Behera et al, Teknik J Anal Bioanal 2012, 3:.

6
Jurnal
o c
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
ISSN: 2155-9872 of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
Analytical & DOI: 10,4172 / 2155-9.872,1000151

Bioanalytical Teknik

Penelitian Buka Akses

Pasal

UV-Visible Spektrofotometri Metode Pengembangan dan Validasi

Pengujian
Parasetamol Tablet Formulasi
Siladitya Behera *, Subhajit Ghanty, Fahad Ahmad, Saayak Santra, dan Sritoma Banerjee
Departemen Quality assurance dan Pharma Regulatory Affairs, Gupta Sekolah Tinggi Ilmu Teknologi, West Bengal, India

Abstrak
Sebuah novel, metode yang aman dan sensitif dari estimasi spektrofotometri UV-wilayah telah dikembangkan
untuk pemeriksaan Parasetamol dalam formulasi tablet. Metode ini telah dikembangkan dan divalidasi untuk
pemeriksaan Parasetamol menggunakan Methanol dan air sebagai pengencer. Yang tidak menunjukkan campur
tangan dalam estimasi spektrofotometri. Semua parameter analisis yang dipilih sesuai dengan ICH [Q2 (R1)]
pedoman dan divalidasi secara statistik menggunakan RSD dan% RSD bersama dengan gram kromat rapi.

Kata kunci: Spektrofotometri; Dikembangkan; divalidasi; parameter; hukum Beer-Lambert: Ketika sinar cahaya dilewatkan melalui sel
ICH [Q2 (R1)] transparan yang berisi larutan zat anabsorbing, pengurangan intensitas
cahaya dapat terjadi. Secara matematis, hukum bir-Lambert dinyatakan
Pengantar sebagai
metodeSpektroskopi [1,2]
A = abc
Ini adalah cabang ilmu yang berhubungan dengan studi interaksi
Dimana, A = absorbansi atau optik
antara radiasi elektromagnetik dan materi. Ini adalah alat yang paling kuat
yang tersedia untuk studi atom dan molekul struktur / s dan digunakan kepadatan = absorptivitas atau koefisien
dalam analisis berbagai sampel. Spektroskopi optik meliputi wilayah kepunahan
spektrum elektromagnetik antara 100 Å dan
panjang b = jalan radiasi melalui sampel (cm)
400 m. Daerah spektrum elektromagnetik yang ditunjukkan dalam tabel 1.
c = konsentrasi zat terlarut dalam larutan.
spektrofotometri Ultraviolet-Visible [3]
Kedua b dan konstan sehingga berbanding lurus dengan konsentrasi c
spektrofotometri UV-Visible adalah salah satu teknik yang paling
sering digunakan dalam analisis farmasi. Ini melibatkan mengukur jumlah Ketika c adalah di gm / 100 ml, maka tetap disebut A (1%, 1 cm)
radiasi ultraviolet atau terlihat diserap oleh zat dalam larutan. Instrumen A = A 1% bc
yang mengukur rasio, atau fungsi dari rasio, dari intensitas dua berkas 1cm
cahaya di daerah UV-Visible disebut spektrofotometer Ultraviolet-Visible.
Kuantifikasi zat obat menggunakan spektrofotometer dapat
Dalam analisis kualitatif, senyawa organik dapat diidentifikasi dengan dilakukan dengan menyiapkan solusi dalam pelarut transparan dan
menggunakan mengukur itu absorbansi pada panjang gelombang yang sesuai. Panjang
gelombangspektrofotometer, jika ada data yang biasanya dipilih adalah panjang gelombang serapan max),
tercatat tersedia, dankuantitatif maksimum (λ
analisis spektrofotometridigunakan untuk
mengetahui kuantitas
spesies molekul menyerap radiasi. Teknik spektrofotometri sederhana, adalah hukum Beer -Lambert.
cepat, cukup spesifik dan berlaku untuk jumlah kecil dari senyawa. Hukum
dasar yang mengatur analisis spektrofotometri kuantitatif Hukum Beer: Ini menyatakan bahwa intensitas sinar radiasi

