Metabolomik Untuk

Tujuan Standarisasi
Bahan Baku Unggul
“Intrument HPLC/GC”

KELOMPOK 3
Febby rizkyani istda (2016-164)
Bella ayu lucyta (2016-163)
Aurora onyx Aldila (2016-159)
Yuliya Purnama (2016-118)
Denny Kurniawan.A (2016-160)
PENDAHULUAN
METABOLOMIK
Metabolomik merupakan analisis komprehensif komponen dari suatu
organisme pada waktu atau kondisi tertentu (Hall, 2006). Metabolomik
dapat diaplikasikan untuk mempelajari korelasi antara bioaktivitas dan
profil kimia dan pada akhirnya dapat digunakan untuk mengidentifikasi
komponen bioaktif pada tanaman (Yuliana et al., 2011b). Metode ini
dilakukan dengan ekstraksi sampel secara komprehensif dengan
menggunakan kombinasi pelarut pada tingkat kepolaran yang berbeda
(Yuliana et al., 2011a). Ekstrak yang dihasilkan selanjutnya digunakan
untuk analisis bioaktivitas dan profil kimia dari ekstrak tanaman.
INTRUMENT GC-MS

GC-MS digunakan untuk menganalisis campuran senyawa yang mudah menguap

atau senyawa dengan derivat yang mudah menguap dan stabil terhadap panas.
Derivatisasi diperlukan untuk analisis senyawa-senyawa tertentu untuk meningkat
kan volatilitas dan stabilitas termalnya. Senyawa- senyawa yang dapat dianalisis
dengan metode ini antara lain asam organik, asam amino, gula,amin aromatik, as
am lemak, dan lain sebagainya (Zhang dkk, 2012). GC-MS memiliki tingkat sensit
ifitas tinggi dan presis untuk identifikasi senyawa. Kekurangan dari metode ini ada
lah penggunaannya terbatas untuk analisa senyawa- senyawa yang mudah meng
uap dan perlu derivatisasi untuk analisis senyawa-senyawa tertentu (Li dkk, 2007
).
INTRUMENT HPLC

Suatu ekstrak dapat diidentifikasi secara Chromatography fingerprint menggunak

an kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT)/High perfomance liquid chromatograph
y(HPLC) sehingga dapat diketahui puncak spesifik kandungan kimia suatu ekstra
k. Data yang didapat pada pengujian ekstrak dengan KCKT yaitu profil kromatogr
am, waktu retensi, dan luas area. Fingerprint dapat dibandingkan dengan ekstrak
standar untuk membuktikan keaslian dan identifikasi untuk kontrol kualitas sediaa
n herbal. Teknologi ini dapat digunakan untuk uji kepalsuan sediaan herbal karen
a Chromatography fingerprint dapat digunakan sebagai profil kemurnian dari sedi
aan herbal. Selain itu Chromatografi fingerprint analysis dapat digunakan untuk m
embedakan spesies yang berbeda dari keluarga yang sama (Dejaegher.B, 2010).
METODE PENELITIAN

• Pemeriksaan Organoleptis ekstrak Nigella Sativa

• Analisis Metabolit Profiling dengan KLT

• Analisis Metabolit Profiling dengan KCKT

Analisis profil kromatogram ekstrak dilakukan dengan menggunakan KCKT. Sistem KCKT yang di
gunakan adalah fase terbalik dengan fase gerak gradient metanol:asam fosfat 0,05%:2-propanol dan
deteksi PDA pada λ 254 nm. Sampel ekstrak ditimbang 100 mg, ditambah metanol sampai 10 mL. Lar
utan difiltrasi dengan membran filter 0,22 µm. Larutan dimasukkan dalam flakon dan diinjeksikan seba
nyak 10µL ke dalam sistem. Tiap daerah dilakukan replikasi sebanyak 3 kali.
❑ MS merupakan metode analisis yangmemberi
kan data kualitatif dan kuantitatif dengan sens
itifitas dan resolusi tinggi secara cepat dan sel
ektif. Detektor ini dikombinasikan dengan kro
matograf untuk pemisahan senyawa.
❑ GC-MS digunakan untuk menganalisis campura
n senyawa yang mudah menguap atau senyawa
dengan derivat yang mudah menguap dan stabi
l terhadap panas.
❑ Derivatisasi diperlukan untuk analisis senyawa-
senyawa tertentu untuk meningkatkan volatilit
as dan stabilitas termalnya. Senyawa-senyawa y
ang dapat dianalisis dengan metode ini antara l
ain asam organik, asam amino, gula,amin arom
atik, asam lemak, dan lain sebagainya (Zhang d
kk, 2012).
HASIL PENELITIAN SEBELUMNYA

