PRAKTIKUM LABORATORIUM REKAYASA HAYATI-II

Bioreaktor Sistem Perendaman Temporer

Oleh:
Kelompok 05
Ketua Kelompok :
Chicio Zevenia Sembiring 11215023
Anggota Kelompok :
Muhammad Arief Ardiansyah 11215006
Dini Ambya Fahira 11215015
Tri Ramadianti Shafitri 11215029
Yonatan Dwi Sulistyo 11215040

Dosen : Dr. Muhammad Yusuf Abduh

Annisa Ratna Nurillah, S.T., M.Sc.
Khairul Hadi.B, S.T., M.T.
Asisten : Hilman Naafi Achmad
Tanggal Percobaan : 8-14 Februari 2018
Tanggal Pengumpulan : 18 Februari 2018

LABORATORIUM REKAYASA HAYATI

PROGRAM STUDI REKAYASA HAYATI
SEKOLAH ILMU DAN TEKNOLOGI HAYATI
INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG
2018
 LEMBAR PENILAIAN DAN PENGESAHAN

Komponen Nilai Maksimal Nilai

BAB I 10
BAB II 20
BAB III 10
BAB IV 40
BAB V 10
Format 10
Total 100

Laporan Praktikum Modul Bioreaktor Sistem Perendaman Temporer sebagai

syarat untuk memenuhi rangkaian Praktikum Laboratorium Rekayasa Hayati-
II dalam menempuh studi tingkat sarjana di Program Studi Rekayasa Hayati
Institut Teknologi Bandung

Jatinangor, 18 Februari 2018

Diperiksa oleh,
Asisten Praktikum

Hilman Naafi Achmad

NIM. 11212043
Mengetahui dan menyetujui,
Dosen Pengampu Dosen Pengampu

Annisa Ratna Nurillah, S.T., M.Sc. Khairul Hadi.B, S.T., M.T.

Nopeg. 11811060 Nopeg. 11811064
Dosen Pengampu

Dr. Muhammad Yusuf Abduh

NIP. 198307252010121003
 DAFTAR ISI

DAFTAR ISI ............................................................................................................ i

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. iii
DAFTAR TABEL .................................................................................................. iv
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................... v
RINGKASAN ........................................................................................................ vi
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ................................................................................... 1
1.2 Tujuan ................................................................................................ 2
1.2.1. Tujuan Umum........................................................................... 2
1.2.2. Tujuan Khusus .......................................................................... 2
1.3 Ruang Lingkup .................................................................................. 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................................. 4
2.1 Bioreaktor .......................................................................................... 4
2.1.1 Sistem Perendaman Temporer (Temporary Immersion
System – TIS) ............................................................................ 4
2.1.2 Bioreaktor TIS RITA©.............................................................. 5
2.2 Imbibisi dan Perkecambahan ............................................................. 6
2.2.1 Imbibisi ..................................................................................... 6
2.2.2 Pemanjangan Radikula dan Penyelesaian Perkecambahan ...... 7
2.2.3 Faktor yang Mempengaruhi Imbibisi dan Perkecambahan ...... 8
2.3 Kurva Pertumbuhan Makhluk Hidup ................................................. 8
2.4 Klasifikasi Ilmiah dan Morfologi Tumbuhan .................................. 10
2.1.3 Kacang Hijau .......................................................................... 10
2.1.4 Jagung ..................................................................................... 11
BAB III METODOLOGI ...................................................................................... 13
3.1 Alat dan Bahan................................................................................. 13
3.2 Langkah Kerja.................................................................................. 14
3.2.1 Penentuan swelling coefficient ............................................... 14
3.2.2 Penentuan swelling quotient ................................................... 15
i
 3.2.3 Perakitan Bioreaktor TIS RITA© ........................................... 15
3.2.4 Pengukuran Parameter Berat Kering dan Berat Basah ........... 15
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 17
4.1 Swelling Coefficient Biji Kacang Hijau dan Jagung ........................ 17
4.2 Pengaruh Suhu Imbibisi dan Frekuensi Perendeman terhadap
Swelling Quotient ............................................................................. 19
4.3 Kurva dan Laju Pertumbuhan Tanaman .......................................... 22
BAB V PENUTUP ................................................................................................ 26
5.1 Kesimpulan ...................................................................................... 26
5.2 Saran ................................................................................................ 26
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 27
LAMPIRAN .......................................................................................................... 29

ii
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Rangkaian alat dan mode operasi TIS RITA© ................................... 5
Gambar 2.2 Kurva sigmoid pertumbuhan makhluk hidup ...................................... 9
Gambar 3.1 Rangkaian alat percobaan bioreaktor TIS RITA© ............................. 14
Gambar 4.1 Hubungan proporsi penambahan volume dan volume total
terhadap waktu pada biji kacang hijau ............................................. 17
Gambar 4.2 Hubungan proporsi penambahan volume dan volume total
terhadap waktu pada biji jagung ...................................................... 18
Gambar 4.3 Kurva hubungan antara swelling coefficient dan suhu perendaman . 20
Gambar 4.5 Kurva pertumbuhan biomassa basah kacang hijau (r : waktu
terendam, tr : waktu tidak terendam) ............................................... 22
Gambar 4.6 Kurva pertumbuhan biomassa basah jagung (r : waktu terendam,
tr : waktu tidak terendam) ................................................................ 23
Gambar 4.7 Kurva pertumbuhan biomassa kering kacang hijau (r : waktu
terendam, tr : waktu tidak terendam) ............................................... 25
Gambar 4.8 Kurva pertumbuhan biomassa kering jagung (r : waktu terendam,
tr : waktu tidak terendam) ................................................................ 25

iii
 DAFTAR TABEL

Tabel 3.1 Alat dan bahan pada percobaan ............................................................ 13

Tabel 4.1 Swelling quotient untuk dua variasi suhu yang berbeda ....................... 19
Tabel 4.2 Swelling quotient rata-rata untuk kedua jenis biji yang digunakan ...... 21
Tabel 4.3 Laju pertumbuhan biomassa basah kacang hijau dan jagung
(r : waktu perendaman) ......................................................................... 23
Tabel 4.4 Laju pertumbuhan biomassa kering kacang hijau dan jagung
(r : waktu perendaman) ......................................................................... 24

iv
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran A Cara Pengolahan Data ...................................................................... 30

Lampiran B Data Mentah ...................................................................................... 32
Lampiran C Dokumentasi ..................................................................................... 34

v
 RINGKASAN

Kultur jaringan merupakan teknik yang sangat umum digunakan pada

bioindustri masa kini karena menjanjikan keuntungan dan kemudahan dalam proses
propagasi tanaman. Penerapan kultur jaringan pada suatu bioreaktor umumnya
memiliki masalah pada aspek perendaman dimana kultur yang terlalu lama
terendam air dapat berkurang kualitasnya akibat terkena fenomena seperti
vitrifikasi. Maka muncullah suatu bioreaktor yang mampu melakukan perendaman
secara sementara (Temporary Immersed System) dan berkala. Bioreaktor yang lebih
dikenal dengan nama TIS RITA© inilah yang digunakan dalam percobaan untuk
menentukan frekuensi dan intensitas rendaman optimal bagi biji kacang hijau dan
biji jagung. Parameter yang diukur adalah swelling coefficient dan swelling quotient
sesuai metode yang pernah dilakukan oleh Leopold (1983). Hasil pengukuran
menunjukkan bahwa swelling coefficient biji kacang hijau lebih kecil daripada biji
jagung dengan nilai berturut-turut 0,1299 h-1 dan 1,2633 h-1. Adapun swelling
quotient pada kedua jenis biji mengalami nilai yang lebih besar pada suhu
perendaman yang lebih tinggi ditandai dengan nilai parameter swelling quotient
untuk biji kacang hijau sebesar 1,104 (20°C) dan 1,240 (50°C) dan untuk biji jagung
sebesar 1,083 (20°C) dan 1,207 (50°C). Pengukuran terhadap parameter berat basah
dan berat kering juga dilakukan dalam percobaan ini. Hasilnya didapat bahwa biji
kacang hijau menunjukkan respon pertumbuhan yang lebih baik pada frekuensi
perendaman yang lebih lama, sementara biji jagung menunjukkan hal yang
sebaliknya. Laju pertumbuhan jagung juga terdeteksi lebih lambat jika
dibandingkan dengan laju pertumbuhan kacang hijau, dimana laju pertumbuhan biji
jagung sebesar 0,194 hari-1 (frekuensi 48 menit) dan 0,216 hari-1 (frekuensi 24
menit) dan laju pertumbuhan biji kacang hijau sebesar 0,350 hari-1 (frekuensi 48
menit) dan 0,301 hari-1 (frekuensi 24 menit).

