Nama asisten : Sintha Dewi P.

Tanggal Praktikum : 11 September 2019

Tanggal Pengumpulan : 18 Seotember 2019

PENGENALAN ALAT DAN TEKNIK LABORATORIUM DAN PERSIAPAN

PENGUJIAN MIKROBIOLOGI
FAKULTAS TEKNOLOGI INDUSTRI PERTANIAN
UNIVERSITAS PADJADJARAN

Livia Khalishta Afifah (240210180040)

Departemen Teknologi Industri Pangan Universitas Padjadjaran, Jatinangor

Jalan Raya Bandung-Sumedang Km. 21, Jatinangor, Sumedang 40600 Telp. (022)
7798844, 779570 Fax. (022) 7795780 Email: liviakafifah@gmail.com

ABSTRAK

Praktikum yang berjudul Pengenalan Alat dan Teknik Laboratorium dan

Persiapan Pengujian Mikrobiologi ini bertujuan agar mahasiswa dapat mengenal,
menggunakan dan mengerjakan alat-alat di laboratorium. Sehingga praktikan dapat
meminimalisir kecelakaan kerja pada laboratorium serta agar mendapatkan hasil
praktikum yang valid. Pada laboratorium mikrobiologi, alat-alat yang tersedia terbuat dari
bahan yang berbeda seperti karet, kaca, dan kayu. Bahan yang berbeda tentu membuat
alat tersebut harus memiliki perawatan dan cara menggunakan yang berbeda, terutama
pada proses sterilisasi yang penting untuk membunuh kontaminan agar didapatkannya
hasil praktikum yang sesuai.

Kata Kunci : Alat-alat, laboratorium,, dan teknik.