B
monokromatik paralel menurun secara eksponensial dengan jumlah di mana kesalahan kecil dalam menetapkan skala panjang gelombang
molekul menyerap. Dengan kata lain, absorbansi sebanding dengan memiliki sedikit efek pada
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
konsentrasi. absorbansi diukur. Idealnya, konsentrasi harus disesuaikan untuk
memberikanabsorbansi sekitar 0,9, sekitar yang akurasi dan
Hukum Lambert: Ini menyatakan bahwa intensitas sinar radiasi presisi pengukuran yang optimal.
monokromatik paralel menurun secara eksponensial saat melewati media
ketebalan homogen. Kombinasi dua undang-undang tersebut Uji sampel komponen tunggal, yang mengandung zat-zat menyerap
menghasilkan hukum Beer-Lambert. lainnya, kemudian dihitung dari absorbansi diukur dengan menggunakan
salah satu dari tiga prosedur utama. Mereka adalah, menggunakan
Wilayah Panjang gelombang
Jauh (atau vakum) ultraviolet 10-200 nm
dekat ultraviolet 200-400 nm
Terlihat 400-750 nm * Penulis Sesuai: Siladitya Behera, Departemen Quality Assurance dan Pharma
Regulatory Affairs, Gupta College Of Technological Sciences, Ashram Lebih,
dekat inframerah 0.75- 2.2 m
GTRoad, Asanol-713.301, Burdwan District, West Bengal, India, E-mail:
Mid inframerah 2,5-50 um Siladitya.behera @ gmail.com
Jauh inframerah 50-1000 m
Diterima 1 Oktober 2012; Diterima 27 Oktober 2012; Diterbitkan 31 Oktober
Tabel 1: Daerah spektrum elektromagnetik. 201
2

Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible

Spektrofotometri Metode Pengembangan dan Validasi Pengujian Parasetamol
Tablet Formulasi. Teknik J Anal Bioanal 3: 151. doi:10,4172 / 2155-
9.872,100015
1

Copyright: © 2012 Behera S, et al. Ini adalah sebuah artikel akses terbuka
didistribusikan di bawah persyaratan Lisensi Creative Commons Attribution, yang
memungkinkan penggunaan tak terbatas, distribusi, dan reproduksi dalam media
apapun, asalkan penulis asli dan sumber dikreditkan.
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
Halaman 2 dari 6

nilai absorptivitas standar, grafik kalibrasi dan standarisasi titik tunggal untuk Para-acetylaminophenol dan parasenyawa:.-acetylaminophenol
atau ganda. Dalam metode nilai serap standar, penggunaan standar A (1%, Dalam beberapa konteks, itu hanya disingkat apap, untuk aminophenol
1 cm) atau nilai-nilai E yang digunakan untuk menentukan absorptivitas asetil-para-adalah.
nya. Hal ini menguntungkan dalam situasi di mana sulit atau mahal untuk
mendapatkan sampel bahan referensi. Dalam metode grafik kalibrasi,
absorbansi dari sejumlah solusi standar dari bahan referensi pada
konsentrasi yang meliputi konsentrasi sampel diukur dan grafik kalibrasi
dibangun. Konsentrasi analit dalam larutan sampel dibaca dari grafik
sebagai konsentrasi yang sesuai dengan absorbansi larutan. Prosedur titik
standarisasi tunggal melibatkan pengukuran absorbansi larutan sampel dan
larutan standar dari bahan referensi. Konsentrasi zat dalam sampel
dihitung dari hubungan proporsional yang ada antara absorbansi dan
konsentrasi.

Ctest=(Tes× Cstd)/ Astd

DimanaCtes dan Cstd adalah konsentrasi dalam sampel dan larutan
standar masing-masing danTes dan Astd adalah absorbansi sampel dan
larutan standar masing-masing. Untuk pengujian bahan / s dalam sampel
multi komponen dengan spektrofotometer; metode berikut ini digunakan
secara rutin, yang meliputi [4],
• metode persamaan simultan
• MetodeDerivatif spektrofotometri
• Metoderasio Absorbance (metode Q-Absorbance)
• Perbedaan spektrofotometri
• Pelarut metode ekstraksi

Pengantar Parasetamol
Parasetamol atau asetaminofen adalah banyak digunakan lebih -the-
counter analgesik (pereda nyeri) dan antipiretik (demam peredam). Hal ini
umumnya digunakan untuk menghilangkan sakit kepala dan sakit ringan
lainnya dan nyeri dan merupakan bahan utama dalam berbagai dingin dan
flu obat. Dalam kombinasi dengan analgesik opioid, Parasetamol juga
dapat digunakan dalam manajemen nyeri yang lebih berat seperti nyeri
pasca bedah dan menyediakan perawatan paliatif pada pasien kanker
stadium lanjut [5]. Timbulnya analgesia adalah sekitar 11 menit setelah
pemberian oral Parasetamol [6], dan paruhnya adalah 1-4 jam. Meskipun
acetaminophen digunakan untuk mengobati nyeri inflamasi, umumnya
tidak diklasifikasikan sebagai NSAID karena menunjukkan aktivitas anti-
inflamasi hanya lemah.