vi
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Tingginya pemanfaatan lahan di dunia untuk berbagai keperluan strategis
masyarakat, terutama untuk pembangunan dan pengembangan yang pesat,
menyebabkan lahan yang dapat digunakan untuk budidaya tanaman semakin
sedikit. Hal ini berbanding terbalik dengan jumlah manusia yang semakin
meningkat, sehingga menyebabkan kebutuhan dari manusia terutama sektor pangan
meningkat pula. Berbagai teknik telah banyak dikembangkan dalam menanggapi
kurangnya lahan untuk budidaya tanaman, diantaranya penanaman yang tidak
memanfaatkan lahan luas atau penanaman vertikal dan kultur jaringan. Dengan
memanfaatkan teknik yang berkembang saat ini, terutama kultur jaringan,
kebutuhan-kebutuhan manusia dalam berbagai sektor, terutama pangan, dapat
terjaga karena dapat senantiasa menghasilkan produk dari bibit yang unggul.
Salah satu keunggulan kultur jaringan adalah penanamannya dilakukan
dalam kondisi yang terkontrol sehingga hasil dan produk dari tanaman yang
dibudidaya dapat sesuai yang diinginkan. Kultur jaringan dapat dilakukan dalam
suatu bioreaktor yang salah satunya merupakan bioreaktor perendaman sementara
atau Temporary Immersed System (TIS). Kondisi yang dapat diatur dari bioreaktor
ini adalah intensitas dan frekuensi dari perendaman medium terhadap sampel.
Perendaman sampel akan sangat berpengaruh pada proses imbibisi biji dan sangat
menentukan kecepatan perkecambahan serta pertumbuhan biji tersebut. Besarnya
pertambahan volume dinyatakan dengan suatu besaran bernama swelling quotient.
Kecepatan dari proses imbibisi pada biji yang terendam bergantung pada nilai
swelling coefficient masing-masing. Pengoptimalan intensitas dan frekuensi
perendaman dapat memberikan variasi dari kualitas biji sehingga bisa ditentukan
variasi dengan perlakuan yang terbaik. Penggunaan biji dengan kulaitas baik atau
unggul dapat meningkatkan efisiensi produksi di dalam bioindustri.

1
1.2 Tujuan
Tujuan dari praktikum kali ini dapat dibedakan menjadi tujuan umum dan
tujuan khusus. Berikut penjabaran masing-masing tujuan tersebut secara lebih
mendetil.
1.2.1. Tujuan Umum
Tujuan umum dari praktikum ini adalah menentukan karakteristik
perendaman pada bioreaktor Temporary Immersed System (TIS) terhadap peristiwa
imbibisi dan perkecambahan biji.
1.2.2. Tujuan Khusus
Adapun tujuan khusus dari praktikum ini yaitu sebagai berikut.
1. Menentukan swelling coefficient dari proses imbibisi pada biji kacang hijau
dan biji jagung.
2. Menentukan pengaruh perbedaan temperatur terhadap nilai dari swelling
quotient pada biji kacang hijau dan biji jagung.
3. Menentukan kurva pertumbuhan dari pengaruh frekuensi kontak medium
cair dengan biji kacang hijau dan biji jagung terhadap peristiwa imbibisi dan
pertumbuhan kecambah.
4. Menentukan laju pertumbuhan dari pengaruh frekuensi kontak medium cair
dengan biji kacang hijau dan biji jagung terhadap peristiwa imbibisi dan
pertumbuhan kecambah.

1.3 Ruang Lingkup

Praktikum dilaksanakan di Laboratorium Instruksional I, Labtek 1A
Kampus ITB Jatinangor pada hari Kamis, 8 Februari 2018 pukul 08.00-14.00 WIB
dan pada hari Sabtu hingga Rabu (10-14 Febuari 2018) setiap pukul 13.00-15.00
WIB. Kondisi ruangan berada pada suhu 23,5- 27,3 oC, kelembapan 68% - 82% dan
tekanan 695,55 mmHg. Parameter yang dicari dalam percobaan ini adalah swelling
coefficient, swelling quotient, dan laju pertumbuhan. Sementara parameter yang
diukur dalam percobaan ini adalah massa biji dan volume biji.
Percobaan yang menggunakan variasi suhu dilakukan pada dua kondisi
suhu, yaitu 20oC dan 50oC. Biji tanaman yang digunakan adalah biji kacang hijau

2
serta biji jagung dengan 2 variasi frekuensi perendaman, yaitu 24 menit dan 48
menit terendam serta 48 menit dan 96 menit tidak terendam. Frekuensi perendaman
ini menghasilkan intensitas perendaman biji sebanyak 10 kali per hari dan
dilakukan selaman 7 hari. Adapun asumsi yang digunakan adalah sebagai berikut:
1. Laju alir dari aerator konstan.
2. Karakteristik fisis biji relatif homogen.

3
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Bioreaktor
Bioreaktor merupakan lingkungan steril mandiri yang mengapitalisasi
sistem masukan dan keluaran nutrisi (cair) atau cairan/udara. Bioreaktor didesain
secara intensif dan sering digunakan untuk scale-up kultur, serta menyediakan
kesempatan pengawasan dan kontrol terhadap kondisi lingkungan mikro
(contohnya agitasi, aerasi, dan temperatur) secara maksimum. Saat ini berbagai tipe
bioreaktor sudah didesain dan dapat diproduksi ulang sendiri atau dapat dibeli.
Perbedaan utama terletak pada tipe bejana dan mekanisme agitasi kultur (tidak
diagitasi, mekanik, pneumatik) (Watt, 2012).
Pada umumnya bioreaktor dengan medium cair menawarkan banyak
keuntungan, termasuk kontrol kondisi kultur dengan lebih baik, penyediaan nutrisi
yang merata dan pengatur pertumbuhan yang optimal, pembaharuan atmosfer
kultur, penggantian medium selama periode kultur berdasarkan tahap
perkembangan, filtrasi medium untuk eksudat, kontrol kontaminasi dan produksi
sejumlah tunas atau embrio somatic untuk penanganan propagula otomatis. Namun,
penggunaan media cair pada bioreaktor untuk kultur tanaman menghasilkan
beberapa masalah seperti bocornya faktor pertumbuhan endogenik, keperluan akan
konsentrasi inokulum awal yang tinggi, hiperhidrisitas dan malformasi,
pembentukan busa, tegangan geser dan oksidatif. Permasalahan yang paling utama
adalah malformasi di dalam medium cair yang disebabkan oleh hiperhidrisitas (Ziv,
2000). Oleh karena itu, dikembangkanlah proses perendaman temporer (TIS).
2.1.1 Sistem Perendaman Temporer (Temporary Immersion System – TIS)
Sistem perendaman temporer merupakan sistem yang didesain untuk
menyediakan perendaman temporer, dengan tujuan mengombinasikan aerasi
dengan efek positif dari kultur medium cair. Sistem ini memenuhi syarat yang
disebutkan oleh Teisson et al., (1999), yaitu: 1) penghindaran perendaman kontinu,
yang mempengaruhi pertumbuhan dan morfogenesis; 2) ketetapan transfer oksigen
yang cukup; 3) ketetapan pencampuran yang cukup; 4) membatasi tingkat geser

