Anda di halaman 1dari 78

Kelompok 8

• Elza okta Anggia (1201025)


• Debby Novrioza (1201012)
• Halinda Alizar (1201037)
• Desti wulandari (1201016)
• Lily Suryani (1201049)
• Iswan Permadi (1201045)
• Mocharani (1201062)

DOSEN : Dr. Meiriza Johari, M.kes Apt


System Endokrin & Hormon

Sistem endokrin adalah sistem kontrol kelenjar


tanpa saluran (ductless) yang menghasilkan
hormon yang tersirkulasi di tubuh
melalui aliran darah untuk
mempengaruhi organ-organ lain

Hormon adalah isyarat (petanda,


sinyal) kimiawi yang dikeluarkan ke
dalam sirkulasi dengan tujuan khusus
untuk mengkoordinasi dan mangatur
aktivitas sel sasaran

(McDilvery & Goldstein)


Sesuai Dengan Tempat Dan Proses Kerja
Hormon Dalam Sel
Hormon Dapat Dibagi Dalam 2 Kelompok Besar

Kelompok hormone yang mengawali kerja mereka


pada membrane plasma itu sendiri yaitu :
katekolamin, prostaglandin dan semua hormone
peptide seperti glucagon, insulin dan hormone 1
kelenjar hipofisis

Hormon yang mengawali kerja mereka di dalam


inti sel. Yang dapat masuk ke dalam sel melalui
pengikatan dengan reseptor penghantar khusus,
hormone ini hanya ada dlm sitoplasma, setelah 2
mencapai inti sel mempengaruhi proses dan
kecepatan eksresi gen.
yaitu : triiodotironin dan semua hormone steroid
Kelenjar endokrin
Menghasilkan

Hormon

Fungsi hormon

• Pertumbuhan & perkembangan


• Metabolisme
• (digestion, eliminasi, breathing, sirkulasi & menjaga suhu tubuh)
• Fungsi seksual
• Reproduksi
• Mood
Table 1.1 gambaran umum kelompok hormone (Robert K.murray.,et.al)

Kelompok 1 Kelompok 2
Tipe Steroid, iodotironon Polipeptida, protein,
, klasitriol, retinoad glikoprotein,
ketokolamin
Solubilitas Lipofilik Hidrofilik
Protei pengangkut Ada Tidak ada
Usia paruh plasma Panjang (berjam- Pendek(menit)
jam sampai berhari-
hari )
Reseptor Intraselular Membrane plasma
mediator Kompleks reseptor- cAMP, CGMP, ca2+,
hormon metabolit kompleks
fosfonositol,
rangkaian kinase.
1. Hormon yang terikat pada reseptor intraselular

Androgen
Kalsitriol
Estrogen
Glukokortikoid
Mineralokortikoid
Progestin
Asam retinoat
Hormone tiroid(t3 dan t4)
2. hormone yang terikat pada reseptor
permukaan
A . messenger kedua Glucagon C. Messenger kalsium Subtansi P
adalah cAMP atau fosfatidilinositol (atau
keduanya)

Katekolamin α2adrenergik Lipotroipin Astikolin Thyrotropin RH

Katekolamin beta- Luteinizing hormone Katekolamin α1 adrenergik D. Messenger kinase atau


adrenergik lintasan fosfat

Adrenokortikotropik Melanocyte SH Angiotensin II Chorionic


(ACTH) somatomammotropin
Angiotensin II Pratatiroid Antidiuretic (ADH, Epidermal growth factor
vasopresin)
Antidiuretic (ADH) Somatostatin Kolesistokinin Eritropoetin
Kalsitonin Thyroid SH Gastrin Fibrolast growth factor
Chorionic gonadotropin B.mesengger kedua Gonadotropin-RH GH
(hCG) cGMP:
Corticotropin RH Factor natriuetik atrial Oksitosin Insulin
(ANF)
Insulin like growth factor
(IGF I. IGF II)

Nerve growth factor


Platelet -derived
Follicle SH Nitrogen Oksida (NO) Plateletderived growth prolaktin
factor
Penyakit endokrin

PRODUKSI HORMON
YANG TINGGI ATAU RENDAH
Hormone Hipofisis Dan
Hipotalamus
1) Hormon pertumbuhan (GH) yang terikat
dengan protein

Hipofisis anterior mengeluarkan hormon


pertumbuhan manusia (hGH) dalam menanggapi latihan,
tidur nyenyak, hipoglikemia, dan konsumsi protein.
hGH merangsang faktor-1 insulin-like growth di hati dan
memobilisasi asam lemak dari deposito lemak ke hati.
• Hyposecretion dari hGH menyebabkan
dwarfisme pada anak-anak. Dewasa serum
• Hipersekresi menyebabkan gigantisme pada anak-anak
atau akromegali pada orang dewasa. Pria: 0,01-0,97 ng / mL
hGH stimulasi tes yang diperlukan untuk
mengevaluasi kondisi hGH kelebihan dan kekurangan Wanita: 0,01-3,61 ng / mL

