LAPORAN PRAKTIKUM

PENYEHATAN MAKANAN DAN MINUMAN

Mata Kuliah : Penyehatan Makanan dan Minuman

Materi Praktikum : Total Plate Count

Hari / Tanggal : Kamis, 21 Maret 2019

Waktu : 08.00 - selesai

Tempat : Laboratorium Mikrobiologi

Klompok :I

Pembimbing : Iin Indayani, S.KM

I. Pendahuluan

Prinsip dari Total Plate Count adalah menumbuhkan sel mikroorganisme

yang masih hidup pada media agar, sehingga mikroorganisme akan
berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dan
dihitung dengan mata tanpa menggunakan mikroskop. Pada meyode ini
teknik penegen ceran merupakan hal yang harus dikuasai. Sebelum
mikroorganisme ditumbuhkan di dalam media, terlebih dahulu dilakukan
pengenceran sampel menggunakan larutan fisiologis.

II. Tujuan

Untuk menghitung jumlah koloni yang terdapat pada es

III. Alat dan Bahan

Alat
1.Tabung Reaksi 6 buah (10 9. Gelas Beaker 300 ml (1 bh) 17. Pipet Steril yang berukuran 10 ml, 1
ml) dan Pipet yang tidak steril 10 ml dan
pipet
2. Rak Tabung 10. Kamera/Hp

3. Lampu Spritus 11. Timbangan Analitik

4. Inkubator 12. Autoclave

5. Plate / petri dispossible 13. Gelas Arloji & Sendok

6. Kompor Listrik 14. Kulkas

7. Gelas Ukur 15. Sarung Tangan

8. Erlenmayer 250 ml (2 bh) 16. Koloni Counter

Bahan
1. Sampel Es 3. Aquades 5. Alumunium 7. Koran 9. Korek
lilin kacang foil
ijo
2. Nutrient Agar 4. Kapas 6. Garam 8. Kertas 10. Spidol
Fisiologis

IV. Cara Kerja

 Pembuatan NaCl 0,85% (Perkelompok)
Dalam melarutkan NaCl 0,85% diperlukan 144 ml yang dibulatkan
menjadi 150 ml (Erlenmayer 90 ml dan 6 tabung masing-masing 9 ml).
Dari NaCl 0,85% dilarutkan dengan 100 aquades, jadi :
0,85 % 100 ml

X = 1, 275 gram (dilarutkan dengan

150 ml aquades) dibeaker glass

300 ml
X 150 ml

Dipindahkan ke Erlenmayer 250 ml sebanyak 90 ml kemudian ditutup

dengan kapas dan alumunium foil. Setelah itu memipet 9 ml dari Beaker
Glass dibawa ke tabung reaksi sebanyak 6 buah lalu tutup dengan kapas, ikat
dengan karet, dan bungkus dengan alumunium foil ( tabung reaksi 10 ml ).

 Pembuatan NA (Nutrient Agar)

Dibutuhkan 150 ml dari 7 x 20 = 140 ml ( Erlenmayer dan 6 tabung
reaksi ) dibulatkan menjadi 150 ml.
28 gram 100 ml

X = 4,2 gram

X 150 ml
 Ditimbang 4,2 gram NA dilarutkan 150 ml aquades di Erlemayer 250 ml,
lalu dipanaskan menggunakan kompor listrik (indikator larut sempurna yaitu
mendidih), setelah itu tutup dengan kapas dan bungkus dengan alumunium
foil.

 Penyeterilan Alat dan Bahan (Persiapan)

1) Potong koran lebar kira-kira 3x dari diameter pipet, tinggi melebihi
sedikit dari tinggi pipet ukur / pipet tetes.
2) Putar koran hingga menyelimuti seluruh bagian pipet tetes.

Alat : Pipet steril 10 ml dan 1 ml di suhu 1500 C selama 1 jam incubator.

