PERBANDINGAN PEMERIKSAAN GLUKOSA DARAH

METODE GOD-PAP MENGGUNAKAN SERUM YANG

DIPERIKSA SECARA LANGSUNG DAN SERUM YANG
DIPERIKSA DENGAN PENUNDAAN 2 JAM

KARYA TULIS ILMIAH

Disusun untuk memenuhi salah satu syarat gelar Ahli Madya
Nama : Ujang Ruswadi
NIM : 1611E2042

PROGRAM STUDI DIPLOMA III ANALIS KESEHATAN

SEKOLAH TINGGI ANALIS BAKTI ASIH

BANDUNG

2018

i
PERBANDINGAN PEMERIKSAAN GLUKOSA DARAH
METODE GOD-PAP MENGGUNAKAN SERUM YANG
DIPERIKSA SECARA LANGSUNG DAN SERUM YANG
DIPERIKSA DENGAN PENUNDAAN 2 JAM

LAPORAN TUGAS AKHIR

Diajukan untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar

Ahli Madya Analis Kesehatan

Oleh:

Ujang Ruswadi
1611E2042

Pembimbing

Drs. Firman Solihat

ii
 LEMBAR PENGESAHAN

Tugas akhir Diploma ini Telah diujikan pada sidang tugas akhir Diploma III Analis
Kesehatan Sekolah Tinggi Analis Bakti Asih Bandung.
Tanggal: 22 SEPTEMBER 2018

Panitia Ujian

Pembimbing : Drs. Firman Solihat (...........................)

Penguji 1 : Asep Rahmat ST.MT (..........................)

Penguji 2 : Adang Durachim, S.pd., M.Kes. (...........................)

iii
 PERNYATAAN

Saya menyatakan bahwa laporan tugas akhir yang berjudul: perbedaan nilai hematorit
metode mikro dengan menggunakan darah kapiler dan darah vena ini sepenuhnya
karya saya sendiri. Tidak ada bagian didalamnya yang merupakan plagiat dari karya
orang lain dan saya tidak melakukan penjiplakanatau pengutipan dengan cara-cara yang
tidak sesuai dengan etika keilmuan yang berlaku dalam masyarakat keilmuan. Atas
pernyataan ini, saya siap menanggung resiko/sanksi yang dijatuhkan kepada saya
apabila ditemukan adanya pelanggaran terhadap etika keilmuan dalam karya saya ini,
atau ada klam dari pihak lain terhadap keaslian karya saya ini.

Bandung, 25 Agustus 2018

Yang membuat pernyataan

Ujang Ruswadi

iv
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah Subhanahuwata’ala karena berkat
rahmat dan Karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan Tugas Akhir ini, sebagai syarat dalam
menyelesaikan pendidikan D-III Analis Kesehatan di Sekolah Tinggi Analis Kesehatan Bakti
Asih Bandung (STABA).
Tugas Akhir ini yang berjudul “PERBANDINGAN PEMERIKSAAN
GLUKOSA DARAH METODE GOD-PAP MENGGUNAKAN SERUM YANG
DIPERIKSA SECARA LANGSUNG DAN SERUM YANG DIPERIKSA DENGAN
PENUNDAAN 2 JAM“ ini diharapkan dapat bermanfaat bagi teknisi dan klinisi
laboratorium.

v
 Dengan telah selesainya Tugas Akhir ini, rasa syukur penulis yang besar, untuk itu
dalam kesempatan ini perkenankanlah penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada :
1. Bapak Suryatmana Tanuwidjaja, Drs.M.Si selaku Ketua Sekolah Tinggi Analis
Kesehatan Bakti Asih Bandung.
2. Adang Durachim, S.Pd., M.Kes. selaku pembimbing yang telah banyak memberikan
arahan serta bimbingan dalam penyusunan Tugas Akhir ini.
3. Bapak Drs. Muhamad Firman Solihat terima kasih atas segala dukungan, bantuan,
motivasi dan dorongan untuk penyelesaian pendidikan penulis.
4. Semua dosen dan staf karyawan di Sekolah Tinggi Analis Bakti Asih Bandung
5. Kepada Kepala Dapartemen Laboratorium Rumah Sakit Medika Permata Hijau, atas
izin yang diberikan sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan ini
6. Kepada seluruh anggota keluarga yg telah memberikan dukungan moral sehingga
penulis dapat menyelesaikan pendidikan ini
7. Teman-teman seangkatan dikelas non regular tahun 2016 atas kekompakan dan
kerjasamanya memberikan semangat kepada penulis untuk menyelesaikan tugas akhir
ini

Penulis menyadari bahwa Tugas Akhir ini masih jauh dari kesempurnaan karena
keterbatasan kemampuan dan pengetahuan yang penulis miliki.untuk itu, dengan segala
kerendahan hati penulis mengharapkan kritik dan sarannya.
Akhirnya hanya kepada Alloh segala kebaikan diserahkan dan semoga Tugas Akhir
sederhana ini dapat bermanfaat bagi yang membacanya.

