ISOLASI SENYAWA DARI EKSTRAK METILEN KLORIDA KULIT

BATANG PALIASA (Kleinhovia hospita Linn)*)

ISOLATION OF STEROID CAMPOUNDS FROM METHYLENE

CHLORIDE EXTRACTS OF PALIASA BARK (Kleinhovia hospita Linn)**)

Rabianti ***)

Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi senyawa golongan steroid yang terdapat
dalam ekstrak metilen klorida pada kulit batang paliasa (K.hospita Linn) yang berasal dari
daerah Nipa-nipa kecamatan Manggala, Makassar. Isolasi dilakukan melalui beberapa
tahap yaitu maserasi, fraksinasi, uji kemurnian, dan identifikasi. Hasil penelitian diperoleh
kristal murni berwarna putih bening dengan titik leleh 134-1350C. Hasil uji dengan pereaksi
Lieberman-Buchard berwarna kuning kehijauan dan uji spektroskopi UV-vis dengan
daerah serapan maksimum 214,80 nm menunjukkan kristal bukan senyawa fenolik. Daerah
serapan spektrum IR yang tampak menunjukkan adanya beberapa gugus fungsi pada
panjang gelombang (cm-1) yakni 1058, 1377, 1643, 1462, 2864, 2935, 2958 dan 3446 yang
cenderung memiliki kesamaan spektrum dari senyawa steroid yang telah berhasil
diidentifikasi. Berdasarkan uji pereaksi serta data spektrum UV-Vis dan IR, kristal yang
diperoleh merupakan golongan senyawa steroid.

Kata Kunci: Isolasi, K.hospita Linn, Steroid

Abstack
The research is aimed to isolate steroid compound of methylene chloride extract of
paliasa stem bark (K. hospita Linn) which taken from Nipa-nipa, Manggala subdistrict,
Makassar regency. The isolation of steroid compound done by few steps, those are
maseration, fractionation, purity test, and identification. Result showed that white crystal
has melting point on 134-1350C. Reagent test results with Lieberman-Buchard yellow-
green and UV-vis spectroscopy test with maximum absorption 214,80 nm indicates instead
of phenolic compounds. FTIR spectroscopy spectrum that seems to suggest the presence
of some functional groups on the wavelength (cm-1) 1058, 1377, 1643, 1462, 2864, 2935,
2958 and 3446 are likely to have the same spectrum of steroid compounds that have been
identified. Based on the test reagent and UV-Vis spectral data and IR, crystals obtained by
a steroid compound.

Keywords. Isolation, K.hospita Linn, Steroid.

PENDAHULUAN
Indonesia memiliki banyak
keanekaragaman tumbuhan tropis dan
merupakan salah satu pusat penyebaran
tumbuhan tropis di dunia. Tumbuhan
tropis diyakini memiliki kemampuan
merekayasa beranekaragam senyawa
kimia yang bersifat bioaktifitas.
Kemampuan tersebut salah satunya
adanya mekanisme pertahanan diri
terhadap ancaman lingkungan, baik
berupa faktor iklim maupun gangguan
dari herbivora, serangga, dan hama
penyakit.
1

