LAPORAN RESMI PRAKTIKUM BIOLOGI UMUM II

KEGIATAN 8
Pembuatan Medium, Isolasi dan Identifikasi Mikroorgansime

Disusun Oleh :

Lisna Setyaningsih (14312241038)

Febriana Cahyaningsih (14312241043)
Ardhya Handayani (14312241046)
Asrina Amalia (14312241047)

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN IPA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS NEGERI YOGYAKARTA
2015
 PENGESAHAN

Laporan praktikum biologi umum yang berjudul “Pembuatan Medium, Isolasi dan
Identifikasi Mikroorgansime” disusun oleh Lisna Setyaningsih dan kawan-kawan telah
disetujui dan diarahkan pada:

Hari/tanggal :

Tempat :

Waktu :

Dosen Pembimbing

Susilowati. M. pd. M,si

NIP.
A. Topik
1. Bagaimanakah pembuatan media untuk pertumbuhan dan pembiakan
mikroorganisme?
2. Apakah saja jenis jamur yang tumbuh padda berbagai macam objek ( makanan )?

B. Tujuan
Kegiatan 1
1. Mengetahui cara pembuatan dan sterilisasi media,
2. Mengetahu cara pengangkapan, pembiakan, dan penanaman biakan murni pada media
baru.

Kegiatan 2

1. Mengetahu jenis jamur yang tumbuh pada berbagai macam makanan.

C. Latar Belakang
Mikrobiologi adalah suatu cabang ilmu biologi yang mempelajari tentang
mikroorganisme dan interaksi mereka dengan organisme lain dan lingkungannya
(Singleton.2006).
Sejarah tentang mikroba dimulai dengan ditemukannya mikroskop oleh
Leeuwenhoek (1633-1723). Mikroskop temuan tersebut masih sangat sederhana,
dilengkapi satu lensa dengan jarak fokus yang sangat pendek, tetapi dapat menghasilkan
bayangan jelas yang perbesarannya antara 50-300 kali (Skou, dan Sogaard Jensen. 2007).
Pada saat sekarang ini, dengan berkembangnnya ilmu pengetahuan, maka
semakin tinggi pula rasa ingin tahu seseorang terhadap apa yang terdapat di alam sampai
pada mikrooorganisme yang tidak dapat dilihat jelas dengan mata tanpa menggunakan
alat bantu yang berukuran mikro. Dari hal inilah muncul ilmu pengetahuan yang
mempelajari tentang mikroorganisme tersebut yang disebut dengan mikrobiologi. Para
peniliti mulai mencari tahu akan apa yang terkandung pada mikroorganisme tersebut.
Dalam bidang penelitian mikroorganisme ini, tentunya menggunakan teknik atau
cara-cara khusus untuk mempelajarinya dan bekerja pada skala laboratorium untuk
 meneliti mikroorganisme ini baik sifat dan karakteristiknya, tentu diperlukan pula tentang
bagamana caranya menumbuhkan suatu mikroba ke dalam suatu media, karena kita tahu
bahwa beragamnya persyaratan tumbuh mikroba, maka harus dimengerti jenis-jenis
nutrient yang disyaratkan oleh mikroba dan juga macam lingkungan fisik yang
menyediakan kondisi yang optimum bagi pertumbuhannya. Mikroba amat beragam, baik
dalam persyaratan

D. Dasar Teori

Pembuatan Media Agar

Populasi mikroorganisme yang ada di alam sekitar kita ini sangatlah besar dan
cukup kompleks. Beratus spesies mikroba menguasai setiap bagian tubuh kita seperti
mulut, saluran pencernaan dan kulit. Mereka terdapat dalam jumlah yang cukup besar.
Sebagai contoh, sekali kita bersin dapat menebarkan beribu- ribu mikroorganisme. Udara,
tanah, dan air yang merupakan komponen alam sebagai tempat tinggal kita juga dihuni
oleh beragam mikroorganisme. Jenis mikroorganismenya dapat berupa bakteri, khamir,
kapang dan sebagainya. Populasi dari mikroba yang ada di lingkungan ini sangatlah
beraneka ragam dan masih dalam bentuk campuran Oleh karena itu, di dalam penelaahan
terhadap suatu mikroorganisme, selain ditumbuhkan juga perlu dilakukan isolasi.
Mikroorganisme yang ingin kita tumbuhkan, yang pertama harus dilakukan
adalah memahami kebutuhan dasarnya kemudian memformulasikan suatu medium atau
bahan yang akan digunakan. Air sangat penting bagi organisme bersel tunggal sebagai
komponen utama protoplasmanya serta untuk masuknya nutrien ke dalam sel. Pembuatan
medium sebaiknya menggunakan air suling. Air sadah umumnya mengandung ion
kalsium dan magnesium yang tinggi. Pada medium yang mengandung pepton dan ektrak
daging, air dengan kualitas air sadah sudah dapat menyebabkan terbentuknya endapan
fosfat dan magnesium fosfat (Hadioetomo, 1993).
Alat yang akan digunakan dalam suatu penelitian atau praktikum harus
disterilisasi terlebih dahulu untuk membebaskan semua bahan dan peralatan tersebut dari
semua bentuk kehidupan. Sterilisasi merupakan suatu proses untuk mematikan semua
organisme yang teradapat pada suatu benda. Proses sterilisasi dapat dibedakan menjadi 3
macam, yaitu penggunaan panas (pemijaran dan udara panas); penyaringan; penggunaan
bahan kimia (etilena oksida, asam perasetat, formaldehida dan glutaraldehida alkalin)
(Hadioetomo, 1993).
Memformulasikan suatu medium atau bahan yang akan digunakan untuk
menumbuhkan mikroorganisme di dalamnya harus memperhatikan berbagi macam
ketentuan seperti jika yang ingin kita membuat medium untuk organisme bersel tunggal,
biasanya air sangat penting sebagai komponen utama protoplasmanya serta untuk
masuknya nutrien ke dalam sel. Pembuatan medium agar padat, digunakan agar-agar,
gelatin atau gel silika. Bahan agar yang utama adalah galaktan (komplek karbohidrat
yang diekstrak dari alga genus Gelidium). Agar akan larut atau cair pada suhu hampir
100oC dan akan cair apabila kurang lebih 43oC (Hadioetomo, 1993). Menurut Schlegel
(1993) agar merupakan media tumbuh yang ideal yang diperkenalkan melalui metode
bacteriaological.
Organisme hidup memerlukan nutrisi untuk pertumbuhannya. Subtansi kimia
organik dan inorganik diperoleh dari lingkungan dalam berbagai macam bentuk. Nutrien
diambil dari likungan kemudian ditransformasikan melalui membran plasma menuju sel.
Di sel beberapa nutrisi diolah menghasilkan energi yang digunakan dalam proses seluler
(Lim, 1998). Bakteri dalam medium juga memerlukan makanan untuk pertumbuhannya.
Bakteri yang tidak punya akar harus berada pada permukaan larutan makanan yang cair.
Pertumbuhan bakteri berarti meningkatnya jumlah sel yang konstituen (yang menyusun).
Apabila disusun 10 bakteri dalam 1 ml medium yang cocok dan 24 jam kemudian
ditemukan 10 juta bakteri tiap milimeternya, maka terjadilah pertumbuhan bakteri.
Meningkatnya jumlah bakteri terjadi dengan proses yang disebut dengan pembelahan
biner, dimana setiap bakteri membentuk dinding sel baru (Volk, 1993)

Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat hara (nutrien) yang
berguna untuk membiakkan mikroba. Dengan menggunakan bermacam-macam media
dapat dilakukan isolasi, perbanyakan, pengujian sifat fisiologis dan perhitungan sejumlah
mikroba. Supaya mikroba dapat tumbuh baik dalam suatu media, maka medium tersebut
harus memenuhi syarat-syarat, antara lain:

1. harus mengandung semua zat hara yang mudah digunakan oleh mikroba,
 2. harus mempunyai tekanan osmosis,
3. tegangan permukaan dan pH yang sesuai dengan kebutuhan mikroba yang akan
tumbuh,
4. tidak mengandung zat-zat yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba,
5. harus berada dalam keadaan steril sebelum digunakan, agar mikroba yang
ditumbuhkan dapat tumbuh dengan baik (Sutedjo, 1991).