. Bandung, September 2018

Ujang Ruswadi

vi
 DAFTAR ISI
COVER ....................................................................................................................................... I
LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................................................ III
PERNYATAAN ......................................................................................................................... IV
KATA PENGANTAR ....................................................................................................................... V
DAFTAR ISI ............................................................................................................................ VII
BAB I.......................................................................................................................................... 1
1.1. LATAR BELAKANG MASALAH .............................................................................................. 1
1.2. RUMUSAN MASALAH ............................................................................................................. 3
1.3. TUJUAN ................................................................................................................................... 3
1.4. MANFAAT ............................................................................................................................... 3
1.5. HIPOTESIS .............................................................................................................................. 3
1.6. KERANGKA KONSEP .............................................................................................................. 4
BAB II ........................................................................................................................................ 5
TINJAUAN PUSTAKA .............................................................................................................. 5
2.1. DARAH .................................................................................................................................... 5
2.2. SERUM .................................................................................................................................... 5
2.3. KARBOHIDRAT ....................................................................................................................... 6
2.3.1 KLASIFIKASI KARBOHIDRAT ............................................................................................ 7
2.3.2 METABOLISME GLUKOSA ................................................................................................. 8
2.4 DIABETES MELLITUS ........................................................................................................... 10
2.5 METODE PEMERIKSAAN GLUKOSA DARAH ....................................................................... 11
BAB III ..................................................................................................................................... 15
METODE PENELITIAN ......................................................................................................... 15
3.1 JENIS PENELITIAN ................................................................................................................ 15
3.2 DESAIN PENELITIAN ............................................................................................................ 15
3.3 POPULASI DAN SAMPEL ....................................................................................................... 16
3.3.1 Populasi ........................................................................................................................ 16
3.3.2 Sampel .......................................................................................................................... 16
3.4 LOKASI DAN WAKTU PENELITIAN ...................................................................................... 16
3.4.1 Lokasi Penelitian.......................................................................................................... 16
3.4.2 Waktu Penelitian .......................................................................................................... 16
3.5 ALAT, BAHAN DAN METODE ............................................................................................... 16
3.5.1 Alat yang digunakan .................................................................................................... 16
3.5.2 Bahan yang digunakan ................................................................................................ 16
3.6 CARA KERJA ........................................................................................................................ 17
3.7 PENGOLAHAN DAN ANALISA DATA .................................................................................... 18
BAB IV ..................................................................................................................................... 19
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN........................................................................... 19
4.1 HASIL PENELITIAN .............................................................................................................. 19
4.2 PEMBAHASAN ....................................................................................................................... 21
vii
BAB V ...................................................................................................................................... 23
KESIMPULAN DAN SARAN .................................................................................................. 23
5.1 KESIMPULAN ........................................................................................................................ 23
5.2 SARAN .................................................................................................................................. 23
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................................ 24

viii
 1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang Masalah

Dalam ilmu kedokteran, gula darah adalah istilah yang mengacu

kepada tingkat glukosa di dalam darah. Konsentrasi gula darah, atau
tingkat glukosa serum, diatur dengan ketat di dalam tubuh. Glukosa
yang dialirkan melalui darah adalah sumber utama energi untuk sel-sel
tubuh. Umumnya tingkat gula darah bertahan pada batas-batas yang
sempit sepanjang hari: 4-8 mmol/l (70-150 mg/dl). Tingkat ini
meningkat setelah makan dan biasanya berada pada level terendah pada
pagi hari, sebelum orang makan. (Anik Widjayanti, 2009)

Salah satu pemeriksaan laboratorium yang sering dilakukan adalah

pemeriksaan glukosa darah. Tujuan dari pemeriksaan glukosa darah ini
salah satunya adalah untuk menentukan ada tidaknya penyakit diabetes
mellitus. Diabetes mellitus adalah penyakit yang paling menonjol yang
disebabkan oleh gagalnya pengaturan gula darah atau kelainan
metabolisme karbohidrat, dimana glukosa darah tidak dapat digunakan
dengan baik, sehingga meyebabkan keadaan hiperglikemia. (Anonim.
2010)

Umumnya pada pemeriksaan kimia darah khususnya glukosa

biasanya digunakan serum sebagai spesimen. Serum merupakan hasil
pemisahan antara komponen cair dan seluler dari darah (whole blood).
Proses pemisahan komponen darah untuk mendapatkan serum dapat
dilakukan dengan dua cara. Cara pertama dengan mendiamkan darah
selama minimal 1-2 jam hingga terjadi pemisahan dengan sendirinya
(pemisahan spontan), namun dengan membiarkan darah terlalu lama
memungkinkan terjadinya metabolisme glukosa dalam sampel oleh sel-
sel darah. Kadar glukosa dalam tabung akan menurun setelah 10 menit
pengambilan darah, karena proses glikolisis dengan kecepatan kurang
lebih 7 mg/dl per jam. (Anonim 2012). Cara kedua yaitu dengan
 2

mendiamkan darah hingga membeku kemudian dilanjutkan dengan

sentrifugasi hingga terjadi pemisahan secara total kemudian serum
dipisahkan dari sel-sel darah untuk mencegah terjadinya proses
metabolisme sel hidup yang dapat mengakibatkan penurunan kadar
glukosa darah. Hal ini sejalan dengan pendapat Hardjoeno dalam
bukunya Interprestasi Hasil tes Laboratorium Diagnostik bahwa
”Serum harus segera dipisahkan dari bahan bekuan darah dalam sampel
atau paling lambat 2 jam setelah pengambilan darah untuk menghindari
perubahan-perubahan dari zat-zat yang terlarut didalamnya oleh
pengaruh hemolisis darah” (Hardjoeno, 2003)

Kenyataan dilapangan Pemeriksaan Glukosa darah menggnakan

spektrofotometer sering mengalami penundaan pemeriksaan. Hal ini
biasanya disebabkan karena pemeriksaan dilakukan secara seri,
penundaan pengiriman sampel, penanganan sampel yang kurang cepat
dan tepat, terjadi kerusakan alat maupun kehabisan reagen
pemeriksaan. Sebagai contoh penundaan pengiriman darah akan
mengakibatkan penurunan kadar glukosa darah. ( Anonim. 2012)

Dengan perkembangan yang pesat dari jumlah dan jenis

pemeriksaan, peralatan laboratorium, maka dibutuhkan pemilihan
metode dan alat yang sesuai dengan indikasi pemeriksaan serta
interpretasi hasil yang tepat.