Nilai rujukan:
0-1y <125-762
2-9y 267-1638
10-14y 431-1892
20-50y 686-2019
Metode : Immunoenzymatic Assay
Prinsip: Instrumen yang digunakan adalah Beckman Coulter UniCel DXI
800. Access ultrasensitif hormon pertumbuhan manusia (hGH) assay adalah
simultan satu langkah immunoenzymatic ("sandwich") assay. Sampel
ditambahkan ke bejana reaksi bersama dengan poliklonal anti-hGH alkali
fosfatase konjugasi (kambing) dan paramagnetik partikel dilapisi dengan
antibodi monoklonal tikus anti-hGH. hGH sampel pasien mengikat
monoklonal anti-hGH pada fase padat, sedangkan kambing anti-hGH-alkali
fosfatase konjugat bereaksi dengan situs antigenik yang berbeda pada sampel
pasien hGH. Setelah inkubasi dalam bejana reaksi, bahan terikat pada fase
padat diadakan dalam medan magnet sementara bahan terikat yang hanyut.
Kemudian, substrat chemiluminescent Lumi-phos 530 ditambahkan ke bejana
dan cahaya yang dihasilkan oleh reaksi diukur dengan luminometer. Produksi
cahaya berbanding lurus dengan konsentrasi hGH dalam sampel. Jumlah
analit dalam sampel ditentukan dari disimpan, multi-point kurva kalibrasi.
Prolactin (PRL; hormone laktogenik,
mamotropin, luteotropik)

Prolaktin adalah hormon utama yang mengontrol inisiasi dan pemeliharaan laktasi.
Pada orang normal, konsentrasi prolaktin meningkat dalam menanggapi rangsangan
fisiologis seperti tidur, stres, olahraga, hubungan seksual, dan hipoglikemia, dan juga
meningkat selama kehamilan, menyusui, pasca melahirkan, dan pada bayi baru lahir.
Hiperprolaktinemia adalah gangguan hipotalamus-hipofisis yang paling
umum ditemui dalam endokrinologi klinis. Penyebab patologis
hiperprolaktinemia termasuk prolaktin mensekresi adenoma hipofisis
(prolaktinoma, yang lebih sering pada wanita dibandingkan laki-laki, dan
menyumbang sekitar 40% dari semua tumor hipofisis), penyakit fungsional dan
organik dari hipotalamus, hipotiroidisme primer, kompresi tangkai hipofisis , lesi
dinding dada, insufisiensi ginjal, penyakit ovarium polikistik, dan tumor ektopik.
Metode : Electrochemiluminescent Immunoassay

Prinsip: Roche Cobas e immunoassay metode Prolaktin II dengan 2 antibodi


monoklonal spesifik ditujukan terhadap prolaktin. Sebuah antibodi monoklonal
terbiotinilasi dan antibodi monoklonal kedua diberi label dengan kompleks
ruthenium bereaksi dengan prolaktin dalam sampel untuk membentuk kompleks
Sandwich. Setelah penambahan mikropartikel dilapisi streptavidin, kompleks
menjadi terikat pada fase padat melalui interaksi biotin dan streptavidin. Penerapan
tegangan ke elektroda kemudian menginduksi emisi chemiluminescent, yang
diukur
Nilai Rujukan :
Males
<18 years: not established
> or =18 years: 4.0-15.2 ng/mL

Females:
<18 years: not established
> or =18 years: 4.8-23.3 ng/mL
Hormon adrenokortikotropik (ACTH)

Mengatur fungsi korteks adrenal analog sitetik ACTH1-24digunakan secara luas


untuk kepentingan diagnostic.
Hormon adrenokortikotropik (ACTH), stimulator utama produksi kortisol
adrenal, disintesis oleh hipofisis dalam menanggapi corticotropin-releasing
hormone (CRH), yang dikeluarkan oleh hipotalamus. Plasma ACTH dan
kortisol menunjukkan puncak (6-8 am) dan nadir (11:00).

Gangguan produksi kortisol:


Hypocortisolism
Hiperkortisolisme Insufisiensi adrenal -Addison penyakit
Sindrom -Cushing: primer
- Penyakit Cushing (ACTH hipofisis yang Insufisiensi adrenal -Secondary
menghasilkan tumor) Insufisiensi -Pituitary
- Ektopik ACTH-memproduksi tumor Insufisiensi -Hypothalamic
Congenital Adrenal hyperplasia-cacat pada
- Ektopik CRH
enzim yang terlibat dalam sintesis kortisol
- Adrenal kortisol yang menghasilkan tumor
- Hiperplasia adrenal (tergantung non-ACTH,
kortisol otonom memproduksi nodul adrenal)
Metode : Automated Chemiluminescent Immunometric Assay
Prinsip : The Immulite 2000 adrenokortikotropik hormon (ACTH) adalah fase
padat, immunoassay berurutan. Sampel pasien diinkubasi dengan manik-manik
dilapisi dengan monoklonal tikus antibodi terhadap ACTH. Kedua (kelinci)
antibodi untuk ACTH, yang telah konjugasi alkali fosfatase kemudian
ditambahkan. Sampel membentuk kompleks antibodi-sandwich yang melekat
manik-manik. Setelah mencuci, substrat ditambahkan. Substrat mengalami
hidrolisis dengan adanya alkali fosfatase untuk menghasilkan perantara yang
tidak stabil yang menghasilkan emisi berkelanjutan cahaya. Output foton
berbanding lurus dengan konsentrasi ACTH dalam sampel.
Nilai rujukan :
10-60 pg / mL (pagi )
Adrenocorticotrophic Hormone ACTH, IgE