Sementara umumnya aman untuk digunakan pada dosis yang

direkomendasikan (1.000 mg per dosis tunggal dan hingga 4.000 mg per
hari untuk orang dewasa), overdosis akut Parasetamol dapat menyebabkan
kerusakan hati yang berpotensi fatal dan, pada individu langka, dosis
normal dapat melakukan hal yang sama; Risiko ini meningkat dengan
konsumsi alkohol. Toksisitas Parasetamol merupakan penyebab utama dari
gagal hati akut di dunia Barat, dan menyumbang overdosis narkoba yang
paling di Amerika Serikat, Inggris, Australia dan Selandia Baru [7-10].
Ini adalah metabolit aktif dari phenacetin, pernah populer sebagai
analgesik dan antipiretik dalam dirinya sendiri, tapi tidak seperti
phenacetin dan kombinasinya, Parasetamol tidak dianggap karsinogenik
pada dosis terapi [11]. Kata-kata acetaminophen (digunakan di Amerika
Serikat, Kanada, Jepang, Korea Selatan, Hong Kong, dan Iran [12] dan
Paracetamol (digunakan di tempat lain) keduanya berasal dari nama kimia
Deskripsi
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
sistematis (IUPAC) nama:N- (4-hidroksifenil) acetamide
Parasetamol merupakan bagian dari kelas obat yang dikenal sebagai
“analgesik anilin”, itu -satunya obat tersebut masih digunakan sampai
sekarang [13]. Hal ini tidak dianggap sebagai NSAID karena tidak
menunjukkan aktivitas anti-inflamasi yang signifikan (itu adalah inhibitor
COX lemah) [14,15]. Hal ini terjadi walaupun bukti bahwa Parasetamol
dan NSAID memiliki beberapa aktivitas farmakologis yang sama [16].
mekanisme kerja
untuk saat ini, mekanisme aksi dari Parasetamol tidak sepenuhnya
dipahami. mekanisme utama yang diusulkan adalah penghambatan
siklooksigenase (COX), dan temuan terbaru menunjukkan bahwa itu
adalah sangat selektif untuk COX -2 [17]. W hile memiliki analgesik dan
antipiretik sebanding dengan aspirin atau NSAID lainnya, aktivitas anti-
inflamasi perifer biasanya dibatasi oleh beberapa faktor, salah satunya
adalah tingginya tingkat peroksida hadir dalam lesi inflamasi. Namun,
dalam beberapa situasi, bahkan perifer aktivitas anti-inflamasi sebanding
dengan NSAID lainnya dapat diamati. Sebuah artikel [18] di Nature
Communications dari para peneliti di London, Inggris dan Lund, Swedia
pada bulan November 2011 telah menemukan petunjuk untuk mekanisme
analgesik acetaminophen (Paracetamol), adalah bahwa metabolit
acetaminophen misalnya NAPQI, bertindak atas TRPA1-reseptor di
sumsum tulang belakang untuk menekan transduksi sinyal dari lapisan
permukaan tanduk dorsal, untuk mengurangi rasa sakit.
Metabolisme
Parasetamol dimetabolisme terutama di hati, menjadi produk non-
beracun. Tiga jalur metabolik ada meja:
• glucuronidation dipercaya untuk memperhitungkan 40% untuk dua-
pertiga dari
metabolisme parasetamol.
• Sulfation (sulfat konjugasi) dapat menjelaskan 20-40% [19].
• N-hidroksilasi dan penataan ulang, kemudian GSH konjugasi,
menyumbang kurang dari 15%. Sistem enzim sitokrom P450 hati
memetabolisme parasetamol, membentuk metabolit minor yang belum
signifikan alkylating dikenal sebagai NAPQI(N-acetyl-p-benzo-kuinon
imina). NAPQI kemudian ireversibel terkonjugasi dengan kelompok
sulfhidril glutathione [20].
Semua tiga jalur menghasilkan produk akhir yang sudah tidak aktif,
tidak beracun, dan akhirnya diekskresikan oleh ginjal. Dalam jalur ketiga,
bagaimanapun, NAPQI produk setengah beracun. NAPQI terutama
bertanggung jawab untuk efek racun dari Parasetamol; ini merupakan
contoh dari keracunan.
Validasi metode
• Validasi berkaitan dengan meyakinkan bahwa proses pengukuran
menghasilkan pengukuran yang valid.
• Hasil dari validasi metode dapat digunakan untuk menilai kualitas,
keandalan dan konsistensi hasil analisis. Ini adalah bagian integral dari
praktik analisis yang baik.
• Sebuah proses pengukuran menghasilkan pengukuran yang valid
untuk sebuah
aplikasi yang dimaksud adalah sesuai dengan tujuan.
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
Halaman 3 dari 6