Teknik isolasi mikroba adalah suatu usaha untuk menumbuhkan mikroba diluar dari
lingkungan alamiahnya. Mikroorganisme dapat diperoleh dari lingkungan air, tanah,
udara, substrat yang berupa bahan pangan, tanaman dan hewan. Jenis mikroorganismenya
dapat berupa bakteri, khamir, jamur, kapang dll. Populasi mikroba di lingkungan sangan
beranekaragam sehingga dalam mengisolasi diperlukan beberapa tahap penanaman
sehingga berhasil diperoleh koloni tunggal. Koloni yang tunggal ini kemudian yang akan
diperbanyak untuk suatu tujuan penelitian misalnya untuk mengisolasi DNA mikroba
yang dapat mendeteksi mikroba yang telah resistem terhadap suatu antibiotik.atau untuk
mengetahui mikroba yang dipakai untuk bioremediasi holokarbon (Ani,2002).
Prinsip dari isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis mikroba dengan mikroba
lain yang berasal dari campuran bermacam-macam mikroba. Hal ini dapat dilakukan
dengan menumbuhkannya dalam media padat, sel-sel mikroba akan membentuk koloni
sel yang tetap pada tempatnya (Nur, I. dan Asnani, 2007).
Dikenal beberapa cara atau metode untuk memperoleh biakan murni dari suatu biakan
campuran. Dua diantaranya yang paling sering digunakan adalah metode cawan gores
dan metode cawan tuang. Yang didasarkan pada prinsip pengenceran dengan maksud
untuk memperoleh spesies individu. Dengan anggapan bahwa setiap koloni dapat terpisah
dari satu jenis sel yang dapat diamati (Afrianto, 2004).
Biakan murni diperlukan dalam berbagai metode mikrobiologis, antara lain
digunakan dalam mengidentifikasi mikroba. Untuk mengamati ciri-ciri kultural
morfologi, fisiologi dan serologi dibutuhkan mikroba yang berasal dari satu
spesies (Dwidjoseputro, 2005).
Terdapat beberapa metode isolasi sampai saat ini,yaitu:
1. Teknik Piringan Goresan (Streak plate method)
 Medium agar dicairkan, didinginkan pada suhu 45 C, dituang ke dalam cawan
petri steril (cawan gelas dengan garis tengag tiga inci) dan dibiarkan sampai menjadi
padat. Kemudian dengan kawat gelang menginokulasi yang penuh dengan biakan
campuran (misalnya specimen ludah atau bahan lain), goresan dilakukan diatas
permukaan agar. Ada beberapa metode penggorean yang berbeda, namun kesemua
metode bertujuan untuk meletakkan sebagian besar organism pada beberapa goresan
pertama. Apabila sebaran dilakukan dengan menggerakkan kawat gelang kian kemari
dari satu bagian ke bagian lain. Cawan petri, bakteri yang tertinggal pada kawat
gelang semakin berkurang. Jika dilakukan secara sempurna, goresan akhir akan
meninggalkan bakteri individual cukup terpisah satu sama lain, sehingga setelah
mengalami pertumbuhan, koloni yang berasal dari bakteri individual akan benar-
benar terpisah satu sama lain. Kemudian koloni tunggal dapat ditinggalkan kemedium
steril, dan akan tumbuhlah biakan murni. (Dwiyana, 2011)
2. Metode Tuang (pour-plate method)
Terdiri atas penginokulasian biakan campuran kedalam tabung uji yang
mengandung agar mencair yang telah didinginkan pada suhu 450c. isinya diaduk
untuk memencarkan bakteri keseluruh medium. Campuran itu kemudian ditungkan
kedalam cawan petri steril dan dibiarkan padat pertumbuhan koloni terjadi baik dalam
medium tujuan pada kedua proses ialah untuk memisahkan bakteri satu sama lain
sehingga sel-sel itu akan tumbuh menjadi koloni-koloni yang terpisah didalam
medium yang padat.
Kemudian dapat diambil sel-sel dari satu koloni untuk mendapatkan biakan
murni. Dalam praktek, sering piringan kedua digores kembali dengan organism yang
berasal dari koloni yang diidolasi untuk menjamin bahwa hasil yang diperoleh adalah
biakan murni (Dwiyana, 2011).
3. Teknik Sebar (spread plate)
Teknik isolasi dan mikroba dengan cara menyebarkan mikroba pada
permukaan media yang akan digunakan (Trianda, 2011).
4. Teknik Pengenceran (dilution method)
Suatu sampel dari suatu suspensi yang berupa campuran bermacam- macam
spesies diencerkan dalam suatu tabung yang tersendiri. Dari hasil pengenceran ini
 kemudian di ambil kira- kira 1 mL untuk diencerkan lebih lanjut. Jika dari
pengenceran yang ketiga ini diambil 0,1 mL untuk disebarkan pada suatu medium
padat, kemungkinan besar kita akan mendapatkan beberapa koloni yang akan tumbuh
dalam mdium tersebut, akan tetapi mungkin juga kita hanya akan memperoleh satu
koloni saja. Dalam hal yang demikian ini dapat kita jadikan piaraan murni. Jika kita
belum yakin, Bahwa koloni tunggal yang kita peroleh tersebut merupakan koloni
yang murni, maka kita dapat mengulang pengenceran dengan menggunakan koloni
ini sebagai sampel (Trianda, 2011)
5. Teknik Micromanipulator
Mengambil satu bakteri dengan mikropipet yang ditempatkan dalam mikro
manupulator, kemudian ditempatkan dalam mikromanupulator. Kemudian
ditempatkan dalam medium encer untuk dibiakkan ( Trianda, 2011).

Metode goresan memiliki dua keuntungan yaitu menghemat bahan dan waktu.
Namun untuk memperoleh hasil yang baik diperlukan keterampilan yang lumayan yang
biasanya diperoleh dari pengalaman. Metode cawan gores yang dilaksanakan dengan baik
kebanyakan akan menyebabkan terisolasinya mikroorganisme seperti yang diinginkan.
Dua macam kesalahan yang umum sekali dilakukan oleh para mahasiswa yang baru
mulai mempelajari mikrobiologi ialah tidak memanfaatkan permukaan medium dengan
sebaik-baiknya untuk digores sehingga pengenceran mikroorganisme menjadi kurang
lanjut dan cenderung untuk menggunakan inokulum terlalu banyak sehingga menyulitkan
pemisahan sel-sel yang digoreskan (Ratna, 1990).

