LAPORAN HEMATOLOGI II

PEMERIKSAAN PROTOMBIN TIME / PT

( Masa Protrombin )

Oleh

Ida Ayu Sinta Sasmitha Dewi Suta

P0713407062

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN DENPASAR

JURUSAN ANALIS KESEHATAN

2019
Hari / tanggal : Kamis, 18 April 2019

I. TUJUAN
Menentukan aktivitas faktor – faktor pembekuan jalur ekstrinsik dan
jalur bersama ( Protrombin, FV, FVII, FX )

II. METODE
Metode yang digunakan adalah metode electromechanical clot
detection dengan menggunakan alat Semiotomatis CoaData 4004.

III. PRINSIP
Tromboplastin jaringan dan ion kalsium ditambahkan kedalam plasma
sitrat, kemudian lamanya waktu yang diperlukan untuk terjadinya
pembekuan fibrin.

IV. DASAR TEORI

Waktu protrombin (PT) adalah tes yang membantu mengevaluasi
kemampuan Anda untuk membentuk gumpalan darah secara tepat. Rasio
normalisasi internasional atau INR adalah perhitungan berdasarkan hasil
PT yang digunakan untuk memantau individu yang sedang dirawat dengan
obat pengencer darah (antikoagulan) .PT mengukur jumlah detik
yangdiperlukan untuk bekuan untuk terbentuk dalam sampel darah setelah
zat (reagen) ditambahkan. PT sering dilakukan bersama dengan waktu
tromboplastin parsial (PTT) dan bersama-sama mereka menilai jumlah dan
fungsi protein yang disebut faktor koagulasi yang merupakan bagian
penting dari pembentukan bekuan darah yang tepat. Tes PT mengevaluasi
seberapa baik semua faktor koagulasi dalam jalur ekstrinsik dan umum
dari kaskade koagulasi bekerja bersama.Termasuk di dalamnya adalah:
faktor I (Fibrinogen), II (Prothrombin), V, VII dan X.PT / INR dapat
dilakukan bersamaan dengan PTT, yang mengevaluasi faktor pembekuan
yang merupakan bagian dari jalur intrinsik dan umum: XII, XI, IX, VIII,
X, V, II (protrombin), dan I ( fibrinogen) serta prekallikrein (PK) dan
kininogen berat molekul tinggi (HK) (Rathod, Nair, Mammen, & Singh,
2015).
Waktu protrombin (PT) digunakan untuk memantau terapi
antikoagulan oral dan juga sebagai tes skrining pra operasi untuk
memperingatkan kemungkinan risiko perdarahan pada pasien dengan
riwayat perdarahan pribadi atau keluarga. Waktu pembekuan yang terukur
sangat tergantung pada hewan dan sumber jaringan serta kualitas
tromboplastin yang digunakan. Variabilitas dapat diharapkan karena
ketergantungan uji pada jumlah molekul faktor jaringan dan jumlah
permukaan membran yang disediakan oleh tromboplastin. Untuk
meningkatkan komparabilitas pengukuran waktu protrombin,
tromboplastin distandarisasi dengan membandingkannya dengan
tromboplastin referensi internasional. Tromboplastin terstandarisasi
dijelaskan oleh sejumlah, Indeks Standardisasi Internasional (ISI), yang
menghubungkan tromboplastin dengan standar internasional (Mishra,
Panda, & Das, 2013) .
Defisiensi faktor VII mempengaruhi PT paling sensitif, sedangkan
defisiensi faktor II (protrombin) dan fibrinogen menunjukkan efek yang
paling sedikit. Aplikasi utamanya adalah dalam skrining kelainan
koagulasi bawaan dan didapat dan memantau pengobatan antagonis
vitamin K. Penambahan tromboplastin, yang terdiri dari faktor jaringan
ditambah fosfolipid, bersama dengan penambahan kalsium klorida
memulai uji PT. Waktu yang diperlukan untuk pembentukan bekuan fibrin
kemudian ditentukan dengan metode optik atau mekanis Unit pengukuran
hasil PT adalah detik, dengan kisaran klasik sekitar 10-13 s (Rathod et al.,
2015).
V. ALAT DAN BAHAN
Alat :
 Semiotomatis CoaData 4004
 Kuvet dan stirrer
 Mikropipet
 Yellow tip

Bahan :