• Analisis metabolomik dengan metode HPLC-MS terhadap ektra

k teh hitam terfermentasi dimanfaatkan untuk analisis aktivitas a
ntibakteri ekstrak terhadap E. coli.
• Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak teh terfermentasi me
miliki profil metabolit yang berbeda dengan ekstrak teh hitam ta
npa perlakuan (tidak difermentasi), tiga senyawa yang membed
akan secara signifikan adalah glukosamin, 4-guanidinobutanoat
dan asam glutarat.
• Ekstrak teh terfermentasi juga memiliki kadar senyawa fenolik s
erta tingkat bioavailabilitas yang lebih tinggi. Senyawa fenolik te
h, katekin, menyebabkan stres oksidatif E. coli yang mana berak
ibat pada penghambatan proliferasi atau pertumbuhan bakteri (
Yang dkk, 2018)
❖ GC-MS memiliki tingkat sensitifitas tinggi dan presis untuk id
entifikasi senyawa. Kekurangan dari metode ini adalah peng
gunaannya terbatas untuk analisa senyawa-senyawa yang m
udah menguap dan perlu derivatisasi untuk analisis senyawa
-senyawa tertentu.
❖ Hasil analisis metabolomik Caulophyllum robustum dengan
GC-MS menunjukkan bahwa aporphinoid dan quinolizidin m
erupakan senyawa alkaloid mayor dalam sampel dan senya
wa ini berpotensi untuk dijadikan indikator pada kontrol kua
litas (Li dkk, 2007).
❖ Farag dkk (2012) menggunakan GC-MS untuk analisis metab
olit primer beberapa spesies Glycyrrhiza dan hasil analisis te
rsebut dapat digunakan untuk membedakan spesiesspesies
tersebut.
KESIMPULAN
Teknik metabolomik telah banyak digunakan untuk standardisasi dan kontrol kualitas pro
duk herbal di dunia. Teknik ini memungkinkan analisis obat herbal dengan kandungan m
etabolit yang kompleks secara menyeluruh, nonbias, dan high throughput. Metode analis
is yang umum digunakan untuk metabolomik adalah MS, NMR, FT-IR yang dikombinasi
dengan instumen untuk analisis senyawa seperti GC atau LC.
Chromatography fingerprint analysis
merupakan salah satu metode yang dapat digunakan untuk identifikasi, penetapan kadar, menyatakan
informasi kimia dari produk botani

Suatu ekstrak dapat diidentifikasi secara Chromatography fingerprint menggunakan kromatografi cair k
inerja tinggi (KCKT)/High perfomance liquid chromatography(HPLC) sehingga dapat diketahui puncak
spesifik kandungan kimia suatu ekstrak.

Food and Drugs Administration (FDA), European Medicines Agency (EMEA) dan State Food and Drug
s menyarankan bahwa produk herbal sebelum digunakan harus terstandardisasi dengan menggunaka
n Chromatography fingerprint (Xiaoye He, 2015).

Data yang didapat pada pengujian ekstrak dengan KCKT yaitu profil kromatogram, waktu retensi, dan l
uas area.

Fingerprint dapat dibandingkan dengan ekstrak standar untuk membuktikan keaslian dan identifikasi u
ntuk kontrol kualitas sediaan herbal.
Rimpang temu putih telah banyak digunakan untuk pengobatan di Indonesia salah satun
ya adalah untuk mencegah dan mengobati kanker

Metode untuk menjamin kualitas sediaan herbal salah satunya adalah Chromatography fi
ngerprint analysis dengan KCKT.

Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui profil kromatografi fingerprint dari ekstrak rimp
ang temu putih sehingga dapat digunakan untuk mengetahui kualitas mutu produk rimpa
ng temu putih.
Ekstrak rimpang temu putih yang diperoleh dari tiga daerah yaitu Subang, Sumedang da
n Lembang kemudian dilakukan analisis Chromatography fingerprint menggunakan KCK
T. Langkah pertama yang dilakukan yaitu optimasi kondisi kromatografi untuk mendapatk
an sistem kromatogram yang baik. Hasil optimasi dapat dilihat pada gambar berikut:

15 menit (60-40%), 16-20 menit (50-50%). Total running time 20 menit dan laju alir 0,8 m
l/menit, volume injeksi 10 µl, panjang gelombang UV 425 nm.
Setelah didapat sistem KCKT/HPLC yang baik pengujian dilanjutkan dengan validasi Chr
omatography fingerprint. Hasil validasi berupa repeatability dan stability yang dapat diliha
t pada tabel berikut:
Hasil repeatability persen RSD dari nilai RRT ketiga daerah berada pada rentang 0,015-1,388
%. Sedangkan persen RSD dari nilai RPA ketiga daerah berada pada rentang 2,123- 52,956%.
Sedangkan hasil uji stabilitas persen RSD dari nilai RRT dari ketiga daerah berada pada rentan
g 0,021,388 % dan RPA dari ketiga daerah berada pada rentang 2,635%- 52,956%. Hasil uji sta
bilitas tersebut menunjukkan bahwa sampel stabil selama 48 jam. Dari hasil uji repeatability dan
stabilitas nilai persen RSD dari nilai RPA cenderung tinggi hal tersebut terjadi karena nilai peak
area dari setiap senyawa berbeda yang disebabkan oleh perbedaan kandungan senyawa. Perb
edaan kandungan senyawa dapat disebabkan dari perbedaan tempat tumbuh dan waktu panen
simplisia. Sehingga untuk analisa kemometri menggunakan data persen RSD dari nilai RRT.
Dari hasil fingerprint diatas dapat dilihat bahwa perbandingan profiling dari ekstrak r
impang temu putih dari daerah Subang, Sumedang, dan Lembang menunjukkan pe
rsamaan waktu retensi dengan intensitas yang berbeda antar sampel ekstrak. Peak
yang sering muncul dari masing-masing sampel ekstrak mempunyai kemiripan wakt
u retensi dengan kadar relatif yang berbeda. Kurkuminoid yang merupakan senyaw
a marker dari genus kurkuma meliputi bisdemetoksikurkumin, demetoksikurkumin d
an kurkumin berturut-turut muncul pada waktu retensi ke 6,5, 6,9, dan 7,5.
Hasil kromatogram selanjutnya dianalisis lebih lanjut menggunakan kemometri PCA (Principal Compo
nent Analysis) pada waktu retensi 1,5 menit sampai dengan waktu retensi 10 menit, untuk meminimal
isir terjadinya kesalahan akibat jumlah data KCKT yang cukup banyak dan bervariasi. Hasil dari analis
is PCA berupa scores dan loading

Nilai waktu retensi digambarkan sebagai titik biru yang tersebar disekitar garis tengah. Semakin titik bi
ru berkumpul digaris tengah maka waktu retensi tersebut yang selalu muncul dalam kromatogram dan
dapat dijadikan ciri khas dari kromatogram ekstrak tersebut.
Dari gambar diatas menunjukkan adanya pengelompokan antara ekstrak dari tiga daerah dengan pro
duk rimpang temu putih. Ekstrak dari Subang, Sumedang, Lembang, P2, dan P3 berada pada kuadra
n yang sama hal ini menunjukkan adanya kesamaan karakteristik dari esktrak. Sedangkan pada prod
uk P1 berada pada kuadran yang berbeda hal ini menunjukkan bahwa P1 bukan ekstrak rimpang tem
u putih. Dan pada P2 pada repeatability ketiga (P2C) berbeda kuadran hal ini dikarenakan perbedaan
waktu retensi yang disebabkan karena kurang ketelitian dalam preparasi sampel.
KESIMPULAN

1. Waktu retensi pada KCKT dari sampel ekstrak rimpang temu putih (Curcuma zedoaria) yang dap
at digunakan sebagai fingerprint yaitu pada menit ke 1,5; 2,5; 3,2; 6,6; 7,6; dan 10,4.