Setelah mikroba ditumbuhkan pada media agar tabung maupun cawan dan estelah
inkubasi akan terlihat pertumbuhan bakteri dengan berbagai macam bentuk, ukuran, sifat,
dan berbagai ciri khas yang lain. Ciri-ciri ini akan mengarahkan ke sifat-sifat mikroba
tersebut pada media pertumbuhan, sehingga pengamatan morfologi ini sangat penting
untuk diperhatikan (Ratna,1990).
Bakteri yang memiliki flagella sering kali membentuk koloni yang menyebar
terutama jika menggunakan lempengan agar basah, untuk mencegah menyebarnya koloni
maka harus digunakan agar benar-benar kering (Djida, N., 2000).
 Menurut (Suriawati, 2005), Sterilisasi yang umum dilakukan dapat berupa:
a. Sterilisasi secara fisik (pemanasan, penggunaan sinar gelombang pendek yang
dapat dilakukan selama senyawa kimia yang akan disterilkan tidak akan berubah atau
terurai akibat temperatur atau tekanan tinggi). Dengan udara panas, dipergunakan alat
“bejana/ruang panas” (oven dengan temperatur 170OC– 180oC dan waktu yang
digunakan adalah 2 jam yang umumnya untuk peralatan gelas).
b. Sterilisasi secara kimia (misalnya dengan penggunaan disinfektan, larutan alkohol,
larutan formalin).
c. Sterilisasi secara mekanik, digunakan untuk beberapa bahan yang akibat
pemanasan tinggi atau tekanan tinggi akan mengalami perubahan, misalnya adalah
dengan saringan/filter. Sistem kerja filter, seperti pada saringan lain adalah
melakukan seleksi terhadap partikel-partikel yang lewat (dalam hal ini adalah
mikroba)
Autoklaf digunakan sebagai alat sterilisasi uap dengan tekanan tinggi. Penggunaan
autoklaf untuk sterilisasi, tutupnya jangan diletakkan sembarangan dan dibuka-buka
karena isi botol atau tempat medium akan meluap dan hanya boleh dibuka ketika
manometer menunjukkan angka 0 serta dilakukan pendinginan sedikit demi sedikit.
Medium yang mengandung vitamin, gelatin atau gula, maka setelah sterilisasi medium
harus segera didinginkan. Cara ini untuk menghindari zat tersebut terurai. Medium dapat
langsung disimpan di lemasi es jika medium sudah dapat dipastikan steril
(Dwidjoseputro, 1994).
Inokulasi Penanaman bakteri atau biasa disebut juga inokulasi adalah pekerjaan
memindahkan bakteri dari medium yang lama ke medium yang baru dengan tingkat
ketelitian yang sangat tinggi. Untuk melakukan penanaman bakteri (inokulasi) terlebih
dahulu diusakan agar semua alat yang ada dalam hubungannya dengan medium agar tetap
steril, hal ini agar menghindari terjadinya kontaminasi (Dwijoseputro, 1998).
Teknik inokulasi merupakan suatu pekerjaan memindahkan bakteri dari medium yang
lama ke medium yang baru dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi. Dengan
demikian akan diperoleh biakan mikroorganisme yang dapat digunakan untuk
pembelajaran mikrobiologi. Pada praktikum ini akan dilakukan teknik inokulasi biakan
mikroorganisme pada medium steril untuk mempelajari mikrobiologi dengan satu kultur
murni saja (Emma, 2013).
Penanaman bakteri merupakan pekerjaan memindahkan bakteri dari suatu medium ke
medium baru. Di lingkungan sekitar kita terdapat berbagai macam jenis mikroba yang
sangat beraneka ragam dalam jumlah yang sangat banyak. Secara alami bakteri akan
ditemukan dalam populasi campuran, dimana dalam populasi tersebut terdapat banyak
macam dan jenis bakteri. Hanya dalam keadaan tertentu saja populasi ini ditemukan
dalam keadaan murni. Untuk dapat mempelajari sifat-sifat biakan, morfologi dan sifat
faalinya maka mikroba yang akan diteliti harus dapat dipisahkan. Ini berarti bahwa harus
diperoleh biakan murni yang hanya mengandung satu macam bakteri (Djide, 2011)
Bakteri di alam umumnya tumbuh dalam populasi yang terdiri dari berbagai spesies.
Oleh karena itu, untuk mendapatkan biakan murni, sumber bakteri harus diperlakukan
dengan pengenceran agar didapat hanya 100-200 bakteri yang ditransfer ke medium,
sehingga dapat tumbuh menjadi koloni yang berasal dari bakteri tunggal (Pelczar, 1986).
Proses pemisahan/pemurnian dari mikroorganisme lain perlu dilakukan karena semua
pekerjaan mikrobiologis, misalnya telaah dan identifikasi mikroorganisme, memerlukan
suatu populasi yang hanya terdiri dari satu macam mikroorganisme saja. Teknik tersebut
dikenal dengan Isolasai Mikroba. Terdapat berbagai cara mengisolasi mikroba, yaitu
isolasi pada agar cawan , isolasi pada medium cair, dan isolasi sel tunggal (Yazurah,
2013).
Identifikasi biakan mikroorganisme seringkali memerlukan pemindahan ke biakan
segar tanpa terjadi pencemaran. Pemindahan mikroorganisme ini dilakukan dengan
teknik aseptic untuk mempertahankan kemurnian biakan selama pemindahan berulang
kali. Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dalam biakan cair ataupun padat. Dalam
melakukan isolasi mikroba, terlebih dahulu kita harus memperhatikan alat-alat yang
digunakan apakah sudah steril, agar tidak terkontaminasi oleh udara luar yang dapat
merangsang pertumbuhan mikroba yang tidak kita inginkan pada suatu medium. Untuk
tujuan tersebut digunakan media aseptis untuk mencegah kontaminasi (Indah, 2013)
Pemindahan bakteri dari medium lama ke medium yang baru atau yang dikenal
dengan istilah inokulasi bakteri ini memerluakn banyak ketelitian. Terlebih dahulu kita
harus mengusahakan agar semua alat- alat yang akan digunakan untuk pengerjaan
medium dan pengerjaan inokulasi benar- benar steril. Hal ini untuk menghindari
terjadinya kontaminasi, yaitu masuknya mikrooba lain yang tidak diinginkan sehingga
biakan yang tumbuh di dalam medium adalah benar- benar biakan murni (Dwidjoseputro,
1998).
Pekerjaan memindahkan mikroba dari medium lama ke medium yang baru harus
dilakukan secara teliti. Terlebih dahulu harus diusahakan agar semua alat-alat yang
sangkut paut dengan medium dan pekerjaan inokulasi itu benar-benar steril, hal ini untuk
menghindari terkontaminasi, yakni masuknya mikroorganisme yang tidak kita inginkan.
Beberapa langkah pada pekerjaan inokulasi dan isolasi mikroba yaitu menyiapkan
ruangan, karena tidak sembarang tempat dilakukan isolasi dan inokulasi dimana ruangan
tersebut harus bersih dan bebas angin. Dinding ruang yang basah menyebabkan butir-
butir debu menempel. Pada waktu mengadakan inokulasi baik sekali bila dilakukan di
dalam suatu kotak berkaca. Kemudian memindahkan dengan kawat inokulasi yang
sebaiknya terbuat dari platina atau nikrom (Indah, 2013).
Ada beberapa metode untuk menginokulasi bakteri sesuai dengan jenis medium
tujuannya. Pada medium agar tegak, dilakukan metode tusuk menggunakan jarum ose.
Pada medium agar miring, dilakukan metode gores dengan menggunakan loop ose. Pada
medium petridisk, dapat digunakan metode streak plate (metode gores), pour plate
(metode tuang) atau spread plate (metode sebar) Setelah inokulasi, dilakukan proses
inkubasi, yaitu menyimpan medium pada alat atau kontainer ada temperatur tertentu dan
periode tertentu, sehingga tercipta lingkungan yang menyediakan kondisi cocok untuk
pertumbuhan bakteri.
Metode gores atau streak plate menggunakan loop ose dan menggoreskannya ke
permukaan medium agar dengan pola tertentu dengan harapan pada ujung goresan, hanya
sel-sel bakteri tunggal yang terlepas dari ose dan menempel ke medium. Sel-sel bakteri
tunggal ini akan membentuk koloni tunggal yang kemudian dapat dipindahkan ke
medium selanjutnya agar didapatkan biakan murni (Oetomo, 1990).
Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat hara yang berguna untuk
membiakkan mikroba. Dengan menggunakan bermacam-macam media dapat dilakukan
isolasi, perbanyakan, pengujian sifat fisiologis dan perhitungan sejumlah mikroba.
Supaya mikroba dapat tumbuh baik dalam suatu media, maka medium tersebut harus
memenuhi syarat-syarat, yaitu harus mengandung semua zat hara yang mudah digunakan
oleh mikroba, harus mempunyai tekanan osmosis, tegangan permukaan dan pH yang
sesuai dengan kebutuhan mikroba yang akan tumbuh, tidak mengandung zat-zat yang
dapat menghambat pertumbuhan mikroba, harus berada dalam keadaan steril sebelum
digunakan, agar mikroba yang ditumbuhkan dapat tumbuh dengan baik (Emma, 2013).
Berikut ini beberapa sifat-sifat koloni pada agar lempeng mengenai bentuk,
permukaan dan tepi yaitu:
1. Bentuk koloni dilukiskan sebagai titik-titik, bulat, berbenang, takteratur seruapa
akar dan serupa kumparan
2. Permukaan koloni dapat datar, timbul mendatar, timbul melengkung, timbil
mencembung, timbul membukit dan timbul berkawah
3. Tepi koloni ada yang utuh, ada yang berombak, ada yang berbelah-belah, ada
yang berigi, ada yang berbenang-benang dan ada yang keriting (Dwidjoseputro,
2005).

Menurut Dwidjoseputro (1980), sifat-sifat koloni yang tumbuh pada agar-agar

lempengan, pada agar-agar miring dan pada tusukan gelatin adalah sebagai berikut :
1. Sifat-sifat koloni pada agar-agar lempengan mengenai bentuk, permukaan dan
tepi. Bentuk koloni dilukiskan sebagai titik-titik, bulat berbenang, tak teratur, serupa
akar, serum kumparan. Permukaan koloni dapat datar, timbul mendatar, timbul
melengkung, timbul mencembung, timbul membukit dan timbul berkawah. Tepi
koloni ada yang utuh, ada yang berombak, ada yang berbelah-belah, ada yang
bergerigi, ada yang berbenang-benang dan ada yang keriting.
2. Sifat-sifat koloni pada agar-agar miring. Sifat ini berkisar pada bentuk dan tepi
koloni dan sifat itu dinyatakan dengan kata-kata seperti : serupa pedang, serupa duri,
serupa tasbih, serupa titik-titik, serupa batang dan serupa akar.
3. Sifat koloni tusukan dalam gelatin. Ada bakteri yang dapat mengencerkan
gelatin. Karena itu, maka bentuk-bentuk koloninya juga berbeda-beda. Lagipula
bentuk koloni yang tidak dapat mengencerkan gelatin. Bila dilihat dari samping
koloni yang tidak mengencerkan gelatin dapat serupa pedang, tasbih, bertonjol-tonjol
 dan berjonjot. Jika bakteri mampu mengencerkan gelatin, maka bentuk koloninya
dapat serupa kawah, serupa mangkuk, serupa corong, pundi-pundi dan berlapis.