Manifestasi clinical
hipersensitivitas segera (alergi)
penyakit yang disebabkan oleh
pelepasan mediator proinflamasi
(histamin, leukotrien, dan
prostaglandin) dari imunoglobulin
E (IgE) sel efektor -sensitized (sel
mast dan basofil) ketika antibodi
IgE sel-terikat berinteraksi dengan
alergen .
Metode : Fluorescence Enzyme Immunoassay (FEIA)
Prinsip: IgE spesifik dari serum pasien bereaksi dengan alergen yang menarik,
yang kovalen digabungkan ke ImmunoCAP. Setelah membasuh spesifik IgE,
enzim-label anti-IgE antibodi ditambahkan untuk membentuk kompleks.
Setelah inkubasi, terikat anti-IgE yang hanyut dan kompleks terikat kemudian
diinkubasi dengan agen berkembang. Setelah menghentikan reaksi, fluoresensi
dari eluat diukur. Fluoresensi sebanding dengan jumlah IgE spesifik hadir
dalam sampel pasien (yaitu, semakin tinggi nilai fluoresensi, semakin IgE
antibodi hadir)
Nilai Rujukan:
Class IgE kU/L Interpretation
0 <0.35 Negative
1 0.35-0.69 Equivocal
2 0.70-3.49 Positive
3 3.50-17.4 Positive
4 17.5-49.9 Strongly positive
5 50.0-99.9 Strongly positive
6 > or =100 Strongly positive
HORMONE YANG
MENGATUR METABOLISM
KALSIUM
parathyroid hormone (PTH)

penyimpangan dari kisaran nilai normal kalsium terionisasi akan menimbulkan


banyak gangguan dan bisa mencancam jiwa. Sebanyak 3%dari pasien-pasien yang
dirawat dirumah sakit menderita kelainan hemeostatis kalsium
Hormon paratiroid (PTH) yang diproduksi dan disekresikan oleh kelenjar paratiroid,
yang terletak di sepanjang aspek posterior kelenjar tiroid. Hormon ini disintesis
sebagai prekursor asam amino 115-(pre-pro-PTH), dibelah untuk pro-PTH dan
kemudian ke molekul asam amino 84-, PTH (penomoran, dengan konvensi
universal, mulai dari amino-terminal). Bentuk prekursor umumnya tetap dalam sel
paratiroid
Hipoparatiroidisme adalah yang paling sering sekunder untuk operasi tiroid, tetapi
juga dapat terjadi secara autoimun, atau karena mengaktifkan mutasi CASR. Gejala-
gejala hipoparatiroidisme terutama orang-orang dari hipokalsemia, dengan
kelemahan, tetani, dan kemungkinan atrofi saraf optik.

Metode : Electrochemiluminescence
Nilai rujukan : 15-65 pg/mL
hormone korteks
adrenal
kortikosteron serum

Kortikosteron adalah hormon steroid dan molekul prekursor untuk aldosteron. Hal ini
dihasilkan dari deoksikortikosteron, lanjut dikonversi ke kortikosteron 18-hidroksi
dan, akhirnya, untuk aldosteron di jalur mineralokortikoid. Kelenjar adrenal, ovarium,
testis, dan plasenta memproduksi hormon steroid, yang dapat dibagi menjadi 3
kelompok besar: corticoids mineral, glukokortikoid, dan steroid seks.

Utilitas diagnostik utama pengukuran sintesis intermediet steroid terletak pada


diagnosis gangguan sintesis steroid, khususnya hiperplasia adrenal kongenital
(CAH).

Semua jenis CAH berhubungan dengan defisiensi kortisol


Metode :liquid chromatography-
tandem mass spectrometry.
Nilai rujukan:
< or =18 years: 18-1,970 ng/dL
>18 years: 53-1,560 ng/dL
Aldosterone, 24 Hour, Urine

Aldosteron adalah
mineralokortikoid utama dan
diproduksi oleh korteks adrenal.
Sistem renin-angiotensin adalah
regulator utama dari sintesis
dan sekresi aldosteron.

Hiperaldosteronisme primer, yang mungkin disebabkan oleh aldosteron-mensekresi


adrenal adenoma / karsinoma atau hiperplasia adrenal korteks, ditandai dengan
hipertensi disertai dengan peningkatan kadar aldosteron, hipernatremia, hipokalemia
dan. Hiperaldosteronisme sekunder (misalnya, dalam menanggapi penyakit
renovaskular, deplesi garam, kalium pemuatan, gagal jantung dengan asites,
kehamilan, sindrom Bartter) ditandai dengan peningkatan kadar aldosteron dan
peningkatan aktivitas rennin plasma.
Metode:Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS

Prinsip: Sampel dibubuhi standar internal yang deuterated dan dihidrolisis


semalam dengan asam. Sampel kemudian dinetralisir dan diekstraksi oleh
ekstraksi fase padat (SPE). Ekstrak kering, dilarutkan, dan dianalisis dengan LC-
MS / MS (Taylor RL, Singh RJ:. Validasi kromatografi-tandem metode
spektrometri massa cair untuk analisis urin terkonjugasi metanephrine dan
normetanephrine untuk penyaringan pheochromocytoma.

Nilai rujukan:

0-30 days: 0.7-11.0 mcg/24 hours*

31 days-11 months: 0.7-22.0 mcg/24 hours*

> or =1 year: 2.0-20.0 mcg/24 hours


Aldoteron, Serum
Metode: Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS)
Prinsip : Aldosteron-d6 ditambahkan ke sampel serum / plasma sebagai standar
internal. Aldosteron dan aldosteron-d6 yang diambil dari spesimen menggunakan
kartrid Strata X. Eluat yang dikeringkan di bawah nitrogen, dilarutkan dengan
metanol 70/30 / H2O mengandung estriol dan dianalisis dengan kromatografi cair-
spektrometri massa tandem menggunakan pemantauan reaksi beberapa dalam
mode negatif (Redline VF, Taylor PJ, Dodds HM, Johnson AG:. Sebuah . metode
referensi untuk analisis aldosteron dalam darah oleh cair kinerja tinggi
kromatografi-atmosfer kimia tekanan ionisasi-tandem spektrometri
Nilai rujukan :
0-30 days: 17-154 ng/dL*
31 days-11 months: 6.5-86 ng/dL*
1-10 years:
< or =40 ng/dL (supine)*
< or =124 ng/dL (upright)*
> or =11 years: < or =21 ng/dL (a.m. peripheral vein specimen)
Angiotensin Converting Enzyme,
Serum
Angiotensin converting enzyme (ACE)
berpartisipasi dalam kaskade renin dalam
menanggapi hipovolemia. Tindakan peptidase
Yang di angiotensinogen dekapeptida saya
menghasilkan hidrolisis terminal histidyl leusin
dipeptida dan pembentukan octapeptide
angiotensin II, suatu vasokonstriktor kuat yang
meningkatkan tekanan darah.

