NAMA NPM KELAS

: DHEAN VETRA ANGGARA : 260110110151 :B

A. ANTIBODI MONOKLONAL Antibodi adalah protein yang diproduksi oleh limfosit B dari sistem kekebalan tubuh dalam merespons protein asing, yang disebut antigen. Antibodi berfungsi sebagai penanda, mengikat antigen sehingga molekul antigen dapat dikenali dan dihancurkan oleh fagosit. Bagian dari antigen antibodi yang mengikat disebut epitop. Antibodi monoklonal merupakan suatu jenis protein yang dibuat di laboratorium yang dapat mengikat zat dalam tubuh, termasuk sel-sel tumor. Ada banyak jenis antibodi monoklonal. Setiap antibodi monoklonal dibuat untuk menemukan satu substansi. Antibodi monoklonal yang digunakan untuk mengobati beberapa jenis kanker dan sedang diteliti dalam pengobatan jenis lain. Mereka dapat digunakan sendiri atau untuk membawa obat-obatan, racun, atau bahan radioaktif langsung ke tumor. Dua kunci dari hubungan antibodi-epitop adalah kunci untuk penggunaan antibodi monoklonal sebagai alat molekuler. Spesifisitas - antibodi mengikat hanya untuk epitop tertentu. Sufisiensi - epitop dapat mengikat antibodi dengan sendirinya, misalnya jika tidak terdapat molekul antigen. Secara struktural antibodi adalah protein yang terdiri dari empat rantai polipeptida. Keempat rantai membentuk struktur kuaterner agak menyerupai bentuk Y. Gambar 1 menunjukkan struktur tiga dimensi dari imunoglobulin G, antibodi yang khas, dan representasi skematiknya.

Gambar 1: A) Struktur imunoglobulin G 3D. B) Struktur imunoglobulin G 3D dengan warna yang menunjukkan empat rantai polipeptida.

Setiap sel B dalam organisme mensintesis hanya satu jenis antibodi. Dalam suatu organisme, terdapat seluruh populasi berbagai jenis sel B dan antibodi masing-masing yang dihasilkan sebagai respons terhadap berbagai antigen bahwa organisme telah terpapar. Namun untuk memiliki fungsi sebagai alat, ahli biologi molekuler perlu sejumlah besar antibodi

tunggal (dan antibodi itu saja). Oleh karena itu diperlukan metode untuk budaya populasi sel B yang berasal dari sel B tunggal, sehingga populasi sel B akan memungkinkan kita untuk memanen satu jenis antibodi. Populasi sel ini digambarkan sebagai monoklonal, dan antibodi yang diproduksi oleh populasi sel B disebut antibodi monoklonal. I. PRODUKSI PRODUKSI SEL HYBRIDOMA Antibodi monoklonal biasanya dibuat oleh sel-sel myeloma sekering dengan sel-sel limpa dari tikus yang telah diimunisasi dengan antigen yang diinginkan. Namun, kemajuan terbaru telah memungkinkan penggunaan kelinci sel B untuk membentuk hibridoma Kelinci. Polyethylene glycol digunakan untuk sekering membran plasma yang berdekatan, namun tingkat keberhasilan rendah sehingga media selektif di mana hanya sel menyatu bisa tumbuh digunakan. Hal ini dimungkinkan karena sel-sel myeloma telah kehilangan kemampuan untuk mensintesis hipoksantinguanin-phosphoribosyl transferase (HGPRT), suatu enzim yang diperlukan untuk sintesis asam nukleat penyelamatan. Ketiadaan HGPRT bukanlah masalah bagi sel-sel kecuali de novo purin jalur sintesis juga terganggu. Dengan mengekspos sel untuk aminopterin (analog asam folat, yang menghambat reduktase dihydrofolate, DHFR), mereka tidak dapat menggunakan de novo jalur dan menjadi sepenuhnya auxotrophic untuk asam nukleat yang membutuhkan suplemen untuk bertahan hidup. PEMURNIAN ANTIBODI MONOKLONAL Setelah mendapat baik sampel media hibridoma budidaya atau sampel cairan asites, antibodi yang diinginkan harus diekstrak. Kontaminan dalam sampel kultur sel akan terutama terdiri dari komponen media seperti faktor pertumbuhan, hormon, dan transferrins. Sebaliknya, dalam sampel vivo cenderung memiliki antibodi tuan rumah, protease, nucleases, asam nukleat, dan virus. Dalam kedua kasus, sekresi lainnya oleh hibridoma seperti sitokin mungkin hadir. Ada juga mungkin kontaminasi bakteri dan, sebagai hasilnya, endotoksin yang disekresikan oleh bakteri. Tergantung pada kompleksitas dari media yang dibutuhkan dalam kultur sel, dan dengan demikian kontaminan tersebut, salah satu metode (in vivo atau in vitro) mungkin lebih baik untuk yang lain. ANTIBODI HETEROGENITAS Heterogenitas produk yang umum bagi antibodi monoklonal dan produksi biologis rekombinan lain dan biasanya diperkenalkan baik hulu selama ekspresi atau hilir selama manufaktur. REKOMBINAN Produksi antibodi monoklonal rekombinan melibatkan teknologi, disebut sebagai repertoar kloning atau display / tampilan ragi fag. Rekayasa antibodi rekombinan melibatkan penggunaan virus atau ragi untuk membuat antibodi, daripada tikus. Teknik ini bergantung pada kloning cepat segmen gen imunoglobulin untuk membuat perpustakaan antibodi dengan sekuens asam amino yang sedikit berbeda dari yang antibodi dengan kekhususan yang diinginkan

