Penetapan Kadar Thiamin Dalam Sempel Tablet Vitamin B1 Secara Spektrofotometri Ultra Violet

Tujuan : Menetapkan kadar thiamin dalam sempel tablet vitamin B1 secara spektrofotometri sinar Ultra Violet

Thiamin merupakan senyawa organik yang banyak mengandung gugus fungsi yang mampu menyerap sumber radiasi pada daerah sinar ultra violet. Oleh
Prinsip : karena itu dalam keadaan murni atau tidak tercemar oleh bahan organik yang lain maka thiamin dapat dianalisis menggunakan spektrofotometer sinar ultra
violet tanpa perlu dilakukan teknik pemisahan terlebih dahulu.

Cara Kerja
1. Pembuatan larutan induk thiamin 250 mg/L
25mg Thiamin di timbang Masukkan ke labu takar Larutkan dengan HCl 1:60 tera dan
100 ml homogenkan

2. Pembuatan deret standar

ppm 0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0
ml 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0

Masukkan dalam labutakar 50ml di larutkan denan HCl1:60 tera dan homogenkan

3. Preparasi sempel tablet vitamin B1

Timbang 10 tablet VitB1 Timbang Larutkan dengan HCl 1:60 tera
Gerus Labu takar 100ml
(1-1). Rata rata 10mg dan homogenkan
 Pengamatan dan Perhitungan
a. Tabel Data Pengamatan Fisik Sampel dan Reagen
Nama Bahan Pengamatan Fisik
No. atau Reagen Warna Bau Wujud
Larutan Induk
1 Thiamin 500 Tidak Berwarna Tidak Berbau Cair
mg/L
Larutan Induk
2 Thiamin 100 Tidak Berwarna Tidak Berbau Cair
mg/L
Tablet Vitamin
3 Putih Bau Khas Obat Padat
B1
4 HCl 1:60 Tidak Berwarna Tidak Berbau Cair

b. Tabel Data Pembuatan Larutan Standar Induk Thiamin 250 mg/L

Perhitungan Konsentrasi Standar
Bobot Thiamin (mg) Volume Labu Takar (mL) Warna Larutan Induk Thiamin (mg/L)
25 100 Tidak Berwarna 25mg/0,1L = 250 mg/L

c. Data Pembuatan Deret Larutan Standar (Lampirkan Kurva Kalibrasi)

Volume Konsentrasi Standar Volume Labu Takar yang Konsentrasi Deret Standar
Nomor Induk Absorbansi
yang dipindahkan (mL) Dipergunakan yang Dibuat (mg/L)

1 0.0 50 0.0 -0.0010

2 1.0 50 5.0 0.2143
3 2.0 50 10.0 0.4189
4 3.0 50 15.0 0.6158
5 4.0 50 20.0 0.8166
6 5.0 50 25.0 1.0178
Slope 0.0406
Intersep 0.0067
Koefisien Korelasi 0.9998
 Kurva Deret Standar Thiamin
1.2
1.0
f(x) = 0.0405588571x + 0.006747619
0.8 R² = 0.9998104106
Column G
Absorbansi

0.6 Column H
Linear (Column H)
0.4
Column I
0.2
0.0
0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0
-0.2
Konsentrasi (mg/L)

d. Data preparasi sempel dan penentuan kadar Thiamin dalam tablet vitamin B1
Bobot Bobot Sempel Volume C terukur Absorbansi C Sempel C Sempel
rata-rata (g) Sempel (ml) (mg/L) (mg/Kg) (mg/Tablet)
(mg)
0.0099 100 12.2 0.5027 123232.323 25.00383838
0.2029 0.0101 100 11.9 0.4874 117821.782 23.9060396
0.0099 100 12.1 0.4959 122222.222 24.79888889

e. Gambarkan fish bone sumber ketidak pastian thiamin dalam tablet vitamin B1
 μLabu takar
f. μreg Data Ketidakpastian Asal Kurva Kalibrasi
μkalibrasi
Deret μtemperatur
Standar Xi (mg/L) Yi (abs) Yc (abs) Yi-Yc (Yi-Yc)2 Xi-Xr (Xi-Xr)2 Kadar
Thiamin
1 0.0 -0.0010 0.0067 -0.0077 0.0000600 -12.5 156.2500 (mg/tablet)
μkalibrasi
2 5.0 0.2143 0.2095 0.0048 0.0000226 -7.5 56.2500
3 10.0 0.4189 0.4123 0.0066 0.0000431 -2.5 6.2500
μpm μmassa
4 15.0 0.6158 0.6151 0.0007 0.0000004 2.5 6.2500
5 20.0 0.8166 0.8179 -0.0013 0.0000018 7.5 56.2500
6 25.0 1.0178 1.0207 -0.0029 0.0000085 12.5 156.2500
∑ 75.0 3.0824 3.0824 0.0000 0.0001 0.0000 437.5000
Rata-Rata 12.5 0.5137 0.5137 0.0000 0.0000 0.0000 72.9167
Yo 0.4953
Slope (b) 0.0406
Intersep 0.0067
RSD= √∑(Yi-Yc)² / (n-2) 0.0058
(Yo-Yr)2 0.0003
1 + 1/n 1.1667
b²∑(Xi-Xr)² 0.7212
1 + 1/n + (Yo-Yr) ²/ b²∑(Xi-Xr)² 1.6182
√ 1 + 1/n + (Yo-Yr)² / b²∑(Xi-Xr)² 1.2721
Sx atau µreg 0.1830