Sumber utama ACE adalah endotelium paru-


paru. Kegiatan ACE meningkat pada
sarkoidosis, penyakit granulomatosa
sistemik yang biasanya mempengaruhi paru-
paru. Dalam sarkoidosis, ACE diduga
diproduksi oleh sel-sel epitel dan makrofag
granuloma.
Metode : Spectrophotometry (SP)
Prinsip: Metode untuk kuantitatif serum
angiotensin converting enzyme didasarkan pada
kuantisasi spektrofotometri dari N- (3- [2-furil]
acryloyl) -L-phenylalanyl glycyl glisin untuk
furylacy lol fenilalanin dan glycylglycine dengan
penurunan bersamaan di absorbansi pada 340
nm. (Maguire GA, Harga CP: Sebuah metode
pemantauan spektrofotometri terus menerus
untuk pengukuran enzim angiotensin-converting
dalam serum manusia.
Nilai rujukan:
> Atau = 18 tahun: 8-53 U / L

Interval referensi untuk pasien anak mungkin


sampai 50% lebih tinggi dari orang dewasa
Angiotensin I, plasma

Pembentukan Angiotensin I adalah dikontrol


oleh umpan balik negatif dari Angiotensin II
dan II pada Renin melepaskan dan dengan
konsentrasi aldosteron. Tingkat Angiotensin I
adalah meningkat dalam berbagai jenis
hipertensi. Tingkat angiotensin I yang
digunakanuntuk menentukan aktivitas Renin.
Angiotensin I diekskresikan langsung ke urin.
Metode: Direct Radioimmunoassay (RIA)
Nilai rujukan: Up to 25 pg/mL
Angiotensin II

Tingkat Angiotensin II adalah meningkat


dalam berbagai jenis hipertensi. Angiotensin II
merangsang pelepasan Anti-diuretik hormon,
ACTH, prolaktin, Luteinizing Hormon,
Oksitosin dan aldosteron. Angiotensin II
meningkat vasokonstriksi dan menghambat
resorpsi tubular natrium, dan dapat
meningkatkan pertumbuhan sel endotel.
Metode: Direct Radioimmunoassay (RIA)
Nilai rujukan: 10-60 pg/mL
HORMONE MEDULLA
ADRENAL
meskipun tidak begitu penting dalam
keidupan, hormone pada system
simpatoadrenal tetap diperlukan untuk
adaptasi terhadap stress yang akut dan
kronis. Epinefrin,noreepinefrin dan
dopamine merupakan unsur utama dalam
pembentukan respon terhadap stress berat
tetapi juga dibantu oleh hormone
glukokortikoid, gh, vasopressin,
angiotensin II dan glucagon
hormone gonad
testosteron serum

Testosteron adalah hormon androgenik utama. Hal ini bertanggung


jawab untuk pengembangan alat kelamin eksternal pria dan karakteristik
seksual sekunder. Pada wanita, peran utamanya adalah sebagai prekursor
estrogen. Dalam kedua jenis kelamin, juga diberikannya efek anabolik dan
perilaku pengaruh.
hasil produksi testosteron berlebih di berbagai
tingkat virilisasi, termasuk hirsutisme, jerawat,
oligo-amenore, atau infertilitas. Ringan sampai
sedang ketinggian testosteron biasanya tanpa
gejala pada laki-laki, tetapi dapat menyebabkan
gejala menyedihkan pada wanita.

Penurunan testosteron pada wanita menyebabkan


gejala halus. Ini mungkin termasuk beberapa
penurunan libido dan perubahan mood spesifik.
Pada laki-laki, itu menghasilkan derajat sebagian
atau lengkap dari hipogonadisme. Ini ditandai
dengan perubahan karakteristik seksual laki-laki
sekunder dan fungsi reproduksi. Penyebabnya
adalah baik primer atau sekunder / tersier (hipofisis
/ hipotalamus) kegagalan testis
Metode : FRTST: Equilibrium Dialysis
TTST: Liquid Chromatography-
Tandem Mass Spectrometry (LC-
MS/MS)

Prinsip: Testosteron bebas


Metode ini menggunakan pelacak radioaktif bersama dengan keseimbangan
dialisis untuk menganalisis dan menentukan kapasitas host serum mengikat
testosteron. Selama dialisis Buffered, setiap testosteron yang terikat untuk
hormon seks pengikat globulin (SHBG) atau albumin bebas untuk melewati
dialisis tabung semipermeabel, sedangkan molekul testosteron terikat pada
protein yang mengikat akan diadakan di dalam pipa. Setelah dialisis,
radioaktivitas diukur dari sampel buffer dialisat; jumlah yang dihasilkan
dibandingkan dengan nilai-nilai yang dikenal untuk menghasilkan hasil yang
dinyatakan sebagai persentase dari total testosteron. Untuk menghasilkan
sebuah testosteron bebas mutlak, persentase dihitung dikalikan dengan
konsentrasi testosteron jumlah yang ditentukan oleh cairan kromatografi-
tandem mass spectrometry (LC-MS / MS).
Total Testosteron:
Deuterated isotop stabil (d3-testosteron) ditambahkan ke
sampel serum 0,2 mL sebagai standar internal. Protein
diendapkan dari campuran dengan penambahan asetonitril.
Testosteron dan standar internal diambil dari supernatan
yang dihasilkan oleh ekstraksi secara online menggunakan
kromatografi cair tinggi-throughput (HTLC). Ini diikuti
dengan kromatografi cair konvensional dan analisis pada
spektrometer massa tandem dilengkapi dengan sumber ion
nebulizer dipanaskan (Wang C, Catlin DH, Demers LM, et
al. Pengukuran total testosteron pada pria dewasa:
perbandingan metode laboratorium saat ini versus cair
kromatografi-spektrometri massa tandem J Clin Endocrinol
Metab 2004; 89:. 534-543; Taieb J, Mathian B, Millot F, et
al: Testosteron diukur dengan 10 immunoassay dan dengan
isotop-dilusi gas kromatografi-mass spectrometry di sera
dari 116 laki-laki , wanita, dan anak-anak Clin Chem 2003;
49:. 1381-1395)
NILAI RUJUKAN
 Testosteron, bebas

