I.

Alat dan Bahan III.1 Alat : 1. Labu ukur 10 ml, 25 ml, dan 100 ml 2. Pipet volume 5,0 ; 8,0 ; 10,0 ; 15,0 ; dan 25,0 ml 3. Beaker glass 4. Pipet 5. Spektrofotometer UV-Vis 1800 Shimadzu 6. Alat disolusi tipe II (Tipe Dayung) dengan kecepatan 75 rpm dalam waktu 30 menit 7. Pemanas (hot plate) 8. Gelas ukur 1000 ml 9. Syringe 10. Filter 11. Kertas saring 12. Botol penampung sampel III.2 Bahan : 1. Standar Amoxicillin 100 mg 2. Tablet Amoxicillin 125 mg 6 buah 3. Aquades sebagai media disolusi

II.

Cara Kerja IV.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Standar Amoxicillin Pengukuran pada = 272.20 nm Perhitungan penentuan 6 titik konsentrasi dalam kurva kalibrasi =

Konsentrasi standar yang diambil adalah 80 ppm; 100 ppm; 125 ppm ; 150 ppm; 200 ppm; 250 ppm Skema Pengenceran Standar Amoxicillin 100 mg standar Amoxicillin

100 ml

8 ml

10 ml

25 ml

5 ml

15 ml

100 ml

100 ml

100 ml

25 ml

100 ml

80 ppm

100 ppm

250 ppm 5 ml

200 ppm

150 ppm

10 ml

125 ppm

Alat spektrofotometer UV-Vis 1800 Shimadzu Gambar . Skema Pengenceran Standar Amoxicillin 1. Melarutkan 100 mg standar Amoxicillin dalam 100 ml air dalam labu ukur 100 ml dan didapat konsentrasi 1000 ppm 2. Mengambil 8 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan konsentrasi 80 ppm. 3. Mengambil 10 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan konsentrasi 100 ppm. 4. Mengambil 15 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan konsentrasi 150 ppm. 5. Mengambil 25 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan konsentrasi 250 ppm. 6. Mengambil 5 ml larutan dari konsentrasi 1000 ppm dan dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan konsentrasi 200 ppm.

7. Mengambil 5 ml larutan dari konsentrasi 250 ppm dan dimasukkan ke dalam labu ukur 10 ml kemudian dicukupkan volumenya. Didapatkan konsentrasi 125 ppm. 8. Mengukur serapan pada masing-masing konsentrasi dengan menggunakan alat spektrofotometri UV-Vis 1800 Shimadzu pada panjang gelombang 272,20 nm. 9. Membuat kurva kalibrasi dari data-data yang telah didapatkan. Prosedur pengoperasian alat spektrofotometri UV-Vis 1800 Shimadzu 1. Alat disambungkan dengan sumber listrik (220 volt). Nyalakan stabilizer. Nyalakan komputer. Nyalakan alat spektrofotometri UV-Vis 1800 Shimadzu. Tunggu hingga seluruh initialization mode dalam status OK. 2. Setelah muncul tampilan USER NAME dan PASSWORD, tekan ENTER. 3. Pilih mode F4 (PC Control). 4. Klik aplikasi UV Probe pada komputer. Setelah program tampil, klik CONNECT. Spektrofotometer akan otomatis terhubung dengan komputer. 5. Buka kotak analisis. Isi kedua kuvet dengan medium. Masukkan ke kotak analisis dengan posisi buram kuvet menghadap depan-belakang. Lalu tutup kotak analisis. 6. Klik AUTOZERO pada komputer hingga serapan nol 7. Klik BASELINE pada komputer, lalu pilih rentang panjang gelombang yang diinginkan (200-400nm). Tunggu hingga scan baseline selesai. 8. Buka kotak analisa. Ganti isi kuvet depan dengan sampel yang akan diukur. Lalu tutup kotak analisis. 9. Klik AUTOZERO pada komputer hingga serapan nol. 10. Klik START untuk memulai scan. 11. Sesudah scan selesai, pilih PICK PEAK (pada menubar operations) untuk memperoleh panjang gelombang maksimum sampel. 12. Pilih POINT PEAK untuk mengetahui serapan pada panjang gelombang maksimum yang diinginkan. 13. Simpan data spektrum yang diperoleh pada spektrum tertentu. 14. Setelah alat selesai digunakan, klik DISCONNECT pada komputer. Lalu tutup aplikasinya.

15. Tekan tombol RETURN dua kali pada alat spektrofotometer hingga muncul tampilan USER NAME dan PASSWORD. Lalu matikan alat.

IV.2

Pengambilan dan Pengenceran Sampel Tablet Amoxicillin 125 mg

Apparatus 2 : Tipe Paddle (Dayung) Suhu : 370,5C ; Kecepatan : 75 rpm Waktu : 30 menit

Masukkan labu disolusi pada masing-masing lubang pada alat disolusi Masukkan aquades yang telah dipanaskan hingga suhu 370,5C Masukkan tablet pada 3 labu disolusi secara bersamaan diikuti dengan 3 labu berikutnya dengan interval waktu 3 menit Ambil 10 ml sampel dengan syringe setiap 6 menit, kemudian isi kembali labu disolusi dengan aquades suhu 370C dengan volume yang sama

Pasang filter pada syringe, masukkan sampel yang telah diambil ke dalam botol penampung

Alat spektrofotometri UV-Vis 1800 Shimadzu

Sampel yang telah diambil diukur serapannya dengan spektrofotometer UV-Vis

Gambar . Skema penggunaan alat disolusi Paddle, pengambilan dan pengenceran sampel serta pengukuran serapan dengan spektrofotometer UV-Vis