Berdasarkan uraian diatas, maka penulis bermaksud untuk

melakukan penelitian dengan judul ”Perbedaan Hasil Pemeriksaan
Glukosa Darah Metode GOD-PAP mengunakan serum yang diperiksa
secara langsung dan serum yang diperiksa dengan penundaan 2 jam
pada suhu ruag”.

2
 3

1.2. Rumusan Masalah

Apakah Terdapat Perbedaan Hasil Pemeriksaan Glukosa Darah
Metode GOD-PAP Menggunakan Serum yang di Periksa Secara
Langsung dan Serum yang di Periksa dengan Penundaan Selama 2 Jam
pada suhu ruang?

1.3. Tujuan
Untuk mengetahui perbedaan hasil pemeriksaan glukosa darah
menggunakan serum secara langsung dan serum yang diperiksa dengan
penundaan selama 2 jam pada suhu ruang.

1.4. Manfaat
Penelitian ini dilakukan untuk menemukan selisih hasil
pemeriksaan glukosa darah metode GOD PAP dengan serum yang
diperiksa langsung dan serum dengan penundaan 2 jam pada suhu ruang
sehingga memberikan informasi tentang hal tersebut dapat diterapkan
atau tidak jika seandainya memungkinkan harus adanya penundaan
sampel(serum) dilaboratorium.
1.5. Hipotesis
1. Hipotesis nol (Ho)
Tidak ada perbedaan yang bermakna antara hasil pemeriksaan
glukosa darah metode GOD-PAP secara langsung dan dengan
penundaan 2 jam pada suhu ruang
2. Hipotesis alternatif (Ha)

Ada perbedaan yang bermakna antara hasil pemeriksaan glukosa

darah metode GOD-PAP secara langsung dan dengan penundaan 2 jam
pada suhu ruang

3
 4

1.6. Kerangka Konsep

Darah disentrifuge

Serum

Serum sewaktu Serum yang disimpan 2

(segar) jam pada suhu ruang.

1. Pipet 5 µL serum +
500 µL reagen
glukosa
2. Homogenkan
3. Inkubasi 10 menit
4. Baca hasil pada
spektrofotometri

statistic uji T

kesimpulan

4
 5

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Darah
Darah adalah suatu jaringan tubuh yang terdapat didalam pembuluh
darah yang warnanya merah. Warna merah itu tidak tetap tergantung
pada banyaknya oksigen dan karbondioksida didalamnya. Adanya
oksigen dalam darah diambil dengan jalan bernafas dan zat ini sangat
berguna pada pristiwa pembakaran atau metabolisme dalam tubuh.
Darah terdiri dari dua komponen besar komponen cair ( plasma)
dan komponen seluler sel-sel darah atau korpuskuli (eritrosit, leukosit
dan trombosit ). Komponen plasma 45% - 65% volume darah total yang
terdiri dari air 91% - 92% dan sel padat 8% - 9% diantaranya (
protein, unsur - unsur an-organik, organic dan enzim-enzim).darah
pada umumnya berfungsi sebagai wahana pengangkut (transport)
bebagai komponen menuju berbagai organ tubuh, system imunologik
dan fungsi hemostasis.( Muhamad Sadikin, 2001)

2.2. Serum

Di dalam darah, serum adalah komponen yang bukan berupa sel

darah, juga bukan faktor koagulasi; serum adalah plasma darah tanpa
fibrinogen, berarti bagian tetap cair dari susu yang membeku pada
proses pembuatan keju. Serum terdiri dari semua protein (yang tidak
digunakan untuk pembekuan darah) termasuk cairan elektrolit, antibodi,
antigen, hormon, dan semua substansi exogenous. Serum diperoleh
setelah sampel darah dibekukan dan bekuannya dipisahkan dengan
pemusingan. Pemakaian serum sebagai pengganti plasma juga
mencegah pencemaran spesimen oleh antikoagulan yang mungkin
mempengaruhi satu atau lebih tes (Anonim. 2010
 Bahan-bahan yang biasa diukur dalam serum umumnya
digolongkan ke dalam kategori-kategori berikut:

1. Bahan yang dalam keadaan normal memiliki fungsi dalam

sirkulasi
2. Bahan hasil metabolit
3. Bahan yang dikeluarkan dari sel akibat kerusakan dan
kelainan premeabilitas atau kelainan properasi sel.
4. Obat dan zat toksik.

2.3. Karbohidrat

Karbohidrat merupakan bahan yang sangat diperlukan tubuh

manusia, hewan dan tumbuhan disamping lemak dan protein, senyawa
ini dalam jaringan merupakan cadangan makanan atau energi yang
disimpan dalam sel. Bentuk molekul karbohidrat paling sederhana
terdiri dari satu molekul gula sederhana. Banyak karbohidrat yang
merupakan polimer yang tersusun dari satu molekul gula yang terangkai
menjadi rantai panjang serta bercabang-cabang. Karbohidrat merupakan
bahan makanan penting dan sumber tenaga yang terdapat dalam
tumbuhan dan daging hewan. Selain itu, karbohidrat juga menjadi
komponen struktur penting pada makhluk hidup dalam bentuk serat
(fiber), selulosa, pektin, serta lignin. Karbohidrat menyediakan
kebutuhan dasar yang diperlukan tubuh. Tubuh menggunakan
karbohidrat seperti layaknya mesin mobil menggunakan bensin. Selain
sebagai sumber energi, karbohidrat juga berfungsi untuk menjaga
keseimbangan asam basa di dalam tubuh, berperan penting dalam
proses metabolisme dalam tubuh, dan pembentuk struktur sel dengan
mengikat protein dan lemak. Karbohidrat merupakan komponen pangan
yang menjadi sumber energi utama dan sumber serat makanan.
Komponen ini disusun oleh 3 unsur utama, yaitu karbon (C), hidrogen
(H) dan oksigen (O).