Bakteri
Bakteri merupakan salah satu mikroba yang sering dijumpai dalam kehidupan sehari-
hari. Bakteri adalah makhluk mikroskopik yang sangat kecil dan umumnya bersel
tunggal. Struktur selnya sederhana tanpa nukleus (inti sel) dan jumlahnya banyak. Bentuk
bakteri bisa bermacam-macam dan umumnya berukuran 0,5 - 5 mikrometer
(Anneahira,2004). Dalam kehidupan di ekosistem bakteri memiliki peranan yang
menguntungkan dan merugikan. Bakteri yang menguntungkan dapat dibudidayakan
untuk kepentingan manusia, seperti Lactobacillus strain yang dimanfaatkan untuk
pembutan youghurt. Sedangkan Salmonella thyphosa merupakan penyebab penyakit tifus
(Zaky, 2008).
Nama bakteri itu berasal dari kata “Bakterion” (bahasa Yunani) yang berarti tongkat
atau batang. Berdasarkan bnetuk morfologinya, maka bakteri dapat dibagi atas tiga
golongan, yaitu golongan basil, golongan kokus, dan golongan spiril. (Dwidjoseputro,
1990).
a. Basil (dari bacillus) berbentuk serupa tongkat pendek, silindris. Basil dapat
bergandeng-gandengan panjang disebut streptobasil, bergandengan dua-dua disebut
diplobasil atau terlepas satu sama lain.
b. Kokus (dari coccus) adalah bakteri yang bentuknya serupa dengan bola-bola kecil.
Bentuk kokus ini ada yang bergandengan panjang yang serupa dengan tali leher
disebut streptokokus, ada yang bergandengan dua-dua disebut diplokokus, ada
yang mengelompok empat disebut tetrakokus, yang bentuknya mengelompok
merupakan untaian disebut stafilakokus, sedangkan kokus yang mengelompok
serupa kubus disebut sarsina.
c. Spiril (dari spirillum) adalah baktrei yang bengkok atau berbengko-bengkok
serupa spiral. Golongan ini paling sedikit ditemukan dibandingkan dengan
golongan kokus maupun golongan basil.
 Pada individu intraseluler, bila sel-selnya membelah diri individunya menjadi
bertambah banyak, pada mikroorganisme uniseluler pembelahan berarti bertambah
banyaknya individu, jadi dalam hal ini pembelahan berarti multiplikasi. Bakteri
bermultiplikasi secara aseksual dengan pembelahan menjadi dua, dua menjadi empat,
empat menjadi delapan, dan seterusnya. Setiap keturunannya secara individu dapat
melanjutkan proses reproduksi secara tidak terbatas dengan cara sama dengan induknya
atau individu sebelumnya dengan syarat tersedia makanan dan energi yang cukup dan
keadaan lingkungan (pH, suhu) bebas polusi oleh sisa buang yang beracun dan
sebagainya (Irianto, 2006).
Dalam perkembangannya, bakteri sangat penting untuk diteliti, artinya bakteri yang
ada di alam atau sumbernya dapat diisolasi ke dalam medium buatan untuk
dikembangkan lebih lanjut. Oleh karena itu, penting untuk mengetahui bagaimana
mengisolasi bakteri (mikroba) dari alam dan mengidentifikasinya (paling tidak dari
karakteristik koloninya).
Identifikasi dan determinasi suatu biakan murni bakteri yang diperoleh dari hasil
isolasi dapat dilakukan dengan cara pengamatan sifat morfologi koloni, morfologi sel
bakteri, pengujian sifa-sifat fisiologi dan biokimianya. Selain itu, identifikasi juga dapat
dilakukan dengan pengujian sifat patogenitas dan serologinya. Pertumbuhan bakteri di
alam dipengaruhi oleh berapa faktor luar seperti substrat pertumbuhan, pH, temperatur,
dan bahan kimia. Bakteri yang nampak dapat memiliki morfologi yang sama, namun
keperluan nutrisi dan persyaratan ekologinya berbeda (Dwidjoseputro, 1990).
Bakteri merupakan makhluk hidup uniseluler (prokariotik) yang dapat bersifat
patogen (penyakit) dan non patogen bagi manusia. Bakteri pada umumnya hidup secara
berkoloni, ciri-ciri koloni bakteri adalah sebagai berikut:

Fungi

Fungi adalah mikroorganisme tidak berklorofil, berbentuk hifa atau sel tunggal,
eukariotik, berdinding sel dari kitin atau selulosa, bereproduksi seksual dan aseksual
dalam dunia kehidupan fungi merupakan kingdom tersendiri, karena cara mendapatkan
makanannya berbeda dari organisme eukariotik lainnya yaitu melalui absorbsi (Gandjar
1999).
 Sebagian besar tubuh fungi terdiri atas benang-benang yang disebut hifa yang
saling berhubungan berjalin semacam jala, yaitu miselium. Miselum dapat dibedakan atas
miselium vegetativ yang berfungsi nenyerap nutrien dari lingkungan dan miselium fertil
yang berfungsi dalam reproduksi (Campbell 2004).
Fungi merupakan organisme eukariotik yang mempunyai ciri-ciri sebagai
berikut
1. Mempunyai spoora
2. Memproduksi spora
3. Tidak mempunyai klorofil sehingga tidak berfotosintesis
4. Dapat berkembang biak secara seksual dan aseksual
5. Tubuh berfilamen dan dinding sel mengandung kitin, glukan, selulosa dan
manan (Waluyo 2007)
Fungi ada yang bersifat parasit dan ada pula bersifat saprofit.Parasit apabila dalam
memenuhi kebutuhan makanannya dengan mengambil dari benda hidup yang
ditumpanginya.Sedangkan bersifat saprofit apabila memperoleh makanan dari benda mati
dan tidak merugikan benda itu sendiri.Fungi mensintesis protein dengan mengambil
sumber karbon dan karbohodrat.sumber nitrogen dari bahan organik atau anorganik, dan
mineral dari substratnya (Dwidjoseputro 1994). Fungi merupakan organisme menyerupai
tanaman, tetapi mempunyai beberapa perbedaan, yakni:
 Tidak mempunyai klorofil
 Mempunyai dinding sel dengan kompossi berbeda
 Berkembang biak dengan spora
 Tidak mempunyai cabang, batang, akar dan daun
 Tidak mempunyai sistem vaskuler seperti pada tanaman
Bersifat multiseluler tidak mempunyai pembagian fungsi (Irianto 2006).
Fungi dibedakan menjadi dua golongan yakni
a. Kapang
Fungi multiseluler atau kapang mempunyai miselia atau fillamen dan
pertumbuhannya dalam bahan makanan mudah sekali dilihat, yakni seperti kapas
(Waluyo 2007).
 Kapang dapat dibedakan menjadi dua kelompok berdasarkan struktur hifa, yaitu hifa
tidak bersekat atau nonseptat dan hifa bersekat atau septat yang membagi hifa dalam
mangan-mangan, dimana setiap mangan mempunyai inti satu atau lebih (Campbell 2004).
Secara lamiah kapang berkembang biak dengan berbagai cara, baik aseksual dengan
pembelahan, penguncupan atau pembentukkan spora dapat pula secara seksual dengan
pembelahan nukleus dari kedua induknya (Waluyo 2007).
b. Khamir
Khamir termasuk cendawan, tetapi berbeda dengan kapang karena bentuknya yang
terutama uniseluler. Reproduksi vegetativ terjadi dengan cara pertunasan. Sebagian sel
tunggal khamir tumbuh dan berkembang biak lebih cepat dibanding kapang yang tubuh
dengan pembentukkan filamen. Sel khamir mempunyai ukuran yang bervariasi yaitu
dengan panjang 1-5 mm sampai 20-50 mm, dan lebar 1-10 mm. bentuk khamir
bermacam-macam, yaitu bulat, oval, silinder, ogival yaitu bulat panjang dengan salah
satu ujung runcing, segitiga melengkung, berbentuk batat, bentuk apikal atau lemon,
membentuk psedomiselium dan sebagianya (waluyo 2007).
Jmaur hidup tersebar dan terdapat ditanah, air vegetasi, badan hewan, makanan,
dibangunan, bahkan pada tubuh manusia.Jamur dapat tumbuh dan berkembang pada
kelembaban dan pada suhu yang tinggi.Saat ini di Indonesia diperkirakan terdapat 4.250
sampai 12.000 jenis jamur.Dari jumlah tersebut dalam kehidupan memiliki peran masing
– masing dihabitatnya baik yang berkaitan langsung maupun tidak langsung bagi manusia
(Risma 2011).
Ciri – ciri jamur, organisme yang termasuk dalam kelompok jamur, anggotanya
mempunyai cirri – cirri umum yaitu uniseluler atau bersel satu atau multi seluler ( benang
– benang halus ), tubuhnya tersusun atas hifa ( jalinan benang – benang halus ),
eukariotik( mempunyai membrane inti ), tidak mempunyai klorofil sehingga bersifat
heterotrof, yaitu secara saprofit, parasit dan simbiosis, dinding selnya tersusun atas zat
kitin, cadangan makanan tersimpan dalam bentuk glikogen dan protein, pencernannya
berlangsung secara ekstraseluler, dimana makanan sebelum diserap disederhanakan
terlebih dahulu oleh enzim ekstraseluler yang dikeluarkan dari hifa jamur, memiliki
keturunan yang bersifat haploid lebih singkat, reproduksi jamur uniseluler dilakukan
secara aseksual dengan membentuk spora. Jamur multiseluler secara aseksual dengan
cara memutuskan benang hifa ( fragmentasi ), zoospore, endospora, dan konidia.
Sedangkan secara seksual melalui peleburan inti jantan dan inti betina sehingga
dihasilkan spora askus atau basidium ( Irianto 2006).
Klasifikasi jamur, berdasarkan cara reproduksi secara generative, jamur dapat dibagi
menjadi 4 kelas yaitu zygomycotina, ascomycotina, basidiomycotina, dan
duotromycotina.
1. Zygomycotina : Jamur kelompok ini namanya Zygomycotina karena dalam
reproduksi generatifnya menghasilkan zigot di dalam zigospora. Jamur Zygomycotina
mempunyai cirri – ciri yaitu dinding selnya tersusun atas zat kitin, multiseluler, hifa
tidak bersekat, mengandung inti haploid, memiliki keturunan diploid lebih singkat,
reproduksi generatife dengan konjugasi yang menghasilkan zigospora.
2. Ascomycotina : Jamur kelompok ini namanya Ascomycotina karena dalam
reproduksi generatifnya menghasilkan askuspora. Jamur ini termasuk kelas
Ascomycotina mempunyai cirri – cirri yaitu dinding selnya tersusun atas zat kitin,
uniseluler dan multiseluler, hifa bersekat, membentuk badan buah yang disebut
askospora, memiliki keturunan diploid lebih singkat, reproduksi vegetatifnya dengan
membentuk konidiospora, reproduksi generatifnya dengan konjugasi yang
menghasilkan askospora.
3. Basidiomycotina : Jmaur kelompok ini disebut Basidiomycotina karena dalam
reproduksi generatifnya menghasilkan basidiospora. Jamur yang termasuk kelas
Basidiomycotina mempunyai ciri – ciri yaitu dinding selnya tersusun atas zat kitin,
multiseluler, hifa, bersekat, dibedakan hifa primer ( berinti satu ) dan sekunder (
berinti dua ), mengamdung inti haploid, memiliki keturunan diploid lebih singkat,
membentuk badan buah yang disebut basidikrop, reproduksi vegetatife dengan
menghasilkan basidiospra.
4. Duotromycotina : Jamur kelompok ini disebut jamur imperfecti ( jamur tidak
sempurna ) atau Duotromycotina karena belum diketahui cara perkembangbiakan
seksualnya. Jamur yang termasuk Duotromycotina mempunyai ciri –ciri yaitu dinding
selnya tersusun atas zat kitin, multiseluler, hifa bersekat, dibedakan tipe hifa lebih
singkat, dan reproduksi vegetatifnya dengan membentuk konidiospora ( Campbell
2004).
E. Prosedur Percobaan
 Kegiatan 1
a. Tempat dan Waktu Praktikum
Laboratorium IPA 2 FMIPA UNY
Senin, 04 Mei 2015 pukul 11.00-13.00 WIB
Kamis, 07 Mei 2015, Jumat, 8 Mei 2015,
Senin, 11 Mei 2015, dan Rabu 3 Mei 2015

b. Alat dan Bahan

Alat :
-Tabung reaksi /cawan petri+penutup (steril)
-Kertas payung
-Nampan plastik steril
-Panci
-Kompor
-Karet
-Jarum ose

Bahan :
-Agar-agar ( 1 gr)
-Gula Pasir ( 3 gr)
-Air (100 ml)
-Alkohol
c. Langkah Kerja

Menyiapkan alat dan bahan yang diperlukan

Membuat agar-agar dengan perbandingan 1 gram agar-agar, 3 gram gula dan 100 ml
air, dan memanaskan campuran tersebut higga mendidih dan kental.

Memasukan agar-agar ke dalam tabung reaksi dan meletakkannya dalam keadaan

miring, sehingga agar memiliki ketebalan ±3 ml.

Menunggu agar mendingin, lalu menaruh tabung reaksi atau cawan petri di tempat
yang telah ditentukan selama ± 3 menit.

Menutup tabung reaksi dengan tisu pada bagian atas dan menutup seluruh bagian
tabung reaksi dengan meggunakan kertas payung.

Menuggu selama 3-4 hari, lalu mengecek adanya mikroorganisme yang muncul.

Melakukan penanaman (inokulasi) dari salah satu mikroorganisme dalam media awal
menggunakan jarum ose dan menanamkanya pada media baru yang telah disiapkan.

Menuggu selama 3-4 hari, lalu mengecek adanya pertumbuhan mikroorganisme yang
tumbuh.

Mengidentifikasi mikroorganisme yang tumbuh dalam media baru (jika sudah ada),
dan menunggu 2 hari kemudian untuk melihat perkembangannya.
 Kegiatan 2
a. Tempat dan Waktu Praktikum
Laboratorium IPA 2 FMIPA UNY
Senin, 04 Mei 2015 pukul 11.00-13.00 WIB

b. Alat dan Bahan

Alat : Bahan :
-Mikroskop -Nasi basi
-Metilen Blue -jamur roti
-Penjepit -Tempe baru
-Object glass -Tempe (dibiarkan terbuka)

c. Langkah Kerja

c.1. Jamur Nasi

Menyiapkan alat dan bahan yang diperlukan

Mengambil jamur tipis atau tembus cahaya yang terdapat pada nasi yang telah basi,
lalu menaruhnya di atas objek glass

Meneteskan metilen blue pada object glass dan menutupnya dengan cover glass.

Meletakkan obect glass pada mikroskop dan mengaturnya dari skala terkecil sehingga
ditemukan fokus yang paling jelas.

Mencatat hasil yang ditemukan.

 c.2 Jamur Roti

Menyiapkan alat dan bahan yang diperlukan

Mengambil jamur tipis atau tembus cahaya yang terdapat pada roti yang telah basi,
lalu menaruhnya di atas objek glass

Meneteskan metilen blue pada object glass dan menutupnya dengan cover glass.

Meletakkan obect glass pada mikroskop dan mengaturnya dari skala terkecil sehingga
ditemukan fokus yang paling jelas.

Mencatat hasil yang ditemukan.

c.3. Jamur Tempe yang terbuka

Menyiapkan alat dan bahan yang diperlukan

Mengambil jamur tipis atau tembus cahaya yang terdapat pada tempe yang telah
dibiarkan terbuka beberapa hari, lalu menaruhnya di atas objek glass

Meneteskan metilen blue pada object glass dan menutupnya dengan cover glass.

Meletakkan obect glass pada mikroskop dan mengaturnya dari skala terkecil sehingga
ditemukan fokus yang paling jelas.

