Laporan Sistematika Mikrobia
Laporan Sistematika Mikrobia
Dokumen FO-UGM-BI-07-13
BORANG
Berlaku Sejak 03 Maret 2008
LAPORAN PRAKTIKUM SISTEMATIKA MIKROBIA Revisi 01
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Halaman 2 of 15
1. PENDAHULUAN
1.1.Latar Belakang
Mikroorganisme atau mikrobia merupakan organisme yang berukuran
sangat kecil, sehingga untuk mengamatinya diperlukan alat bantu, seperti
mikroskop. Mikroorganisme disebut juga organisme mikroskopik.
Mikroorganisme dapat berupa sel tunggal (uniseluler) taupun bersel banyak
(multiseluler) (Madigan et. al., 2009). Salah satu contoh mikroorganisme
adalah bakteri.
1.2.Tujuan
Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mempelajari prosedur
taksonomi numerik fenetik dalam klasifikasi bakteri.
2. METODE
2.1.Alat dan Bahan
2.1.1. Morfologi sel
Preparat enam strain bakteri yang dicat dengan cat gram negatif dan
gram positif.
2.1.2. Morfologi koloni bakteri
Enam plate berisi enam kultur murni strain bakteri berbeda, enam media
nutrient agar tegak berisi kultur strain bakteri berbeda, enam media nutrient
agar miring berisi kultur strain baktero berbeda, enam media nutrient cair
berisi kultur strain bakteri berbeda.
2.1.3. Pengujian sifat biokimiawi
a. Fermentasi karbohidrat
Enam kultur strain bakteri berbeda pada media glukosa, laktosa, dan
sukrosa.
b. Hidrolisis Pati
Enam media pati agar plate berisi enam kultur strain bakteri berbeda,
ditetesi dengan larutan JKJ.
c. Hidrolisis kasein
Enam kultur strain bakteri berbeda pada media susu agar.
d. Pembentukan indol
Enam kultur strain bakteri berbeda dalam media tripton cair, ditambah
eter dan reagen Ehrlich.
e. Reduksi nitrat
No. Dokumen FO-UGM-BI-07-13
BORANG
Berlaku Sejak 03 Maret 2008
LAPORAN PRAKTIKUM SISTEMATIKA MIKROBIA Revisi 01
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Halaman 4 of 15
Enam media nitrat cair berisi enam kultur strain bakteri berbeda, ditetesi
asam sulfanilat dan naftilamin.
f. Reduksi hydrogen peroksida (H2O2)
Preparat enam strain bakteri ditetesi dengan H2O2.
2.2.Cara Kerja
2.2.1. Koleksi data
Karakter yang diamati dalam pengamatan morfologi sel meliputi bentuk sel
dan sifat pengecatan gram. Karekter yang diamati dalam koleksi data
morfologi koloni meliputi bentuk pertumbuhan, pertumbuhan, permukaan,
bentuk koloni, elevasi, bentuk tepi, dan tekstur permukaan. Karakter yang
diamati pada pengamatan uji biokimiawi meliputi fermentasi karbohidrat,
hidrolisis pati, hidrolisis kasein, pembentukan indol, reduksi nitrat dan
reduksi H2O2.
2.2.2. Perhitungan nilai similaritas
Nilai similaritas dihitung dengan menggunakan dua macam metode yaitu
simple matching coefficient (Ssm) dan jaccard coefficient (Sj). Untuk
rumus Ssm dan Sj adalah sebagai berikut:
𝑎+𝑑
𝑆𝑠𝑚 = × 100%
𝑎+𝑏+𝑐+𝑑
𝑎
𝑆𝑗 = × 100%
𝑎+𝑏+𝑐
Keterangan :
b= jumlah karakter yang (+) untuk strain pertama dan (-) untuk strain kedua
c= jumlah karakter yang (-) untuk strain pertama dan (-) untuk strain kedua
3. HASIL
Berikut ini adalah hasil dari pengamatan bakteri meliputi morfologi sel,
morfologi koloni, dan pengujian sifat biokimiawi. Hasil pengamatan meliputi
matriks nxt, matriks similaritas, clustering analysis, dendogram, matriks turunan,
dan koefisien korelasi.
