MONOCLONAL ANTIBODY

Risky juliansyah putri

 Antibodi monoclonal merupakan suatu senyawa yang homogen
bersifat spesifik dalam jumlah besar yang bekerja dengan cara
meniru kerja dari sistem kekebalan tubuh.
 Teknik pembuatan MAB dikenal dengan metode hybridoma
 Sel hybridoma memiliki kemampuan dapat bertahan lama dalam
kultur sel dan mampu membelah secara terus-menerus sehingga
mampu memproduksi antibody sendiri dalam jumlah tidak
terbatas

PENDAHULUAN
 Pada tahun 1908, Metchnikoff dan Erlich mengemukakan mengenai teori
imunologi yang membawa perubahan besar pada pemanfaatan antibodi untuk
mendeteksi adanya antigen (zat asing).
 Sebelum ditemukannya teknologi antibodi monoklonal, antibodi dahulunya
diperoleh dengan cara konvensional yakni mengimunisasi hewan percobaan,
mengambil darahnya dan mengisolasi antibodi dalam serum sehingga
menghasilkan antibodi poliklonal di dalam tubuh
 Tahun 1975, Georges Köhler, César Milstein, and Niels Kaj Jerne
menemukan cara baru dalam membuat antibodi dengan mengimunisasi
hewan percobaan, kemudian sel limfositnya difusikan dengan sel
mieloma, sehingga sel hibrid dapat dibiakkan terus menerus
SEJARAH
 Antibodi dikenal sebagai imunoglobulin, disekresikan
oleh sel B (sel plasma) untuk menetralkan antigen
seperti bakteri dan virus. Representasi klasik dari
antibodi adalah molekul berbentuk Y yang terdiri dari
empat polipeptida-dua rantai berat dan dua rantai ringan.
Setiap ujung "Y" berisi paratope (struktur analog dengan
kunci) yang spesifik untuk satu epitop tertentu (mirip
dengan kunci) pada antigen, yang memungkinkan kedua
struktur ini untuk mengikat secara presisis.
 Antibodi ini dapat diklasifikasikan menjadi dua jenis
utama (monoklonal dan poliklonal) dengan cara
pembuatannya dari limfosit. Masing-masing memiliki
peran penting dalam sistem kekebalan tubuh,
pemeriksaan diagnostik, dan perawatan penyakit .

IMUNOGLOBULIN

 Antibodi poliklonal (pAbs) adalah
campuran heterogen yang biasanya
diproduksi oleh klon sel B yang berbeda di
dalam tubuh.dapat mengenali dan
mengikat banyak epitop berbeda dari satu
antigen.
POLIKLONAL ANTIBODY
 Antibodi poliklonal diproduksi dengan
menyuntikkan imunogen ke hewan coba Setelah
diinjeksi dengan antigen spesifik untuk
mendapatkan respons imun primer, hewan
diberikan imunisasi sekunder bahkan tersier untuk
menghasilkan titer antibodi yang lebih tinggi
terhadap antigen tertentu.
 Setelah imunisasi, antibodi poliklonal dapat
diperoleh langsung dari serum (darah yang telah
mengandung protein pembekuan dan sel darah
merah dikeluarkan) atau dimurnikan untuk
mendapatkan larutan yang bebas dari protein
serum lainnya.
POLIKLONAL ANTIBODI
 Keuntungan pAbs Kerugian pAbs
 waktu produksi hort dan biaya rendah.  Rentan terhadap variabilitas batch ke
 Sangat stabil dan toleran terhadap perubahan pH atau batch.
buffer.
 Beberapa epitop harus terdapat
 Afinitas tinggi. Karena antibodi mengikat lebih dari satu
epitop, dapat membantu memperkuat sinyal dari protein pemeriksaan urutan imunogen untuk
target bahkan dengan tingkat ekspresi rendah, Sehingga setiap reaktivitas silang.
antibodi ini ideal untuk imunopresipitasi kromatin.
 Toleran terhadap sedikit perubahan antigen. Antibodi
poliklonal kurang sensitif terhadap perubahan antigen
(denaturasi ringan, polimorfisme, heterogenitas
glikosilasi) dibandingkan antibodi monoklonal.

