PENGAMATAN VIRUS PADA BAKTERI DENGAN METODE PLAQUE

OBSERVATION OF VIRUSES IN BACTERIA BY THE PLAQUE METHOD

Wanda Noer Melania

20118096

Program Studi D-III Analis Kesehatan STIKes Bakti Tunas Husada Tasikmalaya

ABSTRACT

Viruses are obligate intracellular parasites and are 20-200 nm in size, chemical in shape and

composition, but contain only RNA or DNA. The whole particle is called virion which

consists of a capsid wrapped in a glycoprotein or a lipid membrane. The virus is resistant to

lipids. This practicum aims to see whether in the AN medium there is glassy caused by a virus

that lyses bacterial cells. Observation of viruses in bacteria by the Plaque Method is to

determine the presence or absence of virus in cow dung samples that lyse bacterial cells that

are visible from the clear zone or the presence of plaque formed in AN media that has been

inoculated in E. coli bacteria samples and then the clear zone is reculted to prove true

whether the virus or not on AN media. The results of the practicum show the presence of

glassy in all AN media which is tested means that there is a virus contained in cow manure or

bacteriophages.

Keywords: Virus, E. coli Bacteria, Plaque Method

ABSTRAK

Virus adalah parasite intraseluler obligat dan ukurannya 20-200 nm, bentuk dan komposisi

kimianya bervariasi, tetapi hanya mengandung RNA atau DNA. Partikelnya secara utuh

1
disebut virion yang terdiri dari kapsid yang terbungkus oleh sebuah glikopotein atau

membrane lipid. Virus resistan terhadap lipid. Praktikum ini bertujuan untuk melihat apakah

di medi AN terdapat glassy yang disebabkan adanya virus yang melisiskan sel bakteri.

Pengamatan virus pada bakteri dengan Metode Plaque adalah untuk mengetahui ada tidaknya

virus pada sampel kotoran sapi yang melisiskan sel bakteri yang terlihat dari zona bening atau

adanya plaque yang terbentuk didalam media AN yang telah diinokulasikan pada sampel

bakteri E.coli kemudian zona bening tersebut direkultur untuk membuktikan benar apakah

virus atau bukan pada media AN. Hasil praktikum meunjukkan adanya glassy pada semua

media AN yang dicoba bararti positif adanya virus yang terkandung dalam kotoran sapi yaiu

bakteriofag.

Kata kunci: Virus, bakteri E. coli, Metode Plaque

PENDAHULUAN seringkali disingkat fag ditemukan oleh

dua orang ahli mikrobiologi bernama
Virus merupakan parasit
Fredick Twort ( 1913 ) dan Felix d’Herelle
mikroskopik yang menginfeksi sel
( 1917 ) sebagai partikel yang
organisme biologis, virus ini bersifat
menyebabkan sel bakteri lisis ( pecah ).
parasit obligat hal tersebut disebabkan
Nama Virus ini berasal dari kata bacteria
karena virus hanya dapat bereproduksi di
dalam bahasa Inggris dan kata Phagien
dalam material hidup dengan menginvasi
berasal dari bahasa Yunani yang artinya
dan memanfaatkan sel makhluk hidup
makan.
karena virus tidak mempunyai
perlengkapan seluler untuk bereproduksi Pemahaman tentang virus dan
sendiri. (Kuswiyanto, 2016) perkembangbiakan virus perlu digunakan
metode untuk menghitung kualitas atau
Virus ini tidak hanya menyerang
jumlah partikel virus. Partikel virus
manusia tetapi virus juga dapat menyerang
dihitung dengan menghitung efek dari
bakteri, malah dapat memakan bakteri,
virus terhadap inang yang diinfeksinya.
virus memakan bakteri ini disebut dengan
Istilah unit infeksi virus merupakan unit
Bakteriofag. Untuk Bakteriofag atau