Cara validasi adalah proses yang digunakan untuk mengkonfirmasi • Menengah Presisi
bahwa prosedur analisis yang digunakan untuk tes tertentu cocok untuk
• Spesifisitas
digunakan. Hasil dari validasi metode dapat digunakan untuk menilai
kualitas, keandalan dan konsistensi hasil analisis; itu adalah bagian integral • Deteksi Batas
dari praktik analisis yang baik. • Penghitungan Batas
Metode analisis perlu divalidasi atau divalidasi ulang, • Linearitas
• Sebelum pengenalan mereka ke dalam penggunaan rutin; • Rentang
• Setiap kali kondisi perubahan yang metode telah divalidasi (misalnya, Selanjutnya revalidation mungkin diperlukan dalam situasi berikut:
instrumen dengan karakteristik yang berbeda atau sampel dengan matriks
-Changes dalam sintesis zat obat;
yang berbeda); dan
- Perubahan komposisi produk jadi;
• Setiap kali metode ini berubah dan perubahan itu di luar
lingkupasli dari metode ini. - Perubahan prosedur analitis.

Saat ini, ada beberapa organisasi terkenal internasional yang
menawarkan panduan tentang validasi metode dan topik terkait.
• American Society for Testing dan Material (ASTM)
• Komite Codex pada MetodeAnalisis dan Sampling
(CCMAS)
Komite Eropa• untuk Normalisasi (CEN)
• Kerjasama Lacak Internasional di Analytical Chemistry
(CITAC)
• Kerjasama Eropa untuk Akreditasi (EA)
• Organisasi pangan dan Pertanian (FAO)
• Amerika Serikat food and Drug Administration (FDA)
• Konferensi Internasional tentang Harmonisasi (ICH).
Pedoman ICH (ICH Q2R1) untuk Analitis Prosedur
dan Validasi [21]
Prosedur analitis mengacu pada cara melakukan analisis. Ini harus
menjelaskan secara rinci langkah-langkah yang diperlukan untuk
melakukan setiap tes analitis. Ini bisa meliputi tetapi tidak terbatas pada:
sampel, standar acuan dan persiapan reagen, penggunaan aparat, generasi
kurva kalibrasi, penggunaan rumus untuk perhitungan, dll
Jenis Prosedur Analitis divalidasi
Diskusi validasi prosedur analitis diarahkan untuk empat jenis yang
paling umum dari prosedur analitis:
- tes Identifikasi;
- tes kuantitatif untuk konten kotoran;
- tes Batas untuk kontrol kotoran;
- tes kuantitatif dari bagian aktif dalam sampel dari zat obat atau
produk obat atau komponen yang dipilih lainnya (s) dalam produk obat.
Tujuan dari prosedur analitis harus dipahami dengan jelas karena ini
akan mengatur karakteristik validasi yang perlu dievaluasi. Karakteristik
validasi khas yang harus dipertimbangkan adalah sebagai berikut:
Tujuan dari Kerja Hadir
Karya ini berkaitan dengan validasi dari metode yang dikembangkan
untuk pemeriksaan Parasetamol dari bentuk sediaan nya (tablet). Oleh
karena itu, metode ini dapat digunakan untuk analisis pengendalian
kualitas rutin dan juga stabilitas.
Tujuan dan ruang lingkup pekerjaan yang diusulkan adalah sebagai di
bawah:
• Untuk mengembangkan metode spektrofotometri cocok untuk
pengujian
Parasetamol tablet.
• Lakukan validasi untuk metode.
Eksperimental
Bahan
Parasetamol standar disediakan oleh Torque Pharmaceuticals (P) Ltd
(India). Tablet parasetamol mengandung 500 mg parasetamol dan bahan
aktif yang digunakan dalam matriks obat diperoleh dari pasar. Analitis
metanol kelas dan air diperoleh dari Spectrochem Pvt. Ltd, Mumbai
(India).
Pengencer persiapan
Methanol dan air (15:85, v / v) digunakan sebagai pengencer.
Standar persiapan
10 obat mg dilarutkan dalam 15 ml metanol dan terguncang dengan
baik. Kemudian 85 ml air ditambahkan untuk itu untuk mengatur volume
hingga 100 ml (100 ppm). Dari 5 ml diambil dan volume disesuaikan
hingga 50 ml dengan pengencer.
Persiapan ujian
20 tablet ditimbang dan bubuk. Tablet bubuk setara dengan 100 mg
parasetamol ditimbang dan dibawa ke dalam 100 ml labu volumetrik maka
15 ml metanol ditambahkan dan terguncang baik untuk membubarkan
setelah itu 85 ml air ditambahkan untuk mengatur volume hingga 100 ml.
Dari 1 ml larutan ditarik dan dibawa dalam 100 ml labu volumetrik.
Volume disesuaikan dengan pengencer sampai 100 ml.

