NAMA : DHEAN VETRA ANGGARA

NPM : 260110110151
KELAS : B
A. ANTIBODI MONOKLONAL
Antibodi adalah protein yang diproduksi
oleh limfosit B dari sistem kekebalan tubuh
dalam merespons protein asing, yang disebut
antigen. Antibodi berfungsi sebagai penanda,
mengikat antigen sehingga molekul antigen
dapat dikenali dan dihancurkan oleh fagosit.
Bagian dari antigen antibodi yang mengikat
disebut epitop.
Antibodi monoklonal merupakan suatu jenis
protein yang dibuat di laboratorium yang
dapat mengikat zat dalam tubuh, termasuk
sel-sel tumor. Ada banyak jenis antibodi monoklonal. Setiap antibodi
monoklonal dibuat untuk menemukan satu substansi. Antibodi monoklonal
yang digunakan untuk mengobati beberapa jenis kanker dan sedang
diteliti dalam pengobatan jenis lain. Mereka dapat digunakan sendiri atau
untuk membawa obat-obatan, racun, atau bahan radioaktif langsung ke
tumor.
ua kunci dari hubungan antibodi-epitop adalah kunci untuk
penggunaan antibodi monoklonal sebagai alat molekuler.
Spesifisitas - antibodi mengikat hanya untuk epitop tertentu.
Sufisiensi - epitop dapat mengikat antibodi dengan sendirinya,
misalnya jika tidak terdapat molekul antigen.
Secara struktural antibodi adalah protein yang terdiri dari empat rantai
polipeptida. !eempat rantai membentuk struktur kuaterner agak
menyerupai bentuk ". #ambar $ menunjukkan struktur tiga dimensi dari
imunoglobulin #, antibodi yang khas, dan representasi skematiknya.
#ambar $% A& Struktur imunoglobulin # '. B& Struktur imunoglobulin # ' dengan
warna yang menunjukkan empat rantai polipeptida.
Setiap sel B dalam organisme mensintesis hanya satu jenis antibodi.
alam suatu organisme, terdapat seluruh populasi berbagai jenis sel B
dan antibodi masing-masing yang dihasilkan sebagai respons terhadap
berbagai antigen bahwa organisme telah terpapar. (amun untuk memiliki
fungsi sebagai alat, ahli biologi molekuler perlu sejumlah besar antibodi
tunggal )dan antibodi itu saja&. *leh karena itu diperlukan metode untuk
budaya populasi sel B yang berasal dari sel B tunggal, sehingga populasi
sel B akan memungkinkan kita untuk memanen satu jenis antibodi.
+opulasi sel ini digambarkan sebagai monoklonal, dan antibodi yang
diproduksi oleh populasi sel B disebut antibodi monoklonal.
I. PRODUKSI
PRODUKSI SEL HYBRIDOMA
Antibodi monoklonal biasanya dibuat oleh sel-sel myeloma
sekering dengan sel-sel limpa dari tikus yang telah diimunisasi
dengan antigen yang diinginkan. (amun, kemajuan terbaru telah
memungkinkan penggunaan kelinci sel B untuk membentuk
hibridoma !elinci. +olyethylene glycol digunakan untuk sekering
membran plasma yang berdekatan, namun tingkat keberhasilan
rendah sehingga media selektif di mana hanya sel menyatu bisa
tumbuh digunakan. ,al ini dimungkinkan karena sel-sel myeloma
telah kehilangan kemampuan untuk mensintesis hipoksantin-
guanin-phosphoribosyl transferase ),#+-.&, suatu enzim yang
diperlukan untuk sintesis asam nukleat penyelamatan. !etiadaan
,#+-. bukanlah masalah bagi sel-sel kecuali de no/o purin jalur
sintesis juga terganggu. engan mengekspos sel untuk aminopterin
)analog asam folat, yang menghambat reduktase dihydrofolate,
,0-&, mereka tidak dapat menggunakan de no/o jalur dan menjadi
sepenuhnya au1otrophic untuk asam nukleat yang membutuhkan
suplemen untuk bertahan hidup.
PEMURNIAN ANTIBODI MONOKLONAL
Setelah mendapat baik sampel media hibridoma budidaya atau
sampel cairan asites, antibodi yang diinginkan harus diekstrak.
!ontaminan dalam sampel kultur sel akan terutama terdiri dari
komponen media seperti faktor pertumbuhan, hormon, dan
transferrins. Sebaliknya, dalam sampel /i/o cenderung memiliki
antibodi tuan rumah, protease, nucleases, asam nukleat, dan /irus.
alam kedua kasus, sekresi lainnya oleh hibridoma seperti sitokin
mungkin hadir. Ada juga mungkin kontaminasi bakteri dan, sebagai
hasilnya, endotoksin yang disekresikan oleh bakteri. .ergantung
pada kompleksitas dari media yang dibutuhkan dalam kultur sel,
dan dengan demikian kontaminan tersebut, salah satu metode )in
/i/o atau in /itro& mungkin lebih baik untuk yang lain.