2
terkecil yang menimbulkan efek yang
dapat dideteksi pada saat virus tersebut
ditempatkan pada inang yang sesuai,
dengan menentukan jumlah unit infeksi
per volume cairan, maka dapat dihitung
jumlah partikel virusnya.
Bakteri Escherichia coli (E.coli)
adalah bakteri yang biasanya hidup di
dalam usus manusia dan hewan. Walau
kebanyakan jenis E.coli hanya
menyebabkan diare ringan, beberapa jenis
tertentu seperti E.coli O157:H7 dapat
menyebabkan infeksi usus serius yang
mengakibatkan diare, sakit perut, dan
demam. (Syahrurachman, 2006)
Salah satu metode yang digunakan
untuk mengetahui unit infeksi virus di
BAHAN DAN METODE
PRAKTIKUM
Alat dan bahan yang digunakan
adalah cawan petri, batang L, spirtus,
korek api, tabung vial, tabung reaksi,
sumbat, incubator, mikropipet, tip putih
dan kuning, media AN, sampel kotoran
sapi, dan isolate bakteri E. coli.
Jenis metode yang digunakan adalah
plaque assay yaitu saat partikel virus
memulai infeksinya pada lapisan sel inang
yang tumbuh menyebar di permukaan
medium, zona lisis atau zona hambat akan
muncul sehingga akan terlihat wilayah
yang terang pada lapisan sel inang.
3
antaranya adalah plaque assay. Saat
partikel virus memulai infeksinya pada
lapisan sel inang yang tumbuh menyebar
di permukaan medium, zona lisis atau zona
hambat akan muncul sehingga akan
terlihat wilayah yang terang pada lapisan
sel inang. Wilayah terang ini dinamakan
sebagai plaque yang diasumsikan bahwa
setiap plaque berasal dari satu partikel
virus. Plaque merupakan jendela pada
lapisan sel inang yang hidup menyebar
pada permukaan media agar. Plaque dapat
dilihat apabila partikel virus (bakteriofage)
dicampur dengan lapisan tipis inang
bakteri yang ditumbuhkan pada media
agar. (Sihombing , 2007)
Praktikum ini menggunakan
incubator sebagai instrumennya yang
bertujuan untuk menumbuhkan bakteri
serta virusnya, sehingga dapat diketahui
mana yang bakteri atau virusnya.
Adapun sampel yang digunakan
adalah kotoran sapi yang diambil dari
kandang sapi di Desa Tamansari
Kecamatan Tamansari Kota Tasikmalaya.
Jumlah sampel yang diambi adalah
satu wadah sampel penuh, karena sampel
teksturnya keras sampel diencerkan
menggunakan aquabides sebanyak 5 mL.
HASIL PENGAMATAN
 tempat pelekatan virus bagi fag tertentu.
Fag jenis lain tidak dapat melekat pada
reseptor yang tidak sesuai.
Plaque merupakan uji virologis yang
diperkenalkan untuk menghitung dan
mengukur infektivitas becteriophages.
Uji plaque digunakan untuk melihat
dan mencatat kematian sel dalam kultur sel
yang terinfeksi. Virus yang menginfeksi
bakteri (bakteriofage) adalah agen
kematian substansial bakteri, sehingga
mempengaruhi proses biogeokimia global
Pada hasil praktikum kali ini pada
dan fluks energi. Bakteriofag mempunyai
media AN terdapat zona bening atau
asam nukleat double-stranded DNA.
glassy yang berarti adanya virus yang
Bakteriofag memiliki kapsid yang
melisiskan sel bakteri E. coli.
berbentuk polyhedral dan diselubungi oleh
protein. Bakteriofag memiliki ekor seperti
PEMBAHASAN
benang,tersusun atas protein, yang dapat
Hasil praktikum pengamatan virus
mengenali reseptor pada sel inang pada
pada bakteri dengan metode plaque
saat tahap pelekatan
didapat hasil uji plaque menunjukkan hasil
Perkembangbiakan virus atau dalam
positif. Interpretasi hasil positif ditandai
siklus hidupnya virus memerlukan
dengan terbentuknya zona jernih pada
lingkungan sel yang hidup. Oleh karena
media dengan bulat penuh (lingkaran).
itu, virus menginfeksi sel bakteri, sel
Plaque terbentuk akibat lisisnya sel bakteri
hewan, atau sel tumbuhan untuk
oleh bakteriofag. Semakin banyak jumlah
bereproduksi. Reproduksi virus secara
plaque yang terbentuk, maka bakteriofag
umum terbagi menjadi dua, yaitu siklus
yang terdapat didalam sampel dapat
litik dan siklus lisogenik. Siklus litik
dikatatakan memiliki konsentrasi yang
dianggap sebagai cara reproduksi virus
tinggi.
yang utama karena menyangkut
Plaque merupakan daerah kecil yang
penghancuran sel inangnya.sedangkan
bersih disebabkan oleh adanya pelisisan
siklus lisogenik tidak menghancurkan sel
dinding sel bakteri yang disebabkan oleh
inangnya, tetapi disisipi oleh asam nukleat
virus. Reseptor merupakan daerah khas

4
dari virus, tahap penyisipan tersebut
kemudian membentuk provirus.
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil praktikum dapat
disimpulkan bahwa adanya plaque atau
adanya zona bening yang menghambat
tumbuhnya sel bakteri pada media AN
yaitu positif adanya vius.
DAFTAR PUSTAKA
Kuswiyanto. (2016). Buku Ajar Virologi
untuk Analis Kesehatan. Jakarta:
EGC.
Sihombing , D. (2007). Teknik
Pengelolaan Limbah
Kegiatan/Usaha Peternakan.
Bogor: Pusat Penelitian
Lingkungan Hidup Lembaga
Penelitian IPB.
Syahrurachman, A. (2006). Mikrobiologi
Kedokteran . Jakarta: Binarupa
Aksara.