampel yang mengandung natrium azida karena tidak boleh digunakan dalam
pengujian tersebut.
Nilai rujukan : < 5 mIU/ml

Meningkat Pada :

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Kehamilan
Mola hidatidosa
Chorio-carcinoma
Teratoma ovarium atau teratoma
testis
Kehamilan ganda
Seminoma, kanker kolon, kanker
gaster,kanker
paru,
kanker
payudara
Kehamilan topic
Eritroblastis feotalis

Menurun Pada :

1.
2.
3.
4.
5.

Absortus mengancam
Kematian janin
Gestosis
Kehamilan ektopik
IUFD

Prinsip Pemeriksaan Beta HCG

dengan Elisa metode Sandwich
Antibody Capture

Sampel

Wells dilapisi dengan

antibodi anti--HCG dari
tikus (monoclonal)

pasien yang mengandung

endogen -HCG dan / atau HCG

Tambahkan TMB sebagai

substrat, intensitas warna
sebanding dengan

Jumlah peroksidase terikat

sebanding dengan konsentrasi
-HCG / HCG dalam sampel.

Antibody
terkonjugasi
enzim

Enzim HRP (horseradish

peroksidase)

a. Prosedur kerja
1. Diberi penomeran pada mikrowell
2. Dipipet 25 ul standar, control, dan sampel dengan
menggunakan tip disposible kedasar well.
3. Tambahkan 100 ul enzym konjugat.
4. Campurkan selama 10 detik.
5. Inkubasi selama 60 menit disuhu ruang.
6. Keluarkan kelebihan reagen dari mikrowell, beeri 400
ul aquadest kedalam well selama 5 menit.
7. Tambah 100 ul substrat .
8. Inkubasi 15 menit pada suhu ruang.
9. Beri stopsolution 50 ul.
10. Dibaca OD pada panjang gelombang 450 10 nm.

b.

Perhitungan Hasil (kuantitatif)

1. Hitung nilai absorbansi rata-rata untuk setiap set standar, kontrol dan sampel pasien.
2. Buatlah sebuah kurva standar dengan memplot absorbansi rata yang diperoleh dari masing-masing standar
terhadap konsentrasi dengan nilai absorbansi pada vertikal (Y) axis dan konsentrasi pada horisontal (X)
axis.
3. Menggunakan nilai absorbansi rata-rata untuk masing-masing sampel menentukan sesuai konsentrasi
dari kurva standar.
4. Metode Otomatis: Hasil di IFU telah dihitung secara otomatis menggunakan 4 PL (4 Parameter Logistik)
kurva fit.
Parameter Logistik adalah metode yang disukai. fungsi reduksi data lainnya dapat memberikan hasil yang
sedikit berbeda
.5. Konsentrasi sampel dapat dibaca langsung dari kurva standar ini. Sampel dengan konsentrasi lebih tinggi
dari standar tertinggi harus lebih diencerkan atau dilaporkan sebagai> 200 mIU / ml.
Perhitungan Hasil (kualitatif)

C. Perhitungan Hasil (kualitatif)

Untuk analisis kualitatif tingkat -hCG
pengembangan warna spesimen dibandingkan
dengan warna 0 mIU / mL dan 50 standar mIU /
mL.
- Jika warna biru kurang intens dibandingkan
warna 50 mIU / mL standar, sampel dianggap
sebagai negatif.
- Jika warna biru lebih intens dari atau sama
dengan warna 50 mIU / mL standar sampel
dianggap sebagai positif.

Progesteron

disekresi oleh korpus luteum dan plasenta .

kegunaan : a. biosintesis steroid pada semua jaringan yang mengeluarkan hormon steroid .
b. Progesteron bertanggung jawab untuk perubahan progestasional di endometrium
dan perubahan siklik dalam leher rahim dan vagina .
Tujuan pemeriksaan : Tingkat progesteron plasma berguna dalam menyelidiki fungsi luteal
dan pemantauan ovulasi .

Menurun Pada :

Meningkat Pada :

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Kehamilan
Ovulasi
Kista ovarium
Tumor adrenal
Tumor ovarium
Mola hydatidosa
Congenital adrenal hiperplasia

1.
2.
3.
4.

Amenorrhoe
Absorbsi mengancam
Kematian janin
Eklamsi

Prinsip
pemeriksaan
progesteron metode
kompetitif

.
Progesteron
enzim
konjugat
yang ada
direagen
Tambahkan 50
uL standar (S)

Tambahkan300
uL blocking
buffer

150 uL
substrat untuk
masing-masing

Tambahkan 1L
enzim konjugat ke 50
uL volume total dari
EIA penyangga untuk
setiap sumur diuji.
Tambahkan 50 uL
konjugasi enzim
yang telah
diencerkan ke
masing-masing
well
Tutup plate dan
inkubasi pada suhu
kamar 1 jam

Untuk setiap well

tambahkan 110 uL
konjugat enzim menjadi
5,5 mL volume total dari
EIA penyangga.Lalu
campurkan keduanya.
Cuci 3kali selama 5
menit (dirotator 5
menit dan cuci lagi
sebanyak 3 kali)

Tutup plate dan

inkubasi pada suhu
kamar 1 jam
Remove
buffer
Tambah
sampel

Tutup plate dan

inkubasi pada
suhu kamar 1
jam

dibaca dalam microplate reader pada 650 nm.

Jika panjang gelombang ganda digunakan,
ditetapkan W pada 650 nm dan W pada 490 nm.

Cuci 3kali selama

5 menit (dirotator
5 menit dan cuci
lagi sebanyak 3
kali)