Pria: 9-30 ng / dL
Wanita: 0,3-1,9 ng / dL
Nilai referensi tidak didirikan untuk mata pelajaran <16 tahun.

 Testosteron, TOTAL

Pria
0-5 bulan: 75-400 ng / dL
6 bulan-9 tahun: <7-20 ng / dL
10-11 tahun: <7-130 ng / dL
12-13 tahun: <7-800 ng / dL
14 tahun: <7-1,200 ng / dL
15-16 tahun: 100-1,200 ng / dL
17-18 tahun: 300-1,200 ng / dL
> Atau = 19 tahun: 240-950 ng / dL
Wanita

0-5 bulan: 20-80 ng / dL


6 bulan-9 tahun: <7-20 ng / dL
10-11 tahun: <7-44 ng / dL
12-16 tahun: <7-75 ng / dL
17-18 tahun: 20-75 ng / dL
> Atau = 19 tahun: 8-60 ng / dL
Estrogens, Estrone (E1) and Estradiol (E2), Fractionated, Serum
Pengukuran serum E2 merupakan bagian integral dari
penilaian fungsi reproduksi pada wanita, termasuk
penilaian infertilitas, oligo-amenore, dan status
menopause. Selain itu, banyak digunakan untuk
memantau induksi ovulasi, serta selama persiapan untuk
fertilisasi in vitro. Untuk pengukuran ini aplikasi E2
dengan sederhana sensitif tes cukup. Namun, tes E2
sensitif ekstra, pengukuran simultan E1, atau keduanya
dibutuhkan dalam sejumlah situasi klinis lainnya. Ini
termasuk kesalahan metabolisme bawaan steroid seks,
gangguan pubertas, defisiensi estrogen pada pria,
penilaian risiko patah tulang pada wanita menopause,
dan semakin, pemantauan obat terapeutik, baik dalam
konteks dosis rendah terapi penggantian hormon wanita
atau pengobatan antiestrogen.
Metode: Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS)

Prinsip : Estrogen difraksinasi menjadi estradiol dan estron dengan


spektrometri massa kromatografi cair-tandem metode (LC-MS / MS). Metode
LC-MS / MS mempekerjakan ekstraksi organik untuk menghilangkan konjugat
yang larut dalam air dan untuk memungkinkan konsentrasi spesimen. Metode
ini bebas dari gangguan dan merupakan metodologi referensi.

17 beta-estradiol dan estron yang diambil dari 0,5 ml serum dengan organik
metilen klorida pelarut. Deuterated 17 beta-estradiol-d5 dan estron-d4
ditambahkan ke setiap spesimen sebelum ekstraksi cair dan melayani standar
sebagai internal. Setelah derivatisasi dengan dansil klorida, HPLC digunakan
sebelum pengenalan ekstrak sampel diderivatisasi ke MS / MS. (1) kalibrasi ini
menggunakan kurva standar 8 poin atas berbagai konsentrasi 0-600 pg / mL
(Anari MR. , Bakhtiar R, Zhu B, et al: derivatisasi dari ethynylestradiol dengan
dansil klorida untuk meningkatkan ionisasi electrospray.
Nilia rujukan: 1-14 hari: estrone pada bayi baru lahir sangat tinggi pada saat lahir,
tetapi akan jatuh ke tingkat sebelum pubertas dalam beberapa hari.
Tanner Stages# Mean Age Reference Range
Stage I (>14 days and prepubertal) 7.1 years Undetectable-16 pg/mL
Stage II 11.5 years Undetectable-22 pg/mL
Stage III 13.6 years 10-25 pg/mL
Stage IV 15.1 years 10-46 pg/mL
Stage V 18 years 10-60 pg/mL

Tanner Stages# Mean Age Reference Range


Stage I (>14 days and prepubertal) 7.1 years Undetectable-29 pg/mL
Stage II 10.5 years 10-33 pg/mL
Stage III 11.6 years 15-43 pg/mL
Stage IV 12.3 years 16-77 pg/mL
Stage V 14.5 years 17-200 pg/mL

Dewasa
Males: 10-60 pg/mL
Females
Premenopausal: 17-200 pg/mL
Postmenopausal: 7-40 pg/mL
Tanner Stages# Mean Age Reference Range
Stage I (>14 days and prepubertal) 7.1 years Undetectable-13 pg/mL
Stage II 12.1 years Undetectable-16 pg/mL
Stage III 13.6 years Undetectable-26 pg/mL
Stage IV 15.1 years Undetectable-38 pg/mL
Stage V 18 years 10-40 pg/mL

anner Stages# Mean Age Reference Range


Stage I (>14 days and prepubertal) 7.1 years Undetectable-20 pg/mL
Stage II 10.5 years Undetectable-24 pg/mL
Stage III 11.6 years Undetectable-60 pg/mL
Stage IV 12.3 years 15-85 pg/mL
Stage V 14.5 years 15-350 pg/mL**

