Evaluasi perangkat pengelompokan system ABO dan Rh yang baru

Abstrak:

LATAR BELAKANG: Erycard 2.0 adalah perangkat "point-of-care" yang terutama digunakan untuk
pengelompokkan darah pasien sebelum transfusi.

BAHAN DAN METODE: Erycard 2.0 dibandingkan dengan teknologi slide konvensional untuk akurasi dan
waktu yang dibutuhkan untuk hasil pengelompokan ABO dan Rh dengan teknologi aglutinasi kolom
(CAT) menjadi standar emas. Erycard 2.0 sebagai alat juga dievaluasi untuk stabilitasnya di bawah
kondisi penyimpanan yang berbeda dan stabilitas hasilnya sampai 48 jam. Selain itu, pengelompokkan
sampel hemolitik juga diuji dengan Erycard 2.0. Kemudahan penggunaan Erycard 2.0 dievaluasi dengan
survei di antara staf paramedis.

HASIL: Erycard 2.0 menunjukkan konkordansi 100% dengan CAT dibandingkan dengan teknik slide
(98,9%). Rata-rata waktu yang dibutuhkan per tes oleh Erycard 2.0 dan teknik geser masing-masing
adalah 5,13 min dan 1,7 min. Setelah melakukan penyimpanan di bawah kondisi suhu dan kelembaban
yang berbeda, Erycard 2.0 tidak menunjukkan adanya penyimpangan dari hasilnya. Hasilnya tidak
berubah bahkan setelah 48 jam pengujian dan penyimpanan di bawah suhu kamar. Kesesuaian 100%
dicatat antara pengelompokkan darah pra dan pasca hemolitik. Kemudahan penggunaan survei
menunjukkan bahwa Erycard 2.0 lebih dapat diterima oleh staf paramedis karena kesederhanaan,
objektivitas, dan kinerjanya daripada teknik slide konvensional.

KESIMPULAN: Erycard 2.0 dapat digunakan sebagai perangkat "point-of-care" untuk skrining donor
darah untuk kelompok darah ABO dan Rh dan mungkin bisa menggantikan teknik slide konvensional.

Kata kunci:

Pengelompokan ABO, Teknologi Aglutinasi Kolom, penyaringan donor, kemudahan penggunaan,

Erycard, aliran lateral, titik perawatan, stabilitas

kata pengantar

Teknik serologis dasar dalam layanan transfusi darah adalah pengelompokan ABO dan Rh, yang
prinsipnya didasarkan pada reaksi aglutinasi spesifik antara antigen pada sel darah merah dan antibodi
dalam serum. Pengelompokan darah ABO dilakukan dalam dua tahap; tahap pertama adalah red cell
typing atau forward grouping dan langkah kedua adalah pengelompokan serum ( serum grouping ).
Namun, pengelompokan Rh dilakukan dalam satu langkah, yaitu forward grouping.

Ada berbagai macam tes analitis yang tersedia untuk pengelompokan golongan darah ABO dan Rh.
Beberapa adalah yang bersifat klasik seperti tes tabung atau tes slide, sedangkan beberapa metode saat
ini relatif modern seperti adhesi sel padat fase padat dan teknologi aglutinasi kolom (CAT).

Pengelompokan dengan metode slide memiliki banyak keterbatasan. Telah terbukti bahwa
pengelompokan slide harus selalu dilengkapi dengan teknik pengelompokan yang lebih kuat yang terdiri
dari pengelompokan sel dan serum. [1] Beberapa keterbatasan metode slide meliputi pengeringan
campuran reaksi, kesulitan dalam menginterpretasikan reaksi yang lebih lemah, mencampur campuran
reaksi, salah interpretasi karena pencampuran RBC dan antiserum yang tidak adekuat, tidak ada
reproduktifitas, dan banyak lainnya. [2] Meskipun kurang sensitif, teknik ini masih digunakan sebagai
teknik pendahuluan dan biasanya menjadi point-of-care (POC) karena kesederhanaan dan kemudahan
penggunaannya, terutama di tempat yang terbatas sumber daya. [3] Baru-baru ini, perangkat POC
Erycard 2.0 telah diperkenalkan untuk menentukan kelompok darah ABO dan Rh yang didasarkan pada
prinsip aliran lateral yang dipandu oleh tindakan kapiler. Ini mirip dengan pengelompokan slide dalam
hal kesederhanaan, kemudahan penggunaan, tidak memerlukan peralatan atau pelatihan ekstensif, dan
juga mengatasi beberapa keterbatasan pengelompokan slide.

Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengevaluasi dan membandingkan keakuratan Erycard 2.0
terhadap teknik slide konvensional dengan CAT sebagai standar emas. Selain itu, kemudahan
penggunaan, pengelompokan sampel hemolitik, kestabilan perangkat, dan kestabilan hasil yang
diberikan oleh Erycard juga diuji.

bahan dan metode

Pengaturan dan desain

Ini adalah penelitian analitis prospektif yang dilakukan di bank darah berbasis kesehatan tersier pada
donor darah dari bulan Juli sampai Agustus 2016. Bank darah mengumpulkan sekitar 25.000 unit whole
blood setiap tahunnya.

Uji pengelompokan darah Erycard ™ 2.0

Kartu pengelompokkan golongan Erycard 2.0 untuk pengelompokan ABO dan Rh (D) dengan autocontrol
didasarkan pada prinsip aliran lateral. Ini adalah perangkat POC yang diproduksi oleh Tulip Diagnostics
Ltd., Goa, India. Dengan menggunakan mikropipet volume tetap yang diberikan, 5 μl sampel darah
seluruh peserta tes ditambahkan ke masing-masing 4 sumur, memastikan bahwa hanya tetes darah yang
kontak dengan reagen. Setelah 1 menit, dua tetes buffer ditambahkan ke masing-masing sumur. Setelah
menunggu 3 menit, hasilnya diinterpretasikan. Autocontrol harus selalu menunjukkan patch yang tidak
berwarna untuk interpretasi yang valid.

Pengelompokan slide konvensional

Pada slide yang bersih, satu tetes Anti-A, Anti B, dan Anti-D diambil, dan tiga tetes darah ditambahkan
pada tetes antiserum. Setiap larutan dicampur dengan hati-hati dengan tongkat aplikator yang terpisah.
Slide digoyang bolak-balik perlahan selama sekitar 1 menit dan kemudian liat aglutinasi.

Teknologi Aglutinasi Kolom Otomatis

CAT dianggap sebagai metode standar emas untuk pengelompokan darah. Kelompok darah untuk
semua donor dilakukan dengan peralatan berbasis CAT otomatis (AutoVue Innova, Ortho Clinical
Diagnostics, Inggris). Teknologi ini bersifat obyektif, sensitif, mudah, dan relatif mudah dioperasikan.
Perbandingan pengelompokan darah antara slide dan Erycard 2.0

Untuk perbandingan akurasi pengelompokan darah antara slide dan Erycard 2.0

Perbandingan ini dilakukan pada 550 donor darah berturut-turut. Dengan menggunakan satu jari
tangan, sampel darah kapiler diambil untuk pengelompokan dengan slide dan Erycard. Pengelompokan
CAT di AutoVue dilakukan dari sampel vena yang diperoleh dari donor pada saat pemberian. Semua
sampel yang hasilnya sesuai dengan pengarsipan slide, Erycard dan AutoVue dianggap benar. Untuk
sampel yang ada ketidaksesuaian antara Erycard 2.0 dan slide; Hasil AutoVue dinilai final.

Untuk perbandingan rentang waktu untuk pengelompokan slide dan pengelompokan oleh Erycard 2.0

Perbandingan ini dilakukan pada tambahan lima puluh donor darah berturut-turut. Waktu yang
dibutuhkan untuk melakukan pengelompokan dengan slide dan Erycard diukur menggunakan stopwatch
yang dimulai dengan tusukan jari dan diakhiri dengan interpretasi hasil.

Evaluasi lain dari Erycard 2.0

Menilai efek suhu dan kelembaban pada alat

Untuk mempelajari pengaruh kondisi penyimpanan, suhu, dan kelembaban, 24 perangkat masing-
masing disimpan dalam empat lingkungan yang berbeda selama 30 hari dan kemudian diuji secara
bersamaan. Keempat lingkungan tersebut meliputi suhu tinggi dengan kelembaban tinggi, suhu tinggi
dengan kelembaban rendah, suhu rendah dengan kelembaban rendah, dan suhu rendah dengan
kelembaban tinggi. Kelompok kontrol dari 24 perangkat juga disimpan pada suhu optimum (2 ° C - 30 °
C), seperti yang dijelaskan dalam petunjuk pabrik pembuatnya. Kelembaban untuk kontrol dijaga antara
30% dan 35%.