• Akurasi Instrumentasi
• Presisi UV-Visible balok ganda spektrofotometer dengan sel kuarsa cocok (1
cm)
 Membuat: Thermo Scientific, 81 Wyman Jalan Waltham,
Model: Evolution 201
Massachusetts,
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
• pengulangan AS.
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
Halaman 4
dari 6

Hasil danDiskusi
0,110 Sample4

Pengembangandan optimalisasi metode spektrofotometri

Ab

gelombang Tepat pilihan panjang metode tergantung pada sifat dari sor

sampel dan kelarutannya. Untuk mengembangkan metode ba

spektrofotometri kasar dan cocok untuk penentuan kuantitatif 0,100 0,090 0,080 0,070 0,060 0,050 0,040 0,030

parasetamol, kondisi analitis dipilih setelah pengujian parameter yang

berbeda seperti pengencer, penyangga, konsentrasi buffer, dan kondisi
Panjang gelombang
(nm)

kromatografi lainnya. Gambar 3: UV Spektrum Placebo.

Uji coba awal kami adalah dengan menggunakan komposisi yang

berbeda dari pengencer yang terdiri dari air dengan penyangga dan
Sample5
metanol. Dengan menggunakan pengencer 24

3.9

nm
terdiri dari metanol - air (50:50, v / v) hasil terbaik diperoleh dan 1,4

degassed dalam bath ultrasonik (Enertech Electronics Private Limited). 1,2

1,0
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible
Ab Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay 0,8

of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques

sor 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
Di bawah angka mewakili spektrum kosong, standar dan uji 0,6

ba

persiapan masing-masing.
0,4

0,2

Pemilihan panjang gelombang

larutan standar Scan spektrofotometer UV antara 200 nm sampai
400 nm pada mode spektrum, dengan menggunakan pengencer sebagai
200 220 240 260 280 300 320 340 360 380
kosong (Gambar 1). Panjang gelombang
(nm)

Parasetamol menunjukkan λmax di 243. Metode analisis yang Gambar 4: UV Spektrum Placebo + analit.
diusulkan sederhana, akurat dan direproduksi (Gambar 2).