6
 2.3.1 Klasifikasi Karbohidrat

Dari rumus umum karbohidrat, dapat diketahui bahwa senyawa ini

adalah suatu polimer yang tersusun atas monomer yang menyusunnya,
karbohidrat dibedakan menjadi empat golongan yaitu :
monosakarida,disakarida, oligosakarida dan polisakarida

a. Monosakarida
Merupakan karbohidrat paling sederhana karena molekulnya hanya
terdiri atas beberapa atom C dan tidak dapat diuraikan dengan
cara hidrolisis menjadi karbohidrat laiMonosakarida dibedakan
menjadi aldosa dan ketosa. Contoh dari aldosa
yaitu glukosa dan galaktosa. Contoh ketosa yaitu fruktosa terdiri atas 3-
6 atom C dan zat ini tidak dapat lagi dihidrolisis oleh larutan asam
dalam air menjadi karbohidrat yang lebih sederhana tidak dapat
dihidrolisis ke bentuk yang lebih sederhana. Monosakarida yang
terpenting adalah glukosa, galaktosa, dan fruktosa.

b. Disakarida

Merupakan karbohidrat yang terbentuk dari dua molekul

monosakarida yang berikatan melalui gugus –OH dengan melepaskan
molekul air. Contoh dari disakarida adalah sukrosa, laktosa,
dan maltosa.

1) Sukrosa

Adalah gula yang kita gunakan sehari-hari, baik yang berasal dari
tebu, maupun tumbuhan lainya. Pada molekul sukrosa terdapat ikatan
antara molekul glukosa dan fruktosa. Hasil hidrolisis sukrosa yaitu
campuran Glukosa dan fruktosa yang biasa disebut dengan gula invert.

2) Maltosa

Adalah suatu disakarida yang terbentuk dari dua molekul glukosa.

Ikatan yang terjadi ialah antara atom karbon nomor I dan atom karbon

7
nomor 4, oleh karenanya maltosa masih mempunyai gugus -OH
glikosidik dan dengan demikian masih mempunyai sifat mereduksi.
Maltosa merupakan hasil antara dalam proses, hidrolisis amilum dengan
asam maupun dengan enzim.

3) Laktosa

Adalah suatu disakarida yang terbentuk dari dua molekul glukosa.

Dalam tubuh kita amilum Mengalami hidrolisis menjadi glukosa yang
digunakan oleh tubuh.

c. Oligosakarida

Senyawa yang terdiri dari gabungan molekul-molekul

monosakarida yang banyak gabungan dari 3 sampai 6
monosakarida dihidrolisis: gabungan dari 3 sampai 6 monosakarida
misalnya maltosa, sukrosa dan laktosa.

d. Polisakarida

Senyawa yang terdiri dari gabungan molekul-molekul

monosakarida yang banyak jumlahnya, senyawa ini bisa dihidrolisis
menjadi banyak molekul monosakarida. Polisakarida merupakan jenis
karbohidrat yang terdiri dari lebih 6 monosakarida dengan rantai lurus /
cabang. (Riskawati, 2011)

2.3.2 Metabolisme Glukosa

Pada dasarnya metabolisme glukosa dapat dibagi dalam dua bagian

yaitu yang menggunakan oksigen atau aerob dan yang tidak
menggunakan oksigen yaitu reaksi anaerob yang terdiri atas
serangkaian reaksi yang mengubah glukosa menjadi asam laktat, proses
ini disebut glikolisis.

8
 a. Glikolisis
Glikolisis terjadi didalam sel. Proses glikolisis dimulai dengan
molekul glukosa dan diakhiri dengan terbentuknya asam laktat. Pada
tahap glikolisis, terjadi dua langka reaksi, yaitu langka memerlukan
energi dan langkah melepaskan energy. Saat langka memerlukan energi,
2 molekul ATP diperlukan untuk mentransfer gugus fosfat ke glukosa
sehingga glukosa memiliki simpan energi yang lebih tinggi. Energi ini
diperlukan unuk reaksi selanjutnya, yaitu reaksi pelepasan energi.
Jadi dapat disimpulkan bahwa glikolisis adalah reaksi pelepasan
energi yang memecah satu molekul glukosa (terdiri dari 6 atom karbon
) atau monosakarida yang lain menjadi dua molekul asam piruvat (
terdiri dari 3 atom karbon), 2 NADH (nicotinamide Adenin
Dinucleotide H), dan 2 ATP.
b. Glikogenesis
Glukosa merupakan sumber bahan bagi proses glikolisis, karena
glukosa terdapat dalam jumlah banyak bila dibandingkan dengan
monosakarida yang lain, oleh karena itu bila jumlah glukosa yang
diperoleh dari makanan terlalu berlebih, maka glukosa akan disimpan
dengan jalan diubah menjadi glikogen dalam hati dan jaringan otot.
Proses sintesis glikogen dari glukosa ini disebut glikogenesis.
c. Glikogenolisis
Proses reaksi pemecahan molekul glikogen menjadi molekul–
molekul glukosa disebut glikogenolisis, proses ini kebalikan dari reaksi
glikogenesis. Glikogen dalam hati atau otot dapat dipecah menjadi
molekul fosfat melalui proses fosfolisis, reaksi dengan asam amino
d. Glikoneogenesis
Glikoneogenesis merupakan istilah yang digunakan untuk
mencakup semua mekanisme dan lintasan yang bertanggung jawab
untuk mengubah senyawa non karbohidrat menjadi glukosa atau
glikogen. Substrat utama bagi glukoneogenesis adalah asam amino
glikogenik, laktat, gliserol, dan propionat. Hati dan ginjal merupakan