Mencatat hasil yang ditemukan.

 c.4. Jamur tempe ( baru/ tertutup)

Menyiapkan alat dan bahan yang diperlukan

Mengambil jamur tipis atau tembus cahaya yang terdapat pada nasi yang telah basi,
lalu menaruhnya di atas objek glass

Meneteskan metilen blue pada object glass dan menutupnya dengan cover glass.

Meletakkan obect glass pada mikroskop dan mengaturnya dari skala terkecil sehingga
ditemukan fokus yang paling jelas.

Mencatat hasil yang ditemukan.

F. Data Hasil Pengamatan

Kegiatan 1
Hari : Senin, 11 Mei 2015
Mikroba Campuran

Jumlah Koloni : 15
Ukuran : 4 besar, 7 sedang, 4 kecil
Tepi : Undulating dan lobate

Permukaan : Tak berhifa

Warna : Putih
 Mikroba Murni

Jumlah Koloni : 14
Ukuran : 1 besar, dan 13 kecil
Tepi : Undulating dan lobate

Permukaan : Tak berhifa

Warna : Putih

Hari : Rabu, 13 Mei 2015

Mikroba Campuran

Jumlah Koloni : 12
Ukuran : 1 besar, 3 sedang, 8
kecil
Tepi : Undulating dan lobate

Permukaan : Tak berhifa

Warna : Putih
 Mikroba Murni

Jumlah Koloni : 17
Ukuran : 1 besar, 5 sedang, 11 kecil
Tepi : Undulating

Permukaan : Tak berhifa

Warna : Putih

Kegiatan 2
Jamur pada nasi
Perbesaran : 160 x

1
Keterangan :
2 1= Spora
3 2 = Sporangiofor
3 = hifa Stolon
 Jamur pada roti
Perbesaran : 160 x

1
Keterangan :
2 1= Hifa
2 = Oidia

Jamur pada Tempe terbuka

Perbesaran : 80 x
1

2 Keterangan :
1= Spora
3
2 = Sporangiofor
3 = hifa Stolon

Jamur pada Tempe baru

Perbesaran : 160 x

Keterangan :
1
1 = hifa Stolon
2
2= Spora
3
3 = Sporangiofor
G. Pembahasan
Pada percobaan ke 8, dengan judul “ Pembuatan Medium, Isolsai dan Identifikasi
Mikroorgansime “, memiliki dua kegiatan. Kedua kegiatan tersebut dilakukan secara
bersamaan pada, Senin, 4 Mei 2015.
Kegiatan 1
Dalam percobaan ini dilakukan dengan beberapa tahap. Pada hari Senin 4 Mei
2015, bersamaan dengan praktikum kegiatan dua dilakukan pembuatan media agar dan
perlakuan isolasi pada media yang telah diberi organisme.
Hal pertama yang dilakukan adalah mensterilkan tempat, dan alat, serta pada
tangan praktikan. Sterilisasi yang dilakuakan pada awal kegiatan adalah sterilisasi kimia
dilakukan dengan tujuan membersihkan tepat dan alat praktikum dari mikroorgansisme
lain yang bisa menjadi kontaminan.

Pembuatan media dilakukan dengan komposisi bahan yaitu 1 gram agar-agar, 3

gram gula dan 100 ml air. Agar-agar digunaka sebagai media karena, bila agar-agar
sudah menjadi padat masih dapat dicairkan kembali untuk digunakan. Selain itu, suspensi
agar-agar 1,5-2 % dalam air karena dapat larut pada suhu 1000C dan tidak menjadi padat
sebelum suhu turun di bawah 450C kemudian media agar didinginkan dengan cepat
sehingga menjadi padat tanpa merusak sel-sel tersebut. Sekali menjadi padat, agar tidak
dapat mencair kembali, kecuali jika dipanaskan di atas 800C. Pada metode lempeng
tuangan, suatu suspensi sel dicampur dengan agar-agar cair pada suhu 500C dituang pada
cawan petri. Bila agar-agar telah mengeras, sel tidak akan bergerak lagi dan tumbuh
menjadi koloni sangat besar kemungkinannya berasal dari satu sel yang sama.

Setelah agar mendidih dan mengental lalu memasukkan agar kedalam tabun
reaksi atau cawan petri (dalam percobaan tabung reaksi). Lalu tabung reaksi dimiringkan
(agar miring). Dan menunggu agar mendingin dibawah 500, hal ini dilakukan agar
mikroorgaisme yanng ditangkap dapat berkembang, atau tidak mati.

Pengambilan mikroorganisme dilakukan dibawah meja selama ±3 menit, lalu

menutup dengan tisu dan membungkusnya dengan kertas payung. Pemungkusan dengan
kertas payun bertujuan agar setelah disterilisasi, alat tidak terkontaminasi atau tidak
berhubungan langsung dengan udara luar.
 Selanjutanya adalah tahap isolasi. Pada praktikum ini,setelah mikroba dibiakkan
selama beberapa hari,biakan tersebut kemudian diisolasi . Isolasi dilakukan dengan
mengambil mikroba dan membungkusnya dengan kertas payung, dan didiamkan selama
3-4 hari.

Setelah hari ke-4, dilakukan pengecekan dan terlihat pada media adanya
mikroorganisme yang tumbuh, dimana terdapat kumpulan berwarna putih yang
menyebar. Sehingga pada hari ke 5, dilakukan inokulasi atau penanaman pada media agar
lain yang telah disediakan. Dimana media awal disebut mikroba campuran sedangakan
media baru disebut dengan mikroba murni. Inokulasi dilakukan dengan memindahkan
mikroba tersebut menggunakan jarum ose dimana pemindahan mikroba tersebut
dilakukan di dekat api. Teknik inokulasi yang digunakan adalah teknik isolasi goresan
dengan pola zig-zag. Pada inokulasi ini, digunakan jarum ose dengan ujung berbentuk
lingkaran untuk memindahkan mikroba. Tujuan dari penggunaan jarum ose tersebut
adalah selain agar tidak merusak biakan mikroba juga agar tidak merusak media biakan
mikroba tersebut. Sebelum jarum ose digunakan untuk memindahkan mikroba,jarum ose
dipanaskan sampai menimbulkan nyala pijar. Adanya proses pemijaran ini ditujukan agar
jarum tersebut steril dari kontaminan lain yang tidak diinginkan.

Proses pemindahan mikroba ini dilakukan di dekat api yang bertujuan supaya
tidak ada mikroba ataupun bakteri lain yang masuk pada medium biakan murni selain
mikroba hasil biakan tersebut.

Teknik inokulasi yang digunakan pada praktikum ini adalah teknik goresan
dengan pola khusus, yaitu zig – zag.Teknik ini digunakan bertujuan untuk meletakkan
sebagian besar organism pada beberapa goresan pertama. Apabila sebaran dilakukan
dengan menggerakkan jarum ose kian kemari dari satu bagian ke bagian lain, bakteri
yang tertinggal pada jarum ose semakin berkurang. Jika dilakukan secara sempurna,
goresan akhir akan meninggalkan bakteri individual cukup terpisah satu sama lain,
sehingga setelah mengalami pertumbuhan, koloni yang berasal dari bakteri individual
akan benar-benar terpisah satu sama lain. Kemudian koloni tunggal dapat ditinggalkan ke
medium steril, dan akan tumbuhlah biakan murni. (Dwiyana, 2011)
 Tiga hari setelah inokulasi dilakukan pengecekan pada kedua tabung baik
campuran ataupun murni. Dari pengamatan yang dilakukan dalam satu bidang yang sama
didapatkan pada tabung biakan campuran koloni dengan jumlah 15, dengan rincian 4
besar, 7 sedang dan 4 kecil, memiliki variasi tepi yaitu undulating dan lobate, tak
berfilamen dan berwarna putih. Pada tabung dengan biakan campuran didapati perbedaan
dimana koloni yang nampak pada hari 3 hari sebelumnya lebih banyak dari pada koloni
setelah dilakukan pengecekkan. Hal ini daat terjadi karena kurangnya nutrien dalam agar
yang menyebabkan koloni tersebt mati.

Pada tabung dengan mikroba murni memiliki jumlah koloni teramati 14, dengan
rincian 1 besar dan 13 kecil. Dengan tepi pada semua koloni berbentuk undulating, tak
berfilamen dan berwarna putih.

Selanjutnya dilakukan pengamatan 2 hari setelahnya atau 5 hari setelah inokulasi,

dan didapatkan hasil pada mikroba campuran, dengan bidang yang kurang lebih sama,
didapati koloni yang lebih sedikit lagi, atau berkurang, menjadi 12 dengan rincian 1
bessar, 3 sedang dan 8 kecil. yang disebabkan oleh kurangnya nutrisi bagi mikroba.

