PEMERIKSAAN BAKTERI TAHAN ASAM

DEFINISI DAN METODE PEMERIKSAAN BAKTERI TAHAN ASAM

DEFINISI

Bakteri tahan asam (BTA) merupakan bakteri yang memiliki ciri-ciri yaitu berantai karbon (C) yang
panjangnya 8 - 95 dan memiliki dinding sel yang tebal yang terdiri dari lapisan lilin dan asam lemak
mikolat, lipid yang ada bisa mencapai 60% dari berat dinding sel. Bakteri yang termasuk BTA antara
lain Mycobacterium tuberculose, Mycobacterium bovis, Mycobacterium leprae, Nocandia
meningitidis, dan Nocandia gonorrhoeae.

Mycobacterium tuberculose adalah bakteri patogen yang dapat menyebabkan penyakit tuberculose,
dan bersifat tahan asam sehingga digolongkan sebagai bakteri tahan asam (BTA). Penularan
Mycobacterium tuberculose terjadi melalui jalan pernafasan (Syahrurachman, 1994).

METODE

Ziehl Neelson

Pewarnaan Ziehl Neelson atau pewarnaan tahan asam memilahkan kelompok Mycobacterium dan
Nocandia dengan bakteri lainnya. Kelompok bakteri ini disebut bakteri tahan asam karena dapat
mempertahankan zat warna pertama (carbol fuchsin) sewaktu dicuci dengan larutan pemucat
(alkohol asam). Larutan asam terlihat berwarna merah, sebaliknya pada bakteri yang tidak tahan
asam karena larutan pemucat (alkohol asam) akan melakukan reaksi dengan carbol fuchsin dengan
cepat, sehingga sel bakteri tidak berwarna (Lay, 1994).

Dinding bakteri yang tahan asam mempunyai lapisan lilin dan lemak yang sukar ditembus cat. Oleh
karena pengaruh fenol dan pemanasan maka lapisan lilin dan lemak itu dapat ditembus cat basic
fuchsin. Pada waktu pencucian lapisan lilin dan lemak yang terbuka akan merapat kembali. Pada
pencucian dengan asam alkohol warna fuchsin tidak dilepas. Sedangkan pada bakteri tidak tahan
asam akan luntur dan mengambil warna biru dari methylen blue.

Prosedur pewarnaan Ziehl Neelson yaitu dengan memberi larutan pewarna carbol fuchsin, alkohol
asam, dan methylen blue. Hasil yang diperoleh saat praktikum yaitu positif 1 dan positif 2 yang
dilaporkan secara kuantitatif menurut IUAT, yaitu:

Negatif: apabila tidak ditemukan BTA.

Positif: apabila terdapat 1 9 BTA / 100 lapang pandang.

Positif 1: apabila terdapat 10 90 BTA / 100 lapang pandang.

Positif 2: apabila terdapat 1 9 BTA / 1 lapang pandang.

Positif 3: apabila terdapat > 10 BTA / 1 lapang pandang.

PRINSIP

Pewarnaan Ziehl Neelson atau pewarnaan tahan asam memilahkan kelompok Mycobacterium dan
Nocandia dengan bakteri lainnya. Kelompok bakteri ini disebut bakteri tahan asam karena dapat
mempertahankan zat warna pertama (carbol fuchsin) sewaktu dicuci dengan larutan pemucat
(alkohol asam). Larutan asam terlihat berwarna merah, sebaliknya pada bakteri yang tidak tahan
asam karena larutan pemucat (alkohol asam) akan melakukan reaksi dengan carbol fuchsin dengan
cepat, sehingga sel bakteri tidak berwarna (Lay, 1994).

B. TUJUAN PERCOBAAN

1. Untuk mengetahui bakteri tahan asam dan bakteri tidak tahan asam sampel sputum

2. Untuk membedakan antara bakteri tahan asam dan bakteri tidak tahan asam.

A. ALAT DAN BAHAN

1. ALAT

a. Objek Glass

b. Ose

c. Lampu Spirtus

d. Mikroskop

e. Gegep

f. Pipet Tetes

g. Korek api

h. Lidi

2. BAHAN

a. Karbol fuksin

b. Asam alcohol

c. Methilen Blue

d. Aquadest

e. Oil Imersi
C. PROSEDUR KERJA

1. Menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan

2. Membuat preparat dengan mengambil sampel dengan lidi lalu di usapkan pada object glass

3. Menambahkan karbol fuksin pada preparat

4. Memanaskan preparat selama 5 menit sampai terlihat uap ( Jangan sampai mendidih )

5. Mencuci dengan air mengalir

6. Menamhakan asam alcohol lalu di diamkan selama 20 detik

7. Mencuci dengan air mengalir

8. Menambahkan methilen blue dan di diamkan selama 1 menit

9. Mencuci dengan air mengalir

10. Keringkan , Lalu amati pada mikroskop dengan pembesaran lensa objektif 100 x dengan
menambahkann oil imersi

KESIMPULAN

Berdasarkan pengamatan yang di dilakukan di bawah mikroskop, dengan pembesaran 100x maka
dapat disimpulkan bahwa pada sampel ditemukan bakteri tahan asam ( BTA ) / Mycrobacterium
tuberculosis dengan status positif dua (+2).

DAFTAR PUSTAKA

http://ferrydwirestuhendra.blogspot.com/2013/01/laporan-praktikum-pewarnaan-tahan-asam.html

http://aiiudewa.blogspot.com/2013/12/laporan-bakteri-tahan-asam.html

www.academia.edu/9501486/Laporan_Pewarnaan_BTA

http://catatanenyrahayu.blogspot.com/2012/03/laporan-mikrobiologi-pewarnaan-bakteri.html

http://arsyinoviana.blogspot.co.id/2012/11/bakteribasil-tahan-asam-bta.html