Di semua pengaturan, wadah dan thermohygrometer diperiksa setiap hari selama 30 hari. Kartu diambil
pada hari ke 31. Dengan menggunakan 24 sampel darah donor yang diketahui (mengandung sampel Rh
D positif dan Rh D negatif), pengelompokan darah dilakukan pada perangkat yang disimpan dalam
pengaturan 1,2,3,4, dan kontrol secara bersamaan. Hasilnya dicatat dan dibandingkan.

Setting 1: Suhu tinggi dengan kelembaban tinggi.

Inkubator kering ditetapkan pada suhu 45 ° C. Buka wadah yang berisi air tempatkan di semua rak.
Sebuah thermohygrometer ditempatkan di dalam inkubator untuk mencatat suhu dan kelembaban.
Perangkat ditempatkan di inkubator. Kelembaban dipertahankan antara 70% dan 75%.

Setting 2: Suhu rendah dengan kelembaban tinggi.

Dua puluh empat perangkat ditempatkan dalam wadah dengan permukaan terbuka di ruang dingin.
Sebuah thermohygrometer ditempatkan di dalam wadah untuk mencatat suhu dan kelembaban. Suhu
berkisar antara 4 ° C dan 6 ° C, dan kelembaban dipertahankan antara 80% dan 85%.

Setting 3: Suhu tinggi dengan kelembaban rendah.

Dua puluh empat perangkat ditempatkan dalam wadah dengan termohygrometer, dan suhu ditetapkan
pada 45 ° C. Kelembaban dipertahankan antara 10% dan 15%.

Setting 4: Suhu rendah dengan kelembaban rendah.

Sebuah wadah kedap udara diambil dan disimpan di dalam inkubator, saat hangat dibawa keluar dan gel
silika ditempatkan di dalamnya bersamaan dengan 24 perangkat dan termohygrometer. Wadah itu
ditutup segera dan dibungkus dengan plastik dengan kencang. Wadahnya transparan, dan
thermohygrometer ditempatkan sedemikian rupa sehingga bisa dibaca setiap saat. Pengaturan ini
ditempatkan di ruangan dingin pada suhu 4 ° C-6 ° C, dan kelembaban dijaga antara 30% dan 35%.

Menilai kestabilan hasil pada Erycard 2.0

Untuk menguji kestabilan hasil yang diperoleh Erycard 2.0, pengelompokan darah dari lima puluh
sampel donor yang tidak diketahui telah dilakukan. Hasil awal dicatat, dan ini dianggap sebagai 0 h. alat
dibiarkan pada suhu kamar dan diinterpretasikan setiap 6 jam sekali. Interpretasi dicatat pada akhir
setiap 6 jam, dan ini dilakukan sampai 48 jam setelah itu alat tersebut dibuang.

Menilai efek hemolisis terhadap keakuratan pengelompokan darah oleh Erycard 2.0

Untuk menguji efek sampel hemolitik pada keakuratan alat, pengelompokan darah dari sampel yang
diketahui (5 masing-masing A positif, A negatif, B positif, B negatif, AB positif, AB negatif, O positif, dan
O negatif) dilakukan. oleh personil 1. Setelah merekam kelompok darah, sampel disentrifugasi, plasma
dikeluarkan, dan air suling ditambahkan ke sel darah merah dan disentrifugasi lagi. Setelah sentrifugasi,
supernatan diperiksa hemolisis, dan sampel hemolitik dicampur secara menyeluruh sebelum melakukan
pengelompokan darah. Pengelompokan darah menggunakan Erycard 2.0 dilakukan pada sampel
hemolitik ini dan dicatat oleh personil 2.

Survei untuk "kemudahan penggunaan" Erycard 2.0

Sebuah survei dilakukan untuk 28 staf paramedis yang bekerja di bank darah termasuk staf perawat dan
teknisi laboratorium untuk menilai penerimaan metode Erycard 2.0 daripada metode slide. Kuisioner
tersebut memiliki empat pertanyaan dan merupakan skala Likert 4 poin. Semua peserta dijelaskan
tekniknya dan diminta untuk melakukan hal yang sama pada sampel yang tidak diketahui. Setelah
melakukan tes, mereka diminta untuk mengisi kuesioner secara terpisah.