20

211.31
2.8

nm, 0.001
6

Abs
nm

213.97
 Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151

bs
0,001

Validasi metode 0,000

Kekhususan: Resolusi puncak analit dari puncak terdekat:

200 220240 260 280 300 320 340 360 380
P
Solusi dari masing-masing analit disuntikkan secara terpisah dan a
n

retensimereka
j
a
n
g
waktudicatat. Solusi kerja standar yang mengandung campuran
komponen yang menganalisis juga disuntikkan dan masing-masing puncak g
e
analit l
o
m

adalah memeriksa resolusi dari terdekat (Angka b

a
n
2,3,4,5). g

Linearitas: Enam poin kurva kalibrasi (

n
diperoleh dalam berbagai konsentrasi 0-150 ppm m
)

untuk Parasetamol. Respon dari obat itu

Gambar 5: UV
ditemukan linear pada rentang konsentrasi Spektrum
penyelidikan dan persamaan regresi linear adalah y Kosong.
= 0.004x + 0.007 dengan koefisien korelasi 0,998
(Tabel 2, Gambar 6).
 Presisi: presisi dari metode analisis dipastikan
sample2
dengan
24

Citation: Behera S,3.5Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
7 of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
melakukan analisis sesuai prosedur dan sesuai berat
nm
badan normal
diambil untuk analisis. Ulangi analisis enam kali.
Hitung% assay,
berarti assay,% Deviasi dan% relatif standar deviasi
dan% RSD.
200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 Metode yang dikembangkan ditemukan tepat
sebagai nilai-nilai RSD% untuk pengulangan dan
P
a
n

1,6
j
a
studi presisi menengah adalah <0,98% dan <0,79%,
1,4
n
g
masing-masing (Tabel 3).
1,2

1,0 g Akurasi: akurasi dari metode ini dipastikan

Ab
0,8
e
l dengan metode Selain standar pada 3 tingkat.
sor o
0,6
m Kuantitas standar setara dengan 50%,
ba b
0,4

0,2
a
n
100% dan 125% harus ditambahkan dalam sampel.
0,0
g
Hasilnya menunjukkan bahwa terbaik pemulihan
(
(98,54-99,13%) dari obat berduri diperoleh pada
n
m setiap konsentrasi menambahkan, menunjukkan
)
bahwa metode ini akurat (Tabel
4). Komposisi Placebo Ditambahkan untuk
Akurasi Studi ditunjukkan pada
1,4 T
1,2 Sample5
a
1,0 24
b
Ab
0,8 3.9
e
0,6 sor
0
l
0,4
nm
0,2

5
.
200 220 240 260 280 300 320 340 360 380
P
a
Solusi studi stabilitas: Tabel 6 menunjukkan
n
j hasil memperoleh dalam studi stabilitas solusi pada
a
n
g interval waktu yang berbeda untuk persiapan ujian.
Disimpulkan bahwa solusi persiapan ujian
ditemukan stabil hingga 8 jam pada suhu kamar,
g
e
l

karena selama ini hasilnya tidak menurunkan di

o
m
b

bawah persentase minimum.

a
n
g

( Kekokohan: Evaluasi ketahanan harus

dipertimbangkan dalam tahap pengembangan dan
n
m
)

tergantung pada jenis prosedur

Gambar 2: UV spektrum Parasetamol dalam
larutan Sampel.

Figure 1: UV spectrum of Paracetamol in Standard solution.

Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
Halaman 5 dari 6

studi Linearitas untuk Parasetamol

kondisi, nilai uji dari solusi
0,8 persiapan ujian tidak
terpengaruh dan itu sesuai
0,7
dengan yang sebenarnya.
0,6
Parameter kesesuaian sistem juga
b
s 0,5 y = 0,0 04x + 0,007 ditemukan memuaskan; maka
R2 = 0,998
o metode analisis akan
r 0,4
b
disimpulkan sebagai kuat.
0,3
n 0,2 Kesesuaian sistem: Sebuah
c tes sistem kesesuaian sistem
e 0,1
spektrofotometri dilakukan
0 sebelum setiap validasi
0 dijalankan. Enam membaca
mereplikasi persiapan standar
20 40 60 80 100 120 140 diambil dan% RSD membaca
standar diambil untuk sama.
Kriteria penerimaan untuk
Gambar 6: Linearitas kurva untuk kesesuaian sistem,% RSD
Parasetamol. membaca standar tidak lebih dari
2,0%, yang mengisi penuh
selama semua parameter validasi
(Tabel 7).

K
e
s
i
m
p
u
l
a
n

Concentraion (ppm)

Rumus 1. Perhitungan% assay dari Parasetamol

Berarti Uji Absorbance ilution Standar Berarti Uji Berat

Kepekatan (ppm) Absorbance

Tabel 2: Conc. Vs Abs. meja untuk Linearitas Study.