 Control
 Reagen uniplasmin
 Darah dengan antikoagulan sitrat

VI. CARA KERJA

a. Persiapan Sampel
1. Tabung penampung plasma sitrat harus terbuat dari plastik,
bertutup rapat ( Centrifuge Tube )
2. Segera lakukan pemeriksaan, bila ditunda hanya dalam batas waktu
+ 2 jam setelah pengambilan pada suhu kamar.
3. Jangan menginkubasi plasma pada suhu 370C > 1 menit
b. Persiapan dan penyimpanan Control
1. Larutkan bahan control dengan 1,0 ml aquadest dan didiamkan
selama 5 menit pada suhu kamar agar terjadi rehidrasi.
2. Homogenkan hingga larut dengan sempurna selama 15 menit
dengan menggunakan Mixer Roller.
3. Diamkan kembali pada suhu kamar selama 20 menit.
4. Bagilah sebanyak yang dibutuhkan ke tabung plastic bertutup rapat
( Centrifuge Tube ) dan segera simpan pada suhu 2-80 C.
5. Ambil bila dibutuhkan dan diamkan pada suhu kamar sebelum
digunakan. Kontrol yang sudah dipakai tidak boleh disimpan
kembali ke lemari es.
 6. Stabilitas bahan control hanya 8 jam pada suhu 2-80C dan rentan
terhadap perubahan suhu.
c. Persiapan dan Penyimpanan Reagen
1. Reagen cair uniplastin adalah reagen siap pakai, diamkan terlebih
dahulu pada suhu kamar setelah dikeluarkan dari lemari es dan
kemudian homogenkan.
2. Pindahkan seperlunya untuk pemeriksaan ke tabung reagen yang
baru ( penambahan reagen baru harus menggunakan tabung baru
jangan dicampur dengan yang lama )
3. Simpan kembali sisa reagen ke lemari es dengan segera di suhu 2 –
8 0 C ( jangan dibekukan ).
4. Bila dibutuhkan kembali, ambil seperlunya dan diamkan pada suhu
kamar sebelum digunakan.
5. Inkubasi reagen uniplastin pada alat ( suhu 370C ) tidak boleh lebih
dari 30 menit, bila lebih dari 30 menit reagen akan rusak.
d. Langkah – langkah pemeriksaan PT :
1. Pada keadaan STANDBY tanpa kuvet untuk semua chanel
pengukuran, pada layar akan tertera nilai temperatur dari blok
inkubasi dan juga metode pemeriksaan yang dipilih. Gunakan
kursor [ / ] untuk memilih metode pemeriksaan PT. Tekan
Enter untuk melakukan pemeriksaan PT.
2. Alat akan melakukan pembacaan nilai blanko secara otomatis.
3. Pipet 50 ul plasma sitrat masukkan kedalam kuvet yang berisi
stirrer. Buka light protection cap dan segera masukkan kuvet
dengan tepat ke dalam chanel pengukuran. Tutup kembali light
protection
4. Alat akan secara otomatis mengenali kuvet yang dimasukkan dan
timer akan menghitung mundur waktu inkubasi plasma sitrat.
5. Sinyal suara akan terdengar untuk mengindikasikan sisa waktu
inkubasi 5 detik.
 6. Setelah waktu inkubasi selesai alat dalam keadaan adjS ( adjust
Sample ) artinya alat akan sedang melakukan penyesuaian sinyal
untuk sampel.
7. Pipet 100 ul reagen PT-S yang telah diinkubasi ( prewarmed ) dan
masukkan tip pipet melalui light protection cap secara tegak lurus
dan lakukan pemipetan dengan cepat.
8. Segera setelah hasil diperoleh maka printer secara otomatis akan
mencetak hasil dalam Detik dan INR.
9. Keluarkan kuvet dari channel pengukuran diikuti dengan menekan
tombol CH(n) ( sesuai letak kuvet dalam channel pengukuran )

VII. NILAI RUJUKAN

11 – 15 detik
Range kontrol PT : 15, 2detik
: 12,5 – 18,0 detik

VIII. HASIL PENGAMATAN

Nama : I Made Rai Widiantara
Umur :20 tahun
Jenis Kelamin : laki-laki
Hasil :
Kontrol : 32, 6 detik
Sampel : 37 detik