*) Makalah diambil dari Skripsi a.n. Sugiarti.S Jurusan Kimia 2009

**) Makalah dibawakan pada seminar matakuliah Seminar Kimia
***) Mahasiswa Kimia Angkatan 2015
 Tumbuhan paliasa (Kleinhovia
hospita Linn) merupakan salah satu
tumbuhan tropis yang tersebar luas di
Negara Indonesia. Tumbuhan ini
termasuk dalam famili sterculiaceae
yang secara tradisional telah lama
dikenal oleh masyarakat khususnya di
Sulawesi Selatan sebagai tumbuhan
berkhasiat yang dapat mengobati
berbagai macam penyakit seperti
penyakit liver, hepatitis, kolesterol
tinggi, gula dan hipertensi (Herlina,
1993). Banyaknya manfaat dari
tumbuhan K.hospita Linn menunjukkan
adanya senyawa metabolit sekunder
yang beragam sehingga sangat potensial
untuk diteliti.
Beberapa senyawa kimia telah
ditemukan pada tumbuhan K.hospita
Linn melalui penelitian yang telah
dilakukan oleh para ahli. Tumbuhan
K.hospita Linn diyakini dapat
menghasilkan senyawa-senyawa
metabolit sekunder yang memiliki
bioaktifitas menarik. Hasil penelitian
secara umum, kulit pohon K.hospita
Linn mengandung minyak atsiri,
triterpenoid, senyawa sianogenik yang
berfungsi membunuh ektoparasit seperti
kutu juga mengandung asam lemak dan
cincin siklopropenil yang terdiri atas
scopoletin, kaempferol dan quercetin
(Alfian, N,dkk., 2004). Hasil penelitian
lain yang dilakukan pada tumbuhan ini,
telah banyak memberi bukti nyata
adanya kandungan senyawa yang sangat
besar potensinya dan dapat digunakan
sebagai obat atau hal yang berkaitan
seperti untuk pangan, insektisida, dan
bahan industri. Penelitian tersebut
diantaranya ditemukan adanya
golongan senyawa flavonoid dan
alkaloid pada ekstrak etanol daun
K.hospita Linn (Taebe,B., 2004).
Selanjutnya pada ekstrak metilen
klorida sebelumnya sudah diteliti oleh
wiwi (2005) dan ditemukan senyawa
turunan kumarin pada daun tumbuhan
K.hospita Linn. Penelitian yang telah
dilakukan oleh Gaffar,I (2010) pada
kayu batang tumbuhan K.hospita Linn
dengan ekstrak metilen klorida
menemukan adanya senyawa golongan
terpenoid tersubstistusi benzena yang
sangat aktif terhadap Artemia salina.
Selain itu, pada fraksi n-heksan kulit
batang K.hospita Linn mengandung
senyawa yang diperkirakan merupakan
senyawa fenilpropanoid dalam bentuk
ester yang cukup toksik terhadap A.
salina (Ulfa,M., 2007).
Penelitian pada kulit batang
K.hospita Linn dengan ekstrak
kloroform (Nunuk, H., 2008)
mengungkapkan adanya senyawa
kumarin. Senyawa turunan triterpen
yang diduga senyawa lupeol dan
senyawa golongan fenol yang diduga
merupakan turunan senyawa stilben
telah ditemukan pada kulit batang
K.hospita Linn dengan ekstrak
kloroform (Dini, I., 2006). Penelitian
lain tentang penentuan golongan
senyawa pada kayu batang tumbuhan
K.hospita Linn melalui uji Liebermann-
Burchard menyimpulkan adanya
senyawa golongan terpenoid (Gaffar,
I,dkk., 2008). Selanjutnya penelitian
yang telah dilakukan oleh Raflizar
(2000) menyimpulkan adanya golongan
2
senyawa kimia saponin, cardenolin,
bufadienol serta antrakuinon pada daun
tumbuhan paliasa. Senyawa β-sitosterol
pada tumbuhan K.hospita Linn telah
diidentifikasi oleh Dini,I (2006) dengan
ekstrak kloroform dan Gaffar,I (2010)
dengan ekstrak n-heksan.
Uraian diatas menunjukkan
banyaknya senyawa yang dapat
ditemukan pada tumbuhan K.hospita
Linn. Salah satu senyawa yang
berpotensi untuk diisolasi pada
tumbuhan ini yaitu turunan senyawa
golongan triterpenoid yang telah
berhasil diidentifikasi oleh peneliti
dahulu. Selain itu, senyawa golongan
steroid yang dapat terbentuk dari proses
penataan kerangka utama squalen
(Gambar 2.7) juga berpotensi besar
diisolasi pada tumbuhan paliasa dan
telah dibuktikan dengan ditemukannya
senyawa β-sitosterol. Senyawa ini
memiliki efek farmakologis yaitu
mampu menghambat kerja enzim yang
mengkonversi testoteron menjadi
dehidrostestosteron yang merupakan
penyebab terjadinya kanker prostat
(Slaga & Keuneke, 2005 dalam
Gaffar,I., 2010). Beradasrakan hal
tersebut sehingga penelitian ini
dilakukan untuk mengisolasi dan
mengidentifikasi senyawa metabolit
sekunder khususnya senyawa steroid
menggunakan pelarut semipolar yaitu
pelarut metilen klorida.
METODE PERCOBAAN
Alat
Alat yang digunakan terdiri dari
beberapa alat-alat kaca yang sering
digunakan, seperangkat alat destilasi,
corong Buchner, chamber untuk wadah
KLT, pipa kapiler untuk penotol,
kemudian alat kolom kromatografi yang
utama seperti KKCV dan KKT yang
digunakan untuk fraksinasi ekstrak dari
proses maserasi. Kemudian beberapa
alat instrumen seperti; oven, lampu UV
365 nm, neraca analitik, evaporator, alat
penentuan titik leleh mikro,
spektroskopi UV-VIS dan spektroskopi
Inframerah untuk elusidasi struktur.
Bahan
Bahan-bahan yang digunakan
yaitu kulit batang tumbuhan paliasa,
pelarut-pelarut yang berkualitas teknis
yang telah didestilasi seperti metanol
yang digunakan untuk maserasi, metilen
klorida untuk fraksinasi. Pelarut
berkualitas (pa) digunakan pada proses
kristalisasi dari senyawa yang
berbentuk kristal yang diperoleh,
Larutan serium sulfat (CeSO4) 2 %