9
jaringan utama yang terlibat, karena kedua organ tersebut mengandung
komplemen lengkap enzim-enzim yang diperlukan (Anonim, 2011)
2.4 Diabetes Mellitus
Diabetes adalah suatu penyakit yang mengganggu kemampuan
tubuh untuk mengunakan sari-sari makanan secara efisien. Hormon
insulin yang diproduksi di pankreas membantu tubuh dalam mengubah
makanan menjadi energi. Diabetes terjadi bila satu dari kondisi ini
terjadi, pankreas gagal memproduksi insulin, atau tubuh tidak dapat
menggunakan insulin yang telah diproduksinya. Pada kasus kronis, ada
kaitannya dengan kerusakan jangka panjang, disfungsi, atau kegagalan
beberapa organ tubuh, terutama mata, ginjal, syaraf, jantung, dan
pembuluh darah.
Macam-Macam Diabetes
a. Diabetes Tipe 1

Diabetes tipe 1 disebabkan oleh kerusakan sel-sel beta dalam

pankreas yang bertugas mengsekresi insulin. Dipercaya bahwa paling
tidak pada awal mulanya penyakit kekebalan tubuh disebabkan oleh
racun atau virus. “kejadian” ini mendorong sistem kekebalan tubuh
untuk menyerang pankreas. Sel-sel beta dalam pankreas mengalami
kerusakan karena serangan tersebut dan tidak dapat lagi memproduksi
insulin.

Gejala awal diabetes tipe 1 meliputi rasa lapar dan haus

berlebihan, penurunan berat badan tanpa sebab, seiring pembuangan air
kecil penglihatan kabur, kelelahan, dan infeksi kronis. Pada situasi
krisis, serangan diabetes tipe satu dapat mengakibatkan kejang,
kebingungan, napas berbau buah, dan ketidaksadaran dan biasanya
terjadi pada usia yang sangat muda.

Diabtes tipe 1 hanya dapat dikendalikan dengan suntikan

insulin dan pengawasan makanan sehari-hari. Penyakit ini tidak dapat
disembuhkan, tetapi pengelolahan yang cermat memungkinkan
penderita diabetes tipe 1 dapat menjalani hidup secara normal

10
 b. Diabetes Tipe 2

Suatu penyakit metabolisme tubuh. Penderita diabetes tipe 2

dapat menghasilkan insulin tetapi insulin yang dihasilkan tidak cukup
atau tidak bekerja sebagaimana mestinya didalam tubuh. Diabetes tipe 2
sering dijumpai pada pria maupun wanita berusia lebih dari 40 tahun
yang memiliki kelebihan berat badan.

Diabetes tipe 2 dapat menjadi gerbang bagi berbagai penyakit yang

dapat mengacam kehidupan. Yang terbesar diantaranya adalah
meningkatnya resiko terhadap kemungkinan berkembangnya penyakit
jantung koroner (coronary artery disease) atau sering disebut CAD.
CAD adalah penyebab kematian terbesar bagi penderita DM. Bila kadar
gula tinggi ( hiperglikimia ) dan tak terkendali karena diabetes, hal ini
dapat menyebabkan kerusakan sistemik dalam tubuh. Lama kelamaan
dapat menyebabkan serangan jantung dan stroke pada usia dini,
kebutaan, amputasi kaki, dan kerusakan ginjal.

2.5 Metode Pemeriksaan Glukosa Darah

Metode pemeriksaan gula darah meliputi metode reduksi dan

enzimatik. Yang paling sering digunakan adalah metode enzimatik,
yaitu metode glukosa oksidasi (GOD) dan metode heksokinase. Metode
GOD dan heksokinase banyak digunakan karena mempunyai akurasi
dan presisi yang baik dan merupakan metode referensi, karena enzim
yang digunakan spesifik untuk glukosa.

1. Metode Glukosa Oksidasi

Metode glukosa oksidase merupakan metode yang paling banyak

digunakan di laboratorium yang ada di Indonesia. Sekitar 85% dari
peserta program nasional pemantapan mutu eksternal di bidang kimia
klinik. Memeriksa glukosa serum kontrol dengan menggunakan metode
ini.

11
 Prinsip pemeriksaan: Glukosa ditentukan setelah oksidasi enzimatis
dengan adanya oksidase. Hidrogen peroksida yang terbentuk bereaksi
dengan adanya peroksidase. Dengan phenol serta 4-amiophenazon
menjadi zat warna quinoneimine berwarna merah violet.

Digunakan enzim glukosa oksidasi pada reaksi pertama

menyebabkan sifat Reaksi pertama spesifik untuk glukosa khususnya P-
D-glukosa. Sedangkan reaksi kedua tidak spesifik karena zat yang bisa
teroksidasi dapat menyebabkan hasil pemeriksaan lebih rendah. Asam
urat, asam askorbat, bilirubin, dan glutation menghambat reaksi karena
zat-zat ini akan berkompotesi dengan kromogen bereaksi dengan
hydrogen peroksida sehingga hasil pemeriksaan akan lebih rendah.
Keunggulan dari metode GOD adalah karena murahnya reagen dan
hasil yang cukup memadai. Namun hasil pemeriksaan juga dapat
dipengaruhi oleh serum yang lisis mutu reagen, alat yang tidak
terkalibrasi dengan baik dan cara kerja analisis itu sendiri.

2. Metode Hexokinase

Metode hexokinase merupakan metode untuk pemeriksaan glukosa

darah dianjurkan (reference method) oleh WHO dan IFCC. Namun baru
sekitar 10% laboratorium yang menggunakan metode ini untuk
pemeriksaan glukosa darah.