0 0 50 0,246 75 0,338 100 0,456

 Berarti Standar Absorbance Pengenceran Sampel Label
Klaim
%
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
Assay = ------------ × ------------ × ----------- × Potensi Standar

Waktu (Jam.) Standard Contoh

0 0,723 0,723
2 0,72 0,721

4 0,717 0,717 6 0,716

0,717 8 0,716
Batas di (2 jam) 0,414 0,276
Batas di (4 hr) 0,829 0,829
Batas di (6 jam) 0,968 0,829
Limit pada (8 jam) 0,968 0,968

Sl ada. 242 nm 243 nm 244 nm

1 0,65 0,653 0,657
2 0,65 0,653 0,656
3 0,651 0,653 0,656
4 0,651 0,653 0,657
5 0,651 0,654 0,657
6 0,652 0,654 0,657
Berarti 0,650833 0,6533333 0,6566667
SD 0,000753 0,0005164 0,0005164%
RSD 0,115663 0,0790405 0,0786393
Tabel 5: Data Evaluasi solusi studi stabilitas.

Sampel No.%Assay
SET Intraday interday
1 101,8 99,3
2 101,2 98,2
3 101,3 99,0
4 101,5 99,0
5 100,6 98,6
6 99,1 100,5
Berarti 101,1 99,1
SD 0,99 0,78%
RSD 0,98 0,79%

Pemuliha Pemulih Berarti% S RSD

n an Pemulihan D
Tin %
gk
at
%
5 98,62
0
%

98,62 0 0
98,63
0,005773
5
0,005854
98,61
0,008164
97
%

98,56
98,55
0,006
93889
0,007
041
98,57
0,009
42809
0,009
566
98,54
 %

Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151

99,13
99,12
0,007
0710
7
0,007
134
99,11
0,007
0710
7
0,007
134
99,12
Tabel 3: Evaluasi data studi presisi.

Tabel 6: Evaluasi data penelitian ketahanan.

Tabel 4: Evaluasi data penelitian akurasi.

diteliti. Ini harus menunjukkan keandalan analisis terhadap

disengaja variasi dalam parameter metode.

Jika pengukuran rentan terhadap variasi dalam kondisi analitis,

kondisi analitis harus sesuai dikendalikan atau pernyataan
pencegahan harus dimasukkan dalam prosedur.

Sampel No. Absorbance

Tabel 7: Evaluasi Data dari Sistem Kesesuaian Study.

1 0,66 2 0,661 3 0,66 4 0,66

rata-rata 0,66
SD 0,000408%
RSD 0,061856
Hasil penelitian ketahanan metode pengujian yang
dikembangkan didirikan pada Tabel 7. Hasilnya menunjukkan
bahwa selama semua varian
Citation: Behera S, Ghanty S, Ahmad F, Santra S, Banerjee S (2012) UV-Visible Spectrophotometric Method Development and Validation of Assay
of Paracetamol Tablet Formulation. J Anal Bioanal Techniques 3:151. doi:10.4172/2155-9872.1000151
Halaman 6 dari 6

2. Relatif standar deviasi gagal hatiAcetaminophen-diinduksi akut: hasil dariAmerika

multicenterSerikat,studi prospektif. Hepatologi 42: 1364-1372.
deviasi Standar
11. Bergman K, Müller L, Teigen SW (1996) Seri: isu-isu di mutagenesis dan
Pengukuran%RSD = ---------------------------------- ----------------------- ×100 karsinogenesis, No. 65. genotoxicity dan carcinogenicity parasetamol: a
regulasi (re) tampilan. Mutat Res 349: 263-288.
nilaimean Pengukuran
12. Bradley N (1996) Penamaan obat. BMJ harus menggunakan “parasetamol”
bukan
3. Pemulihan
“acetaminophen” dalam indeks. BMJ 313: 689.
Jumlah 13. Bertolini A, Ferrari A, Ottani A, Guerzoni S, Tacchi R, et al. (2006) Parasetamol:
pandangan baru dari obat lama. Ulasan CNS Obat 12: 250-275.
Ditemukan%Pemulihan = ------------- -------- × 100
14. Viswanathan AN, Feskanich D, Schernhammer ES, Hankinson SE (2008)
Jumlah Ditambahkan Aspirin, NSAID, dan Acetaminophen Penggunaan dan Risiko Kanker
endometrium. Kanker Res 68: 2507-2513.
4. Jumlah Ditemukan 15. Altinoz MA, Korkmaz R (2004) migrasi NF-kappaB Makrofag inhibitory factor
dan cyclooxygenase-hambatan sebagai mekanisme kemungkinan belakang
Berarti Uji Absorbance acetaminophen- dan NSAID-pencegahan kanker ovarium. Neoplasma 51:
239-247.
Jumlah Ditemukan (mg / ml) = ---------------------- × standar
Konsentrasi 16. Byrant B, Knights K, Salerno E (2006) Farmakologi bagi para profesional
kesehatan.
Berarti standar Absorbance Mosby Elsevier.