dalam asam sulfat 2 N sebagai larutan
penyemprot plat KLT untuk penampak
noda. Pereaksi Liebermann Burchard
untuk uji kualitatif senyawa triterpen
dan steroid serta pereaksi Dragendroff
untuk uji kualitatif senyawa alkaloid.
Prosedur Kerja
Persiapan bahan tumbuhan
Kulit batang paliasa diambil dan
dikumpulkan dari daerah nipa-nipa
kecamatan manggala, Makassar,
Sulawesi selatan. Sampel kulit batang
tumbuhan paliasa yang diambil terlebih
dahulu dibersihkan, dikeringkan
diudara terbuka (tanpa sinar matahari)
kemudian dihaluskan menggunakan
3
blender dan dikeringkan kembali
sampai kadar airnya telah berkurang
untuk perlakuan selanjutnya 400C,
Sehingga diperoleh ekstrak pekat
(Harborne, 1987).
Ekstraksi.
Serbuk kulit batang paliasa yang
telah dihaluskan dan dikeringkan
dimaserasi selama 1 x 24 jam sebanyak
4 kali dengan masing-masing 2 liter
metanol. Masing-masing maserat 1, 2,
3, dan 4 di KLT. Keseluruhan maserat
yang diperoleh dari hasil penyaringan
menggunakan penyaring Buchner
dengan kertas Whatman diuapkan pada
tekanan rendah sampai diperoleh
maserat metanol agak kental kemudian
ditentukan beratnya. Ekstrak metanol
diekstraksi cair-cair menggunakan
corong pisah dengan pelarut pada
kepolaran yang berbeda-beda dimulai
dari pelarut yang paling nonpolar
sampai pelarut yang paling polar. Fraksi
yang digunakan di sini adalah fraksi
metilen klorida. Fraksi yang diperoleh
dievaporasi sampai kering dan
kemudian ditentukan beratnya.
Fraksinasi
Ekstrak yang diperoleh terlebih dahulu
dianalisis dengan KLT dan dideteksi
dengan lampu UV dan penyemprotan
larutan serium sulfat lalu dipanaskan
untuk menentukan eluen yang cocok
dalam proses fraksinasi. Fraksinasi
dilakukan dengan menggunakan
KKCV, fraksi-fraksi yang diperoleh
dianalisis dengan KLT. Fraksi yang
mempunyai nilai Rf yang sama
digabung kemudian dievaporasi sampai
kering, ditentukan beratnya. Fraksi
fraksi yang diperoleh kemudian
difraksinasi lebih lanjut menggunakan
KKF yang dilakukan berulang kali
sampai diperoleh isolat murni.
Pemurnian
Komponen padatan yang
diperoleh dikristalisasi atau
direkristalisasi dengan menggunakan
pelarut n-heksan. Kemurnian senyawa
yang diperoleh ditentukan dengan
melakukan KLT sistem tiga eluen
dengan eluen etil asetat : n-heksana, n-
heksana : kloroform, kloroform : etil
asetat dan uji titik leleh. Jika titik leleh
senyawa menunjukkan trayek titik leleh
yang tajam, maka senyawa tersebut
telah murni.
Identifikasi
Identifikasi dilanjutkan dengan
menggunakan pereaksi. Pereaksi yang
digunakan adalah pereaksi Liebermann-
Burchard, FeCl3, Wagner dan
Dragendroff untuk mengetahui
golongan senyawa metabolit sekunder
yang diperoleh dan identifikasi lebih
lanjut dilakukan metode spektroskopi
dengan menggunakan spektroskopi UV
dan spektrometer Inframerah untuk
elusidasi struktur.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Preparasi Sampel
Penelitian ini kulit batang K.
Hospital Linn dibersihkan kemudian
dipotong-potong dan dikeringkan tanpa
terkena sinar matahari. Sampel yang
sudah kering dihaluskan dengan
blender. Selanjutnya, sebanyak 1,10 Kg
serbuk halus dimaserasi dengan pelarut
4
metanol untuk mengekstrak senyawa dengan penampak noda CeSO4 2%
bahan alam yang ada pada sampel. menunjukkan perpisahan noda yang
Maserasi dilakukan selama 1 × 24 jam baik seperti yang tampak pada Gambar
sebanyak 4 kali kemudian dipekatkan 4.1.
dengan Evaporator. Metanol
mempunyai sifat yang dapat menarik
semua jenis senyawa bahan alam
sehingga digunakan untuk maserasi.
Selain itu metanol digunakan, karena
pelarut metanol sangat mudah menguap,
sehingga penggunaan panas tinggi
untuk menghilangkan pelarut tidak
perlu dilakukan karena dapat merusak
senyawa yang terekstraksi. Gambar 4.1. Kromatogram ekstrak
Ekstrak kental methanol yang Metilen klorida Eluen Kloroform: Etil
diperoleh diekstraksi cair-cair dengan asetat (19:1)
pelarut n-heksan. Sisa ekstrak kental Fraksinasi dilakukan dengan
metanol diekstraksi cair-cair eluen yang ditingkatkan kepolarannya
menggunakan pelarut metilen klorida dimulai dari n-heksan 100%, n-
(CH2Cl2) yang kemudian di evaporasi heksan:kloroform, n-heksan:etil asetat,
sehingga diperoleh ekstrak kental kloroform:etil, etanol hingga sampai
metilen klorida berwarna coklat pekat pada eluen yang paling polar yaitu
metanol 100%. Dari hasil KKCV
dengan bobot 2,581 gram.
diperoleh sebanyak 29 fraksi.
Fraksinasi
Kromatogram hasil KKCV.
Ekstrak yang diperoleh
difraksinasi dengan kromatografi kolom
cair vakum (KKCV). Fraksinasi
dilakukan untuk memisahkan senyawa-
senyawa pada sampel. Sebelum
dilakukan KKCV, terlebih dahulu
dilakukan kromatografi lapis tipis pada
sampel untuk mendapatkan eluen yang
Eluen n-heksan:metilen (8:2)
cocok digunakan saat melakukan
KKCV. Beberapa uji eluen yang telah
dilakukan yaitu eluen n-
heksan:kloroform, kloroform:etil asetat,
etil asetat: metilen, n-heksan:metilen,
metilen: aseton dan aseton:metanol
diperoleh bahwa eluen kloroform: etil
asetat dengan perbandingan 19:1 Eluen n-heksan:etil (9:1)