PENDAHULUAN melancarkan berlangsungnya praktikum

pengetahuan mengenai alat yang
Mikrobiologi merupakan suatu meliputi nama alat, fungsi alat, dan cara
ilmu yang mempelajari tentang menggunakannya sangat diperlukan.
kehidupan mikroorganisme meliputi Pengenalan alat-alat laboratorium
morfologi, struktur, fungsi serta penting dilakukan untuk keselamatan
metabolisme yang dilakukan dalam kerja saat melaukan penilitan. Alat-alat
proses kelangsungan hidupnya yang laboratotium biasananya dapat rusak
tidak dapat dilihat dengan mata ataupun membahayakan jika
telanjang. Dibutuhkan peralatan khusus penggunaannya tidak sesuai dengan
yang mendukung untuk tercapainya teknik dan prosedur penggunaannya.
tujuan dalam pengamatan Pentingnya pengenalan alat-alat
mikroorganisme (Yunilas & Yusni, laboratorium adalah agar dapat diketahui
2017). cara penggunaan alat tersebut dengan
Alat merupakan salah satu baik dan benar, sehingga kesalahan
pendukung dari keberhasilan praktikum prosedur pemaikaian alat dapat
di laboratorium. Sehingga untuk diminimalisir.
 Bekerja di laboratorium
mikrobiologi tidak akan lepas dari
berbagai kemungkinan terjadinya
bahaya dari berbagai jenis bahan kimia
baik yang bersifat sangat berbahaya
maupun yang bersifat berbahaya. Selain
itu, peralatan yang ada di dalam
laboratorium juga dapat mengakibatkan
bahaya yang tak jarang berisiko tinggi
bagi praktikan yang sedang melakukan
praktikum jika tidak mengetahui cara
dan prosedur penggunaan alat yang akan
digunakan. Setiap percobaan kita selalu
menggunakan peralatan yang berbeda
atau meskipun sama tapi ukurannya
berbeda (Andriani, 2016).
METODOLOGI
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada praktikum
kali ini adalah autoklaf, batang
pengaduk, beaker glass, botol scott,
botol semprot, bulb pipet, bunsen, cawan
petri, colony counter, cover glass,
erlenmeyer, gelas ukur, lemari
pendingin, mikroskop, neraca analitik,
object glass, ose (ose bulat dan ose
tusuk), pipet tetes, pipet ukur, pipet
volume, rak tabung reaksi, shaker,
spatula, tabung durham, tabung reaksi,
teko ukur, vortex, dan water bath.
Bahan-bahan yang digunakan pada
praktikum kali ini adalah kain kasa dan
kapas.
Prosedur
Cara Memegang Cawan Petri
Pertama, letakkan cawan petri di
tangan kiri pada tiga jari yaitu jari
tengah, jari manis, dan jari kelingking
sebagai alas dari cawan petri bagian
bawah. Jari telunjuk digunakan sebagai
penahan tutup cawan petri dan ibu jari
digunakan untuk membuka dan menutup
cawan petri bagian atas. Tangan kanan
digunakan untuk penuang media ke
cawan petri.
Cara Membungkus Cawan Petri
Pertama, ambil kertas ukuran A4
kemudian bagi menjadi dua bagian.
Gunakan salah satu kertas A4 yang
sudah dibagi dua lalu simpan cawan petri
di bagian tengah kertas kemudian
pertemukan kedua ujung lipatan. Buatlah
bentuk segitiga pada ujung kertas yang
sudah disatukan lalu lipat segitiga
tersebut kebagian bawah cawan petri.
Cara Membungkus Pipet Ukur
Pertama, ambil kertas ukuran A4
kemudian bagi menjadi empat bagian
secara memanjang. Kertas yang sudah
dibagi, ditaruh pada ujung atau pangkal
pipet ukur. Buatlah bentuk segitiga lalu
lanjutkan dengan menggulung kertas
tersebut. Jika kertas tersebut tidak cukup,
sambung kembali dimulai dari ujung
pangkal pipet ukur. Tempel label atau
selotip kertas diantara sambungan kertas
tersebut.
Cara Membuat Sumbat
Ambil kain kasa dan kapan
secukupnya. Gulung kapas hingga padat
dan taruh kapas pada ujung kain kasa.
Lipat kain kasa dan rapikan. Pasang
sumbat yang diatas tabung reaksi.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Autoklaf adalah alat untuk
mensterilkan berbagai macam alat dan
bahan yang digunakan dalam
mikrobiologi menggunakan uap air