Bahan : Kumpulkan Erlenmayer dan 6 tabung reaksi 10 ml ( tabung reaksi
yang sudah terikat dan tertutupi oleh alumunium foil) dan NA
yang telah dpanaskan lalu disteril dengan suhu 1210 C selama 15
menit di Autoclaf. Lalu ditunggu sekama 1 x 24 jam dan media
dimasukkan ke kulkas.\

 Pengujian Es

Dipipet Dipipet Dipipet Dipipet Dipipet Dipipet

10 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml

90 ml 9 ml 9 ml 9 ml 9 ml 9 ml
9 ml
NaCl NaCl NaCl NaCl NaCl NaCl
NaCl
Sampel Es NaCl 0,85 %

KONTROL

(10-1 ) ( 10-2) (10-3) (10-4) (10-5) (10-6)

  *Ket : pekerjaan menggunakan lampu bunsen

BUNSEN

1) Ambil pipet steril yang dimana mahasiswa telah dilengkapi APD.

2) Buka Koran, lihat atasnya mana yang menghadap angka biar mudah
melihat saat pemipetan.
 3) Pasang ball pipet, lalu buka seluruh koran tanpa memegang bawah
maupun tengah dari pipet steril.
4) Fiksasi menggunakan bunsen dengan cara dilewati.
5) Ambil 10 ml dari sampel fiksasi, kemudian taruh di erlenmayer berisi
NaCl 90 ml.
6) Ambil 1 ml menggunakan pipet tetes 10 ml lalu pipet 10 ml lalu
fiksasi dari NaCl Erlenmayer (10-1) ke tabung reaksi (10-2) dan fiksasi
kembali.
7) Lanjutkan seterusnya.

10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6

KONTROL

Dipipet Dipipet Dipipet Dipipet Dipipet Dipipet

Dipipet

1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
1 ml

Petrdish Petrdish Petrdish Petrdish Petrdish Petrdish

Petrdish

Tuangkan Nutrient Agar ke Setiap Cawan Petri 20 ml atau sampai garis

pembatas

*Ket : pekerjaan menggunakan

 
lampu bunsen BUNSEN

(Nb : Panaskan NA yang beku tanpa membuka kapas)

  Pada Saat Memindahkan ke Cawan Petri
1) Ambil pipet steril (1 ml), mahasiswa sudah dilengkapi dengan APD.
2) Buka Koran, lihat atasnya saja dan mana yang menghadap angka biar
mudah terlihat.
3) Pasang ball pipet, lalu nuka seluruh korn tanpa memegang pipet steril
baik bawah maupun tengahnya.
4) Fiksasi menggunakan Bunsen dengan cara dilewati.
5) Ambil terlebih dahulu di control guna meminimalisir
mikroorganisme, fiksasi lalu teteskan ke cawan petri control.
6) NA yang panas tuang segera menggunakan sarung tangan guna
meminimalisir mikroorganisme yang masuk ke cawan petri. Tuang
(20 ml) atau tertutup permukaan cawan petri.
7) Lanjutkan seterusnya dari 10-1 sampai 10-6 dan tuangkan.
8) Lalu dimasukkan ke inkubator dengan suhu 370 C dan ditunggu
selama 1 x 24 jam

 Cara Kerja Penghitungan Colony

1) Ambil cawan petri di dalam incubator.
2) Nyalakan alat dan siapkan spidol untuk menghitung.
3) Buka tutup petri cawan lalu hadapkan terbalik pada cahaya colony
counter
4) Hitung atau titikkan kolony menurut spidol.
5) Jika sudah rapikan alat dan bahan serta bersihkan.

V. Hasil dan Pembahasan

Hasil

Kontrol : 0 10-3 :0 10-6 :0

10-1 :5 10-4 :0
10 -2
:1 10-5 :2

Dari hasil yang didapatkan bahwa kolony setiap cawan petri 10-1 sampai
10-6 dibawah 30 dengan nilai kontrolnya memenuhi syarat yaitu 0
(Ket : ≥ 30 ≤ 300) dan (kontrol > 10 tidak digunakan)

Pembahasan
Adapun pembahasan yang dapat disampaikan dari hasil yaitu es lilin
kacang ijo memenuhi syarat untuk dikonsumsi.
VI. Simpulan
Dari hasil praktikum yang telah dilakukan, sampel es lilin kacang ijo
yang telah kami beli di warung koloninya tidak melebihi dari ≤ 30. Hal ini
dtunjang dari proses pembuatan yang steril dan pengujian yang sesuai
prosedur / SOP di laboratorium.

LEMBAR PENGESAHAN
Denpasar, 30 Maret2019

Mengetahui Mahasiswa

Iin Indayani I Made Dwitya Nata

NIP. 198303282010122004 NIM. P07133 217005