5
 Fraksi-fraksi yang diperoleh
dikromatografi, fraksi yang memiliki Rf
dan kecendrungan bentuk yang sama
digabungkan dan diperoleh fraksi
gabungan sebanyak 6 fraksi dapat
dilihat pada tabel 4.1
Tabel 4.1. Hasil penggabungan fraksi
KKCV
Fraksi Berat
Fraksi gabungan (g) Warna
1,097 coklat
1-4 A kehijauan
5-8 B 0,480 coklat
0,271 bening
9-11 C kecoklatan
12-20 D 0,019 coklat
0,217 coklat
21-24 E pekat
0,301 coklat
25-29 F muda
Kromatogram lapis tipis fraksi-fraksi
gabungan KKCV Eluen: N-
heksan:metilen (19:1)
Fraksi gabungan hasil KKCV
yang diperoleh kemudian dipilih untuk
di fraksinasi lebih lanjut dengan
pertimbangan adanya target yang ingin
dicapai berdasarkan noda yang tampak
pada saat dilakukan KLT dan noda yang
terbentuk sedikit. Fraksi gabungan yang
dipilih adalah fraksi gabungan A yang
kemudian di KLT hingga diperoleh
eluen yang cocok dengan perpisahan
noda yang baik.
Fraksi gabungan A yang diperoleh
berbentuk padat dengan berat 1,097
gram kemudian dilakukan KLT untuk
menentukan eluen yang akan digunakan
dalam kromatografi kolom flash.
Beberapa eluen yang digunakan antara
lain n-heksan:metilen dan kloroform:
metilen diperoleh bahwa eluen yang
paling baik perpisahan nodanya yaitu
metilen: kloroform dengan
perbandingan (1:19) seperti yang
tampak pada Gambar 4.2.
Gambar 4.2. Kromatogram fraksi
gabungan A Eluen kloroform:metilen
(19:1)
Sampel yang telah dielusi
beberapa kali dengan eluen
metilen:kloroform (1:19) kemudian
ditingkatkan kepolarannya hingga
sampai yang paling polar pada
kromatografi kolom flash sehingga
menghasilkan 56 fraksi. Pada fraksi 29-
34 terbentuk kristal putih kekuningan.
Kristal yang terbentuk kemudian di
KLT untuk melihat kesamaan Rf.
Kromatogram hasil KLT fraksi 29-34
Eluen kloroform:etil (8:2)
6
 Berdasarkan hasil KLT pada Fraksi A3 dikromatografi kolom
Gambar 4.2 maka fraksi 29-34 flash lebih lanjut untuk memurnikan
digabung. Adapun rincian dari fraksi- kristal yang diperoleh. Hasil
fraksi hasil kromatografi kolom flash kromatografi kolom flash diperoleh 20
setelah dilakukan KLT dan fraksi yang digabung menjadi 3 fraksi.
penggabungan keseluruhan diperoleh 5 Fraksi yang membentuk kristal yaitu
fraksi gabungan dapat dilihat pada tabel fraksi A32 yang diperoleh dari hasil
4.2 kromatografi kolom flash berwarna
Tabel 4.2. Hasil penggabungan putih kekuningan dan setelah di KLT
pengamatan KKF fraksi A menunjukkan tiga pendaran dibawah
Fraksi sinar UV 365 nm. Bentuk dan
Fraksi Warna
gabungan kromatogram Kristal dapat diihat pada
Bening gambar 4.4
1-16 A1 kekuningan
17-28 A2 Kuning
Bening
29-34 A3 kekuningan
Bening
35-47 A4 kekuningan
48-56 A5 Hijau pekat (a) (b)
Gambar 4.4. Bentuk dan kromatogram
Fraksi gabungan A3 diperoleh kristal hasil KKF a) Kristal, b)
kristal berwarna putih kekuningan Kromatogram hasil KLT
berbentuk jarum dengan berat 0,431 Kristal kemudian direkristalisasi
gram. Fraksi A3 kemudian di KLT dengan cara dilarutkan dalam pelarut
untuk mengetahui eluen yang cocok yang tidak melarutkan kristal yaitu n-
digunakan pada kromatografi kolom heksan kemudian disaring. Kristal yang
flash lebih lanjut untuk memurnikan diperoleh lalu dilarutkan dengan
kristal yang diperoleh. Kromatogram kloroform yang dapat melarutkan kristal
hasil KLT menunjukkan dua noda dengan baik untuk di KLT. Hasil
sehingga harus dilakukan pemisahan rekristalisasi diperoleh kristal yang
untuk mendapatkan kristal murni. lebih putih bening dan berbentuk jarum
Kromatogram hasil KLT seperti yang pada fraksi A32 dengan bobot kristal
tampak pada Gambar 4.3. sebanyak 10 mg. Dari hasil yang
diperoleh, diketahui bahwa proses
rekristalisasi dapat memurnikan dan
membentuk kembali kristal yang lebih
Gambar 4.3. Kromatogram fraksi baik. Kromatogram dan bentuk kristal
gabungan A3, Eluen n-heksan:etil setelah rekristalisasi dapat dilihat pada
asetat (8:2) Gambar 4.5