Prinsip pemeriksaan:Hexokinase akan mengkatalisis reaksi

fosforilasi glukosa dengan ATP membentuk glukosa 6-fosfat dan ADP.
Enzim kedua yaitu glukosa 6-fosfat dehidrogennase akan mengkatalisis
oksidasi glukosa-6-fosfat dan ADP dengan nicotinamid
adeninedenucleotide phosphate (NADP)

Pada metode ini digunakan dua macam enzim yang spesifik

sehingga hasil yang diperoleh sangat baik. Belum ada laporan penelitian
yang mengatakan adanya reaksi senyawa lain. Kekurangan dari metode
ini adalah biaya yang relativ mahal untuk pemeriksaan tersebut.

12
 3. Pemeriksaan Reduksi Metode Benedict

Penyakit diabetes selain dapat dideteksi melalui pemeriksaan

glukosa darah dapat juga dideteksi pada urin sehinga dapat dilakukan
pemeriksaan glukosa pada sampel urin yaitu pemeriksaan reduksi
metode benedict. Darah disaring oleh jutaan nefron sebuah unit
fungsional dalam ginjal. Hasil penyaringan (filtrat) berisi produk-
produk limbah (misalnya urea), elektrolit( misalnya natrium, kalium
dan klorida), asam amino dan glukosa. Filtrate kemudian dialirkan ke
tubulus ginjal untuk direabsorbsi dan diekskresikan zat-zat yang
diperlukan termasuk glukosa diserap kembali dan zat-zat yang tidak
diperlukan diekskresikan kedalam urin.

Kurang dari 0,1% glukosa yang disaring oleh glomerolus terdapat

dalam urin yaitu kurang dari 130 mg/24 jam. Kelebihan gula dalam urin
atau disebut juga glukosuria karena nilai ambang ginjal terlampau (
kadar gula darah melebihi 160-180 mg/dl) atau daya reabsorbsi tubulus
yang menurun.

Uji glukosa urin menggunakan reagen benedict atas dasar sifat

glukosa sebagai peruduksi. Cara ini tidak spesifik karena beberapa
pereduksi lain dapat mengacaukan hasil uji. Beberapa gula lain bisa
menyebabkan hasil uji reduksi positif misalnya glukosa, sukrosa,
galaktosa, pentosa, laktosa dan beberapa zat bukan gula yang dapat
mengadakan reduksi seperti homogentisat alkapton, formalin,
glukoronat. Metode benedict banyak digunakan di laboratorium klinik
karena hanya menggunakan satu jenis larutan saja untuk menafsirkan
kadar gula secara kasar dan pemakaian bahan urin yang sedikit sekali,
dengan prinsip glukosa dalam urin akan mereduksi garam kompleks
dari reagen (ion cupri direduksi cupro ) dan mengendap dalam bentuk
CuO dan Cu2O berwarna kuning hingga merah bata.

13
 4. Pemeriksaan Glukosa Metode Carik Celup

Metode carik celup (dipstick) dinilai lebih bagus karena lebih

spesifik untuk glukosa dan waktu pengujian yang amat singkat Reagen
strip untuk glukosa dilekati dua enzim, yaitu glukosa oksidase (GOD)
dan peroksidase (POD) serta zat warna (kromogen) seperti orto-toluidin
yang berubah warna biru jika teroksidasi. Zat warna lain yang
digunakan ialah iodide yang akan berubah warna coklat jika teroksidasi.

Prosedur uji yang akan dijelaskan disini adalah uji dipstick yaitu
celupkan strip reagen (dipstick) kedalam urin. Tunggu selama 60 detik,
amati perubahan warna yang terjadi dan cocokkan dengan bagan warna.

5. Pemeriksaan Glukosa Darah Dengan Alat Glukometer

Ada beberapa jenis alat yang digunakan dalam pemeriksaan

glukosa darah salah satunya adalah glukometer yang digunakan untuk
mengukur kadar glukosa darah dengan mudah dan cepat. Pada alat
glukometer dilengkapi dengan suatu sensor tepatnya disebut biosensor
sesuai dengan komponen penyusunnya yang terdiri dari biological
element sebagai pengenal molekul atau senyawa yang hendak diukur
(analit) dan trasducer yang menangkap sinyal dari biological element
itu. Biosensor sendiri bekerja berdasarkan reaksi enzymatic antara
enzim glukose oxidase (GOD) dengan glukosa dalam darah yang
kemudian dirubah menjadi sinyal elektronik.

Glukosa dalam darah bereaksi dengan glukosa oxidase dan kalium

ferrycianide didalam strip memproduksi kalium ferrocyanide. Kalium
ferrocyanide yang di produksi sebanding dengan konsentrasi glukosa
dalam darah. Oksidasi kalium ferrocyanida menghasilkan suatu elektrik
yang kemudian dikonversi oleh meter untuk menampakan konsentrasi
glukosa pada layar.

14
 15

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Jenis penelitian

Jenis penelitiaan yang digunakan adalah bersifat eksperimen

laboratorium, yaitu untuk membandingkan ada tidaknya perbedaan
pemeriksaan serum yang diperiksa secara langsung dan serum yang
diperiksa dengan penundaan 2 jam pada suhu ruang terhadap hasil
pemeriksaan glukosa darah metode GOD-PAP.

3.2 Desain Penelitian

Rancangan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah

perbandingan kelompok statistic (Static Group Comparison) yaitu
penelitian yang dilakukan dengan membandingkan kelompok
eksperimen dengan kontrol.