ANTIBODI HETEROGENITAS
,eterogenitas produk yang umum bagi antibodi monoklonal dan
produksi biologis rekombinan lain dan biasanya diperkenalkan baik
hulu selama ekspresi atau hilir selama manufaktur.
REKOMBINAN
+roduksi antibodi monoklonal rekombinan melibatkan teknologi,
disebut sebagai repertoar kloning atau display 2 tampilan ragi fag.
-ekayasa antibodi rekombinan melibatkan penggunaan /irus atau
ragi untuk membuat antibodi, daripada tikus. .eknik ini bergantung
pada kloning cepat segmen gen imunoglobulin untuk membuat
perpustakaan antibodi dengan sekuens asam amino yang sedikit
berbeda dari yang antibodi dengan kekhususan yang diinginkan
dapat selected..he fag perpustakaan antibodi adalah /arian dari
perpustakaan fag antigen pertama kali ditemukan oleh #eorge
+ieczenik. .eknik ini dapat digunakan untuk meningkatkan
spesifisitas dengan yang antibodi mengenali antigen, stabilitas
mereka dalam berbagai kondisi lingkungan, keberhasilan terapi
mereka, dan pendeteksian mereka dalam aplikasi diagnostik. -uang
fermentasi telah digunakan untuk memproduksi antibodi ini dalam
skala besar.
II. PENGGUNAAN
Tes Dia!"s#i$
Setelah antibodi monoklonal untuk zat tertentu telah diproduksi,
mereka dapat digunakan untuk mendeteksi keberadaan zat ini. .es
3estern Blot dan immuno dot blot tes mendeteksi protein pada
membran. Mereka juga sangat berguna dalam imunohistokimia,
yang mendeteksi antigen dalam bagian jaringan tetap dan uji
imunofluoresensi, yang mendeteksi substansi dalam bagian jaringan
beku atau dalam sel hidup.
T%ea#&e!# Ka!$e%
A'#"i&'! Disease
III. (ONTOH
Ka#e"%i U#a&a )e!is Pe!'!aa!
A!#ii!*+a&asi
4nfli1imab
-heumatid
arthritis
5hrone6s disease
7lcerati/e 5olitis
Adalimumab
-heumatid
arthritis
5hrone6s disease
7lcerati/e 5olitis
Basili1imab
-ejeksi akut
transplantasi
ginjal
aclizumab
-ejeksi akut
transplantasi
ginjal
*malizumab
Asma alergi
sedang sampai
berat
A!#i$a!$e%
#emtuzumab
!ambuh
leukemia myeloid
akut
Alemtuzumab Sel B leukemia
-itu1imab
(on-,odkin6s
8umphoma
.rastazumab !anker payudara
(imotuzumab
7ji klinis untuk
indikasi lain
berlangsung
5etu1imab
S9uamous cell
carcinomas,
colorectal
carcinoma
Be/acizumab
.erapi kanker
anti-angiogenik
8ain-lain
+ali/izumab
4nfeksi -S: pada
anak-anak
Abci1imab
Mencegah
koagulasi
B. ANTIBODI POLIKLONAL
-espon imun terhadap antigen umumnya
melibatkan akti/asi beberapa sel B di mana
targetnya epitop tertentu pada antigen itu.
Akibatnya sejumlah besar antibodi yang
diproduksi dengan kekhususan yang berbeda dan
afinitas epitop ini dikenal sebagai antibodi
poliklonal. Antibodi poliklonal disiapkan dari
hewan yang diimunisasi. Mengandung campuran
kompleks dari jenis antibodi yang berbeda yang
dihasilkan dari klon sel B yang berbeda.
Antibodi poliklonal dapat membentuk kisi
dengan homogen, antigen protein monomer karena setiap antibodi dapat
berinteraksi dengan epitop yang berbeda pada antigen.
I. PRODUKSI
Antibodi ini biasanya diproduksi dengan inokulasi mamalia yang
cocok, seperti tikus, kelinci, atau kambing. Mamalia yang berukuran
besar lebih dipilih karena jumlah serum yang didapat lebih banyak.
Antigen disuntikkan pada mamalia. Sehingga akan menginduksi
limfosit B untuk menghasilkan imunoglobulin 4g# spesifik untuk
antigen. +oliklonal 4g# ini dimurnikan dari serum hewan.
Banyak metodologi yang digunakan untuk memproduksi antibodi
poliklonal pada hewan laboratorium. +edoman yang mengatur
penggunaan dan prosedur yang berkaitan dengan metodologi hewan
umumnya berorientasi pada pertimbangan dan perilaku yang sesuai
untuk adju/ant yang digunakan. .ermasuk pemilihan adju/ant, rute,
dan /olume injeksi.
.ujuan utama dari produksi antibodi pada hewan laboratorium
adalah untuk mendapatkan titer tinggi, antisera dengan afinitas tinggi
untuk digunakan dalam eksperimen atau tes diagnostik. Adju/ant
digunakan untuk memperbaiki atau meningkatkan respon imun
terhadap antigen.
II. PEMILIHAN HE,AN
,ewan yang sering digunakan untuk produksi antibodi poliklonal
termasuk ayam, kambing, hamster, kuda, tikus, mencit, dan domba.