panas bertekanan (Andriani, 2016).
Autoklaf memiliki dua fungsi. Fungsi
utamanya yaitu mensterilkan dengan
cara sterilisasi basah pada suhu 121℃
selama 15 menit tetapi autoklaf juga
digunakan untuk mendestruksi bahan
atau media yang mengandung
mikroorganisme patogen. Autoklaf
dapat digunakan dengan cara
mengisinya dengan aquades sampai
batas pada autoklaf, lalu masukkan
peralatan dan bahan yang ingin
disterilkan atau didestruksi. Lalu, tutup
dan kunci autoclave dan buka katup yang
ada sambil ditunggu sampai
mengeluarkan tetes uap pertama. Setelah
ada tetesan pertama, tutup katup lalu
tunggu sampai tekanannya turun.
Selanjutnya, peralatan dan bahan bisa
dikeluarkan dari autoclave.
Batang pengaduk adalah batang
yang terbuat dari kaca. Berfungsi untuk
mengaduk suatu campuran dan untuk
membantu menuangkan larutan dalam
proses penyaringan (Juvitasari, Melati,
& Lestari, 2002). Sama halnya dengan
batang pengaduk, spatula juga
digunakan untuk menghomogenkan
suatu larutan secara manual.
Beaker glass merupakan wadah
yang digunakan untuk menyimpan
larutan atau media. Beaker glass juga
digunakan untuk sebagai tempat untuk
menimbang bahan yang akan dilarutkan.
Beaker glass harus disterilisasi
menggunakan oven dengan sterilisasi
kering karena terbuat dari bahan
glass/kaca.
Botol scott adalah botol yang
memiliki tutup yang berfungsi
menyimpan larutan atau media. Tutup
pada botol scott digunakan agar larutan
tidak bercampur dengan udara.
Botol semprot digunakan untuk
menyemprotkan alkohol 70% pada area
kerja. Alkohol yang ada pada area kerja
disemprotkan disekitar meja kerja dan
pada sarung tangan.
Pipet yang digunakan dalam
laboratorium mikrobiologi ada 3 jenis
yaitu, pipet ukur, pipet volume, dan pipet
tetes. Pipet ukur berfungsi untuk
mmindahkan larutan atau cairan dengan
ukuran voulme yang dapat diatur (Fallis,
2013). Pipet volume digunakan untuk
memindahkan larutan atau cairan sesuai
dengan volume pipet tersebut, ukuran
pipet volume sangat bervariasi yaitu 1
ml, 5 ml, 10 ml, dan lain-lain. Pipet tetes
digunakan untuk memindahkan cairan
atau larutan dengan mengeluarkannya
tetes per tetes dan tidak memiliki ukuran
volume yang tepat. Cara menggunakan
pipet volume dan pipet ukur relatif sama.
Pertama, pasang bulb pipet pada bagian
atas pipet. Bulb pipet adalah alat yang
terbuat dari karet yang berfungsi
mengisap dan mengeluarkan cairan dari
pipet tersebut. Ada 3 bagian pada bulb
pipet yaitu bagian yang terdapat huruf
“A” atau aspirate yaitu tombol yang
ditekan pada sebelum pemakaian yang
berfungsi untuk mengeluarkan udara
agar cairan dapat terhisap oleh pipet.
Lalu ada bagian “S” atau suction yang
berfungsi untuk menghisap larutan.
Setelah itu, untuk mengeluarkan larutan,
tekan bagian “E” atau exit. Cara
menggunakan pipet tetes adalah dengan
menekan bagian atas pipet agar larutan digunakan (kanan), namun disarankan
masuk ke dalam pipet. Jika ingin untuk memegangnya dengan tangan kiri
mengeluarkan larutan yang ada di dalam sedangkan tangan kanan digunakan
pipet, tekan karet pada bagian atas pipet untuk menuangkan media.
secara perlaha agar larutan dapat keluar
Colony counter adalah alat yang
dalam bentuk tetesan kecil. Proses
berfungsi untuk menghitung jumlah
sterilisasi pada pipet ada dua yaitu,
koloni mikroorganisme. Pertama, colony
sterilisasi kering untuk pipet volume dan
counter dihubungkan ke arus listrik agar
ukur dengan dilapisi kertas. Sedangkan
dapat digunakan. Lalu taruh cawan petri
ball pipet dan pipet tetes disterilisasi
yang berisi kultur mikroorganisme dan
dengan cara sterlisasi basah. Pada
nyalakan lampu yang ada pada alat.
praktikum yang dilakukan, disarankan
Lalu, tekan cawan petri menggunakan
untuk menggunakan pipet volume dan