Kelompok Perlakuan Postest

Memeriksa glukosa darah metode GOD- Amati dan catat kadar

PAP menggunakan serum yang diperiksa glukosa darah
Kelompok
dengan penundaan 2 jam pada suhu ruang
Perlakuan

Memeriksa glukosa darah metode GOD- Amati dan catat kadar

PAP menggunakan serum yang diperiksa glukosa darah
Kelompok
secara langsung
Kontrol
 3.3 Populasi dan Sampel
3.3.1 Populasi
Populasi dalam penelitian ini adalah pasien yang datang ke
Laboratorium RS. Salak
3.3.2 Sampel
Sampel dalam penelitian ini adalah darah vena yang didapat dari 20
pasien yang datang ke laboratorium RS.Salak

3.4 Lokasi dan Waktu Penelitian

3.4.1 Lokasi Penelitian
Penelitian ini dilakukan di laboratorium RS.SALAK Kota Bogor.
3.4.2 Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada tanggal September 2018

3.5 Alat, Bahan dan Metode

3.5.1 Alat yang digunakan
1. Spuit 3 cc
2. Tabung reaksi
3. Mikropipet 5µl dan 500 µl
4. Tip kuning putih dan biru
5. tisue
3.5.2 Bahan yang digunakan
1. Serum dari darah vena
2. Reagen Glukosa

16
 3.6 Cara Kerja
a. Pembuatan serum
1. Darah diambil dari vena dengan menggunakan spuit
sebanyak 3 cc
2. Darah dimasukan kedalam tabung yang bersih dan kering.
3. Darah disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rotasi permenit
selama 10 menit untuk memperoleh serum.
b. Pemeriksaan Glukosa dari serum yang diperiksa
langsung
1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
2. Siapkan tabung reaksi yang bersih dan steril diberi label
sampel.
3. Dipipet sampel serum tanpa penundaan sebanyak 5 µl
masukan pada tabung sampel.
4. Dengan menggunakan mikropipet, tabung sampel diisi
dengan reagen glukosa sebanyak 500µl.
5. Campur dan homogenkan tiap-tiap tabung, inkubasi 10 menit
pada suhu ruangan.
6. Kemudian kadar glukosa dibaca pada Spektofotometer.

c. Pemeriksaan Glukosa dari serum dengan

penundaan/penyimpanan 2 jam pada suhu ruang
1. Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan
2. Siapkan tabung reaksi yang bersih dan steril diberi label
sampel.
3. Dipipet sampel serum (yang sudah melewati penyimpanan
/didimkan selama 2 jam pada suhu ruang) sebanyak 5 µl masukan pada
tabung sampel.
4. Dengan menggunakan mikropipet, tabung sampel diisi
dengan reagen glukosa sebanyak 500µl.
5. Campur dan homogenkan tiap-tiap tabung, inkubasi 10 menit
pada suhu ruangan.

17
 6. Kemudian kadar glukosa dibaca pada Spektofotometer.

Nilai Normal : Glukosa Sewaktu : 140 mg/dl

Glukosa Puasa : 70 – 100 mg/dl

2 jam PP : <180 mg/dl

3.7 Pengolahan dan Analisa Data

Data disajikan dalam bentuk tabel dan dianalisa secara statistic.

Untuk memperoleh nilai statistik, maka semua data ditabulasikan sesuai
dengan kelompok perlakuan yang selanjutnya dilakukan pengujian
statistik dengan uji-t dua pihak dengan program SPSS.

Kriteria penerimaan dan penolakan yaitu Ho diterima bila t hitung

< t tabel dan sebaliknya Ha diterima bila t hitung > t tabel (Sugiyono,
2004).

18
 19

BAB IV

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian

Setelah dilakukan pemeriksaan glukosa darah metode GOD-PAP
menggunakan serum yang diperiksa secara langsung dan serum yang
diperiksa dengan penundaan selama 2 jam pada suhu ruang. Dengan
Jumlah sampel dalam penelitian ini adalah 20 sampel. Hasil penelitian
ditampilkan dalam bentuk table.

HASIL PEMERIKSAAN GLUKOSA DARAH (mg/dl)

SECARA
N
NAMA LANGSUN PENUNDAA SELISIH
O
PASIEN G N 2 JAM

1 Tn. Dimas 143 115 28

2 Nn. Wanda 112 99 13

3 Tn. Ilyas 109 86 23

4 Tn. Rifqi 118 105 13

5 Tn. Reiga 132 117 15

6 Nn. Rizka 120 106 14

7 Nn. Reisa 132 116 16

8 Nn. Nesya 100 97 3

 9 Nn. Cindy 104 101 3

10 Nn. Sintya 110 96 14

11 Nn. Ratih 153 153 0

12 Ny. Lilis 161 150 11

13 Ny Oyi 148 135 13

14 Tn. Endang 123 95 28

Ny.
15 128 101 17
Nunung

16 Ny. Eti 98 89 9

17 Tn. Ajat 145 130 15

18 Ny. Neneng 90 85 5

19 Tn. Abdul 126 115 11

Ny.
20 85 72 13
Halimah

243
∑ 2163 238
7

X 122 108 12

Dari tabel diatas menunjukan dari 20 pasien yang diambil darahnya

di Laboratorium RS.Salak pada pemeriksaan glukosa darah didapatkan,
serum yang diperiksa secara langsung diperoleh kadar terendah yaitu 85
mg/dl dan kadar tertinggi yaitu 161 mg/dl dan pada serum yang
diperiksa dengan penundaan 2 jam didapatkan kadar terendah yaitu 72
mg/dl dan kadar tertinggi 150 mg/dl.

Hasil analisis uji t ( 2 pihak) perbandingan hasil pemeriksaan

glukosa darah metode GOD-PAP menggunakan serum yang diperiksa

20
langsung dengan serum yang melewati penundaan pemeriksaan selama
2 jam yaitu :

Pemeriksaan
N O SD t hitung t tabel
Glukosa

Serum yang
1
diperiksa 21.26 2.498 2,045
2 22
langsung
0
Serum dengan 1
21.20
penundaan 2 jam 08

Tabel diatas menunjukan bahwa t hitung 2.498 > t tabel 2,045 maka
Ha diterima artinya ada pengaruh signifikan menggunakan serum yang
diperiksa secara langsung dan serum dengan penundaan 2 jam terhadap
hasil pemeriksaan glukosa darah metode GOD-PAP.