dapat selected.The fag perpustakaan antibodi adalah varian dari perpustakaan fag antigen pertama kali ditemukan oleh George Pieczenik. Teknik ini dapat digunakan untuk meningkatkan spesifisitas dengan yang antibodi mengenali antigen, stabilitas mereka dalam berbagai kondisi lingkungan, keberhasilan terapi mereka, dan pendeteksian mereka dalam aplikasi diagnostik. Ruang fermentasi telah digunakan untuk memproduksi antibodi ini dalam skala besar. II. PENGGUNAAN Tes Diagnostik Setelah antibodi monoklonal untuk zat tertentu telah diproduksi, mereka dapat digunakan untuk mendeteksi keberadaan zat ini. Tes Western Blot dan immuno dot blot tes mendeteksi protein pada membran. Mereka juga sangat berguna dalam imunohistokimia, yang mendeteksi antigen dalam bagian jaringan tetap dan uji imunofluoresensi, yang mendeteksi substansi dalam bagian jaringan beku atau dalam sel hidup. Treatment Kanker Autoimun Disease III. CONTOH Kategori Utama Jenis Penggunaan Rheumatid arthritis Infliximab Chrones disease Ulcerative Colitis Rheumatid arthritis Adalimumab Chrones disease Ulcerative Colitis Antiinflamasi Rejeksi akut Basiliximab transplantasi ginjal Rejeksi akut Daclizumab transplantasi ginjal Asma alergi Omalizumab sedang sampai berat Antikanker Kambuh Gemtuzumab leukemia myeloid akut Alemtuzumab Sel B leukemia Non-Hodkins Rituximab Lumphoma Trastazumab Kanker payudara Nimotuzumab Uji klinis untuk indikasi lain berlangsung

 Cetuximab Bevacizumab Palivizumab Lain-lain Abciximab

Squamous cell carcinomas, colorectal carcinoma Terapi kanker anti-angiogenik Infeksi RSV pada anak-anak Mencegah koagulasi

B. ANTIBODI POLIKLONAL Respon imun terhadap antigen umumnya melibatkan aktivasi beberapa sel B di mana targetnya epitop tertentu pada antigen itu. Akibatnya sejumlah besar antibodi yang diproduksi dengan kekhususan yang berbeda dan afinitas epitop ini dikenal sebagai antibodi poliklonal. Antibodi poliklonal disiapkan dari hewan yang diimunisasi. Mengandung campuran kompleks dari jenis antibodi yang berbeda yang dihasilkan dari klon sel B yang berbeda. Antibodi poliklonal dapat membentuk kisi dengan homogen, antigen protein monomer karena setiap antibodi dapat berinteraksi dengan epitop yang berbeda pada antigen. I. PRODUKSI Antibodi ini biasanya diproduksi dengan inokulasi mamalia yang cocok, seperti tikus, kelinci, atau kambing. Mamalia yang berukuran besar lebih dipilih karena jumlah serum yang didapat lebih banyak. Antigen disuntikkan pada mamalia. Sehingga akan menginduksi limfosit B untuk menghasilkan imunoglobulin IgG spesifik untuk antigen. Poliklonal IgG ini dimurnikan dari serum hewan. Banyak metodologi yang digunakan untuk memproduksi antibodi poliklonal pada hewan laboratorium. Pedoman yang mengatur penggunaan dan prosedur yang berkaitan dengan metodologi hewan umumnya berorientasi pada pertimbangan dan perilaku yang sesuai untuk adjuvant yang digunakan. Termasuk pemilihan adjuvant, rute, dan volume injeksi. Tujuan utama dari produksi antibodi pada hewan laboratorium adalah untuk mendapatkan titer tinggi, antisera dengan afinitas tinggi untuk digunakan dalam eksperimen atau tes diagnostik. Adjuvant digunakan untuk memperbaiki atau meningkatkan respon imun terhadap antigen. II. PEMILIHAN HEWAN Hewan yang sering digunakan untuk produksi antibodi poliklonal termasuk ayam, kambing, hamster, kuda, tikus, mencit, dan domba. Namun kelinci adalah hewan laboratorium yang paling umum digunakan untuk tujuan ini. Pemilihan hewan harus didasarkan pada:

Jumlah antibodi yang dibutuhkan Hubungan antara donor antigen dan antibodi resipien Karakteristik yang diperlukan III. ADJUVANT Pemilihan adjuvant atau tipe tertentu bervariasi tergantung apakah mereka akan digunakan untuk penelitian dan produksi antibodi atau dalam pengembangan vaksin. Adjuvant untuk vaksin digunakan hanya untuk menghasilkan antibodi pelindung dan memori sistemik. Setiap adjuvant memiliki kelebihan dan kekurangan. Penggunaan adjuvant umumnya disertai dengan efek samping yang tidak diinginkan dari berbagai tingkat keparahan. Adjuvant yang sering digunakan untuk produksi antibodi adalah adjuvant Freund, adjuvant sistem Ribi, dan titermax. IV. PENGGUNAAN FARMASETIKAL Digoxin Immune Fab adalah fragment antigen mengikat pada antibodi poliklonal yang dikembangkan pada derivat digitalis sebagai ikatan hapten pada protein dan digunakan untuk pembalikan mengancam digoxin atau toksisitas digitoxin. Imunoglobulin Rho(D) dibuat dari plasma manusia yang dikumpulkan dan disediakan oleh donor Rh-negatif dengan antibodi terhadap antigen D. hal ini digunakan untuk menyediakan imun pasif yang mengikat antigen, mencegah respon imun aktif ibu yang berpotensi mengakibatkan penyakit hemolitik pada bayi baru lahir. V. PERBEDAAN ANTIBODI POLIKLONAL DAN MONOKLONAL Antibodi Poliklonal Antibodi Monoklonal Tidak mahal dalam produksinya Mahal dalam produksinya Tidak butuh teknologi yang Membutuhkan teknologi yang terlalu canggih sangat canggih Membutuhkan pelatihan untuk Tidak perlu keahlian yang tinggi menggunakan teknologi Waktunya relatif singkat Waktu lama untuk hibridoma Menghasilkan antibodi spesifik Menghasilkan antibodi non (bahkan dapat terlalu spesifik) spesifik dalam jumlah banyak dalam jumlah banyak Mengenal beberapa epitop pada Hanya mengenal satu epitop pada antigen antigen

DAFTAR PUSTAKA
Anonim. Tersedia di http://www.bio.davidson.edu/courses/molbio/molstudents/01rakarnik /mab.html (diakses tanggal 2 Juni 2013). Anonim. Tersedia di http://www.cancer.gov/Common/PopUps/popDefinition.aspx? id=46066 (diakses tanggal 2 Juni 2013). Anonim. Tersedia di http://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/archives/fdaDrugInfo.cfm? archiveid=12121 (diakses tanggal 2 Juni 2013). Anonim. Tersedia di http://mcb.berkeley.edu/courses/mcb150/lecture4/Lecture4%286%2 9.pdf (diakses tanggal 2 Juni 2013). Anonim. Tersedia di http://www.randox-lifesciences.com/articles/57? articleSectionId=1 (diakses tanggal 2 Juni 2013). Anonim. Tersedia di http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK2266/ (diakses tanggal 2 Juni 2013). Anonim. Digoxin Immune Fab. Tersedia di http://www.fda.gov/downloads/BiologicsBloodVaccines/BloodBloodPr oducts/ApprovedProducts/LicensedProductsBLAs/FractionatedPlasm aProducts/ucm117624.pdf (diakses tanggal 2 Juni 2013). Anonim. Medication and Drugs. Tersedia di http://www.emedicinehealth.com/drugdigoxin_immune_fab/article_em.htm (diakses tanggal 2 Juni 2013). Anonim. Polyclonal and Monoclonal: A Comparison. Tersedia di http://www.abcam.com/index.html? pageconfig=resource&rid=11269&pid=11287 (diakses tanggal 2 Juni 2013). Campbell, N.A. 1996. Biology 4th Ed. The Benjamin/Cummings Publishing Co., CA, pp. 862-869. Davis, Jerome. Women's Donated Blood Yields Lifesaving RhoGAM. Tersedia di http://usatoday30.usatoday.com/news/health/2009-0208-blood-rhogam_N.htm (diakses tanggal 2 Juni 2013). Goding, James W. 1996. Monoclonal Antibodies: Principles and Practice 3rd Ed. London: ACADEMIC PRESS LIMITED.