spidol, maka colony counter akan secara
pipet ukur karena memiiliki tingkat
otomatis menghitung jumlah koloni pada
ketelitian yang lebih tinggi (Benson,
cawan petri tersebut. Colony counter
1973).
dapat mengihtung mulai dari 30 sampai
Bunsen adalah alat pembakaran 300 buah koloni.
yang digunakan untuk mensterilisasikan
Object glass dan cover glass
area kerja selama praktikum dilakukan
digunakan untuk menaruh benda yang
dengan cara melalui media yang akan
akan diamati, yang disebut praparat.
digunakan diatas api. Pembakar bunsen
Object glass dan cover glass merupakan
juga digunakan untuk mensterilisasikan
kaca tipis dan transparan. Object glass
jarum inokulasi. Cara menggunakannya
yang digunakan untuk menaruh media
yaitu dengan membakar sumbu
dan kultur yang sudah diinokulasi. Cover
menggunakan korek api kayu dan
glass adalah penutup yang menjaga
menyalakannya selama praktikum
spesimen dari kotoran dari luar.
berlangsung (Murtius, 2018).
Labu Erlenmeyer berfungsi
Cawan petri adalah wadah yang
untuk menampung larutan, bahan, atau
digunakan untuk menumbuhkan atau
cairan. Labu Erlenmeyer dapat
memelihara kultur mikroorganisme.
digunakan untuk meracik dan
Cawan petri disterilisasi dengan cara
menghomogenkan bahan-bahan
sterilisasi kering dan ditutupi oleh kertas.
komposisi media, menampung akuades,
Cara memegang cawan petri yaitu
dan kultivasi mikroba dalam kultur cair
memegang bagian bawah dengan tiga
(Benson, 1973).
jari yaitu jari tengah, jari manis, dan jari
kelingking. Sedangkan, bagian atas Lemari es di laboratorium
cawan petri ditahan menggunakan jari mikrobiologi ada tiga, yaitu lemari es
telunjuk, lalu ibu jari digunakan untuk yang berfungsi untuk menyimpan kultur
membuka bagian atas cawan petri. mikroorganisme yang bersifat patogen
Untuk pemula, disarankan ataupun non-patogen serta menyimpan
memegangnya dengan tangan yang biasa media dan larutan pengencer. Media atau
kultur yang disimpan di dalam lemari es yang zat yang ditimbang tidak
biasanya ditaruh dalam wadah berupa dipengaruhi oleh udara dari luar.
cawan petri yang dilapisi oleh kertas atau
Tabung durham berbentuk mirip
ditaruh pada botol schott. Cawan petri
dengan tabung reaksi, namun ukurannya
dan botol schott yang disimpan di dalam
lebih kecil dan berfungsi untuk
lemari es harus diberi label agar tidak
menampung/menjebak gas yang
tertukar dengan sampel milik praktikan
terbentuk akibat metabolisme pada
lain.
bakteri yang diujikan. Penempatannya
Mikroskop adalah alat yang terbalik dalam tabung reaksi dan harus
digunakan untuk melihat benda terendam sempurna dalam media
berukuran mikro yang tidak bisa dilihat (Benson, 1973).
dengan mata telanjang. Mikroorganisme
Tabung reaksi adalah wadah
merupakan makhluk hidup yang hanya
yang digunakan sebagai wadah suatu
bisa dilihat menggunakan mikroskop
larutan yang akan diamati atau
karena ukurannya sangat kecil. Cara
digunakan sebagai wadah media cair
menggunakan mikroskop di permukaan
atau padat. Tabung reaksi harus
datar dan atur pencahayaan yang akan
disterilisasi terlebih dahulu sebelum
mengenai mikroskop. lalu putar revolver
digunakan dengan metode sterilisasi
sehingga lensa objektif paling pendek.
kering karena terbuat dari bahan
Lalu, turunkan tubus sampai maksimal
glass/kaca. Pada saat praktikum, tabung
dan coba meneropong lewat okuler
reaksi disusun di rak tabung reaksi agar
dengan mata kiri maka akan terlihat
tabung reaksi berdiri tegak dan
medan bundar putih. Lalu atur jarak
meminimalisir terjadinya kecelakaan
lensa ke meja sediaan. Setelah itu, taruh
kerja. Pada praktikum mikrobiologi,
benda yang atau zat akan diteliti di atas
tabung reaksi ditutup menggunakan
object glass dan tutup menggunakan
sumpat agar media yang ada di dalam