No. Dokumen FO-UGM-BI-07-13
BORANG
Berlaku Sejak 03 Maret 2008
LAPORAN PRAKTIKUM SISTEMATIKA MIKROBIA Revisi 01
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Halaman 6 of 15
Strain (OTU)
No. Karakter
A B C D E F
MORFOLOGI SEL
Bentuk Sel
1 Bacillus + + + - - -
2 Coccus - - - + + +
Pengecatan Gram
3 Negatif + - - + + +
4 Positif - + + - - -
MORFOLOGI KOLONI (AGAR MIRING)
Bentuk Pertumbuhan
5 Arborescent + - - - - -
6 Echinulata - + + + + +
Pertumbuhan
7 Tebal + + - - + -
8 Sedang - - - + - +
9 Tipis - - + - - -
Kilat
10 Mengkilat + + - - - +
11 Tidak Mengkilat - - + + + -
MORFOLOGI KOLONI (AGAR TEGAK)
Bentuk Pertumbuhan
12 Filiform + + - + + +
13 Beaded - - + - - -
Pertumbuhan
14 Tebal - + - - - -
15 Tipis + - + + - +
16 Sedang - - - - + -
MORFOLOGI KOLONI (MEDIUM CAIR)
Bentuk Pertumbuhan
17 Keruh - + - + - -
18 Jernih + - + - + +
Permukaan
19 Ring + + - + - -
20 Pellicle - - + - - -
21 Flocculent - - - - + +
MORFOLOGI KOLONI (PLATE)
Bentuk Koloni
22 Irregular + - - + + +
No. Dokumen FO-UGM-BI-07-13
BORANG
Berlaku Sejak 03 Maret 2008
LAPORAN PRAKTIKUM SISTEMATIKA MIKROBIA Revisi 01
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Halaman 7 of 15
23 Rhizoid - + - - - -
24 Flamentous - - + - - -
Elevasi
25 Flat + + - - - -
26 Raised - - + - - -
27 Umbonate - - - + - -
28 Convex - - - - + +
Tepi
29 Undulate + - - + + -
30 Filamentous - + - - - -
31 Lobate - - + - - -
32 Entire - - - - - +
Tekstur Permukaan
33 Contoured + + - + - -
34 Smooth - - + - + +
UJI BIOKIMIA
Fermentasi Karbohidrat
35 Manotil - + - + - -
36 Glukosa - + + + - +
37 Laktosa + + + + - -
Hidrolisis Kasein
38 Zona Jernih + + + + + -
Hidrolisis Pati
39 Zona Jernih - + - + + +
Pembentukan Indol
40 Cincin Merah - + - + - -
41 Penggumpalan + + + + + -
Reduksi Nitrat
42 Perubahan Warna + + - + + -
Reduksi H2O2
43 Terbentuk Gelembung - + + + - +
Berdasarkan data yang telah ditata pada tabel n x t diatas, selanjutnya data
tersebut digunakan untuk menghitung similaritas, indeks similaritas yang dihitung
dalam percobaan ini adalah Simple Matching Coefficient (Ssm) dan Jaccard
Coefficient (Sj).
No. Dokumen FO-UGM-BI-07-13
BORANG
Berlaku Sejak 03 Maret 2008
LAPORAN PRAKTIKUM SISTEMATIKA MIKROBIA Revisi 01
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Halaman 8 of 15
Strain (OTU)
Similaritas
A B C D E F
1 A B C D E F
0,698 A B C D (E,F)
0,628 A (B,D) C (E,F)
0,605 {[A(B,D)]} C (E,F)
0,523 {[A(B,D)(E,F)]} C
0,46 {[A(B,D)(E,F)C]}
No. Dokumen FO-UGM-BI-07-13
BORANG
Berlaku Sejak 03 Maret 2008
LAPORAN PRAKTIKUM SISTEMATIKA MIKROBIA Revisi 01
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Halaman 9 of 15
Strain (OTU)
Similaritas
A B C D E F
1 A B C D E F
0,467 A (B,D) C E F
0,435 A (B,D) C (E,F)
0,393 {[A(B,D)]} C (E,F)
0,29 {[A(B,D)(E,F)]} C
0,226 {[A(B,D)(E,F)C]}
UPGMA
Strain C
Strain F
Strain E
Strain D
Strain B
Strain A
0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1
UPGMA
Strain C
Strain F
Strain E
Strain D
Strain B
Strain A
0,04 0,2 0,36 0,52 0,68 0,84 1
Jaccard's Coefficient
Tabel 6. Nilai indeks similaritas antar strain dalam data set matriks similaritas yang
diturunkan (derived) dendogram berdasarkan Simple Matching Coefficient (Ssm).
Strain A Strain B Strain C Strain D Strain E Strain F
Strain A 1
Strain B 0,605 1
Strain C 0,465 0,442 1
Strain D 0,605 0,628 0,442 1
Strain E 0,628 0,419 0,465 0,605 1
Strain F 0,512 0,395 0,488 0,581 0,698 1
No. Dokumen FO-UGM-BI-07-13
BORANG
Berlaku Sejak 03 Maret 2008
LAPORAN PRAKTIKUM SISTEMATIKA MIKROBIA Revisi 01
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Halaman 11 of 15
Tabel 7. Nilai indeks similaritas antar strain dalam data set matriks similaritas yang
diturunkan (derived) dendogram berdasarkan Jaccard Coefficient (Sj).
Dari data nilai indeks similaritas antar strain dalam data set matriks similaritas
yang diturunkan (derived) dendogram, baik berdasarkan Simple Matching
Coefficient (Ssm) maupun Jaccard Coefficient (Sj), kemudian dilakukan analisis
Cophenetic-Correlation untuk menguji dendogram hasil klasifikasi numerik-
fenetik.