Dan pada mikroba murni didapatkan koloni yang lebih banyak dari pengamatan
sebelumnya. Dengan rincian 1 besar, 5 sedang, dan 11 kecil. Hal ini bisa terjadi karena
mikroba yang ditanam ada 3 hari setelah penanaman belum berkembang dan tumbuh
secara optimal, sehingga pada pengamatan selanjutnya dimungkinkan pertumbuhan
mikroba yang optimal sehingga teramati koloi yang lebih banyak.

Dalam mikroba murni diharapkan memiliki koloni yang sama, namun dalam
percobaan ini tidak dapat dipastikan apakah semua koloni yang terdapat dalam media 2
adalah sama karena memiliki perbedaan walaupun memiliki tepi yang sama namun
memiliki ukuran yang berbeda-beda

Adanya perbedaan ini bisa terjadi karena beberapa hal, seperti saat inokulasi
jarum ose yang digunakan setelah dipanaskan trlalu lama dilur sehingga kesterilanya
kurang terjamin, selain itu dimungkinkan pula jarum ose yang digunakan maasih berpijar
sehingga merusak media.
Kegiatan 2

Pada kegiatan dua ini dilakukan 4 pengamatan pada objek yang berbeda. Objek
tersebut adalah makanan yang berupa : nasi berjamur, roti berjamur, tempe yang
dibiarkan terbuka beberapa hari dan tempe yang baru/terbungkus.

Pengamatan nasi berjamur

Berdasarkan hasil pengamatan cendawan pada nasi basi menunjukan bagian

mikroskopik yaitu berupa sporangium dan hifa.Jamur nasi basi hampir sama dengan roti
berjamur. Jenis cendawan pada roti berjamur yaitu Rhizopus stolonifer.Jamur kelompok
ini namanya Zygomycotina yang mempunyai ciri-ciri hifa senositik, menghasilkan
Zigosporangium, dinding sel tersusun atas zat kitin dan mempunyai houstoria. Contoh
jenis cendawan pada Zigosporangium: Rhizopus stolonifer, Mucor hiemalis, Beauveria
bassiana dan Metarrhisium anisopliae (Fardiaz 1999).

Kami melakukan pengamatan pada roti yang telah basi dan terlihat jamur-jamur
yang telah tumbuh pada roti itu, yang kami lihat yaitu benang-benang halus dan serat-
serat yang dalam jamur disebut hifa. Memiliki hifa pendek bercabang-cabang dan
berfungsi sebagai akar (rizoid) untuk melekatkan diri serta menyerap zat-zat yang
diperlukan dari substrat. Selain itu, terdapat pula sporangiofor (hifa yang mencuat ke
udara dan mengandung banyak inti sel, di bagian ujungnya terbentuk sporangium
(sebagai penghasil spora).

Jamur Pada Nasi (Rhizopus oligosporus ) Rhizopus oligosporus merupakan

kapang dari filum Zygomycota yang banyak menghasilkan enzim protease. Rhizopus
oligosporus banyak ditemui di tanah, buah, dan sayuran yang membusuk, serta roti yang
sudah lama. Rhizopus oligosporus termasuk dalam Zygomycota yang sering
dimanfaatkan dalam pembuatan tempe dari proses fermentasi kacang kedelai, karena
Rhizopus oligosporus yang menghasilkan enzim fitase yang memecah fitat membuat
komponen makro pada kedelai dipecah menjadi komponen mikro sehingga tempe lebih
mudah dicerna dan zat gizinya lebih mudah terserap tubuh. Fungi ini juga dapat
memfermentasi subtrat lain, memproduksi enzim, dan megolah limbah. Salah satu enzim
yang diproduksi tersebut adalah dari golongan protease. 2. Jamur Pada Roti Basi
(Rhizopus stolonifer ) Klasifikasi menurut Inge L Birsyam

Kingdom : Plantae

Divisio : Zygomycota

Classis : Zygomycetes

Ordo : Mucorales

Familia : Mucoraceae

Genus : Rhizopus

Spesies : Rhizopus stolonifer

Rhizopus stolonifer merupakan jamur yang hidup pada roti, biasanya berwarna
biru kehitam-hitaman, mempunyai maselium yang luas, bercabang- cabang, tak bersepta,
miselium yang tak bersepta dan berinti banyak disebut sonosit. Septanya dibentuk pada
batas alat-alat reproduksi seperti sporangium, gametangium, juga terbentuk pada
miselium tua. Miselium sering membentuk rhizoid. Sporangium dari hifa yang
mendukungnya terpisah oleh satu sekat, yang menonjol kedalam sporangium; tonjolon ini
dinamakan kolumela.

Pada nasi basi terdapat jamur yang berwarna putih dan multiseluler yaitu
memiliki spora aseksual ( sporangium ). Dari ciri-ciri tersebut dapat diketahui bahwa
jamur yang terdapat pada nasi basi yaitu Rhyzopus Stolongifor. Hal ini sesuai dengan
literatur Syamsuri (2004) bahwa Rhyzopus Stolongifor adalah jamur yang berada pada
nasi, yang juga mempunyai sporongium, spora dan sporangifor. Sporangiofor Rhizopus
tidak bercabang dan setelah pemanjangan sampai batas tertentu bagian ujung tampak
membesar dan membentuk sporangium.

Pada roti basi terdapat jamur berwarna hijau, multiseluler hifa, berkoloni dan
memiliki sporangium.dari ciri-ciri tersebut dapat diketahui bahwa jamur yang terdapat
pada roti basi yaitu Rhizopus stolonifer. Hal ini sesuai dengan literatur Subandi (2010).
Rhizopus stolonifer merupakan jamur yang hidup pada roti, mempunyai maselium yang
luas, bercabang-cabang, tak bersepta, miselium yang tak bersepta dan berinti banyak
disebut sonosit. Septanya dibentuk pada batas alat-alat reproduksi seperti sporangium,
gametangium, juga terbentuk pada miselium tua. Miselium sering membentuk rhizoid.
Sporangium dari hifa yang mendukungnya terpisah oleh satu sekat, yang menonjol
kedalam sporangium; tonjolon ini dinamakan kolumela.

Pengamatan pada roti berjamur

Pada pengamatan jamur pada roti ditemukan jamur pada roti berbentik seperti
benang tipis yang ditempeli dengan bulatan kecil disepanjang benang tersebut. Untuk
mngidentifikasi jamur pada roti ini, memiliki beberapa kemungkinan yaitu jamur yeast
cereviceae, rhizopus stolonifer atau rhizopus nigricans. Sehingga dapat dilihat menurut
teori :

Dari gambar diatas terlihat jika dicocokkan dengan pengamatan dibawah

mikroskop, memiliki kencenderungan jamur Oidiofor dengan tunas-tunas kecil berbentuk
bulat yang menempel pada hifa, yang bernama Oidia. Dari ketiga jenis jamur tersebut,
jamur rhizopus stollonifr dan rhizopus nigricans memiliki kecenderungan berbentuk
seperti jamur dengan payung yaitu konidofor, sehingga mmiliki kemungkinan besar
bahwa jamur yang teramati pada roti tersebut adalah Yeast cerevicease.

Yeast S. cerevisiae, mikroorganisme yang paling populer untuk menghasilkan

ethanol Setiap mikroorganisme seperti layaknya makhluk hidup pasti membutuhkan
makanan sebagai sumber energi. Pada roti jaur ini memiliki fungsi untuk memberi udara
agar roti dapat mengembang.

Pengamatan pada tempe yang telah terbuka beberapa hari

Jamur Rhizopus oryzae merupakan jamur yang sering digunakan dalam

pembuatan tempe. Jamur Rhizopus oryzae aman dikonsumsi karena tidak menghasilkan
toksin dan mampu menghasilkan asam laktat. Jamur Rhizopus oryzae mempunyai
kemampuan mengurai lemak kompleks menjadi trigliserida dan asam amino. Selain itu
jamur Rhizopus oryzae mampu menghasilkan protease. Rhizopus sp tumbuh baik pada
kisaran pH 3,4-6. Pada penelitian semakin lama waktu fermentasi, pH tempe semakin
meningkat sampai pH 8,4, sehinggajamur semakin menurun karena pH tinggi kurang
sesuai untuk pertumbuhan jamur. Secara umum jamur juga membutuhkan air untuk
pertumbuhannya, tetapi kebutuhan air jamur lebih sedikit dibandingkan dengan bakteri.
Selain pH dan kadar air yang kurang sesuai untuk pertumbuhan jamur, jumlah nutrien
dalam bahan, juga dibutuhkan oleh jamur.