4
(shear level); 5) memungkinkan perubahan medium sekuensial dan otomatisasi; 6)
mengurangi kontaminasi; 7) biaya rendah. Sistem ini dibedakan berdasarkan
ukuran kontainer, jenis kultur yang didukung, adanya kontrol perendaman
terkomputerisasi atau hanya menggunakan timer, penggunaan pompa (pompa
peristaltik, pompa udara, atau gerakan mekanis pada kontainer untuk memindahkan
cairan. Salah satu jenis sistem TIS adalah TIS RITA© (Etienne & Berthouly, 2002).
2.1.2 Bioreaktor TIS RITA©
TIS RITA© (Temporary Immersion System – Recipient for Automated
Temporary Immersion System) merupakan peralatan dengan dua kompartmen,
bagian atas yang mengandung tanaman dan bagian bawah yang berisi medium. Dua
kompartmen ini dihubungkan dengan suatu cara di mana overpressure
diaplikasikan pada kompartmen bawah sehingga mendorong medium ke bagian
atas. Selama periode perendaman dilakukan aerasi aliran udara ke medium,
mengagitasi tanaman dan menggantikan atmosfer di dalam bejana kultur seiring
tekanan berlebih keluar melalui keluaran pada bagian atas peralatan. Ketika tekanan
turun, medium akan kembali ke kompartmen bawah karena gravitasi. Frekuensi dan
durasi perendaman dapat dengan mudah diatur menggunakan program aplikasi
overpressure dengan katup solenoid dan timer (Teisson & Alvard, 1999).
Rangkaian alat dan mode operasi TIS RITA© dapat dilihat pada Gambar 2.1

Gambar 2.1. Rangkaian alat dan mode operasi TIS RITA©

Sumber: Teisson & Alvard (1999)

5
2.2 Imbibisi dan Perkecambahan
Perkecambahan didefinisikan sebagai gabungan kejadian-kejadian yang
dimulai dengan pengambilan air secara difusi dan osmosis oleh biji kering yang
diam (imbibisi) dan diakhiri dengan elongasi dari sumbu embrionik (Bewley &
Black, 1994). Akhir dari proses perkecambahan biasanya ditandai dengan penetrasi
struktur di sekitar embrio oleh radikula. Kejadian-kejadian selanjutnya, termasuk
mobilisasi dari cadangan utama, diasosiasikan dengan pertumbuhan benih.
2.2.1 Imbibisi
Pengambilan air oleh biji dewasa yang kering terdiri dari tiga fase
(triphasic), dengan pengambilan air awal dengan cepat (fase 1) diikuti fase plateau
(fase 2). Peningkatan pengambilan air lebih lanjut terjadi hanya setelah germinasi
selesai, seiring proses elongasi dari sumbu-sumbu embrionik. Oleh karena itu, biji
yang mengalami dormansi tidak dapat menyelesaikan proses perkecambahan
(Bewley J. D., 1997).
Fluks masukan air ke dalam sel biji kering selama fasa 1 menghasilkan
kekacauan struktur sementara, khususnya pada membran, yang menyebabkan
kebocoran zat terlarut dan metabolit dengan berat molekul rendah yang cepat dan
instan ke sekitar larutan imbibisi. Hal ini merupakan gejala transisi dari komponen
fosfolipid pada membran dari fasa gel pada yang diperoleh selama pengeringan saat
pendewasaan menjadi normal dengan bentuk kristalin-cairan terhidrasi (Crowe &
Crowe, 1992). Dalam waktu rehidrasi yang singkat, membran kembali ke
konfigurasi yang lebih stabil, yaitu saat kebocoran zat terlarut dapat dibatasi.
Selama imbibisi, biji kering yang diam melanjutkan proses metabolisme
dengan cepat. Struktur-struktur dan enzim yang dibutuhkan dalam awal permulaan
aktivitas metabolik kembali diasumsikan sudah ada di biji kering. Pengenalan air
kembali selama imbibisi diperlukan agar aktivitas metabolik dapat diteruskan,
dengan pergantian komponen-komponen yang terjadi selama beberapa jam saat
status metabolik penuh sudah tercapai (Bewley J. D., 1997)
Salah satu perubahan awal yang terjadi saat imbibisi adalah perubahan
aktivitas respirasi. Setelah peningkatan konsumsi oksigen awal, laju konsumsi
oksigen akan berkurang sampai radikula melakukan penetrasi ke struktur di

6
sekitarnya. Pada saat ini berlangsung, peningkatan aktivitas respirasi kembali
berlangsung. Proses respirasi ini berfungsi menghasilkan energi berupa ATP yang
digunakan untuk mendukung proses metabolisme beberapa jam setelah imbibisi
berlangsung. Proses respirasi ini terjadi pada mitokondria di jaringan biji kering
dewasa (Attucci et al., 1991).
2.2.2 Pemanjangan Radikula dan Penyelesaian Perkecambahan
Pemanjangan radikula melewati struktur disekitar embrio adalah kejadian
yang mengakhiri masa perkecambahan dan tanda dimulainya pertumbuhan
kecambah. Pemanjangan ini dapat disertai atau tidak disertai dengan pembelahan
sel. Ada dua fase sintesis DNA berbeda yang terjadi pada sel radikula setelah
imbibisi. Pertama terjadi segera setelah imbibisi dan melibatkan perbaikan DNA
yang rusak selama pengeringan biji dan rehidrasi serta sintesis DNA mitrokondria.
Sintesis DNA terkait dengan pembelahan sel pasca germinasi pada fase kedua ()
Pemanjangan radikula merupakan proses yang digerakkan oleh tekanan
turgor yang memerlukan pelengkungan dinding sel di mana sumbu embrionik akar
berada diantara tudung akar dan dasar hipokotil. Ada tiga alasan pertumbuhan
radikula dimulai. Pertama, pada akhir germinasi, potensial osmotic (φπ) pada sel
radikula menjadi lebih negatif akibat akumulasi zat terlarut, kemungkinan sebagai
hasil dari hidrolisis polimer cadangan yang ada pada sel radikula (Bradford, 1995),
kedua, ekstensibilitas dinding sel radikula yang mengizinkan pemanjangan radikula
(Cosgrove, 1997), dan ketiga, jaringan biji di sektitar ujung radikula melemah,
sehingga mengizinkan elongasi ujung radikula (Schopfer & Placy, 1985).
Proses pemanjangan radikula hanya bisa terjadi apabila terjadi
pemberhentian masa dormansi. Masa dormansi dipengaruhi oleh komposisi dari
dua hormon, yaitu ABA dan GA. ABA berperan dalam penghambatan germinasi
dan menyebabkan biji tetap berada pada masa dormansi karena menghalangi
terjadinya pelonggaran dinding sel. GA berperan penting dalam promosi dan
perbaikan proses germinasi karena berperan melawan efek inhibitor dari ABA.
Hormon GA sering dikombinasikan dengan sitokinin (Bewley & Black, 1994).