Tabel 8. Analisis Cophenetic-Correlation berdasarkan Simple Matching Coefficient
(Ssm)
Ssm X Y X2 Y2 XY
A-B 0,813 0,605 0,660 0,366 0,492
A-C 0,541 0,465 0,292 0,216 0,251
A-D 0,813 0,605 0,660 0,366 0,492
A-E 0,794 0,628 0,631 0,394 0,499
A-F 0,595 0,512 0,354 0,262 0,304
B-C 0,543 0,442 0,295 0,195 0,240
B-D 0,931 0,628 0,867 0,394 0,585
B-E 0,500 0,419 0,250 0,176 0,210
B-F 0,459 0,395 0,211 0,156 0,181
C-D 0,543 0,442 0,295 0,195 0,240
C-E 0,541 0,465 0,292 0,216 0,251
C-F 0,568 0,488 0,322 0,238 0,277
D-E 0,813 0,605 0,660 0,366 0,492
D-F 0,758 0,581 0,574 0,338 0,440
E-F 0,909 0,698 0,826 0,487 0,635
∑ 10,118 7,978 7,189 4,367 5,588
No. Dokumen FO-UGM-BI-07-13
BORANG
Berlaku Sejak 03 Maret 2008
LAPORAN PRAKTIKUM SISTEMATIKA MIKROBIA Revisi 01
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Halaman 12 of 15
4. PEMBAHASAN
Sitematika mikrobia mmerupakan ilmu yang mempelajari keanekaragaman
mikrobia serta hubungan diantaranya yang ditinjau fari krmiripan sifat dan
hubungan filogenik. Sistematika mikrobia diperlukan untuk mengetahui
keanekaragaman mikrobia. Ilmu ini meliputi tiga subdisiplin ilmu, yaitu identifikasi,
klasifikasi, dan tanamana (Winn et. al., 2006).
Menurut Priest,F & Goodfellow (2000) terdapat beberapa macam konsep yang
untuk melakukan klasifikasi bakteri. Konsep pertama adalah taxo-species concept,
yaitu konsep klasifikasi berdasarkan similaritas yang mencapai 70%. Kedua, geno-
species concept yaitu konsep klasifikasi berdasarkan genotype bakteri. Konsep
ketiga adalah genomic-species concept yaitu suatu bakteri dikatakan satu spesies
No. Dokumen FO-UGM-BI-07-13
BORANG
Berlaku Sejak 03 Maret 2008
LAPORAN PRAKTIKUM SISTEMATIKA MIKROBIA Revisi 01
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Halaman 13 of 15
jika memiliki DNA relatedness lebih dari 70%, sedangkan konsep terakhir yaitu
nomen-species concept, suatu bakteri dikatakan satu spesies jika mengacu pada type
strain yang sama. Berdasarkan berbagai macam konsep tersebut, dilakukan
pengklasifikasian meliputi banyaknya karakter, yaitu klasifikasi monotetik,
klasifikasi berdasarkan jenis karakter yaitu klasifikasi numerik fenetik politetik,
klasifikasi berdasrkan sifat kimiawi yaitu khemotaksonomi, dan klasifikasi
molecular. Pada praktikum ini klasifikasi yang dilakukan adalah klasifikasi numerik
fenetik.
sebesar 0,999995859 (99, 9995859%) dan pada metode Sj, R sebesar 0,999997868
(99, 9997868%). Dari sini dapat disimpulkan bahwa clustering analysis deng
metode Sj lebih akurat daripada metode Ssm.
5. KESIMPULAN
Prosedur taksonomi numeric meliputi pembuatan table nxt, matriks similaritas
SSM dan SJ, clustering analysis SSM dan SJ, pembuatan dendogram SSM dan SJ,
matriks similaritas evaluasi dendogram SSM dan SJ, pembuatan tabel korelasi
kofenetik dan mencari nilai koefisien korelasi. Hasil dendogram dengan
menggunakan indeks similaritas Sj lebih akurat dibanding dengan indeksi
similaritas Ssm.
6. DAFTAR PUSTAKA
Bergey. 2001. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. 2 ed. Volume I.
Springer –velay. New York.
Madigan, M.T., J.M. Martinko, P.V. Dunlap, and D.P. Clark. 2009. Brock Biology
of Microorganisms, 12th edition. Pearson Benjamin-Cummings. San
Francisco. p.50.
Prescott, L.M., J.P. Harley, and B.A. Klein. 2007. Microbiology 7th Edition. Mc
Graw-Hill Company, Inc. New York. p. 122.
Priest,F & Goodfellow. 2000. Applied Microbial Systematic. Kluwer Academic
Publisher. Netherland. pp: 8-10, 94.
Romesburg, C. 2004. Cluster Analysis for Researchers. Luna Press. North Carolina,
USA. p. 143.
Waluyo, L. 2005. Mikrobiologi Umum.edisi ke-2. UMM-Press. Malang. hal: 15,
16, 21.
Winn, W., S. Allen, W. Janda, E. Koneman, G. Procop, P. Schreckenberger, and G.
Woods. 2006. Koneman’s Color Atlas and Textbook of Diagnostic
Microbiology, 6th Ed. Lippincott Williams and Wilkins. Philadelphia. p. 167.