IX. PEMBAHASAN
Di dalam tubuh, ketika ada cedera dan perdarahan terjadi, proses
pembekuan yang disebut hemostasis dimulai. Proses ini melibatkan
sebagian rangkaian reaksi kimia berurutan yang disebut kaskade koagulasi,
di mana koagulasi atau faktor "pembekuan" diaktifkan satu demi satu dan
menghasilkan pembentukan bekuan. Harus ada jumlah yang cukup dari
masing-masing faktor koagulasi, dan masing-masing harus berfungsi
dengan baik, agar pembekuan normal terjadi. Terlalu sedikit dapat
menyebabkan pendarahan yang berlebihan; terlalu banyak
dapatmenyebabkan pembekuan yang berlebihan.Dalam tabung reaksi
selama uji laboratorium, ada dua "jalur" yang dapat memulai pembekuan,
yang disebut jalur ekstrinsik dan intrinsik. Keduanya kemudian bergabung
menjadi jalur bersama untuk menyelesaikan proses pembekuan.Proenzim
yang secara khas ada sebagai tidak aktif dalam ruang intravaskular
bersama dengan kofaktor, kation, dan fosfolipid yang berhubungan dengan
sel terdiri dari sistem koagulasi. Dua mekanisme utama, jalur intrinsik dan
ekstrinsik, yang bergabung untuk menghasilkan trombin menggunakan
jalur umum yang ditandai dengan serangkaian reaksi enzimatik yang
saling terkait, mengaktifkan koagulasi.Jalur klasik ini membentuk dasar
dari dua tes koagulasi yang paling sering dilakukanpadaPT mengukur jalur
ekstrinsik dan umum (Mishra et al., 2013).
Waktu protrombin (PT) secara rutin digunakan untuk mengevaluasi
efek artikel uji pada pembekuan darah dalam studi toksikologi umum. PT
adalah tes jalur koagulasi ekstrinsik (juga disebut jalur faktor jaringan),
yang mencakup faktor VII, X, V, dan II. APTT menguji jalur intrinsik
(juga disebut jalur amplifikasi atau sistem kontak), yang mencakup faktor
XII, XI, IX, VIII, X, V, dan II. Ada perbedaan dalam konsentrasi faktor
koagulasi individual antara spesies, dan perbedaan antar spesies dalam
sensitivitas terhadap berbagai artikel uji. Faktor II, VII, IX, dan X
bergantung pada Vitamin K untuk sintesisnya. Vitamin K adalah vitamin
yang larut dalam lemak yang dikonsumsi dalam makanan dan disintesis
oleh bakteri di saluran usus. Senyawa yang mengganggu Vitamin K (mis.
Persiapan dosis tinggi lemak sintetik, warfarin, broadifacoum, antibiotik
spektrum luas, sefalosporin, resin α-tokoferol intravena, resin
cholestyramine intravena) adalah contoh artikel uji yang dapat
menyebabkan peningkatan nyata pada PT . Defisiensi diet atau sindrom
malabsorpsi juga dapat mengakibatkan rendahnya ketersediaan Vitamin K.
Karena faktor VII memiliki waktu paruh terpendek, defisiensi pada faktor
ini dengan cepat akan mengakibatkan perpanjangan PT.Penilaian
konsentrasi vitamin Kplasma dimungkinkan dengan spektroskopi massa,
tetapi mahal, tidak tersedia, dan tidak rutin. Efek buruk pada Vitamin K
umumnya tidak dikenal dalam studi toksikologi non-klinis (Rathod et al.,
2015).
Perbedaan kecil (mis., 2 detik atau <20%) di PT mungkin signifikan
secara statistik tanpa secara biologis bermakna. Interpretasi perubahan uji
koagulasi membutuhkan pertimbangan banyak faktor, termasuk aktivitas
farmakologis artikel uji, pengamatan klinis korelatif potensial (seperti
perdarahan retina atau melena), dan temuan histopatologis korelatif yang
potensial, terutama yang berkaitan dengan pembuluh darah atau hati.
Pertimbangan juga harus diberikan pada temuan dalam penelitian
sebelumnya dengan artikel uji, atau kemungkinan perubahan artifaktual
palsu karena pengumpulan darah yang sulit.Mungkin lebih sulit untuk
mengumpulkan sampel darah dengan kualitas baik atau volume yang
memadai dari hewan yang kesehatannya buruk atau mengalami dehidrasi,
dan peningkatan rasio antikoagulan sitrat terhadap plasma dapat