7
2.2.3 Faktor yang Mempengaruhi Imbibisi dan Perkecambahan
Ada beberapa faktor yang mempengaruhi proses imbibisi dan
perkecambahan, seperti perbedaan konsentrasi air di dalam biji dengan lingkungan,
tekanan hidrostatik, daya intermolekuler, luas permukaan biji (bidang penyerapan),
temperatur, spesies dan varietas biji, umur, tingkat kemasakan biji, dan komposisi
kimia biji. Perbedaan konsentrasi air di dalam biji dan di luar biji akan
menyebabkan terjadinya proses difusi dan osmosis air ke dalam biji. Temperatur
mempengaruhi perkecambahan karena mempengaruhi aktivitas protein, reaksi
enzim, dan struktur membran. Apabila temperatur terlalu tinggi atau rendah, dapat
terjadi denaturasi protein, reaksi enzim autokatalitis, dan perubahan membrane
yang dapat mengakibatkan kegagalan perkecambahan akibat dormansi biji dan
bahkan kematian biji (Gutterman, 1993).
Spesies dan varietas biji mempengaruhi proses imbibisi biji, karena spesies
dan varietas biji yang berbeda akan memiliki komponen biji yang berbeda,
khususnya karakteristik kulit biji yang mempengaruhi permeabilitas air. Biji
dengan kulit biji yang tebal akan menyerap air lebih lambat dibandingkan biji
dengan kulit yang lebih tipis. Komposisi kimia biji menentukan property penyerap
air, sehingga mempengaruhi imbibisi. Karbohidrat memiliki kualitas penyerapan
air yang paling baik, diikuti protein dan lemak yang merupakan penyerap air paling
buruk. Selain itu, umur biji juga mempengaruhi proses imbibisi. Biji dengan umur
yang lebih tua akan menyerap air lebih cepat dibandingkan biji yang lebih muda
karena deteorisasi membran sel untuk menyimpan mineral dan kehilangan tekanan
turgor pada sel. Biji dengan luas permukaan lebih besar akan melakukan imbibisi
dengan lebih cepat, karena memiliki daerah kontak air yang lebih besar (Suriyong
et al., 2002).

2.3 Kurva Pertumbuhan Makhluk Hidup

Salah satu ciri kehidupan yang dimiliki oleh makhluk hidup adalah
mengalami pertumbuhan dan perkembangan. Pertumbuhan dan perkembangan
meliputi perubahan variabel-variabel tumbuh seperti volume, ukuran, berat, dan
jumlah individu serta organogensis dan diferensiasi bagian makhluk hidup (Reece

8
et al., 2014). Pertumbuhan dan perkembangan dapat dikuantifikasi dan
direpresentasikan dalam suatu kurva. Pada umumnya pertumbuhan makhluk hidup
tumbuhan, hewan, dan mikroorganisme pada tingkat organisme maupun populasi
mengikuti pola pertumbuhan kurva sigmoid (Gambar 2.2) (Zwietering et al., 2013).

Gambar 2.2 Kurva sigmoid pertumbuhan makhluk hidup

(Sumber: Dwimahyani, 2013)

Menurut Dwimahyani (2013), kurva pertumbuhan makhluk hidup terdiri

dari beberapa fase pertumbuhan. Fase pertama disebut fase lag, dimana individu
baru beradaptasi dengan lingkungan barunya sehingga tidak terjadi pertumbuhan
yang signifikan. Setelah selesai beradaptasi dengan lingkungan barunya,
pertumbuhan dilanjutkan dengan fase logaritmik yang terdiri dari fase eksponensial
dan linier. Pada fase eksponensial individu mulai aktif melakukan pembelahan sel,
sehingga terjadi pertumbuhan yang sangat pesat dan meningkat secara
eksponensial. Selanjutnya pertumbuhan individu meningkat secara linier dengan
pertambahan yang konstan. Pada pertumbuhan individu semakin lama substrat yang
digunakan untuk tumbuh semakin berkurang, sehingga terjadi penurunan laju
pertumbuhan yang terjadi pada fase pertumbuhan yang disebut fase progressive
deceleration. Akibat substrat untuk pertumbuhan semakin berkurang, nutrisi yang
digunakan untuk tumbuh semakin tidak tercukupi sehingga terjadi beberapa
kemamtian sel. Fase dimana laju pertumbuhan sama dengan laju kematian disebut

9
dengan fase stasioner. Apabila substrat untuk pertumbuhan sudah tidak dapat
menunjang pertumbuhan, laju kematian akan semakin lebih besar sehingga terjadi
fase kematian.

2.4 Klasifikasi Ilmiah dan Morfologi Tumbuhan

Klasifikasi ilmiah memberikan informasi tentang tingkatan suatu individu
berdasarkan karakteristiknya. Sementara morfologi tumbuhan memberikan
gambaran fisik dan struktur suatu individu.
2.1.3 Kacang Hijau
Kacang hijau merupakan salah satu jenis tanaman palawija yang tumbuh
di daerah beriklim tropis. Kacang hijau termasuk dalam komoditas kacang-
kacangan yang merupakan sumber bahan pangan berprotein tinggi (Fitri, 2012).
Menurut Kole (2007) klasifikasi ilmiah tanaman kacang hijau (Vigna radiata L.)
adalah sebagai berikut.
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Fabales
Famili : Fabaceae
Genus : Vigna
Species : Vigna radiata L.
Biji kacang hijau berbentuk bulat kecil dengan berat tiap butir 0,5 – 0,8
mg atau berat per 1000 butir antara 36 – 78 mg (Rukmana, 1996). Umumnya biji
kacang hijau berwarna hijau kusam atau cokelat. Biji kacang hijau terdiri dari tiga
bagian utama, yaitu kulit biji (10%), kotiledon (88%), dan lembaga (2%) (Fitri,
2012). Bagian kulit biji kacang hijau mengandung mineral seperti fosfor (P),
kalsium (Ca), dan besi (F) yang berfungsi untuk melindungi biji dari kekeringan,
kerusakan fisik dan mekanik, serangan kapang dan serangga. Bagian kotiledon
banyak mengandung pati dan serat yang berfungsi sebagai cadangan makanan
untuk pertumbuhan (Junaidi & Isworo, 2014). Sementara, bagian lembaga biji
merupakan sumber protein dan lemak (Fitri, 2012).

10
 Biji kacang hijau akan berkecambah pada kondisi lingkungan yang
memadai. Kandungan air dan kelembapan udara sekeliling biji harus dijaga pada
konsentrasi yang tinggi. Kadar air biji kacang hijau kering berkisar 5 – 15 %, pada
kadar air ini kelembaban terlalu rendah untuk berlangsungnya metabolisme
sehingga tahap pertama perkecambahan adalah kadar air biji kacang hijau harus
dinaikkan dengan cara dilakukan perendaman atau ditempatkan pada lingkungan
yang jenuh uap (Anggrahini, 2011). Selain itu suhu optimum perkecambahan biji
adalah 34℃, sementara pertumbuhan tanaman kacang hijau optimum pada suhu 25
– 27 ℃ dan kelembapan udara 50 – 90 % (Junaidi & Isworo, 2014).

2.1.4 Jagung
Jagung merupakan salah satu sumber bahan makanan pokok yang
tergolong dalam biji-bijian. Tumbuhan ini termasuk dalam tanaman semusim yang
banyak ditemukan di daerah beriklim tropis. Menurut Iriany & Andi (2008),
klasifikasi ilmiah jagung adalah sebagai berikut.
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Kelas : Monocotyledoneae
Ordo : Poales
Familia : Poaceae
Genus : Zea
Spesies : Zea mays L.
Biji jagung merupakan jenis serealia dengan ukuran biji terbesar dengan
berat rata-rata 250 – 300 mg per biji (Fauzi, 2012). Biji jagung berbentuk bulat
melebar dan tipis. Warna biji jagung bermacam-macam, mulai dari kuning, merah,
ungu, dan putih (Iriany & Andi, 2008). Keragaman warna biji jagung tersebut
merupakan akibat adanya variasi genetik pada tumbuhan jagung tersebut.
Terkadang dalam satu tongkol biji jagung terdapat beberapa warna disebabkan
terjadinya transpose gen atau jumping gen (Iriany & Andi, 2008). Varietas tanaman
jagung juga bermacam-macam, beberapa varietas memungkinkan untuk tumbuh
lebih cepat (Fauzi, 2012).