cover glass lalu taruh preparat tersebut
tabung reaksi tidak terkontaminasi oleh
diatas meja sediaan. Object glass dan
kontaminan yang berasal dari
cover glass digunakan untuk menaruh
lingkungan luar. Sumbat yang biasa
benda yang akan diamati, yang disebut
digunakan adalah sumbat kapas karena
praparat. Lalu amati perbesaraan
mudah untuk dibuat dan relatif
bayangan dengan memutar lensa objektif
terjangkau.
yang lebih panjang ke arah meja sediaan.
Teko ukur dan gelas ukur adalah
Neraca analitik digunakan untuk
alat yang digunakan untuk mengukur
mengukur massa suatu zat dengan
suatu larutan namun dengan tingkat
ketelitian tinggi. Cara
ketelitian yang rendah. Teko ukur
mengggunakannya dengan menaruh zat
digunakan untuk larutan yang
yang akan ditimbang diatas meja neraca
volumenya lebih besar, sedangkan gelas
biasanya menggunakan kaca arloji untuk
ukur digunakan untuk larutan yang
zat yang bersifat higroskopis. Lalu, tutup
memiliki volume yang lebih kecil.
kaca pada neraca analitik agar massa
 Jarum inokulasi atau ose
digunakan untuk menginokulasi atau
memindahkan kultur mikroorganisme ke
media. Jarum inokulasi terbuat dari
kawat ni-Cr yang akan berpijar saat
terkena api pada saat dilakukan
sterilisasi. Sterilisasi jarum inokulasi
dilakukan dengan cara dipanaskan diatas
pembakar bunsen hingga berpijar
berwarna merah. Jarum inokulasi Ada
dua jenis jarum inokulasi, yaitu
inoculating loop yaitu jarum inokulasi
yang berbentuk bulat yang cocok
digunakan untuk menstreak kultur ke
atas permukaan media, sedangkan
inoculating needle adalah jarum
inokulasi yang berbentuk lurus yang
cocok digunakan untuk media agar
tegak.
Vortex dan shaker adalah alat
yang digunakan untuk
menghomogenkan suatu larutan. Vortex
digunakan untuk menghomogenkan
larutan dalam wadah berdiameter kecil
seperti tabung sentrifugasi. Vortex
digunakan dengan cara memegang
wadah diatas permukaan vortex.
Sedangkan, shaker adalah alat yang
digunakan untuk menghomogenkan
larutan di dalam wadah yang
berdiameter besar. Wadah hanya perlu
ditaruh diatas permukaan shaker lalu,
atur kecepatan gerakan pada alat
tersebut. Jika menggunakan vortex atau
shaker, gunakan dalam kecepatan
standar sehingga larutan tidak mengenai
sumbat pada wadah.
Waterbath adalah alat yang
digunakan memanaskan media agar
tidak kontak langsung dengan api
dengan suhu yang konstan. Waterbath
digunakan dengan cara mengisinya
dengan akuades dan
menyambungkannya dengan arus listrik.
Lalu, atur limit temperatur untuk
membuat batasan suhu. Setelah itu, tekan
tombol start dan masukkan media yang
ingin dipanaskan.
KESIMPULAN
Berdasarkan praktikum yang
telah dilakuakan, dapat ditarik
kesimpulan bahwa setiap alat praktikum
memiliki nama dan fungsinya masing-
masing, sehingga diperlukan pengenalan
terhadap alat-alat yang digunakan.
Penguasaan dan pemahan terhadap alat-
alat praktikum akan membantu mengi
dari kegagalan.
DAFTAR PUSTAKA
Andriani, R. (2016). Pengenalan Alat-
Alat Laboratorium Mikrobiologi
Untuk Mengatasi. Jurnal
Mikrobiologi, 1(1), 1–7.
Benson, H. J. (1973). Dasar-dasar
Praktikum Mikrobiologi.
Microbiological Applications, A
Laboratory Manual in General
Microbiology., 2 nd ed. l(:W.M.C.
Brown Co. Publ. Dubuque.), 1–61.
Fallis, A. . (2013). 済無No Title No
Title. Journal of Chemical
Information and Modeling, 53(9),
1689–1699.
https://doi.org/10.1017/CBO97811
07415324.004
Juvitasari, P. M., Melati, H. A., &
Lestari, I. (2002). DESKRIPSI
PENGETAHUAN ALAT
PRAKTIKUM KIMIA DAN. 1–13.
Murtius, W. S. (2018). Praktek Dasar
Mikrobiologi. 46. Retrieved from
repo.unand.ac.id
Yunilas, & Yusni, E. (2017). Penuntun
Praktikum Mikrobiologi Akuatik.
Fakultas Pertanian Universitas
Sumatera Utara, 60.
LAMPIRAN