(amun kelinci adalah hewan laboratorium yang paling umum
digunakan untuk tujuan ini. +emilihan hewan harus didasarkan pada%
;umlah antibodi yang dibutuhkan
,ubungan antara donor antigen dan antibodi resipien
!arakteristik yang diperlukan
III. AD)UVANT
+emilihan adju/ant atau tipe tertentu ber/ariasi tergantung apakah
mereka akan digunakan untuk penelitian dan produksi antibodi atau
dalam pengembangan /aksin. Adju/ant untuk /aksin digunakan hanya
untuk menghasilkan antibodi pelindung dan memori sistemik. Setiap
adju/ant memiliki kelebihan dan kekurangan. +enggunaan adju/ant
umumnya disertai dengan efek samping yang tidak diinginkan dari
berbagai tingkat keparahan.
Adju/ant yang sering digunakan untuk produksi antibodi adalah
adju/ant 0reund, adju/ant sistem -ibi, dan titerma1.
IV. PENGGUNAAN -ARMASETIKAL
igo1in 4mmune 0ab adalah fragment antigen mengikat pada
antibodi poliklonal yang dikembangkan pada deri/at digitalis sebagai
ikatan hapten pada protein dan digunakan untuk pembalikan
mengancam digo1in atau toksisitas digito1in.
4munoglobulin -ho)& dibuat dari plasma manusia yang
dikumpulkan dan disediakan oleh donor -h-negatif dengan antibodi
terhadap antigen . hal ini digunakan untuk menyediakan imun pasif
yang mengikat antigen, mencegah respon imun aktif ibu yang
berpotensi mengakibatkan penyakit hemolitik pada bayi baru lahir.
V. PERBEDAAN ANTIBODI POLIKLONAL DAN MONOKLONAL
A!#i."/i P"+i$+"!a+ A!#i."/i M"!"$+"!a+
.idak mahal dalam produksinya Mahal dalam produksinya
Ti/a$ .'#'0 #e$!"+"i 1a!
#e%+a+' 2a!i0
Membutuhkan teknologi yang
sangat canggih
Ti/a$ 3e%+' $ea0+ia! 1a! #i!i
Membutuhkan pelatihan untuk
menggunakan teknologi
,a$#'!1a %e+a#i* si!$a# 3aktu lama untuk hibridoma
Me!0asi+$a! a!#i."/i !"!
s3esi*i$ /a+a& 4'&+a0 .a!1a$
Menghasilkan antibodi spesifik
)bahkan dapat terlalu spesifik&
dalam jumlah banyak
Me!e!a+ .e.e%a3a e3i#"3 3a/a
a!#ie!
,anya mengenal satu epitop pada
antigen
A0.A- +7S.A!A
Anonim. .ersedia di
http%22www.bio.da/idson.edu2courses2molbio2molstudents2<$rakarnik
2mab.html )diakses tanggal = ;uni =<$'&.
Anonim. .ersedia di
http%22www.cancer.go/25ommon2+op7ps2popefinition.asp1>
id?@A<AA )diakses tanggal = ;uni =<$'&.
Anonim. .ersedia di
http%22dailymed.nlm.nih.go/2dailymed2archi/es2fdarug4nfo.cfm>
archi/eid?$=$=$ )diakses tanggal = ;uni =<$'&.
Anonim. .ersedia di
http%22mcb.berkeley.edu2courses2mcb$B<2lecture@28ecture@C=DAC=
E.pdf )diakses tanggal = ;uni =<$'&.
Anonim. .ersedia di http%22www.rando1-lifesciences.com2articles2BF>
articleSection4d?$ )diakses tanggal = ;uni =<$'&.
Anonim. .ersedia di http%22www.ncbi.nlm.nih.go/2books2(B!==AA2 )diakses
tanggal = ;uni =<$'&.
Anonim. Digoxin Immune Fab. .ersedia di
http%22www.fda.go/2downloads2BiologicsBlood:accines2BloodBlood+r
oducts2Appro/ed+roducts28icensed+roductsB8As20ractionated+lasm
a+roducts2ucm$$FA=@.pdf )diakses tanggal = ;uni =<$'&.
Anonim. Medication and Drugs. .ersedia di
http%22www.emedicinehealth.com2drug-
digo1inGimmuneGfab2articleGem.htm )diakses tanggal = ;uni =<$'&.
Anonim. Polyclonal and Monoclonal: A Comparison. .ersedia di
http%22www.abcam.com2inde1.html>
pageconfig?resourceHrid?$$=AEHpid?$$=DF )diakses tanggal =
;uni =<$'&.
5ampbell, (.A. $EEA. Biology 4
th
d. .he Benjamin25ummings +ublishing
5o., 5A, pp. DA=-DAE.
a/is, ;erome. !omen"s Donated Blood #ields $i%esa&ing 'ho(AM.
.ersedia di http%22usatoday'<.usatoday.com2news2health2=<<E-<=-
<D-blood-rhogamG(.htm )diakses tanggal = ;uni =<$'&.
#oding, ;ames 3. $EEA. Monoclonal Antibodies: Principles and Practice I
)
rd
d. 8ondon% A5AJM45 +-JSS 84M4.J.