11
 Kandungan biji jagung sebagian besar adalah karbohidrat, yaitu mencapai
80% dari biji kering. Karbohidrat yang terkandung dalam biji jagung pada
umumnya merupakan campuran amilosa dan amilopektin. Struktur biji jagung
secara umum terdiri dari tiga bagian, yaitu pericarp, endosperma, dan lembaga.
Pericarp merupakan bagian terluar biji jagung, lapisan kedua yaitu endosperma
yang merupakan cadangan makanan biji, dan lapisan terdalam yaitu lembaga atau
embrio biji (Purwono & Hartono, 2005). Biji jagung berkecambah apabila berada
pada kondisi lingkungan yang mendukung. Pada perkecambahan biji jagung, suhu
optimal berkisar 30°C – 32°C. Suhu di bawah 12,8°C akan mengganggu
perkecambahan sehingga dapat menurunkan yield, sementara pada suhu 40°C –
44°C lembaga (embrio) jagung menjadi rusak (Purwono & Hartono, 2005).

12
 BAB III
METODOLOGI

3.1 Alat dan Bahan

Alat dan bahan yang digunakan pada praktikum ini ditunjukkan pada
Tabel 3.1.

Tabel 3.1 Alat dan bahan pada percobaan

Alat Bahan
Bejana bioreaktor TIS RITA© (1 buah) Aluminium foil (22 cm x 22 cm)
Set selang dan pompa udara (1 buah) Biji kacang hijau yang telah
Penggaris (1 buah) diimbibisi 24 jam (4 gram)
Gelas ukur 10 mL (1 buah) Biji kacang hijau yang belum
Gelas ukur 1 L (1 buah) diimbibisi (2 gram)
Oven dengan suhu 50°C (1 buah) Air (2 L)
Oven dengan suhu 130°C (1 buah)
Neraca analitik (1 buah)
Desikator (1 buah)
Timer (1 buah)
Labu Erlenmeyer (2 buah)
Cawan petri (2 buah)

Rangkaian peralatan untuk percobaan dinamika proses sistem tangki dapat

dilihat pada Gambar 3.1 dan Gambar 3.2.

13
 Gambar 3.1 Rangkaian alat percobaan bioreaktor TIS RITA©.

3.2 Langkah Kerja

3.2.1 Penentuan swelling coefficient
Mula-mula dilakukan perhitungan volume terhadap 2 gram biji kacang
hijau yang belum pernah diimbibisi memanfaatkan teknik water displacement.
Sebelumnya air dengan volume tertentu disiapkan didalam gelas ukur, kemudian 2
gram biji tersebut dimasukkan kedalam gelas ukur yang sama. Pengukuran
dilakukan dengan tiga kali pengulangan (triplo) agar didapat hasil yang akurat.
Nilai volume rata-rata dari ketiga pengukuran inilah yang kemudian dimaknai
sebagai volume biji tersebut.
Biji yang sudah diukur volumenya kemudian diimbibisi selama 30 menit
sebelum dilakukan pengukuran serupa. Hal tersebut dilakukan berulang-ulang
hingga didapat volume 2 gram biji kacang hijau yang telah diimbibisi selama 120
menit. Secara paralel, volume biji yang sudah diimbibisi selama 24 jam (full
hydrated) juga diukur dengan teknik serupa. Nilai volume biji yang baru diimbibisi
sekian menit dan nilai volume biji yang telah diimbibisi selama 24 jam inilah yang
kemudian dibandingkan untuk mendapatkan nilai swelling coefficient.

14
3.2.2 Penentuan swelling quotient
Adapun dalam penentuan pengaruh temperatur terhadap volume
kesetimbangan, dilakukan pengukuran terhadap swelling quotient sesuai metode
yang pernah dijalankan oleh Leopold (1983). Dua gram biji kacang hijau yang
sudah diimbibisi selama 24 jam (full hydrated) diletakkan didalam ruang kultur
(suhu 20 C) dan dua gram dengan kondisi serupa diletakkan didalam oven (suhu 50
C). Setelah 1,5 jam, biji yang diletakkan di ruang kultur dikeluarkan kemudian
diukur volumenya menggunakan teknik water displacement seperti langkah kerja
3.2.1. Adapun biji yang berada didalam oven baru dapat dikeluarkan setelah 3 jam
sebelum dilakukan pengukuran volume menggunakan teknik serupa.

3.2.3 Perakitan Bioreaktor TIS RITA©

Mula-mula bioreaktor TIS RITA© yang sudah dirangkai disiapkan beserta
pompa dan timer-nya. Berikutnya air sebanyak 1300 mL dimasukkan kedalam
bioreaktor. Nilai ini berasal dari perhitungan melalui pendekatan water
displacement. Selang dari pompa kemudian disambungkan dengan selang yang
menuju bagian atas bioreaktor dan selang bagian samping bioreaktor ditutup
dengan penjepit. Selanjutnya 1.5 gram biji kacang hijau yang belum diimbibisi
disiapkan dan diletakkan kedalam 3 kompartemen secara merata (masing-masing
kompartemen terdiri dari 0.5 gram biji kacang hijau). Catu daya pompa pun
dihubuungkan ke timer yang sudah diatur programnya. Pengaturan tersebut
meliputi berapa lama ia akan menyala (timer on) dan berapa lama ia akan mati
(timer off). Jika sudah, timer dihubungkan ke sumber listrik dan pengamatan
dilakukan setiap 2 hari sekali pada jam yang sama. Apabila saat pengamatan biji
tidak terendam dengan cukup baik, maka dapat dilakukan penambahan air dengan
volume tertentu kedalam bioreaktor secara langsung.

3.2.4 Pengukuran Parameter Berat Kering dan Berat Basah

Sebuah aluminium foil yang telah dibentuk sedemikian rupa mula-mula
ditimbang menggunakan neraca analitik. Berikutnya dua gram biji kacang hijau
ditempatkan kedalam aluminium foil tersebut dan dilakukan pengukuran terhadap

15
berat basah kacang hijau tersebut. Setelah itu aluminium foil berisi kacang hijau
dipindahkan kedalam oven dengan suhu 130°C. Setelah 30 menit, biji kacang hijau
dikeluarkan dan ditempatkan kedalam desikator selama beberapa waktu sebelum
dilakukan pengukuran berat kering menggunakan neraca yang sama.
Berikutnya biji kacang hijau kembali dimasukkan kedalam oven 130°C
selama 10 menit dan setelahnya dilakukan penyimpanan di desikator dan
pengukuran berat kering seperti sebelumnya. Langkah ini terus dilakukan berulang-
ulang hingga didapat nilai berat kering biji kacang hijau yang konstan dengan
isyarat tidak berubahnya dua angka dibelakang koma hasil pengukuran.
Pengukuran terhadap nilai berat basah dan berat kering ini dilakukan setiap 2 hari
pada jam yang sama dengan mengambil sampel dari salah satu kompartemen pada
bioreaktor hingga seluruh biji kacang hijau dalam reaktor terambil.

16
 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Swelling Coefficient Biji Kacang Hijau dan Jagung

Swelling coefficient diperoleh dari nilai gradien persamaan regresi linier
antara proporsi pertambahan volume terhadap ekspansi total dengan waktu. Pada
praktikum ini laju ekspansi biji kacang hijau diamati selama 2 jam menunjukkan
hubungan yang sebanding antara pertambahan volume terhadap waktu (Gambar
4.1). Hal serupa diperoleh pada hasil penelitian Leopold (1983), pada kondisi awal
imbibisi sekitar 10 jam pertama pertambahan volume beberapa kecambah
menghasilkan hubungan linier terhadap waktu, sementara pada pengamatan selama
24 jam terlihat bahwa dinamika pertambahan volume pada biji selama imbibisi
setelah 10 jam cenderung melambat dan mendekati titik maksimum sesuai dengan
kinetika reaksi orde satu (Leopold, 1983).
0.600
y = 0,1299x + 0.2904
0.500 R² = 0.974
-ln(a max - a)/ a max

0.400

0.300 -ln(a max - a)/ a max

0.200 Linear (-ln(a max - a)/ a

max)
0.100

0.000
0 0.5 1 1.5 2 2.5
t (jam)

Gambar 4.1 Hubungan proporsi penambahan volume dan volume total terhadap
waktu pada biji kacang hijau