7

(a) (b)
Gambar 4.5. Bentuk dan kromatogram
kristal murni. a) bentuk kristal, b)
kromatogram hasil KLT
Identifikasi
Kristal yang diperoleh
diidentifikasi kelarutannya dengan
menggunakan pelarut yang berbeda
tingkat kepolarannya. Dari hasil
identifikasi tersebut diketahui bahwa
kristal yang diperoleh larut baik dalam
pelarut kloroform, sedikit larut pada etil
asetat, n-heksan dan metanol.
Berdasarkan uji kelarutannya diketahui
bahwa kristal yang diperoleh bersifat
semi polar. Dari studi literatur diketahui
bahwa senyawa steroid memang
merupakan senyawa yang bersifat semi
polar.
Kristal kemudian diuji
kemurniannya dengan metode KLT
sistem tiga eluen dengan perbandingan
dan pelarut yang berbeda. Hal ini
dilakukan untuk memastikan kemurnian
dari suatu kristal yang ditunjukkan
dengan munculnya satu noda pada tiap
KLT. Eluen pertama yaitu
kloroform:etil asetat (8:2) dengan Rf
0,80 yang nampak dengan
menggunakan penampak noda CeSO4
2%. Eluen selanjutnya yaitu dengan n-
heksan:kloroform (1:9) dengan Rf 0,56
dan eluen ketiga menggunakan n-
heksan:etil asetat dengan perbandingan
8:2 Rf 0,40. Hasil kromatogramnya
dapat dilihat pada Gambar 4.6.
(a) (b) (c)
Gambar 4.6. Kromatogram sistem tiga
eluen. a) Eluen kloroform:etil asetat
(8:2), b) Eluen n-heksan:kloroform
(1:9)dan c) Eluen n-heksan:etil asetat
(8:2)
Identifikasi selanjutnya
dilakukan dengan pengujian titik leleh
menggunakan Melting Point. Dari teori
yang diperoleh mengatakan bahwa
senyawa murni akan memiliki trayek
titik leleh tajam yakni awal dari
melelehnya senyawa uji hingga meleleh
secara keseluruhan berada dalam trayek
titik leleh tidak lebih dari 2oC. Hasil uji
titik leleh menunjukkan kristal mulai
meleleh pada suhu 1340C hingga
meleleh keseluruhan pada suhu 1350C.
Hasil ini membuktikan bahwa kristal
yang diperoleh telah murni dan
memiliki titik leleh yang tinggi.
Beberapa studi literatur ditemukan
bahwa kristal dengan titik leleh tinggi
dan berada pada kisaran 120-1700C
diidentifikasi merupakan senyawa
golongan steroid seperti yang tampak
pada tabel 4.3. Berdasarkan hal tersebut
maka dapat mendukung bahwa kristal
8
yang diperoleh merupakan senyawa Tabel 4.4. Hasil uji pereaksi pada
golongan steroid. kristal murni
Tabel 4.3. Titik leleh beberapa senyawa Pereaksi Hasil Keterangan
steroid yang telah ditemukan Warna
Liebermann- kuning + Steroid
Senyawa Titik
Sumber Burchard kehijauan
steroid leleh