Dewasa
Males: 10-40 pg/mL
Females
Premenopausal: 15-350 pg/mL**
Postmenopausal: <10 pg/mL
Progesterone serum

Setelah ovulasi, ada kenaikan yang


signifikan pada tingkat serum
sebagai korpus luteum mulai
memproduksi progesteron dalam
jumlah yang meningkat.
Metode: Electrochemiluminescence Immunoassay

 Prinsip : Pengujian dilakukan pada Roche Cobas. Uji Roche Progesteron II


adalah uji kompetitif menggunakan deteksi electrochemiluminescence. Pasien
spesimen, terbiotinilasi antibodi monoklonal-progesteron tertentu, dan turunan
progesteron label dengan ruthenium kompleks diinkubasi dengan Danazol
untuk melepaskan progesteron. Progesteron dari sampel bersaing dengan
progesteron turunan diberi label untuk situs pengikatan antibodi. Setelah
penambahan mikropartikel dilapisi streptavidin, kompleks menjadi terikat pada
fase padat melalui interaksi biotin dan streptavidin. Jumlah progesteron
derivatif berlabel terikat pada fase padat berbanding terbalik dengan isi
progesteron sampel. Campuran reaksi ini disedot ke dalam sel berukuran mana
mikropartikel terikat ditangkap ke permukaan elektroda dan zat terikat dihapus.
Tegangan diterapkan ke elektroda menginduksi emisi chemiluminescent, yang
kemudian diukur terhadap kurva kalibrasi untuk menentukan jumlah
progesteron dalam spesimen pasien.

pria

Cord darah: 569-1,107 ng / mL *


0-23 bulan: 0,87-3,37 ng / mL *
 2-9 tahun: <0,15 ng / mL *
10-17 tahun: tingkat dewasa dicapai oleh pubertas *.

 wanita

Cord darah: 569-1,107 ng / mL *


0-23 bulan: 0,87-3,37 ng / mL *
2-9 tahun: 0,20-0,24 ng / mL *
10-17 tahun: nilai-nilai meningkat melalui masa pubertas dan remaja *.

> Atau = 18 tahun: 0,20-1,40 ng / mL

 premenopause

Fase folikular: 0,20-1,50 ng / mL


Fase ovulasi: 0,80-3,00 ng / mL
Fase luteal: 1,70-27,00 ng / mL
Postmenopause: <0,15-0,80 ng / mL

 Urin:

Metode: RIA

Nilai rujukan:
dewasa Males: up to 0.5 ug/24 hours
dewasa Females: up to 2.8 ug/24 hours
hormone pancreas dan traktus gastrointestinal
Insulin adalah hormon yang diproduksi oleh sel-sel
beta pankreas. Ini mengatur penyerapan dan
pemanfaatan glukosa dan juga terlibat dalam sintesis
protein dan penyimpanan trigliserida.

 Diabetes tipe 1 (insulin-dependent diabetes)


disebabkan oleh kekurangan insulin akibat kerusakan
islet pankreas (beta) sel yang memproduksi insulin.
 Diabetes tipe 2 (non insulin dependent diabetes)
ditandai dengan resistensi terhadap aksi insulin
(resistensi insulin).
Kadar insulin dapat meningkat pada pasien dengan
tumor sel beta pankreas (insulinoma).
Metode: Electrochemiluminescence Immunoassay
Prinsip: Metode insulin Roche Cobas adalah sandwich
electrochemiluminescence immunoassay yang menggunakan
antibodi monoklonal insulin-spesifik terbiotinilasi dan antibodi
insulin-spesifik monoklonal. Insulin dalam spesimen bereaksi
dengan baik terbiotinilasi monoklonal insulin-spesifik antibodi
(mouse) dan insulin-spesifik antibodi monoklonal (mouse)
berlabel dengan kompleks ruthenium, membentuk kompleks
Sandwich. Mikropartikel dilapisi streptavidin ditambahkan dan
campuran disedot ke dalam sel pengukuran mana mikropartikel
yang magnetis ditangkap ke permukaan elektroda. Zat terikat
kemudian dihapus dengan ProCell. Penerapan tegangan ke
elektroda menginduksi emisi chemiluminescent, yang kemudian
diukur (Paket insert: Roche Insulin reagen, Roche Diagnostic
Corp, Indianapolis, IN 2010-10, V1).
Nilai rujukan: 2.6-24.9 mcIU/mL
Prinsip: Metode insulin Roche Cobas adalah sandwich
electrochemiluminescence immunoassay yang menggunakan
antibodi monoklonal insulin-spesifik terbiotinilasi dan antibodi
insulin-spesifik monoklonal. Insulin dalam spesimen bereaksi
dengan baik terbiotinilasi monoklonal insulin-spesifik antibodi
(mouse) dan insulin-spesifik antibodi monoklonal (mouse)
berlabel dengan kompleks ruthenium, membentuk kompleks
Sandwich. Mikropartikel dilapisi streptavidin ditambahkan dan
campuran disedot ke dalam sel pengukuran mana mikropartikel
yang magnetis ditangkap ke permukaan elektroda. Zat terikat
kemudian dihapus dengan ProCell. Penerapan tegangan ke
elektroda menginduksi emisi chemiluminescent, yang kemudian
diukur (Paket insert: Roche Insulin reagen, Roche Diagnostic
Corp, Indianapolis, IN 2010-10, V1).
Nilai rujukan: 2.6-24.9 mcIU/mL
hormone tiroid
1) T4 TOTAL ADAN FREE

TSH merangsang tiroid untuk mensekresi T4.