Berdasarkan persamaan yang diperoleh dari hasil regresi linier, maka nilai
swelling coefficient biji kacang hijau yang dipeoleh adalah 0,1299 jam-1 dengan
nilai R2 sebesar 0,974. Percobaan juga dilakukan pada biji jagung dimana tren yang
dihasilkan sama dengan biji kacang hijau (Gambar 4.2). Nilai swelling coefficient

17
biji jagung yang diperoleh lebih besar daripada kacang hijau, yaitu sebesar 1,2633
jam-1 dengan nilai R2 sebesar 0,873. Berbeda dengan hasil percobaan Leopold
(1983) dengan waktu pengamatan selama 24 jam, nilai swelling coefficient biji
jagung (0,157 jam-1) lebih kecil daripada kacang hijau (0,180 jam-1).
4.500
4.000
3.500 y = 1,2633x + 0.8838
-ln(a max - a)/ a max

R² = 0.873
3.000
2.500
-ln(a max - a)/ a
2.000 max
1.500 Linear (-ln(a max -
a)/ a max)
1.000
0.500
0.000
0 1 2 3
t (jam)

Gambar 4.2 Hubungan proporsi penambahan volume dan volume total terhadap
waktu pada biji jagung

Perbedaan hasil percobaan ini dapat disebabkan oleh beberapa alasan.

Pertama, perbedaan varietas biji yang digunakan. Biji jagung yang digunakan pada
praktikum ini merupakan biji yang telah mendapatkan seed treatment, yaitu biji
yang telah siap tanam sehingga tidak diperlukan perlakuan khusus sebelum
ditanam. Alasan tersebut diduga menyebabkan laju ekspansi biji jagung pada
percobaan ini lebih besar daripada biji kacang hijau yang tidak mendapatkan
perlakuan khusus. Kedua, keragaman sifat genetik dan perbedaan struktur pada biji
juga mempengaruhi karakteristik pertumbuhannya. Secara teori biji jagung
memiliki ukuran yang lebih besar dan mengandung lebih banyak pati daripada biji
kacang hijau, sehingga proses imbibisi cenderung lambat karena ikatan kimia yang
harus diputuskan dalam biji jagung lebih banyak daripada kacang hijau. Akan
tetapi, tingkat kekeringan biji mempengaruhi nilai potensial air pada biji. Biji
kacang hijau yang digunakan relatif lebih kering daripada biji jagung sehingga laju
penyerapan air pada biji kacang hijau lebih lama dibandingkan dengan jagung. Hal

18
tersebut diduga menyebabkan laju ekspansi biji jagung lebih cepat daripada biji
kacang hijau. Selain itu, waktu pengamatan laju ekspansi biji pada percobaaan ini
hanya dilakukan selama 2 jam sementara Leopold (1983) melakukan pengamatan
hingga 24 jam dengan interval 10 jam. Sehingga dinamika laju ekspansi biji pada
percobaan ini tidak teramati secara keseluruhan. Pengabaian tersebut berpengaruh
pada galat nilai swelling coefficient biji jagung dan kacang hijau pada percobaan
ini.

4.2 Pengaruh Suhu Imbibisi dan Frekuensi Perendeman terhadap Swelling

Quotient
Swelling quotient ditentukan berdasarkan rasio volume awal biji terhadap
volume akhir biji setelah perendaman. Berdasarkan hasil pengamatan yang
dilakukan, nilai swelling quotient kacang hijau dan jagung untuk dua variasi suhu
perendaman disajikan pada Tabel 4.1.

Tabel 4.1 Swelling quotient untuk dua variasi suhu yang berbeda
Swelling quotient
Kelompok
T = 20oC T = 50oC
5 (kacang hijau) 1,125 1,273
6 (kacang hijau) 1,083 1,207
3 (jagung) 0,875 1,125
4 (jagung) 1,071 1

Swelling quotient menggambarkan perubahan karakter mikroskopik biji

yang diukur berdasarkan perubahan volume biji tersebut. Oleh karena itu, nilai dari
swelling quotient akan berubah ketika faktor-faktor yang mempengaruhi karakter
mikroskopik biji berubah. Dari percobaan yang dilakukan, didapatkan bahwa pada
suhu imbibisi 50oC nilai swelling quotient biji lebih besar dibandingkan pada suhu
20oC untuk semua pengamatan yang dilakukan oleh kelompok yang berbeda. Hal
ini diakibatkan suhu yang lebih tinggi akan mempercapat deformasi polimer-
polimer penyusun biji sehingga untuk rentang waktu yang sama nilai swelling

19
quotient pada suhu perendaman yang lebih tinggi akan lebih besar dibandingkan
pada suhu perendaman yang lebih rendah.
Salah satu karakter mikroskopik yang dapat dianalogikan dengan peristiwa
swelling dari biji adalah peristiwa swelling dari polimer-polimer penyusun biji
(Leopold, 1983). Suhu imbibisi akan mempengaruhi derajat deformasi polimer-
polimer tersebut ketika proses imbibisi berjalan. Suhu yang lebih tinggi akan
menyediakan energi yang lebih banyak untuk meregangkan struktur dari polimer-
polimer penyusun biji tersebut sehingga dalam rentang waktu yang sama, suhu yang
lebih tinggi dapat mempercepat proses deformasi dari polimer tersebut. Proses
deformasi polimer ini akan menyediakan celah antarmolekul yang lebih luas untuk
dapat diisi oleh air dan meningkatkan derajat pembengkakan biji (Chung et al.,
1961). Karakteristik perubahan volume akhir biji pada suhu perendaman yang
berbeda terhadap waktu digambarkan melalui Gambar 4.3.
1.3 1.6
1.28 1.4
1.26
1.2
1.24
1.22 1

t (jam)
V/V0

1.2 0.8
1.18 0.6
1.16
0.4
1.14
1.12 0.2
1.1 0
0 10 20 30 40 50 60
T (℃)

Swelling coefficient waktu

Linear (Swelling coefficient) Linear (waktu)

Gambar 4.3 Kurva hubungan antara swelling coefficient dan suhu perendaman

Variasi jenis biji yang digunakan pada percobaan ini adalah biji dari
tanaman kacang hijau dan biji dari tanaman jagung. Untuk membandingkan
swelling quotient dari kedua jenis biji, data swelling quotient pada Tabel 4.1 dirata-
rata terlebih dahulu dan hasilnya disajikan pada Tabel 4.2. Penghitungan nilai rata-

20
rata dapat dilakukan karena perlakuan dan kondisi lingkungan ketika pengambilan
data serupa dan bisa dianggap sebagai data duplo.

Tabel 4.2 Swelling quotient rata-rata untuk kedua jenis biji yang digunakan
Swelling quotient
Tanaman
T = 20oC T = 50oC
Kacang hijau 1,104 1,24
Jagung 1,083 1,207

Dari perhitungan didapatkan bahwa nilai swelling quotient biji jagung

lebih kecil dibandingkan biji kacang hijau. Hal ini disebabkan adanya perbedaan
karakteristik anatomi dari kedua spesies tanaman tersebut. Dilihat dari anatominya,
jagung memiliki struktur terspesialisasi sebagai penyesuaian terhadap kondisi
tumbuhnya. Jagung termasuk tanaman C4 yang mampu beradaptasi dengan baik
pada faktor-faktor pembatas pertumbuhan seperti intensitas radiasi cahaya matahari
yang tinggi, curah hujan yang rendah, dan kesuburan tanah yang relatif rendah.
Anatomi terspesialisasi ini dikarakterisasi dengan jaringan pengangkut yang
berkembang baik bersama sel-sel bundle sheet yang mengandung sejumlah besar
organel yang dikenal dengan Kranz anatomy (Zebua et al., 2012). Struktur ini
mengakibatkan jarak antarpembuluh pada tanaman C4 lebih kecil dibandingkan
struktur anatomi kacang hijau yang termasuk tumbuhan C3. Struktur anatomi
jagung yang lebih rapat ini mengakibatkan ruang yang tersedia untuk dapat diisi
oleh air lebih sedikit sehingga nilai swelling quotient biji jagung untuk rentang
waktu yang sama bernilai lebih kecil pada kedua variasi suhu.