Tabel 1. Gambar dan Fungsi Alat Laboratorium

No. Nama Gambar Fungsi
1. Autoklaf I Melakukan sterilisasi
basah di suhu 121℃
selama 15 menit.

2. Autoklaf II Mendestruksi media.

3. Laminar Flow Tempat melakukan

inokulasi tanpa
terkontaminasi.
No. Nama Gambar Fungsi
4. Waterbath Memanaskan media
agar tidak kontak
langsung dengan api
dengan suhu yang
konstan.

5. Inkubator I dan Menyimpan kultur

II patogen atau non
patogen.

6. Oven Melakukan sterilisasi

kering pada suhu
180℃ selama 2 jam.
No. Nama Gambar Fungsi
7. Lemari es I Menyimpan kultur
mikroorganisme
patogen.

8. Lemari es II Menyimpan kultur

mikroorganisme non
patogen.

9. Showcase Menyimpan media

atau larutan
pengencer.
No. Nama Gambar Fungsi
10. Tabung Reaksi Menyimpan
mikroorganisme
dalam medium cair
atau padat.

11. Sumbat Menyumbat tabung

reaksi agar tidak
terkontaminasi
kontaminan.

12. Beaker Glass Sebagai wadah untuk

media atau larutan.

13. Jarum Memindahkan kultur

Inokulasi atau mikroorganisme.
Ose
No. Nama Gambar Fungsi
14. Ball Pipet Digunakan bersama
dengan pipet volume
dan pipet ukur untuk
mengambil larutan.

15. Pipet Volume Memindahkan larutan

dengan ukuran
volume tertentu.

16. Cawan Petri Menumbuhkan dan

memeilhara
mikroorganisme.

17. Erlenmeyer Sebagai wadah untuk

menyimpan media
atau larutan.
No. Nama Gambar Fungsi
18. Pipet Tetes Mengambil larutan
dalam jumlah kecil
dan mengeluarkannya
pertetes.

19. Pipet Ukur Mengambil dan

memindahkan larutan
dengan ketetapatan
ukuran yang lebih
akurat.

20. Spatula Mengambil dan

mengaduk bahan
sampel.

21. Botol Schott Sebagai wadah untuk

menyimpan media.
No. Nama Gambar Fungsi
22. Teko ukur Mengukur volume
larutan dengan
ketelitian rendah.

23. Rak Tabung Tempat untuk

Reaksi menyusun dan
menyimpantabung
reaksi.

24. Bunsen Sebagai alat

pembakaran dan untuk
mensterilkan area
kerja.

25. Botol Semprot Untuk mensterilkan

Berisi Alkohol area kerja.
70%
No. Nama Gambar Fungsi
26. Colony Untuk Menghitung
Counter jumlah koloni
mikroorganisme.

27. Neraca Untuk mengukur

Analitik massa dari bahan
sampel.

28. Gelas Ukur Untuk mengukur

larutan dengan
ketelitian rendah.

29. Object Glass -Object Glass umtuk

dan Cover menaruh preparat.
Glass -Cover Glass untuk
menutupi preparat
yang telah
ditempatkan di object
glass untuk diteliti
menggunakan
mikroskop.
 No. Nama Alat Gambar Fungsi
30. Vortex Menghomogenkan
larutan dengan wadah
yang memiliki
diameter kecil,
contoh: tabung reaksi
dan tabung
sentrifugasi.

31. Shaker Menghomogenkan

larutan dengan wadah
ayng memiliki
diameter besar,
contoh: erlenmeyer.

32. Mikroskop Melihat benda

berukuran mikro.

33. Batang Menghomogenkan

Pengaduk larutan.

(Sumber: Dokumen Pribadi, 2019)