Nunuk,H (2008) Warna

dan Gaffar,I FeCl3 hijau - Flavonoid
β- muda
1260C (2010) pada
sitosterol
tumbuhan
Dragendroff Orange - Alkaloid
K.hospita Linn

β- 1300C Dini,I (2006) Wagner Kuning - Alkaloid

sitosterol pada tumbuhan
Dari hasil uji pereaksi didapatkan
K.hospita Linn
bahwa kristal positif steroid yang
Steroid Saleh,Chaerul menunjukkan warna pereaksi
(stigmast 170- (2009) pada Liebermann-Burchard berubah warna
erol) 1710C tumbuhan Aegle menjadi kuning kehijauan.
marmelos L. Uji Spektroskopi
Uji spektroskopi dilakukan
Pince,Salempa dengan menggunakan spektroskopi
(2011) pada Inframerah Prestige-21 dengan metode
β- 130- tumbuhan pellet KBr dan spektroskopi UV-Vis.
sitosterol 1310C Pterospermum Spektroskopi Inframerah (IR) dapat
subpeltatum digunakan untuk mengidentifikasi suatu
C.B.Rob. senyawa yang belum diketahui karena
spektrum yang dihasilkan spesifik untuk
senyawa tersebut. Kromatogram hasil
Kristal yang telah dinyatakan murni
spektroskopi IR dari kristal A32
kemudian ditentukan jenis golongan
senyawanya dengan menggunakan
beberapa pereaksi yaitu Liebermenn-
Burchard, FeCl3, Dragendroff dan
Wagner. Hasil ujinya dapat dilihat pada
Tabel 4.4.

Spectrum inframerah Kristal A32

9
 Daerah serapan dari spektrum 2958,2935,2864 sedangkan pada
IR yang tampak menunjukkan adanya senyawa β-sitosterol yang berhasil
beberapa komponen senyawa pada diidentifikasi berada pada daerah 3412
panjang gelombang (cm-1) yakni 1058, dan 3453 untuk gugus OH sedangkan
1377, 1462, 1643, 2864, 2935, 2958 dan untuk gugus C-H yaitu 2956,3935,2866
3446. Uji spektoskopi dengan dan 2936 sementara untuk senyawa
Inframerah pada daerah serapan 3446 stigmasterol berada pada 3429 dan
cm-1 spektrum ulur yang menunjukkan 2956,2871. Hal yang sama juga
adanya gugus O-H yang didukung ditunjukkan pada daerah serapan lain
dengan adanya satu spektrum pada yang menunjukkan daerah hampir sama
bilangan gelombang 1058 cm-1 yang dengan serapan kristal yang diperoleh.
menunjukkan adanya gugus C-O. Pada Berdasarkan hal-hal tersebut sehingga
daerah serapan 1462 dan 1377 dapat disimpulkan bahwa kristal yang
menunjukkan adanya gugus C-H tekuk diperoleh merupakan senyawa steroid.
yang didukung adanya serapan tajam Data lengkap dari spektrum IR pada
yang tampak pada daerah gelombang senyawa steroid yang berhasil
2958, 2935 dan 2864 cm-1 yang diidentifikasi dapat dilihat pada tabel
mengidentifikasi adanya gugus C-H. 4.5
Kemudian pada daerah serapan 1643 Tabel 4.5. Daerah spektrum IR senyawa
menunjukkan adanya gugus C=C. Data steroid yang telah diidentifikasi
dari spektrum IR tersebut menunjukkan Jenis Daerah Gugus
gugus fungsi yang banyak terdapat pada senyawa spektrum IR fungsi
senyawa metabolit sekunder. Akan -1
(cm )
tetapi dari beberapa studi literatur Steroid 3429 O-H ulur
menunujukkan bahwa spektrum- (stigmaste 1054 C-O
spektrum seperti uraian diatas rol) 2956 dan C-H ulur
merupakan senyawa golongan steroid. 2871 C-H
Beberapa senyawa steroid tersebut yaitu 1371 dan tekuk
β-sitosterol yang berhasil diidentifikasi 1460
pada tumbuhan yang sama (K.hospita β- 3412 O-H
Linn) dan pada tumbuhan sitosterol 1049 C-O ulur
P.subpeltatum C.B.Rob serta senyawa 2956,2935 C-H ulur
yang diduga stigmasterol diidentifikasi dan 2866 C-H
pada tumbuhan A.marmelos L. 1462 dan tekuk
menunjukkan spektrum hampir sama 1379 C=C
dengan spektrum dari kristal yang 1664
diperoleh khususnya pada serapan yang β- 3453 O-H
mengidentifikasi adanya gugus OH dan sitosterol 1050 C-O
C-H dimana kristal yang diperoleh 2936 C-H
berada pada daerah 3446 dan