menyebabkan peningkatan artifaktual PT. Nilai sering meningkat pada
sampel kelinci ketika dikumpulkan oleh fllebotomis kelinci yang tidak
berpengalaman, dan PT yang berkepanjangan telah dikaitkan dengan puasa
pada tikus. Efek penyimpanan dan pembekuan pada PT berbeda menurut
spesies.Fungsi hati jugadapat mempengaruhi produksi faktor koagulasi
karena banyak faktor koagulasi disintesis di hati. Karena hati sering
menjadi sasaran uji toksisitas terkait artikel, interpretasi terpadu hasil
koagulasi dan kimia klinis lebih hati-hati (Nnenna Adaeze, Uchenna
Emeribe, Abdullahi Nasiru, Babayo, & Uko, 2014).
Pemeriksaan PT dilakukan dalam dua tahap. Pada tahap pertama,
pereaksi PT yang terdiri dari sejumlah standar fosfolipid procoag-ulant dan
aktivator kontak ditambahkan ke plasma antikoagulasi sitrat. Setelah
waktu inkubasi standar, kalsium klorida ditambahkan dan waktu
pembekuan diukur. Aktivator berbeda tetapi umumnya kaolin, silika, asam
ellagic, atau zat bermuatan negatif lainnya. Dalam beberapa waktu
terakhir, peningkatan volume uji koagulasi dan anggaran personel yang
terbatas meningkat minat dalam analisis koagulasi otomatis. Instrumen
koagulasi ini melakukan tes yang memungkinkan penentuan defek
hemostatik dan memantau pengobatan antikoagulan. Sebagian besar tes PT
didasarkan pada identifikasi gumpalan fibrin sebagai titik akhir. Analisis
koagulasi sepenuhnya otomatis dapat secara otomatis mengirimkan reagen
dan sampel plasma ke kuvet reaksi, deteksi sampel barcode, melakukan
pengenceran dan penyimpanan data komputer sampel pasien, dan
mengontrol hasil dan kurva kalibrasi.Seperti praktikum yang telah
dilakukan dengan menggunakan alat otomatis, praktikum yang dilakukan
dengan membuat control terlebih dahulu sampel yang digunakkan adalah
sampel probandus atas nama I Made Rai Widiantara, berumur 20 tahun
jenis kelamin laki- laki hasil yang di dapatkkan sebesar 15,2 detik. Hasil
ini menunjukkan bahwa nilai PT probandus di atas normal atau nilai PT
mengalami perpanjangan.Hal ini dapat disebabkan oleh kekurangan atau
pemanfaatan faktor-faktor atau oleh inhibitor seperti heparin. Hasil dari
pengujian ini sangat tergantung pada sistem reagen dan instrumentasi, oleh
karena itu menetapkan rentang / interval referensi in-house adalah penting
karena perbandingan dengan rentang yang dipublikasikan atau rentang
yang didirikan di laboratorium lain tidak mungkin bermakna. Pengujian ini
relatif tidak sensitif dan tidak spesifik, karena aktivitas faktor pembekuan
tunggal harus dikurangi hingga sekitar 30% dari normal sebelum terjadi
perpanjangan PT yang berarti untuk diagnosis suatu penyakit pada
seseorang (Rathod et al., 2015).
X. KESIMPULAN
Berdasarkan pemeriksaan PT pada probandus atas nama I Made Rai
Widiantara berumur 20 tahun, berjenis kelamin laki-laki didapatkan hasil
sebesar 37 detik. Hal ini menunjukkan bahwa nilai PT diatas normal.
 DAFTAR PUSTAKA

Rathod, N., Nair, S., Mammen, J., & Singh, S. (2015). A comparison study of routine
coagulation screening tests (PT and APTT) by three automated coagulation
analyzers. International Journal of Medical Science and Public Health, 5(8),
1563. https://doi.org/10.5455/ijmsph.2016.13112015254
Mishra, N. R., Panda, P. C., & Das, S. (2013). Prothrombin Time & International
Normalized Ratio in Pediatric Liver Disease. Journal of Global Biosciences,
2(6), 241–246.
Nnenna Adaeze, N., Uchenna Emeribe, A., Abdullahi Nasiru, I., Babayo, A., & Uko,
E. K. (2014). Evaluation of Prothrombin Time and Activated Partial
Thromboplastin Time in Hypertensive Patients Attending a Tertiary Hospital in
Calabar, Nigeria. Advances in Hematology, 2014, 1–7.
https://doi.org/10.1155/2014/932039