g. Data Ketidakpastian Asal Faktor Presisi Metode

C Thiamin Terukur Kadar Thiamin dalam
Ulangan Abs Larutan Uji (mg/L) Sampel (mg/Kg) Keterangan

1 0.5027 12.2 123232.32

2 0.4874 11.9 117821.78
3 0.4959 12.1 122222.22
Syarat keberterimaan
PM adalah %RSD <5%
 Syarat keberterimaan
Rata-Rata 0.4953 12.0667 121092.1090 PM adalah %RSD <5%
µPM atau SD 2348.9508
RSD 0.0194
%RSD 1.94
h. Data Ketidakpastian Asal Faktor Labu Takar (Labu takar )
Labu Takar μ Volume Labu Takar
(mL)
Ketidakpa Variasi Suhu μ (Efek T)
stian Asal Koef. Muai Air (C-1) Vol. (mL) k
(0C) (mL)
Temperat
ur
0.00021 100 8 1.7321 0.096994845
Ketidakpa 0.1129
stian Asal
Spesifikas Data kal. pabrik (mL) k μ kal (mL)
i
(Kalibrasi)
Pabrik 0.10 1.7321 0.0577

i. Data Ketidakpastian Asal Faktor Penimbangan (Neraca)

Neraca μ Volume Labu Takar
(mL)
Ketidakpa
stian Asal
Spesifikas Data kal. pabrik (mL) k μ kal (mL)
0.0002828427
i
(Kalibrasi)
Pabrik 0.0004 2 0.0002

j. Kuantifikasi Ketidakpastian Gabungan Penetapan Thiamin dalam Tablet Vitamin

Sumber
Ketidakpa Nilai (Xi) Satuan µXi (µXi/Nilai (Xi)) (µXi/Nilai (Xi))²
stian
Kurva
Kalibrasi 12.07 mg/L 1.2721 0.1054226727 0.0111139399
PM
Labu 121092.11 mg/Kg 2348.9508 0.0193980504 0.0003762844
Takar 100 ml 0.1128775 0.0011287751 1.27413333333333E-06
Massa 0.0100 g 0.0002828 0.0282842712 0.0008
Σ 0.0122914984
 Nilai Ketidakpastian Gabungan µCSx 13425.12
Nilai Ketidakpastian Gabungan Diperluas (U) yaitu 2µCSx 26850.2450475196
Pelaporan (27.04 ± 4.08)
ar ultra violet. Oleh
otometer sinar ultra
PENGAMATAN DAN PERHITUNGAN

A.Tabel Data Pengamatan Fisik Sampel dan Reagen

Pengamatan Fisik
No. Bahan / Reagen
Warna Bau Wujud

Lar.Induk Thiamin Tidak Berwarna

1 Tidak berbau Cair
250 mg/L

Sampel Tablet
2 Tidak Berwarna Tidak Berbau Padatan
Vit.B1
3 Lar. HCl 1:60 Tidak Berwarna Tidak Berbau Cair

B. Tabel Data Pembuatan Larutan Standar Induk Thiamin

Volume Labu Warna Larutan Perhitungan Konsentrasi Std.Induk Thia
Bobot Thiamin (mg) Takar (mL) (mg/L)
mg/ L = mg Thiamin * VLT
25 100 Tidak Berwarna = 25 mg * 0.1 L
= 250 mg/L

C. Data Pembuatan Deret Larutan Standar

Volume Std Induk Volume Labu Konsentrasi
No. Absorbansi
(mL) Takar Deret (mg/L)
1 0.00 50.00 0.00 0.0138
2 1.00 50.00 5.00 0.2168
3 2.00 50.00 10.00 0.4078
4 3.00 50.00 15.00 0.5755
5 4.00 50.00 20.00 0.8203
6 5.00 50.00 25.00 1.0146
slope 0.0399
intersept 0.0094
r 0.9990
yr 0.5081
xr 12.5