T4 sebagian dikonversi perifer terlalu
triiodothyronine (T3). Jumlah tinggi T4 dan
T3 (sebagian besar dari konversi perifer
T4) menyebabkan hipertiroidisme

Tiroksin bebas terdiri dari sebagian kecil


dari jumlah tiroksin. T4 bebas (FT4)
tersedia untuk jaringan dan, karena itu,
fraksi aktif secara metabolik.
Ketinggian di FT4 menyebabkan
hipertiroidisme, sementara penurunan
menyebabkan hipotiroidisme
metode : Electrochemiluminescence
Immunoassay

Nilai rujukan :
T4 (THYROXINE), TOTAL ONLY
Adult (> or =20 years): 4.5-11.7 mcg/dL
Pediatric:
0-5 days: 5.0-18.5 mcg/dL
6 days-2 months: 5.4-17.0 mcg/dL
3 -11 months: 5.7-16.0 mcg/dL
1 -5 years: 6.0-14.7 mcg/dL
6 -10 years: 6.0-13.8 mcg/dL
11 -19 years: 5.9-13.2 mcg/dL

T4 (THYROXINE), FREE
Adult (> or =20 years of age): 0.9-1.7 ng/dL
0-5 days: 0.9-2.5 ng/dL
6 days-2 months: 0.9-2.2 ng/dL
3-11 months: 0.9-2.0 ng/dL
1-5 years: 1.0-1.8 ng/dL
6-10 years: 1.0-1.7 ng/dL
11-19 years: 1.0-1.6 ng/dL
T3 tidak terikat (bebas)

Biasanya triiodothyronine (T3) beredar erat terikat tiroksin-binding


globulin dan albumin. Hanya 0,3% dari total T3 tidak terikat (bebas); fraksi
bebas adalah bentuk aktif

diperlukan untuk
mengevaluasi secara klinis
pasien eutiroid yang memiliki
distribusi yang berubah
protein yang mengikat
(misalnya, kehamilan,
dysalbuminemia).
Metode: Immunoenzymatic Assay

Prinsip: Rinsip Instrumen yang digunakan adalah DXi Beckman Coulter


800. Akses Gratis triiodothyronine (T3) assay adalah tes immuno enzymatic
kompetitif mengikat. Sampel ditambahkan ke bejana reaksi dengan anti-T3
antibodi monoklonal terkonjugasi untuk alkaline phosphatase. Selama
inkubasi, T3 bebas dalam sampel bereaksi dengan antibodi anti-T3. Partikel
dilapisi dengan streptavidin dan terbiotinilasi T3 analog kemudian
ditambahkan ke campuran. Situs mengikat kosong pada antibodi anti-T3
yang dijembatani ke partikel melalui analog T3. Setelah inkubasi dalam
bejana reaksi, bahan terikat pada fase padat diadakan dalam medan magnet,
sedangkan bahan terikat yang hanyut. Substrat chemiluminescent Lumi-
phos 530 ditambahkan ke kapal dan cahaya yang dihasilkan oleh reaksi
diukur dengan luminometer a. Produksi cahaya berbanding terbalik dengan
konsentrasi T3 bebas dalam sampel. Jumlah analit dalam sampel ditentukan
dari disimpan, kurva kalibrasi multipoint (Instruksi Panduan: Beckman
Coulter Assay 2007).

Nilai rujukan : > or =1 year: 2.0-3.5 pg/Ml


Tabel 1. Contoh-contoh manifestasi penyakit endokrin. (Manifestasi
tidak selalu terjadi pada semua kasus, dan keparahan dapat sangat berbeda).
METODE ANALISIS
HORMON DALAM PLASMA

Tahap Pra
Analitik
Pengukuran Tahap Analitik
kadar Pengukuran
Hormon Kadar Hormon
TAHAP PRA ANALITIK

1
persiapan pasien

2
Pengambilan Sampel

Pengiriman Sampel Ke Laboratorium 3


Pemeriksaanambilan Sampel

Proses Pemisahan Serum Atau 4


Plasma

Penyimpanan Sampel 5
Hal yang harus diperhatikan

apakah puasa atau tidak, makanan


dan minuman tertentu, merokok,
alkohol, obat-obatan tertentu, juga
kerja fisik atau olahraga

Pada penpegambilan sampel


diperhatikan posisi badan pasien,
jenis antikoagulan, apakah perlu
perlakuan khusus seperti pendingin.
Perubahan posisi badan dari tegak
ke berbaring

pengumpulan darah sampai


transportasinya ke laboratorium baik
dengan kurir atau dengan sistem
angkutan dijaga agar darah jangan
sampai mengalami hemolysis.

Pemisahan serum atau plasma


sebaiknya dilakukan sebelum 2 jam
dari waktu pengambilan darah
Tabel. 1 Daftar hormon dan perlakuan khusus yang diperlukan pada
pengambilan sampel dan penyimpanan

Hormon Antikoagulan Perlakuan Khusus


Bekukan dalam 15 menit
ACTH Heparin
pengambilan
Aldosteron Bekukan atau + borat
Androsiadione Sampel diambil pagi hari
Calcitonin Bekukan
Cortisol Heparin Pisahkan segera
11-Deoxycortisol Heparin Pisahkan segera
Estradiol Heparin Bekukan
Gastrin Puasa, bekukan
17- Pengambilan antara jam 09.00-
Hydroxyprogesteron 10.00
Insulin Puasa, bekukan
Parathyroid Bekukan
Palacental lactogen Bekukan
Prolactin Bekukan
Tahap Analitik

biologis immunologis kimiawi


Immunologis/ immunoassay

Radioimmuno
Assay
(RIA)
Enzim-
linked immunos
orbent assay
Metode (ELISA)
Electrochemiluminesc
ence Immunoassay
(ECLIA)

