BAB III

METODELOGI

Waktu dan Tempat Pelaksanaan

Hari, tanggal : Senin, 29 Agustus 2022
Waktu : 08.00 – Selesai
Tempat : Laboratorium Kimia Jurusan Kesehatan Lingkungan
Poltekkes Kemenkes Surabaya

Alat dan Bahan

Alat :
 Timbangan analitik
 Autoclave
 Colony counter
 Incubator
 Petridish 15 buah
 Erlenmeyer
 Beaker Glass
 Sendok Pengaduk
 Microbiology Air Sampler
 Lux Meter
 Anemometer
 Stopwatch

Bahan :
 Alcohol 70%
 Aquadest
 Nutrient Agar (NA)
 Alumunium foil
 Kertas pembungkus coklat
 Tali rami
 Gunting
 Handscoon
 Kapas
 Spirtus
 Langkah Kerja MAS
a. Langkah Kerja Sterilisasi Alat
Mensterilkan semua alat dan bahan yang akan digunakan ke dalam autoclave selama
kurang lebih 1 jam

b. Pembuatan NA
1. Menimbang NA sebanyak 7 gram dan memasukkannya ke dalam Erlenmeyer
2. Tambahkan aquadest sebanyak 250ml, kemudian aduk menggunakan sendok
pengaduk
3. Tutup Erlenmeyer menggunakan kapas dan aluminium foil lalu ikat dengan tali
rami
4. Lalu, Erlenmeyer yang berisi larutan NA dan petridish sejumlah 15 (5 titik, dimana
per titik 2 petridish untuk ambil sampel (2x5 = 10 petridish) dan 1 kontrol. Sisanya
sebagai cadangan) ke dalam autoclave selama 30 menit dengan suhu 121oC
5. Setelah itu sterilkan meja kerja dan nyalakan Bunsen
6. Lalu, buka Erlenmeyer dan petridish di dekat Bunsen
7. Kemudian, tuangkan larutan NA ke dalam petridish kurang lebih 10-15ml
8. Diamkan dan tunggu hingga media menjadi beku

c. Pengambilan Sampel Udara Ruangan menggunakan MAS

1. Menyiapkan ruangan yang akan dipakai untuk pemeriksaan udara dengan
menggunakan MAS
2. Menyiapkan alat dan tempat titik yang akan dilakukan pengukuran dengan alcohol
3. Menentukan 5 titik pengukuran dalam ruangan yang akan diukur
4. Memasang media NA yang sudah membeku pada alat MAS dengan ketinggian
kurang lebih 1,5meter dari lantai
5. Menutup kembali alat dan mengatur daya hisapnya yaitu 200
6. Memberi label pada petridish
7. Lakukan kembali pada titik tersebut yakni 2x pengulangan dengan petridish yang
berbeda
8. Membungkus semua sampel dan meletakkannya pada coolbox

d. Pengereman di Inkubator
1. Setelah sampel dibawa ke laboraturium, semua sampel dan kontrol dibungkus
kembali dengan kertas coklat dan ditali rami
2. Mengeramkan di incubator selama 2 x 24 jam

e. Perhitungan Koloni
1. Menyiapkan alat penghitung koloni (Colony Counter)
2. Mengambil petridish yang berisi sampel dan control dari incubator dan
meletakkannya dia atas Colony Counter dalam keadaan terbalik
3. Mengamati dan menghitung jumlah koloni serta jamur
4. Mencatat hasil dan melakukannya dengan perhitungan tabel

Langkah Kerja Anemometer (Mengukur Kec.Angin, suhu, dan kelembapan)

1. Menekan tombol “ON” pada alat anemometer
2. Arahkan anemometer pada sumber angin
3. Diukur selama 5 menit dan tiap 5 detik pembacaan
 4. Catat nilai kecepatan angin minimal dan maksimal yang sering muncul pada display
alat
5. Mencatat suhu yang tertera pada layar
6. Dan mencatat kelembapan konstan yang tertera pada layar (%)
7. Menekan tombol “OFF”

Langkah Kerja Lux Meter (pencahayaan)

1. Letakkan lux meter di lantai atau tempat yang terkena cahaya
2. Tekan power pada alat lux meter
3. Sebelum pengukuran, tutup fotosel dengan bahan tidak tembus cahaya dan
memastikan bahwa jarum/display menunjukkan angka “0”
4. Sebelum pembacaan, pindahkan penutup dan biarkan fotosel terpapar cahaya selama
5 menit, dengan setiap menitnya dicatat hasil pengukuran. Jadi ada 5 hasil pengukuran
pada 5 menit
5. Catat hasil tiap menitnya
6. Setelah itu, matikan lux meter dengan cara tekan power hingga angka pada alat hilang
atau muncul bunyi