Pada pengamatan mikroskop jamur tempe (Rhizopus oligosporus) yang teramati

ialah bentuknya menyerupai akar/ rhizoid, koloni jamur ini berwarna putih pada
permukaan tempe, hifa tidak bersekat, dan termasuk pada divisi Zygomycota jamur ini
bermanfaat dalam pembuatan tempe. Berikut klasifikasi jamur tempe:

Kingdom : Fungi
Divisio : Zygomycota
Ordo : Murcorales
Familia : Murcoraceae
Genus : Rhizopus
Spesies : Rhizopus oligosporus
Menurut teori ciri-ciri jamur tempe ialah:
 Koloni berwarna putih
 Hifa bercabang memebntuk miselium dan membentuk sporangium yang berisi
spora
 Sporangiopora tumbuh dari stolon dan menghdap ke udara
 Bentuknya rhizoid atau meyerupai akar
Selain itu, benang halus yang berwarna putih dari jamur tempe/ jamur oncom
merupakan penyusun tubuh jamur yang disebut hifa. Nama jalinan benang yang tersusun
oleh cabang-cabang hifa adalah miselium. Berdasar fungsinya miselium dibagi menjadi 2
yaitu miselium vegetatif fungsinya untuk menyerap makanan, kedua yaitu miselium
generatif fungsinya untuk menghasilkan spora.
Persamaan Hifa jamur tempe dengan jamur oncom yaitu sama-sama mempunyai
inti sel, Sitoplasma, dinding sel, dan bercabang. Perbedaannya, pada hifa jamur oncom
bersekat, dan jamur tempe tidak bersekat. Inti pada hifa jamur tempe terletak di sekeliling
dinding sel. Sedangkan jumlah inti pada hifa jamur yaitu banyak dan letaknya tersebar.
Inti sel yang mempunyai selaput inti semacam ini disebut eukariotik.
Ciri-ciri lain dari jamur Zygomycota (jamur tempe) ini yaitu hidup dilingkungan
darat, saprofit, multiseluler, hifa tak bersekat, tidak berspora flagel, dan dihasilkan
zigospora.

Pengamatan pada tempe baru

Pada pengamatan mengenai tempe yang telah dilakukan,dengan pengamatan

mikroskopis tampak adanya benang – benang halus yang saling tumpang tindih dan
beberapa bulatan – bulatan pada ujung benang- benang tersebut.Jika diamati secara lebih
mendetail,benang- benang yang saling tumpang tindih tersebut merupakan struktur
menyerupai benang yang tersusun dari dinding berbentuk pipa. Dinding ini
menyelubungi membran plasma dan sitoplasma hifa. Sitoplasmanya mengandung organel
eukariotik.Sementara bulatan bulatan pada ujung benang benang tersebut adalah
sporangia globuler yang merupakan bagian dari kotak spora . Dinding sporangium
terdiri dari satu atau beberapa lapisan sel penutup berdinding tebal dan menyerupai cincin
yang disebut anulus. Pada bagian ujung lingkaran terdapat satu kumpulan sel yang pipih
yang dikenali sebagai stomium . Apabila sporangium masak sel stomium akan pecah dan
membebaskan spora yang terdapat didalamnya .

Berdasarkan analisis singkat tersebut,jamur pada tempe tersebut dapat

diklasifiikasikan sebagai berikut.

Kingdom : Fungi

Divisio : Zygomycota

Class : Zygomycetes

Ordo : Mucorales

Familia : Mucoraceae

Genus : Rhizopus

Species : Rhizopus sp.

Rhizopus oryzae merupakan jamur yang sering digunakan dalam pembuatan

tempe. Jamur ini aman dikonsumsi karena tidak menghasilkan toksin dan mampu
menghasilkan asam laktat. Rhizopus oryzae mempunyai kemampuan mengurai lemak
kompleks menjadi trigliserida dan asam amino. Selain itu jamur ini juga mampu
menghasilkan protease. Menurut Sorenson dan Hesseltine (1986), Rhizopus oryzae
tumbuh baik pada kisaran pH 3,4-6. Pada penelitian, semakin lama waktu fermentasi, pH
tempe semakin meningkat sampai pH 8,4, sehingga jamur semakin menurun karena pH
tinggi kurang sesuai untuk pertumbuhan jamur. Secara umum jamur juga membutuhkan
air untuk pertumbuhannya, tetapi kebutuhan air untuk jamur lebih sedikit dibandingkan
dengan bakteri. Selain pH dan kadar air, jumlah nutrien dalam bahan juga dibutuhkan
oleh jamur. Ciri-ciri R. oryzae secara umum, antara lain ialah hifa tidak bersekat
(senositik), hidup sebagai saprotrof, yaitu dengan menguraikan senyawa organik.
Pembuatan tempe dilakukan secara aerobik. Reproduksi aseksual cendawan R. oryzae
dilakukan dengan cara membentuk sporangium yang di dalamnya terdapat
 sporangiospora. Pada R. oryzae terdapat stolon, yaitu hifa yang terletak di antara dua
kumpulan sporangiofor (tangkai sporangium).

H. Kesimpulan
Dari praktikum yang telah dilakukan dapat disimpulkan :
Kegiatan 1 :
1. Salah satu cara pembuatan media adalah dengan menggunakan agar miring, dan
proses sterilisasi secara kimia dengan alkohol dan fisika dengan cara pemanasan pada
alat. Untuk sterilisasi media dengan membungkus media menggunakan kertas
payung.
2. Penangkapan media dapat dilakukan dengan cara mebaruh media pada empat yang
diingikan ( bawah meja) selam 3 menit dan segera menutupnya.
Perkembangbiakan mikroorganisme terjadi saat isolasi dimana memiliki nutrisi, pH,
kelembapan yng sesuai, dan steril.
Penanaman (inokulasi) dilakukan dengan cara mengambil satu koloni dari mikroba
campuran dengan jarum ose steril, lalu menaruhnya di media baru yang telah dibuat.

Kegiatan 2

1. Jamur yang tumbuh pada :

Nasi berjamur : Rhizopus oligosporus

Roti berjamur : yeast cereviceae, rhizopus stolonifer. rhizopus

nigricans

Tempe terbuka beberapa hari : Rhizopus Orizae

Tempe baru : Rhizopus Orizae

I. Saran
Pada percobaan ini diharapkan praktikan lebih berhati-hati dalam menjaga
perilaku saat melaksanakan praktikum guna menjaga kesterilan serta mengetahui teori
dan cara praktikum sehingga dapat melaksanakan praktikum dengan lancar.
Dalam percobaan kali ini deperlukan koordinasi yang baik untuk stiap kelompok
sehingga dapat terlaksana manajemen waktu yang baik

J. Daftar Pustaka
Ani Murniati, 2002. Buku Penuntun Praktikum Mikrobiologi.Bogor: IPB Press.
Neil A, Campbell.2000.Campbell Edisi 5.Jakarta.PT Gelora Aksara Pratama
Dwidjoseputro, D.1994. Dasar – Dasar Mikrobiologi. Jakarta : Djambatan.
Dwyana Z,. Abdullah. 2012. Penuntun Praktikum Mikrobiologi. Universitas Hasanuddin.
Makassar
Dwyana Z,. Nurhaedar. 2011. Mikroobiologi Dasar. Universitas Hasanuddin. Makassar
Prescott, L. M, J. P. Harley, dan D. A. Klein. 2008. Microbiology. 7th Ed. McGraw-Hill
Book Company Inc. USA, p: 113-116
Pelczar, M.J dan E.C.S Chan, 1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Terjemahan R.S.
Hadioetomo dkk. UI Press. Jakarta, hal. 68.
Schagel, Hans G. 1996. Mikrobiologi Umum. Jogja : gajah mada
Trianda. 2011. Inokulasi Mikroba Mkrobiologi. www.Trianda.herisonsurbakti.com.
Diakses pada tanggal 15 Mei 2015. Campalagian
Volk, Wesley A. Dan Margaret F. Wheeler. 1993. Mikrobiologi Dasar. Erlangga.
Jakarta.
Waluyo, L. 2007. Mikrobiologi Umum. UMM Press. Malang, p: 61-67