Imunokromato
grafi
Enzyme-Linked Immunosorbent
Assay (ELISA)

Enzyme-Linked Immunosorbent
Assay (ELISA) adalah suatu
teknik biokimia yang terutama digunakan
dalam bidang imunologi untuk mendeteksi
kehadiran antibodi atau antigen
dalam suatu sampel.
Sandwich 1. Disiapkan permukaan untuk mengikatkan antibodi
ELISA ‘penangkap’
2. Semua non spesifik binding sites pada permukaan
diblokir
3. Sampel berisi antigen dimasukkan dalam plate

4. Plate dicuci untuk membuang kelebihan antigen


yang tidak terikat
5. Antibodi primer ditambahkan, supaya berikatan
secara spesifik dengan antigen
6. Antibodi sekunder yang berikatan dengan enzim
dimasukkan, yang akan berikatan dengan antibodi
primer
7. Plate dicuci, sehingga konjugat antibodi-enzim
yang tidak terikat dapat dibuang
8. Ditambahkan reagen yang dapat diubah oleh enzim
menjadi sinyal berwarna/ berfluoresensi/ elektrokimia
9.Diukur absorbansinya untuk menetukan kehadiran
dan kuantitas dari antigen.
ELISA 1. Antibodi yang tidak berlabel diinkubasi
Kompetitif dengan kehadiran antigennya

2. Komplek antigen-antibodi ini selanjutnya


ditambahkan pada lubang yang telah dilapisi
antigen

3. Plate dicuci, sehingga kelebihan antibodi


tercuci (semakin banyak antigen dalam sampel,
semakin sedikit antibodi yang dapat terikat pada
antigen yang menempel pada permukaan
lubang, karena inilah disebut kompetisi.

4. Ditambahkan antibodi sekunder yang spesifik


utnuk antibodi primer. Antibodi sekunder ini
berpasangan dengan enzim

5. Substrat ditambahkan, enzim akan mengubah


substrat menjadi sinyal kromogenik/ fluoresensi.
Prinsip kerjanya
• Keuntungan utama dari metode
sandwich ELISA adalah

kemampuannya menguji sampel


yang tidak murni, dan mampu
mengikat secara selektif antigen
yang dikehendaki.

Tanpa lapisan pertama antibodi


penangkap, semua jenis protein
pada sampel (termasuk protein
serum) dapat diserap secara
kompetitif oleh permukaan
lempeng, menurunkan kuantitas
antigen yang terimobilisasi.
Radioimmunoassay (RIA)

Digunakan untuk mendeteksi jumlah yang sangat


kecil dalam darah. Radioimmunoassay adalah
teknik nuklir yang banyak digunakan
untuk mengetahui konsentrasi hormon. Pengujian
ini menggunakan antibodi yang spesifik untuk
hormon sebagai protein terikat.

Keuntungan metode RIA adalah :


1. Sensitivitas dan presisi yang tinggi
2. Mudah dikerjakan.Pekerjaannya lebih cepat dan tidak memerlukan sampel
yang besar
3. Metode radioimmunoassay (RIA) mempunyai kemampuan
untuk menentukan zat-zat fisiologis dalam tumbuh sampai kosentrasi yang
sangat rendah sekali hampir sekitar nanogram (ng = 10‾‾) dan bahkan
mencapai konsetrasi pictogram (pg = 10 ) untuk setiap 1 ml. Metode ini
sangat penting dalam peptide dan hormon steroid yang terdapat dalam
plasma yang kosentrasinya rendah.
competitive 1. sejumlah tertentu antibodi diimobilisasi
RIA (ditempelkan) pada suatu fase padat misalnya
dinding tabung plastik.

2. Sampel pasien yang mungkin


mengandung biomolekul (misalnya patogen)
ditambahkan bersama dengan sejumlah
tertentu biomolekul berlabel radioaktif yang
akan berinteraksi dengan antibodi yang timbul.

3. Intensitas signal radiasi dari biomolekul


berlabel radioaktif yang terikat padaantibodi
yang menempel pada dinding tabung akan
berbanding terbalik dengan konsentrasi
biomolekul dalam sampel.
sandwich 1. Langkah pertama adalah membuat antibodi
berlebihan yang terimobilisasi,
IRMA.

2. menambahkan biomolekul yang akan ditentukan


yang ditempelkan pada antibodi tersebut.

3. Jika biomolekulnya sama seperti antibodi yang


terimobilisasi, mereka akan berikatan dengan
antibodi dan membentuk lapisan pertama sandwich

4. Antibodi kedua yang berlabel radioaktif kemudian


ditambahkan. Antibodi ini akan menempel pada
epitope (daerah) yang berbeda dari biomolekul
yang sama dari antibodi yang terimobilisasi.

5. Ini akan berikatan sebagai lapisan


atas sandwich. Signal radiasi akan sebanding
dengan konsentrasi biomolekul dalam sampel.
Gambar 1. Prinsip dasar teknik competitive RIA
dan sandwich IRMA.
Metode Electrochemiluminescence
Immunoassay (ECLIA)

Chemiluminescence adalah emisi


atau pancaran cahaya oleh
produk yang distimulus oleh
suatu reaksi kimia atau suatu
kompleks cahaya. Kompleks
ikatan anti gen-antibodi yang
terjadi akan menempel pada
streptavidin-coated microparticle.

Keuntungan dari ECLIA adalah:


1. Reagen lebih stabil
2. Waktu pengerjaan cepat
3. Tidak menggunakan label radiasi (Roche Diagnostic, 2000)
Terimakasih

Anda mungkin juga menyukai