10
 1465 dan C-H
1382 tekuk
1635 C=C
Hasil uji spektroskopi UV-Vis
dengan daerah serapan spektrum
maksimum berada pada panjang
gelombang 214,80 nm menunjukkan
tidak adanya kromofor atau bukan
merupakan senyawa fenolik.
Kromatogram spektrum hasil UV-Vis.
Spectrum UV-VIS Kristal A32
Metode spektroskopi UV-VIS
membahas tentang interaksi Radiasi
Elektro Magnetik (REM) monokromatis
dengan molekul pada daerah panjang
gelombang dekat (190-380 nm) sampai
daerah panjang gelombang sinar tampak
(380-780 nm).
Uraian diatas menunjukkan
bahwa kristal yang diperoleh
merupakan senyawa golongan steroid
hal ini sesuai dengan kristal yang
diperoleh berbentuk jarum berwarna
putih bening. Berdasarkan uji pereaksi
dengan Liebermann-Burchard yang
berwarna kuning kehijauan
menunjukkan senyawa steroid dan
bentuk spektrum Inframerah yang
relatif sama dengan senyawa steroid
yang telah ditemukan, serta didukung
dengan titik leleh tinggi yaitu 134-
1350C.
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian
telah diisolasi satu senyawa murni yang
diidentifikasi sebagai senyawa steroid
dari ekstrak metilen klorida kulit batang
Paliasa (K. hospita Linn). Didukung
oleh beberapa data antara lain, uji
pereaksi dengan Liebermann-Burchard
yang positif steroid, data spektroskopi
IR yang menunjukkan adanya gugus
OH dan C-H serta memiliki titik leleh
134-1350C.
DAFTAR PUSTAKA
Achmad,S.A,. 1986. Kimia Organik
Bahan Alam. Jakarta: Karunika
Jakarta Universitas Terbuka
Alfian,N.,dkk. 2004. Isolasi dan
Identifikasi Konstituen Organik
Tanaman Daun Paliasa,
Kleinhovia hospita Linn. pada
Kelarutan Berdasarkan
Kelompok Polaritasnya. Marina
Chimica Acta. Vol 5(2). Jurusan
Kimia FMIPA Universitas
Hasanuddin. Makassar.
Dini, I. 2006. Bioaktifitas ekstrak Kulit
Batang Tumbuhan Paliasa
(Kleinhovia hospital Linn.)
terhadap Artemia salina Leach.
Jurnal Chemica Edisi khusus
seminar Nasional Jurusan Kimia
FMIPA UNM tahun 2006.
Makassar.
Gaffar, Imran., dkk. 2008. Senyawa
triterpenoid asam-3-asetoksi-
12-oleanen-28-oat dari Ekstrak
11
 Metilen Klorida pada Tumbuhan
(Kleinhovia hospita Linn).
Jurnal Informasi Teknologi. Vol
14(2). Makassar: Universitas
Hasanuddin.
. 2010. Senyawa Di-(2-
etilheksil Ftalat) Dalam Fraksi
Metilen Klorida Ekstrak Jaringan
Kayu Batang Tumbuhan
Kleinhovia hospita Linn. Jurnal
Kimia FMIPA. Vol 14(2).
Universitas Haluoleo Kendari.
Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia:
Penuntun Cara Modern
Menganalisis Tumbuhan.
Bandung: Institut Teknologi
Bandung
Hasni, 2002. Pengaruh Infus Daun
Paliasa (Kleinhovia hospita
Linn.) Terhadap Traspor Aktif
Glukosa pada Usush Halus
Marmut. Skripsi tidak
diterbitkan. Makassar: Jurusan
Farmasi Fakultas MIPA
Universitas Hasanuddin.
Hendayana, S. 1994. Kimia Analitik
Instrumen. Semarang: IKIP
Semarang Press
Herlina. 1993. Pengaruh Infus Daun
Kayu Paliasa Klenhovia hospita
Linn. Terhadap Penurunan
Kadar Glukosa Darah Kelinci.
Skripsi tidak diterbitkan.
Makassar: Jurusan Farmasi
Fakultas MIPA Universitas
Hasanddin.
Heyne, K. 1987. Tumbuhan Berguna
Indonesia, Departemen
Kehutanan, Jakarta, Indonesia.
Hoffmann, D. 2003. Medical
Herbalism: The Science and
Practice of Herbal Medicine.
Library of Congress.
Cataloging-in-Publcation Data.
Latiff, A., Faridah, H.I., L.J.G Van den
Maese, 1997. “Kleinhovia
hospita Linn”. Plant Reseorces
of South-east Asia No.II.
Nunuk,H.S, dkk. 2008. Coumarin and
Steroid Compound from stem
bark of Kleinhovia hospita Linn.
Proceeding of the International
Seminar on Chemistry 2008.
Jatinangor.
Pince, Salempa. 2011. Bioaktifitas
Antibakteri dan Metabolit
Sekunder Prospektif dalam
Kayu Akar Pterospermum
subpeltatum C.B.Rob. Tesis
Pascasarjana. Universitas
Hasanuddin. Makassar.
Raflizar, 2000. Dekok Daun Paliasa
(Kleinhovia hospita Linn)
Sebagai Obat Radang Hati Akut.
Badan Litbang Kesehatan
Jakarta.
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik
Tumbuhan Tinggi. Bandung:
Institut Teknologi Bandung.
Saleh, Chairul. 2009. Isolasi dan
Identifikasi Senyawa Steroid
Dari Kulit Batang Tumbuhan
Maja (Aegle marmelos L).
Jurnal Kimia Mulawarman. Vol
7(1). Samarinda
Sastrohamidjojo, H. 1991. Spektoskopi.
Yogyakarta: Liberty
. 1995. Sintesis
Bahan Alam. Yogyakarta:
Gadjah Mada University Press.
Steenis, C.G.G.J.v. 2003. Flora,
cetakan ke-9. PT. Jakarta : Pradnya
Paramita.
Suryawati, 1991. Pengaruh Pemberian
Ekstrak daun Paliasa
Klenhovia hospita Linn.
Terhadap Hati Hewan Uji
Mencit. Skripsi tidak
diterbitkan, Ujung Pandang:
Jurusan Farmasi Fakultas MIPA
Universitas Hasanuddin.