4.2 Pembahasan

Pemeriksaan kimia darah, khususnya pemeriksan kadar glukosa

merupakan salah satu parameter penting dalam mendiagnosa suatu
penyakit serta mengevaluasi tindakan medik atau memantau
perkembangan suatu penyakit termasuk diabetes mellitus (DM). Salah
satu metode yang sering digunakan adalah metode GOD-PAP. Metode
GOD-PAP merupakan suatu metode pemeriksaan glukosa darah secara
enzimatik, dimana kadar glukosa sebagai substrat akan dihidrolisis
dengan bantuan glukosa oksidase menghasilkan asam glukonik dan
H2O2. Kemudian H2O2 yang dilepaskan akan bereaksi dengan 4-
aminophenazone dan phenol dengan bantuan peroksidase menghasikan
zat warna quiononeimine yang berbanding lurus dengan substrat yang
terdapat pada sampel.

Dalam mencapai hasil yang presisi dan akurasi untuk pemeriksaan

glukosa darah sangat dipengaruhi oleh banyak faktor diantaranya mulai
dari faktor sumber daya manusia, instrument, reagen dan metode yang

21
digunakan, kemudian tiga tahap yang dijalankan yaitu pra analitik,
analitik dan pasca analitik.

Berdasarkan hasil penelitian yang dianalisis dengan uji t statistik

pada pemeriksaan glukosa darah menggunakan serum yang diperiksa
secara langsung dan serum yang diperiksa dengan penundaan 2 jam
menunjukan hasil t hitung = 2,4989 > t tabel 2.045 Maka Ha diterima
artinya ada perbedaan yang bermakna antara pemeriksaan glukosa
menggunakan serum yang diperiksa secara langsung dengan serum
yang diperiksa dengan penundaan 2 jam terhadap hasil pemeriksaan
glukosa darah metode GOD-PAP.

Indikasi penurunan kadar yang sangat signifikan merupakan

peringatan bagi kita untuk pentingnya memperhatikan penanganan
sampel dengan cepat dan tepat untuk menghindari tertundanya suatu
pemeriksaan khususnya pemeriksaan glukosa darah.

Dalam suatu pemeriksaan kita dituntut untuk memberikan hasil

yang dapat dipercaya yang nantinya digunakan sebagai acuan dalam
mendignosis suatu penyakit. Hal ini bisa terwujud apabila bisa
seminimal mungkin menghindari kesalahan dengan memperhatikan
standar prosedur operasional, memperhatikan faktor-faktor yang
mempengaruhi hasil dan tahap-tahap dalam suatu pemeriksaan.

Penundaan serum khususnya untuk pemeriksaan glukosa

mengalami penurunan nilai dapat terjadi dikarenakan mendiamkan
sampel/serum pada suhu ruang selama 2 jam dapat mengakibatkan :

1. Glikolisis, yaitu sebuah reaksi pelepasan energi yang

memecah satu molekul glukosa atau monosakarida yang lain menjadi
dua molekul asam piruvat ( terdiri dari 3 atom karbon), 2 NADH
(nicotinamide Adenin Dinucleotide H), dan 2 ATP.
2. Adanya pertumbuhan sel hidup didalam darah yang
menyebabkan penurunan kadar glukosa darah.

22
 23

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilaksanakan, maka dapat

disimpulkan bahwa terdapat pengaruh yang signifikan dimana kadar
glukosa mengalami penurunan pada serum dengan penundaan
pemeriksaan 2 jam.

5.2 Saran

Saran dari saya, untuk peneliti selanjutnya agar melakukan

penelitian perbandingan pemeriksaan glukosa darah metode GOD-PAP
menggunakan serum yang diperiksa secara langsung dengan serum
yang diperiksa dengan penundaan selama 2 jam dengan penyimpanan
didalam kulkas.
 24

DAFTAR PUSTAKA
Budiwiyono, Imam . 1995 . Prinsip Pemeriksaan Preparat Hapusan Darah
. Semarang

Cambridge Communication Limited . 1999 . Anatomy and Physiology . Alih

Bahasa Andy Santo Agustinus . Jakarta : EGC

Gandasoebrata, R . 2008 . Penuntun Laboratorium Klinik . Jakarta : Dian

Rakyat

Ganong, William F . 2002 . Buku Ajar Fisiologi Kedokteran . Alih Bahasa

dr.H.M Djauhari Widjajakusumah . Jakarta : EGC

Guyton, Athur C . 1995 . Text Book of Medical Physiology . Alih Bahasa

Adji Darma, Petruslukamo . Jakarta

Pearce, Evelyne C . 2002 . Anatomi dan Fisiologi Untuk Paramedis .

Jakarta : Gramedia

Sacher, R.A dan McPherson . 2004 . Tinjauan Klinis Atas Hasil

Pemeriksaan Laboratorium . Jakarta : EGC

Sloane, Ethel . 2004 . Pengantar Hematologi dan Imun-Hematologi .

Jakarta

Sodikin, Muhammad . 2002 . Biokima Darah . Jakarta : Widya Medika

Syaifuddin . 2001 . Fungsi Sistem Tubuh Manusia . Jakarta : Widya Medika

Widman, F.K . 1992 . Clinical Intepretation of Laboratory Test . Alih

Bahasa R. Gandasoebrata, dkk . Jakarta : EGC

Wirawan, Riadi dan Erwin Silman. 1996 . Pemeriksaan Hematologi

Sederhana . Jakarta