D. Data Preparasi Sampel dan Penentuan Kadar Thiamin dalam Tablet Vitamin B1
Bobot Sampel Volume Sampel C Terukur
Bobot tiap tablet (mg) Absorbansi
(mg) (mL) (mg/L)
10 100 0.5130 12.6220
10 100 0.5063 12.4540
201.1 9.9 100 0.4987 12.2636
10 100 0.4945 12.1583
10.1 100 0.4816 11.8350
yo 0.4988

E. Fish Bone Sumber Ketidakpastian Pengukuran Thiamin

μ LT μreg

μkal μef.T
 μkal

μPM μm

F. Data Ketidakpastian Asal Kurva Kalibrasi

Deret standar Xi (mg/L) Yi (abs) Yc (abs) (Yi-yc)2
1 0 0.0138 0.0094 1.93181E-05
2 5 0.2168 0.2089 6.24702E-05
3 10 0.4078 0.4084 3.45296E-07
4 15 0.5755 0.6079 0.001048403
5 20 0.8203 0.8074 0.000167173
6 25 1.0146 1.0069 5.98781E-05
Jumlah 0.001357587

RSD 0.0184
RSD/b 0.4617
1+(1/n) 1.1667
b^2 0.0016
yo 0.4988
yr 0.5081
(yo-yr)^2 8.67381778E-05
√1+(1/n)+(yo-yr)2/(b2*Ʃ(xi-xr)2) 1.080181101
μreg 0.4987652478

Kurva Regresi Konsentrasi

Deret (mg/L)
1.2
1 0.00
f(x) = 0.0398982857x + 0.0094047619 5.00
0.8 R² = 0.9980544813
absorbansi

10.00
0.6
15.00
0.4
20.00
0.2
25.00
0
0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00

Konsentrasi (mg/L)

Xi (mg/L)
0
5
10
15
20
25
G. Data Ketidakpastian Asal Faktor Presisi Metode
Ulangan absorbansi C Thiamin terukur Kadar Thiamin keterangan
(mg/L) (mg/kg)
1 0.5130 20.2 126219.768363
2 0.5063 19.9 124540.498219
3 0.4987 21.2 123874.398458
4 0.4945 19.8 121582.977667
5 0.4816 20.9 117177.976283 %RSD < 5%
Yo Csxo CSx
0.49882 20.4 122679.123798
μpm atau SD 3496.20224332
%RSD 2.85

H. Data Ketidakpastian Asal Labu Takar

Labu Takar

Koef. Muai Air (C-

Ketidakpastian Asal Volume (L) k
1)
Temperatur Variasi Suhu (°C)
0.00021 100 11 1.73

Ketidakpastian Asal Data Kal. Spek Pabrik (L) k

Spesifikasi
(Kalibrasi) Pabrik 0.10 1.73

I. Data Ketidakpastian Asal Faktor Neraca

Ketidakpastian Asal Data Kal. Spek Pabrik (kg) k
Spesifikasi
(Kalibrasi) Pabrik 0.0004 2

J. Kaualifikasi Ketidakpastian Gabungan Penetapan Thiamin Dalam Tablet Vitamin

 Xi 
Sumber Ketidakpastian Nilai (Xi) Satauan μ Xi 
 Nilai ( Xi ) 

 

Kurva Kalibrasi 20.4 mg/L 0.4987652478 0.02449277

Presisi Metode 122679.1237983 mg/L 3496.20224332 0.028498755

Labu Takar 0.1 L 0.0001453556 1.453555673

Neraca 0.00001 kg 2.82842712E-07 0.028284271

Ʃ
Nilai Ketidakpastian gabungan μ CSx
Nilai Ketidakpastian gabungan diperluas (U) yaitu 2 μ CSx
Pelaporan Csx ± U
Kesimpulan :
1. Nilai Koefisien Korelasi (r) pada penetapan kadar Thiamin dalam Tablet vitamin B1 adalah 0.9990. Artinya memenuhi sya
2. %RSD diperoleh sebesar 2.85%. Artinya memenuhi syarat keberterimaan (%RSD < 5%)
3. kandungan Thiamin dalam tablet vitamin B1 adalah 24.48 mg/tablet nilai tersebut mendekati e-tiket 25mg/tablet
4. Pelaporan Konsentrasi analit dan estimasi ketidakpastian gabungan yang diperluas pada penetapan kadar Thiamin pada

TES FORMATIF
1. Mengapa perlu dihitung nilai ketidakpastian pengukuran?

Jawaban : Untuk memastikan dan mengukur kesalahan pada pengukuran, sehingga data hasil pengukuran lebih valid untuk diinformasi
atau dipublikasikan. Selain itu juga untuk mengurangi tingkat kesalahan dalam analisa.

2. Mengapa pengukuran thiamin harus dilakukan pada panjang gelombang maksimum?

Jawaban : Karena dengan menggunakan panjang gelombang tertinggi, dapat diketahui kemampuan panjang gelombang yang dapat dis
oleh sampel thiamin. Sehingga akan diperoleh kepekaan analisis yang maksimal.