Analisis statistik

Perbedaan dalam pengelompokan hasil antara pengelompokan slide konvensional dan pengelompokan
darah oleh Erycard dianalisis sensitivitas dan spesifisitas untuk metode baru yang sudah di perhitungkan

Persetujuan komite etika

20 μl sampel darah whole blood yang dibutuhkan untuk pengujian golongan darah Erycard 2.0 diperoleh
dari tusukan jari yang sama dengan sampel untuk pengelompokan slide; Tusukan tambahan pun tidak
dilakukan. Karena tidak ada ketidaknyamanan donor yang terlibat dalam perolehan sampel, maka
institusi tersebut membebaskan persetujuan dan persetujuan etis

Hasil

Perbandingan pengelompokan darah antara metode slide konvensional dan Erycard 2.0 dilakukan pada
dua parameter; akurasi hasil pada 550 donor darah dan rentang waktu untuk menghasilkan tambahan
50 donor darah. Evaluasi Erycard 2.0 dilakukan pada empat parameter; Pengaruh suhu dan kelembaban
pada 96 perangkat, kestabilan hasil penelitian pada 50 perangkat, pengaruh hemolisis terhadap
ketepatan pengelompokan darah pada 40 perangkat, dan survei untuk kemudahan penggunaan juga
dilakukan.

Perbandingan pengelompokan darah antara slide dan Erycard 2.0

Perbandingan akurasi pengelompokan darah antara slide dan Erycard 2.0

Sebanyak 550 donor darah relawan yang sehat diuji oleh pengelompokan slide konvensional dan oleh
Erycard 2.0 dan dibandingkan dengan CAT (standar emas).

Hasil konkuren diperoleh pada sampel 544/550 (98,9%). Dari enam perbedaan yang terjadi, tidak ada
yang diberikan oleh Erycard. Nilai prediksi positif Erycard adalah 100% dan sensitivitasnya 100% [Tabel
1]. Dari enam perbedaan tersebut, satu adalah perbedaan ABO, sedangkan lima adalah perbedaan Rh
[Tabel 2].

Perbandingan rentang waktu untuk pengelompokan slide dan pengelompokan oleh Erycard 2.0

Waktu yang dibutuhkan untuk melakukan pengelompokan darah pada Erycard 2.0 dan metode slide
dicatat menggunakan stopwatch pada lima puluh sampel. Rata-rata waktu yang dibutuhkan dihitung
[Tabel 3].

Evaluasi Erycard 2.0

Menilai efek suhu dan kelembaban pada alat

Alat yang disimpan pada empat kondisi lingkungan yang berbeda selama 30 hari masing-masing
menunjukkan bahwa tidak ada pengaruh variasi suhu dan kelembaban terhadap keakuratan
pengelompokan darah oleh Erycard.

Menilai kestabilan hasil yang diperoleh Erycard 2.0

Semua lima puluh alat tidak menunjukkan penyimpangan dari hasil yang diobservasi pada interval 6 jam
sampai 48 jam.

Menilai efek hemolisis terhadap keakuratan pengelompokan darah oleh Erycard 2.0
Semua 40 tes menunjukkan kelompok darah yang sama sebelum dan sesudah hemolisis.

Survey untuk kemudahan penggunaan perangkat baru

Dua puluh delapan staf paramedis bank darah berpartisipasi dalam penelitian ini. Atas dasar tanggapan
yang diperoleh dari kuesioner, skor rata-rata untuk setiap pertanyaan dihitung [Tabel 4].

Diskusi

Bahkan saat ini, beberapa bank darah di India menggunakan pengelompokan slide sebagai metode
pendahuluan untuk pengelompokan darah. Saat ini, beberapa perangkat POC tersedia untuk
pengelompokan ke depan yang digunakan untuk pengelompokkan pasien, namun perangkat ini dapat
digunakan dalam skrining donor juga. Tes POC untuk kelompok darah ABO dan Rh menemukan
penggunaan dalam pelabelan utama kantong darah pada saat pemberian, yang diperlukan untuk
menjaga persediaan dan juga sebagai pemeriksaan pelabelan akhir kantong darah. Selanjutnya,
pengelompokan darah awal penting saat mencari donor golongan darah yang sama untuk melakukan
plateletpheresis dan untuk penyatuan darah dengan buffy coat.