POLIKLONAL ANTIBODY

 Antibodi monoklonal (mAbs) dihasilkan
oleh sel B identik yang merupakan klon
dari sel induk tunggal. Ini berarti bahwa
antibodi monoklonal memiliki afinitas
monovalen dan hanya mengenali epitop
antigen yang sama.
MONOKLONAL ANTIBODI
 antibodi monoklonal diproduksi secara ex vivo
menggunakan teknik kultur jaringan.
 Proses dimulai dengan penyuntikan antigen yang
diinginkan ke hewan, seringkali tikus, berkali-
kali. Setelah hewan mengembangkan respons
imun, limfosit B diisolasi dari limpa hewan dan
menyatu dengan garis sel myeloma, menciptakan
hibridoma sel B-myeloma yang diabadikan.
 Hibridoma, yang mampu tumbuh terus menerus
dalam kultur sambil memproduksi antibodi,
kemudian disaring untuk mAb yang diinginkan.
MONOKLONAL ANTIBODY
 Keuntungan mAbs
 Pengenalan yang sangat spesifik hanya
pada satu epitop antigen
 Garis sel hibridoma abadi memiliki
kemampuan untuk menghasilkan jumlah
antibodi yang tidak terbatas
 Konsistensi tinggi di antara trial
 Sangat baik dengan afinitas pemurnian
MONOKLONAL ANTIBODY
Kerugian mAbs
 Mengembangkan monoklonal membutuhkan
waktu dan membutuhkan keterampilan teknis
yang tinggi.
 dapat menghasilkan antibodi spesifik dalam
jumlah besar tetapi mungkin terlalu spesifik
untuk dideteksi di berbagai spesies.
 Rentan terhadap perubahan epitop. Bahkan
sedikit perubahan konformasi dapat
menyebabkan penurunan kapasitas pengikatan
secara dramatis.
 Poliklonal antibody
 Antibodi poliklonal adalah reagen yang ideal dalam
uji diagnostik dan reaksi hemaglutinasi karena
kemampuannya mengenali epitop yang berbeda dari
molekul target. Penggunaan terbaik dari antibodi
poliklonal adalah untuk mendeteksi antigen yang tidak
diketahui.
 Antibodi poliklonal digunakan sebagai antibodi
sekunder dalam immunoassay (misalnya ELISA,
western blotting, microarray assay, imunohistokimia,
flow cytometry) yang berfungsi sebagai pengikat
epitop yang berbeda dan memperkuat sinyal, yang
mengarah ke deteksi yang lebih baik.
DIAGNOSTIK KLINIS
Monoklonal antibodi
 Antibodi monoklonal, berperan dalam menyediakan
sumber antibodi tak terbatas yang homogen dan, setelah
dikarakterisasi, perilakunya dapat diprediksi.
 Antibodi monoklonal sering digunakan sebagai antibodi
primer dalam immunoassay karena kemampuannya
mengikat secara spesifik ke satu epitop antigen. Melalui
penggunaan aplikasi klinis, beberapa kelemahan
penggunaan setiap jenis antibodi telah ditiadakan.
 sebagai media Pemurnian antibodi poliklonal untuk
membatasi tingkat reaktivitas silang dalam pengujiannya.
Kombinasi antibodi monoklonal mengarah pada
penangkapan beberapa epitop dan memperluas
spesifisitasnya.
 antibodi monoklonal menonjol dalam pengaturan klinis adalah kemampuannya untuk menemukan
dan menargetkan molekul tertentu. Daerah Fc antibodi monoklonal awalnya ditandai dengan
penanda dan digunakan untuk menemukan komponen permukaan seluler. Penelitian ini
mempromosikan antibodi monoklonal yang digunakan sebagai obat.
 OKT3 (juga disebut Muromonab) pertama kali disetujui oleh FDA pada tahun 1985 sebagai obat
penolakan transplantasi khusus untuk pasien transplantasi organ yang mencegah penyakit cangkok.
Sejak saat itu, empat puluh satu antibodi lainnya telah disetujui oleh FDA untuk melawan kanker,
artritis reumatoid, asma, dan penyakit lainnya. Antibodi monoklonal juga digunakan sebagai vektor
untuk membawa obat ke sel target (misalnya sel kanker). Ketika konjugat obat Antibodi bertemu
dengan sel target, obat dilepaskan dan memberikan efeknya.
 Antibodi poliklonal, sebaliknya, tidak seperti antibodi monoklonal dalam mengobati sel kanker
karena kurangnya spesifisitas dan tingkat reaktivitas silang yang tinggi. Penelitian menunjukkan
bahwa terapi antibodi poliklonal dapat bermanfaat dalam pengobatan beberapa penyakit dan
sebagai imunosupresan untuk pasien transplantasi.

TERAPI PENGOBATAN
 teknologi dengan menggabungkan sel normal dan
sel mieloma untuk membentuk suatu protein
tertentu.
 Dalam pembentukan MAB, dengan
menggabungkan sel B normal yang telah
diimunisasi dan sel B kanker (mieloma)
 Sel hibridoma mempunyai kemampuan untuk
tumbuh secara tidak terbatas dalam kultur sel,
sehingga mampu memproduksi antibodi
homogen yang spesifik (monoklonal) dalam
jumlah yang hampir tak terbatas

TEKNIK HIBRIDOMA
 chimeric MAB yaitu antibodi yang dibuat dengan
rekayasa genetika dengan mengubah rangkaian gen
pembentuk susunan protein dalam mencit/tikus
penghasil antibodi dengan gen pada manusia
sehingga menghasilkan antibodi yang 65% sama
dengan antibodi manusia.
 Humanized antibodies adalah antibodi dari spesies
non-manusia yang sekuens proteinnya telah
dimodifikasi untuk meningkatkan kesamaan pada
varian antibodi yang dihasilkan secara alami pada
manusia (90%).

JENIS ANTIBODY MONOKLONAL