3. Apa gunanya pencarian panjang gelombang maksimum?

Jawaban : Agar dapat mengetahui kemampuan maksimum penyerapan yang mampu dilakukan oleh sampel, sehingga hasil analisa yang
diperoleh lebih tepat dan akurat.

4. Mengapa senyawaan thiamin tidak berwarna?

Jawaban : Karena pada percobaan ini senyawa thiamin tidak diberikan zat pembangkit warna dari pada pengukuran digunakan panjang
erhitungan Konsentrasi Std.Induk Thiamin
(mg/L)
g/ L = mg Thiamin * VLT
= 25 mg * 0.1 L
= 250 mg/L

C sampel C sampel
(mg/kg) (mg/tablet)
126219.77 25.38
124540.50 25.05
123874.40 23.71
121582.98 24.45
117177.98 23.80
rata-rata 24.48

Kadar Thiamin (mg/kg)

 Kadar Thiamin (mg/kg)

Xi-Xr (Xi-Xr)2
-12.5 156.25
-7.5 56.25
-2.5 6.25
2.5 6.25
7.5 56.25
12.5 156.25
0 437.5

Absorbansi

0.0138
0.2168
0.4078
0.5755
0.8203
1.0146

KURVA KALIBRASI
1.2000
Yc (abs) 1.0000
0.0138 f(x) = 0.1994914286x - 0.1900866667
0.8000 R² = 0.9980544813
0.2168
ABSORBAN

Absorbansi Deret Standar

0.4078 0.6000 Linear (Absorbansi Deret
0.5755 Standar)
0.8203 0.4000
1.1460 0.2000

0.0000
KONSENTRASI
 Standar)

AB
0.4000

0.2000

0.0000
KONSENTRASI

μ Volume
μ (Efek T) (L) Labu takar (L)

0.1334
0.145355
μ kal (L)

0.0578

μ Massa
μ kal (kg) Neraca (kg)
0.0002 2.828427E-07

Xi   Xi 
2

 
 Nilai ( Xi ) 
Nilai ( Xi ) 
 



0.000597767

0.000812179

2.11282409E-06

0.000824094

2.115021392
178413.6375
356827.2749
(12.27 ± 1.40)%
1 adalah 0.9990. Artinya memenuhi syarat keberterimaan (r > 0.995)

ut mendekati e-tiket 25mg/tablet

s pada penetapan kadar Thiamin pada Vitamin B1 adalah (12.27 ± 1.40)%

il pengukuran lebih valid untuk diinformasikan

mpuan panjang gelombang yang dapat diserap

an oleh sampel, sehingga hasil analisa yang

a dari pada pengukuran digunakan panjang gelombang UV (245 nm)

nsi Deret Standar
bsorbansi Deret
 LAPORAN PRAKTIKUM ANALISIS SPEKTROFOTOMETRI

Nama : Elsya Wendi

NIM : 1717835
Kelas/kelompok : 2A/5
Tanggal : 20 November 2017

Judul : Penetapan Kadar Thiamin Dalam Sampel Tablet Vitamin B1 Secara Spektrofotometri
Sinar Ultra Violet

Tujuan : Menetapkan kadar thiamin dalam sampel tablet vitamin B1 secara spektrofotometri
sinar ultra violet

Prinsip :

Thiamin merupakan senyawa organik yang banyak mengandung gugus fungsi

yang mampu menyerap sumber radiasi pada daerah sinar ultraviolet. Oleh karena itu
dalam keadaan murni atau tidak tercemar oleh bahan organik yang lain maka thiamin
dapat dianalisis menggunakan spektrofotometer sinar ultra violet tanpa perlu
dilakukan teknik pemisahan terlebih dahulu.

Cara Kerja :
1. Pembuatan Larutan Induk 250 mg/L

Timbang 250 Larutkan dengan HCl 1:60 ke dalam

mg Thiamin LT 100 mL hingga tanda tera Homogenkan
Larutkan de

2. Pembuatan Deret Standar

Larutan induk Thiamin 250 mg/L

0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 ppm

0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 mL

ke LT 50 mL & tera dengan

HCl 1:60

Homogenkan

3. Preparasi Sampel Tablet Vitamin B1

Timbang 10 mg Larutkan dengan HCl 1:60 ke

dalam LT 100 mL hingga tanda Lakukan 5x
tablet yang telah
tera pengulangan
di gerus
 Timbang 10 mg Larutkan dengan HCl 1:60 ke
dalam LT 100 mL hingga tanda Lakukan 5x
tablet yang telah
tera pengulangan
di gerus
 Lakukan 5x
pengulangan
 Lakukan 5x
pengulangan