Penelitian ini dilakukan untuk mengevaluasi Erycard 2.0 sebagai tes pengelompokan darah untuk
pemeriksaan donor darah. Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa penentuan ABO dan Rh dengan
perangkat POC sederhana mudah dan akurat. Meskipun pengelompokan slide masih digunakan di
banyak pusat, namun memiliki banyak kekurangan dan Erycard 2.0 dapat menggantikan pengelompokan
dengan slide di tempat di mana pengelompokan dapat membantu mengurangi kesalahan yang
menyebabkan transfusi darah tidak serasi.

Dalam penelitian ini, perangkat tersebut menunjukkan konkordansi 100% dengan CAT, standar emas.
Pada tahun 2015, El Kenz dan Corazza menguji alat uji aglutinasi POC ABO dan mengamati bahwa ada
100% kesesuaian antara perangkat pengujian POC dan instrumen laboratorium mereka. [4]

Namun, Dhruva dkk. [3] melakukan penelitian pada tahun 2015 mengenai keakuratan Erycard 2.0,
setelah itu mereka menyimpulkan konkordansi 97,6% antara hasil yang diperoleh oleh Erycard dan
dengan standar emas mereka (teknik tabung konvensional). [5] Mereka menemukan 7/300 perbedaan
pada sampel pasien yang diuji dan perbedaannya disebabkan oleh hematokrit rendah (<15%),
autoclumping, antibodi anti-A1, dan sampel hemolitik. Namun, karena penelitian ini dilakukan pada
sampel donor yang diperoleh dari bahan dasar jari, penyebab ketidaksesuaian yang disebutkan di atas
tidak sesuai dengan penelitian ini.

Perangkat ini dirancang sebagai tes POC untuk digunakan dengan whole blood yang baru diperoleh.
Evaluasi Erycard 2.0 dilakukan dengan menggunakan whole blood dari bahan dasar jari. Ini adalah
keuntungan dari penelitian yang dilakukan oleh Thomas Herold dkk, yang melakukan pengujian
terhadap sampel tersimpan yang telah dikumpulkan sebelumnya. [6] Hemolisis dan degradasi sampel
dapat terjadi akibat penanganan variasi dan penyimpanan yang lama dan dengan demikian
menyebabkan penyimpangan pada hasil. Dalam penelitian ini, ada perbedaan yang signifikan dalam
waktu rata-rata yang diambil untuk pengelompokan darah oleh Erycard 2.0 dan oleh slide. Meski waktu
yang dibutuhkan oleh Erycard lebih, metode ini kurang berantakan dan lebih obyektif dibandingkan
dengan metode slide pengelompokan darah.

Pada tahun 2009, Bienek dkk. melakukan penelitian untuk menguji kestabilan alat typing blood yang
mudah digunakan yang disimpan di bawah kondisi lapangan militer yang khas. Kit Eldon Home
2511(Eldon Biological A/S, Denmark) dan kombinasi blood typing ABO-Rh digunakan. Tidak ada
perbedaan yang ditemukan antara hasil dari peralatan yang tersimpan dalam kondisi penyimpanan yang
dimanipulasi dan yang tersimpan pada kondisi penyimpanan optimal. Hasil ini serupa dengan hasil yang
diperoleh dalam penelitian ini, yang menunjukkan bahwa selama transportasi, bahkan jika perangkat
terkena kondisi suhu dan kelembaban yang tidak menguntungkan, keakuratan pengelompokan darah
yang diperoleh Erycard 2.0 tidak terpengaruh.

Dalam penelitian ini, tidak ada penyimpangan yang diamati pada semua perangkat yang diuji dari hasil
awal, sampai 48 jam setelah pengujian. Sesuai petunjuk pabrikan, untuk hasil yang stabil, perangkat
harus disimpan dalam penutup tertutup tanpa kontaminasi di tempat yang sejuk dan kering, dan hindari
terkena sinar matahari langsung dan panas. Perangkat yang diuji dalam penelitian ini dibiarkan terbuka
pada suhu kamar yang dijaga antara 20 ° C dan 24 ° C secara normal. Pengamatan ini penting bila
hasilnya perlu disimpan untuk mengatasi perbedaan pengelompokan darah sementara pelabelan
kantong darah dan juga ketika donor datang ke bank darah dengan keraguan tentang golongan darah
mereka.