17. Hinz B, Cheremina O, Brune K (2008) Acetaminophen (parasetamol) adalah

5. Jumlah Ditambahkan selektif siklooksigenase-2 inhibitor pada manusia. FASEB J 22: 383-390.

Berat 18. Andersson DA, Gentry C, Alenmyr L, Killander D, Lewis SE, et al. (2011)
TRPA1 memediasi antinociception tulang belakang yang disebabkan oleh
Jumlah Added (mg / ml) = ----------- acetaminophen dan cannabinoid Δ (9) -tetrahydrocannabiorcol. Nat Commun
2: 551.
Volume
19. Hendrickson RG, Kenneth EB (2006) Acetaminophen.In Flomenbaum NE,
Goldfrank LR, Hoffman RS, Howland MA, Lewin NA, et al. Goldfrank ini
6. Batasi Perhitungan Stabilitas Analytical Solusi Studi: Absorbansi toksikologik Darurat 525.
dari standar awal-Absorbansi standar ( pada waktu yang berbeda) Batas 20. Borne Ronald F (1995) Obat nonsteroid anti-inflamasi. Dalam PrinsipObat
Kimia, (4thedn), William OFoye, Thomas L Lemke, David A Williams, Williams
= -------------------------------------------- ---------------- × 100 & Wilkins, 544-545.
Absorbansi dariStandard awal 21. ICH (1996) Q2B Validasi Analytical Prosedur-Metodologi. Pedoman
konsensus, ICH Pedoman Tripartit Harmonized.
Referensi
1. Willard-Hobart H, Merritt Jr Lynne L, Dean John A (1974) Instrumental Metode
Analisis. (5thedn), Von Nostrand, University of Michigan.

2. ChatwalGR, Anand S (2002) Instrumental Metode Analisis Kimia. (5thedn),

Himalaya Publishing House, New Delhi.

3. Davidson AG (2002) Ultraviolet-terlihat spektrofotometri serapan. Dalam

BeckettAH, Stenlake JB, (4thedn), kimia farmasi Praktis. CBS Penerbit dan
distributor, New Delhi, 275-278.

4. Patil KM, Bodhankar SL (2005) Kinerja tinggi lapis tipiskromatografi

penentuanlamotrigin dalam serum. J Chromatogr B analyt Technol Biomed
Hidup Sci 823: 152-157.

5. Skotlandia Intercollegiate Guidelines Network (SIGN) (2008) Pengendalian

nyeri pada orang dewasa dengan kanker-A pedoman klinis nasional.
Skotlandia: National Health Service (NHS).

6. Moller P, Sindet-Pedersen S, Petersen CT, Juhl GI, Dillenschneider A, et al.

(2005) Onset dari analgesia acetaminophen: perbandinganoral dan intravena
rutesetelah operasi gigi molar ketiga. Br J Anaesth 94: 642-648.

7. Daly FF, Fountain JS, Murray L, Graudins A, Buckley NA (2008)

Pedomanpengelolaan keracunan parasetamol di Australia dan New Zealand-
penjelasan dan elaborasi. Sebuah pernyataan konsensus dari ahli toksikologi
klinik konsultasi dengan racun pusat informasi Australasia. Med J Aust 188:
296-301.

8. Khashab M, Tector AJ, Kwo PY (2007) Epidemiologi gagal hati akut. Curr
Gastroenterol Rep 9: 66-73.

9. Hawkins LC, Edwards JN, Dargan PI (2007) Dampak membatasiparasetamol

ukuran paketpada keracunan parasetamol di Inggris: tinjauan literatur. Obat
Saf 30: 465-479.

10. Larson AM, Polson J, Fontana RJ, Davern TJ, Lalani E, et al. (2005)