12
Sutrisno. 2011. Spektroskopi Molekul
Organik. Malang: Cakrawala
Indonesia
Taebe, B., 2004. Standarisasi Ekstrak
Daun Paliasa (Kleinhovia
hospita Linn) Sebagai Bahan
Baku Sedian Fitofarmaka.
Makalah disajikan dalam
seminar hasil penelitian pada
Pascasarjana Universitas
Hasanuddin. Makassar 23
Pebruari.
Tobo, F. 2001. Fitokimia I (Ekstraksi
Komponen Kimia Bahan Alam).
Makassar: Lab. Fitokimia
FMIPA Universitas Hasanuddin
Ulfa, Maria. 2007. Isolasi dan
Bioaktivitas Senyawa
Fenilpropanoid dari Ekstrak
Kulit Batang Kleinhovia hospita
Linn. Jurnal kimia: Universitas
Mataram.
Wiwi, 2005. Eksplorasi Senyawa Kimia
Daun Paliasa (Kleinhovia
hospita Linn.) Pada Fraksi Aktif
Metilenklorida. Skripsi tidak
diterbitkan. Makassar: Jurusan
Kimia, Fakultas MIPA
Universitas Hasanuddin.
Zenta, F. 1999. Teknik Laboratorium
Kimia Organik. Makassar:
Laboratorium Kimia Organik
Jurusan Kimia FMIPA
Universitas Hasanuddi

13
14