Sampel hemolitik dapat menghasilkan hasil yang keliru dari banyak tes laboratorium termasuk pengujian
golongan darah. Supernatan hemoglobin dapat menghasilkan perbedaan antara kelompok forward dan
reserve. Makanya, menentukan golongan darah tepat sampel hemolitik itu sulit. Dalam penelitian ini,
diamati bahwa Erycard 2.0 menentukan semua golongan darah (A positif, A negatif, B positif, B negatif,
AB positif, AB negatif, O positif, dan O negatif) dari sampel hemolitik dengan benar. Pengamatan ini
sangat penting karena bahkan dengan teknik yang paling sensitif sekalipun, terkadang layanan transfusi
tidak dapat mengomentari kelompok darah sampel hemolitik.

Hasil yang diperoleh dari survei yang dilakukan untuk staf paramedis menyatakan staf setuju bahwa
perangkat baru mudah dipelajari, mudah diingat, mudah dilakukan, mudah diinterpretasikan, dan
merupakan alat yang mudah dioperasikan. Staf memilih Erycard 2.0 karena pengelompokan slide karena
kerapiannya, tidak ada pengeringan campuran reaksi, dan sedikit kemungkinan cedera yang tajam.

Kesimpulan

Erycard 2.0 mudah digunakan dan diinterpretasikan bahkan dengan minimnya pelatihan staf bank darah
dapat melakukan pengelompokan darah dengan mudah. Perangkat ini bisa menjadi alat yang berguna
untuk menentukan golongan darah sampel hemolitik. Keakuratan perangkat secara keseluruhan lebih
baik daripada teknik slide dan oleh karena itu dapat digunakan sebagai metode pengujian kelompok
darah pendahuluan.
Sambutan

Penulis ingin berterima kasih kepada Tulip Diagnostics Private Limited, Goa, India, karena menyediakan
perangkat yang bebas biaya.

Dukungan finansial dan sponsor

Tidak ada

Konflik kepentingan

Tidak ada konflik kepentingan.

Tabel 1: Perbandingan akurasi pengelompokan darah antara slide dan Erycard 2.0

Pengelompokan slide Pengelompokan Erycard 2.0

konvesional ( %)
Hasil yang benar 544 ( 98.9 ) 550 ( 100 )
Hasil yang salah 6 ( 1.09 ) 0
Total 550 550

Tabel 2: Jenis ketidaksesuaian

Nomor sampel Pengelompokan Pengelompokan Pengelompokan Jenis

dengan slide dengan erycard dengan CAT Ketidaksesuaian
47 A positif O positif O positif ABO
179 B negatif B positif B positif Rh
268 O positif O negatif O negatif Rh
392 AB negatif AB positif AB positif Rh
438 A positif A negatif A negatif Rh
475 B positif B negatif B negatif Rh

Tabel 3: Perbandingan rentang waktu untuk pengelompokkan slide dan pengelompokan oleh Erycard
2.0

Teknik Waktu yang dibutuhkan (menit) Jarak (menit)

Slide 1.7 1.43 – 1.93
Erycard 2.0 5.13 4.67 – 5.77
Tabel 4: Survei untuk kemudahan penggunaan perangkat baru

Pertanyaan Nilai Total (n=28) Skor Rata – Rata

Pengelompokan dengan
perangkat mudah dipelajari, 96 3.42
diingat, dan dilakukan
Pengelompokan menurut
perangkat mudah
100 3.57
diinterpretasikan

Pengelompokan menurut
96 3.42
perangkat mudah di operasikan
Preferensi perangkat diatas
pengelompokan slide berkaitan
97 3.46
dengan kerapihan

Preferensi perangkat di atas

pengelompokan slide berkaitan
dengan pengeringan campuran 97 3.46
reaksi

Preferensi perangkat di atas

pengelompokan slide berkaitan
dengan kemungkinan cedera 100 3.57
yang lebih rendah