21
 Gambar 4.4 Struktur anatomi tanaman C3 dan C4
(Sumber: Langdale, 2015)

4.3 Kurva dan Laju Pertumbuhan Tanaman

Tanaman yang diamati di dalam percobaan ini, yaitu kacang hijau dan
jagung, menunjukkan respon yang berbeda terhadap variasi frekuensi perendaman
yang diberikan. Perendaman dari 2 variasi memiliki total waktu yang sama jika
dijumlahkan, namun perbedaan terdapat pada frekuensi dan rentang waktu tiap
perendaman. Perbedaan ini memiliki pengaruh terhadap pertumbuhan biomassa
basah dari tanaman terhadap waktu seperti yang ditunjukkan oleh Gambar 4.5 dan
Gambar 4.6.
4.50
4.00
3.50
Berat basah (g)

3.00
2.50
2.00 r : 48; tr : 96
1.50 r : 24; tr : 48
1.00
0.50
0.00
0 2 4 6 8
Waktu (hari)

Gambar 4.5 Kurva pertumbuhan biomassa basah kacang hijau (r : waktu

terendam, tr : waktu tidak terendam)

22
 4.00

3.50

3.00
Berat basah (g)

2.50

2.00
r : 48; tr : 96
1.50 r : 24; tr : 48
1.00

0.50

0.00
0 1 2 3 4 5 6 7
Waktu (hari)

Gambar 4.6 Kurva pertumbuhan biomassa basah jagung (r : waktu terendam, tr :

waktu tidak terendam)

Kacang hijau (Gambar 4.5) dengan frekuensi perendaman 48 menit

memiliki biomassa basah yang pertumbuhannya lebih cepat, ditunjukkan dengan
posisi garis yang berada di atas. Namun, hal yang sebaliknya terjadi pada jagung
(Gambar 4.5). Pertumbuhan biomassa basah jagung lebih cepat di dalam frekuensi
perendaman 24 menit. Secara umum, laju pertumbuhan biomassa basah tanaman
kacang hijau lebih cepat jika dibandingkan dengan jagung seperti dapat dilihat pada
Tabel 4.3.

Tabel 4.3 Laju pertumbuhan biomassa basah kacang hijau dan jagung (r : waktu
perendaman)
Laju pertumbuhan (hari-1)
Tanaman
r : 48 menit r : 24 menit
Kacang hijau 0,350 0,301
Jagung 0,194 0,216

Laju pertumbuhan jagung yang lebih lambat dibandingkan kacang hijau

dapat disebabkan oleh adanya coating pada biji jagung. Coating ini memiliki fungsi

23
untuk mencegah biji berkecambah pada saat penyimpanan. Namun, dibalik
fungsinya tersebut, coating dapat menyebabkan proses imbibisi pada biji jagung
menjadi terhambat, sehingga laju pertumbuhannya menjadi lebih lambat (Schneider
& Renault, 1997).
Waktu yang dibutuhkan oleh biji secara umum untuk melakukan imbibisi
hingga menjadi jenuh dengan air adalah 24 jam (Leopold, 1983). Meskipun
demikian, variasi frekuensi perendaman yang diberikan memberikan hasil yang
berbeda antara biji kacang hijau dan biji jagung. Perbedaan spesies, yang merujuk
pada perbedaan kondisi fisis maupun hereditas biji, diduga memiliki peran yang
besar dalam proses imbibisi dan perkecambahan (Leopold, 1983). Kondisi yang
terjadi pada biji kacang hijau adalah sudah mulai berkecambahnya biji tersebut pada
hari pertama, sedangkan yang terjadi pada jagung lebih lambat.

Tabel 4.4 Laju pertumbuhan biomassa kering kacang hijau dan jagung (r : waktu
perendaman)
Laju pertumbuhan (hari-1)
Tanaman
r : 48 menit r : 24 menit
Kacang hijau 0,124 -0,074
Jagung -0,028 -0,018

Selain biomassa basah, kurva dan laju pertumbuhan juga ditinjau untuk
biomassa kering. Laju pertumbuhan biomassa kering pada Tabel 4.4 menunjukkan
nilai yang lebih rendah dibandingkan biomassa basah, serta beberapa menunjukkan
nilai yang negatif. Kecenderungan atau tren dari kurva pertumbuhan dapat dilihat
pada Gambar 4.7 dan Gambar 4.8. Lebih rendahnya laju pertumbuhan biomassa
kering terjadi karena massa air yang diserap oleh kecambah terakumulasi banyak
pada biomassa basah. Massa air tersebut sudah tidak terdapat lagi pada biomassa
kering. Selain itu, proses perkecambahan juga diikuti dengan terjadinya respirasi
untuk pertumbuhan biji tersebut menjadi kecambah (Mudiana, 2007). Proses
perkecambahan dilakukan di dalam tempat yang tidak terpapar cahaya, sehingga
tidak ada proses fotosintesis yang terjadi. Tidak terjadinya fotosintesis

24
menyebabkan kecambah sangat bergantung pada cadangan makanan yang terdapat
pada kotiledon dan endosprema sebagai sumber energi. Konsumsi cadangan
makanan ini dan tidak terjadinya fotosintesis dapat menyebabkan tanaman tetap
bertumbuh namun dengan biomassa kering yang menurun.
1.20

1.00
Berat kering (g)

0.80

0.60
r : 48; tr : 96

0.40 r : 24; tr : 48

0.20

0.00
0 1 2 3 4 5 6 7
Waktu (hari)

Gambar 4.7 Kurva pertumbuhan biomassa kering kacang hijau (r : waktu

terendam, tr : waktu tidak terendam)

1.60

1.40

1.20
Berat kering (g)

1.00

0.80
r : 48; tr : 96
0.60 r : 24; tr : 48
0.40

0.20

0.00
0 1 2 3 4 5 6 7
Waktu (hari)

Gambar 4.8 Kurva pertumbuhan biomassa kering jagung (r : waktu terendam, tr :

waktu tidak terendam)

25
 BAB V
PENUTUP

5.1 Kesimpulan
Berdasarkan percobaan yang telah dilakukan, didapat kesimpulan sebagai
berikut.
1. Swelling coefficient biji jagung lebih besar daripada swelling coefficient
kacang hijau.
2. Swelling quotient untuk kedua jenis biji lebih besar nilainya untuk suhu
perendaman yang lebih tinggi.
3. Frekuensi perendaman yang lebih lama akan memberikan respon
pertumbuhan yang lebih baik pada biji kacang hijau ditandai dengan
peningkatan pada nilai berat basah pada kurva pertumbuhan.
4. Frekuensi perendaman yang lebih singkat akan memberikan respon
pertumbuhan yang lebih baik pada biji jagung ditandai dengan peningkatan
pada nilai berat basah pada kurva pertumbuhan.
5. Laju pertumbuhan biji jagung lebih lambat daripada laju pertumbuhan
kacang hijau.
.
5.2 Saran
Berikut adalah beberapa saran yang dapat dilakukan agar penyelenggaraan
praktikum modul ini dapat menjadi semakin baik kedepannya.
1. Perlu dilakukan isolasi sempurna terhadap bioreaktor agar volume air yang
berkurang karena bocor dapat diminimalisir.
2. Penambahan titik waktu pada pengamatan berat basah dan berat kering agar
dapat dilakukan analisis yang lebih komprehensif lagi.

26
 DAFTAR PUSTAKA

Attucci, S., Carde, J., Raymond, P., Ges, V. S., Spiteri, A., & Pradet, A. (1991).
Oxidative phosphorylation by mitochondria extracted from dry sunflower
seeds. Plant Physiol, 390-398.
Bewley, J. D. (1997). Seed Germination and Dormancy. The Plant Cell, 1055-1066.
Bewley, J., & Black, M. (1994). Seeds: Physiology of Development and
Germination. New York: Plenum Press.
Bradford, K. J. (1995). Water relations in seed germination. In J. Kigel, & G. Galili,
Seed Development and Germination (pp. 313-339). New York: Marcel
Dekker.
Chung, D. S., Fan, L., & Shellenberger, J. A. (1961). Volume Increase of Wheat
Kernels Accompanying Absorption of Liquid Water. Manhattan: Kansas
State University.
Cosgrove, D. (1997). Relaxation in high-stress environment: The molecular bases
of extensible cell walls and cell enlargement. Plant Cell, 1031-1041.
Crowe, J., & Crowe, L. (1992). Membrane integrity in anhydroiotic organisms:
Toward an mechanism for stabilizing dry seeds. In G. Somero, C. Osmond,
& C. Bolis, Water and lIfe (pp. 87-103). Berlin: Springer-Verlag.
Etienne, H., & Berthouly, M. (2002). Temporary immersion systems in plant
micropropagation. Plant Cell, Tissue, and Organ Culture, 215-231.
Gutterman, Y. (1993). Seed germination in desert plants. Berlin: Springer-Verlag.
Langdale, J. (2015). Kranz Anatomy. Retrieved from
https://langdalelab.com/research-2/kranz-anatomy/.
Leopold, A. C. (1983). Volumetric components of seed imbibition. Plant
Physiology, 73(3), 677-680.
Mudiana, D. (2007). Germination of Syzigium cumini (L.) Skeels. Biodiversitas
Journal of Biodiversity, 8(1), 39-42.
Schneider, A., & Renault, P. (1997). Effects of coating on seed imbibition : I. Model
estimates of water transport coefficient. Crop Science, 37(6), 1841-1849.

27
Schopfer, P., & Placy, C. (1985). Control of seed germination by abscisic acid III.
Effect of embryo growth potential (minimum turgor pressure) and growth
coefficient (cell wall extensibility) in Brassica napus L. Plant Physiol, 676-
686.
Teisson, C., & Alvard, D. (1999). In vitro production of potato microtubers in liquid
medium using temporary immersion. Potato Research, 499-504.
Watt, M. (2012). The status of temporary immersion system (TIS) technology for
plant micropropagation . African Journal of Biotechnology, 14025-14035.
Zebua, S. J., Toekidjo, Rabaniyah, R. (2012). Kualitas Benih Kacang Hijau (Vigna
Radiata (L.) R. Wilczek) pada Pertanaman Monokultur dan Tumpang Sari
Dengan Jagung (Zea Mays L.). Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada
Ziv, M. (2000). Bioreactor technology for plant micropropagation. Hortic : Rev, 1-
30.

28
LAMPIRAN

29
 Lampiran A Cara Pengolahan Data

A.1 Swelling Coefficient

Data mentah untuk swelling coefficient biji kacang hijau terdapat pada
Lampiran B.1. Nilai swelling coefficient ditentukan dengan menggunakan
persamaan Pacheles (A.1.1) berikut.
𝑎𝑚𝑎𝑥 −𝑎
𝑘𝑡 = −𝑙𝑜𝑔𝑒 ( ) (A.1.1)
𝑎𝑚𝑎𝑥

dengan k adalah nilai swelling coefficient (jam-1), t adalah waktu (jam), a adalah
pertambahan volume pada waktu t (mL), dan amax adalah pertambahan volume
maksimal (mL). Data pertambahan volume yang diperoleh kemudian digunakan
untuk menentukan proporsi pertambahan volume terhadap pertambahan volume
total. Selanjutnya data tersebut diplot terhadap waktu dan dilakukan regresi linier
dengan menggunakan Ms. Excel. Persamaan regresi linier ditunjukkan oleh (A.1.1)
dan dengan nilai R2 sebesar 0,974. Nilai k adalah gradien dari persamaan regresi
linier yang diperoleh, sehingga nilai k adalah sebesar 0,1299 jam-1.
𝑦 = 0.1299𝑥 + 0.2904 (A.1.2)
0.600
y = 0.1299x + 0.2904
R² = 0.974
0.500
-ln(a max - a)/ a max

0.400

0.300 -ln(a max - a)/ a max

Linear (-ln(a max - a)/ a

0.200 max)

0.100

0.000
0 0.5 1 1.5 2 2.5
t (jam)

Gambar A.1 Hubungan proporsi penambahan volume dan volume total terhadap
waktu

30
A.2 Swelling Quotient
Data pengamatan pertambahan volume biji kacang hijau dengan perlakuan
perendaman pada 20℃ dan 50℃ ditampilkan pada lampiran B.3. Swelling quotient
ditentukan dengan membagi volume akhir (V) dengan volume awal (V0).
Kemudian data swelling quotient dan waktu perendaman diplotkan terhadap
perubahan suhu. Pengaluran garis hubungan antara swelling quotient dan waktu
perendaman terhadap perubahan suhu disajikan pada Gambar A.2.
1.300 1.6
1.280 1.4
1.260
1.2
1.240
1.220 1

t (jam)
V/V0

1.200 0.8
1.180 y = 0.0049x + 1.0265 0.6
1.160
0.4
1.140
1.120 0.2
1.100 0
0 10 20 30 40 50 60
T (℃)

Swelling coefficient waktu

Linear (Swelling coefficient) Linear (waktu)

Gambar A.2 Hubungan swelling quotient dan waktu perendaman terhadap

perubahan suhu

31
 Lampiran B Data Mentah

B.1 Data Mentah Swelling Coefficient Biji Kacang Hijau Kelompok 5

Volume Biji (mL)
t (jam)
Simplo Duplo Triplo Rata-rata Standar Deviasi
0 1.5 1.4 1.5 1.467 0.047
0.5 1.5 1.4 2 1.633 0.262
1 2 2 2.2 2.067 0.094
1.5 2 2.4 2.2 2.200 0.163
2 2.25 2.6 2.4 2.417 0.143

dengan nilai amax ditentukan dengan data berikut.

Pengulangan amax amax rataan
1 5.5 5.75
2 6 0

B.2 Data Mentah Swelling Coefficient Biji Kacang Hijau dan Jagung
a max
Biji Kelompok a=0 a=0,5 a=1 a=1,5 a=2
(mL)
3 4,000 2,667 3,167 3,375 3,333 3,333
Jagung
4 3,750 2,167 3,167 3,200 3,367 3,667
Kacang 5 5,750 1,467 1,633 2,067 2,200 2,417
Hijau 6 5,917 1,500 2,270 2,300 2,330 2,330

B.3 Data Mentah Swelling Quotient Biji Kacang Hijau

Volume (mL)
Biji Kelompok Vo Vo V V
(T=20℃) (T=50℃) (T=20℃) (T=50℃)
3 4 4 3.5 4.5
Jagung
4 3.5 4 3.75 4
Kacang 5 6 5.5 6.75 7
Hijau 6 6 5.8 6.5 7

32
B.4 Data Mentah Kurva Pertumbuhan Biji Kacang Hijau
Pengamatan (hari)
Biji Kel. t=0 t=1 t=2 t=3
FW DW FW DW FW DW FW DW
3 1.052 1.024 2.083 0.893 2.762 1.131 3.361 0.861
Jagung
4 1.000 0.971 2.183 1.033 2.765 1.398 3.652 0.866
Kacang 5 0.512 0.504 2.092 0.734 2.720 0.897 4.174 1.054
Hijau 6 0.517 0.503 1.712 0.452 2.595 0.482 3.166 0.320

33
 Lampiran C Dokumentasi

C.1 Pengukuran volume biji dengan teknik water displacement

C.2 Percobaan penentuan swelling quotient

C.3 Kacang hijau dalam bioreaktor TIS RITA© pada t=0

34
C.4 Kacang hijau dalam bioreaktor TIS RITA© pada t=1

C.5 Kacang hijau dalam bioreaktor TIS RITA© pada t=3

35
36