2. Dari analisis PCA dapat mengelompokkan ekstrak rimpang temu putih berdasarkan kesamaan ka
rakteristik ekstrak dari data waktu retensi sehingga analsis Chromatography fingerprint dengan K
CKT dan analisis menggunakan PCA mampu mengetahui kesamaan karakteristik ekstrak dari da
erah yang berbeda

3. Hasil analisis PCA menunjukkan bahwa ekstrak dari Subang, Sumedang dan Lembang memiliki k
arakteristik yang sama. Serta sampel produk rimpang temu putih yang memiliki karakteristik yang
sama dengan ekstrak yaitu produk P2 dan P3.
TUJUAN

1. Untuk mengidentifikasi senyawa-senyawa bioaktif bekatul tersebut yang berkorelasi dengan aktivi
tas sitotoksik dan aktivitas antioksidan menggunakan pendekatan metabolomik

2. Mengetahui varietas beras yang memiliki aktivitas sitotoksik dan aktivitas antioksidan terbaik.

3. Mengidentifikasi senyawa-senyawa dari profil kimia yang berkorelasi dengan aktivitas sitotoksik d
an aktivitas antioksidan pada bekatul yang memiliki aktivitas sitotoksik dan aktivitas antioksidan t
erbaik dengan pendekatan metabolomik..
METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan Penelitian
• Alat utama yang digunakan untuk produksi bekatul adalah mesin huller (Satake, Japan), rice millin
g (Satake, Japan), ekstruder tipe ulir ganda (Berto BEX-DS-2256) dan oven. Sedangkan alat untu
k analisis yaitu peralatan gelas, neraca analitik, pipet mikro, rotary evaporator, sonikator, vortex mi
xer SA8/1(Stuart®, UK), penangas air, botol vial, instrumen GC-MS Agilent 6890 gas chromatogra
ph dan mass selective detector HP 5973, Epoch microplate spectrophotometer (BioTek), dan iMar
kTM microplate absorbance reader (Bio-Rad, UK).
• Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah bekatul dengan 4 varietas yang berasal dari bek
atul beras putih Ciherang, bekatul beras merah Cere, dan bekatul beras hitam Cempo Ireng (diper
oleh dari petani di Jasinga, Bogor) dalam bentuk gabah kering giling (GKG) serta bekatul beras Je
pang Japonica. Bahan analisis yang digunakan terdiri dari pelarut metanol pro analyse (PA), akua
des, kertas saring, regenerated membrane, gas nitrogen dan reagen untuk analisis GCMS, DPPH
(1,1-diphenyl-2-picryhyldrazyl), standar asam askorbat, 3-(4,5- dimethylthiazol-2-yl) 2,5-diphenyl t
etrazolium bromide (MTT), 5-Fluorouracil (5-FU). Adapun sel lestari kanker yang digunakan adala
h sel lestari Vero (ATCC CCL-81, diperoleh dari PSSP IPB) dan sel kanker kolon WiDr (ATCC CC
L-218, diperoleh dari CCRC UGM).
Prosedur Penelitian

Penelitian ini dilakukan atas 3 tahapan, yaitu tahap pertama persiapan sampel bekatul, tahap kedua p
reparasi dan ekstraksi komponen bioaktif bekatul, serta tahap ketiga analisis berupa analisis profil kim
ia ekstrak metanolik bekatul dengan GC-MS, dan analisis bioaktivitas yakni analisis sitotoksik dan akti
vitas antioksidan secara in vitro
HASIL

Pada penelitian ini, pengujian ekstrak metanolik berbagai varietas bekatul pada sel kanker WiDr diaw
ali dengan pengujian pada sel normal Vero. Tujuan dilakukan pengujian terlebih dahulu menggunakan
sel normal Vero adalah untuk melihat keamanan ekstrak terhadap sel Vero. Sel Vero merupakan sel n
ormal yang diambil dari ginjal African Green Monkey dewasa, pertama kali pada tanggal 27 Maret 196
7 oleh T. Yasamura dan T. Kawalata dari Universitas Chiba, Chiba Jepang (Ammerman et al. 2008).
Senyawa aktif yang berada pada menit ke 9.
802 pada ekstrak metanol bekatul beras hita
m adalah senyawa dengan m/z 319 dan rum
us molekul C6H12O6 merupakan senyawa D
-Glukosa. Berdasarkan database GC-MS NI
ST14 yang digunakan, senyawa ini merupak
an senyawa D-Glukosa dan D-manosa. Men
urut Antoniewicz et al. (2011) senyawa aldon
itrile pentatrimethylsilyl glucose memiliki frag
mentasi (m/z) 103, 117, 129, 133, 147, 157,
189, 191, 205, 217, 229, 291, 319. Senyawa
aldonitrile pentatrimethylsilyl glucose merupa
kan senyawa TMS derivat dari glukosa.
Senyawa aktif yang berada pada menit ke 7.835 pada ekstrak metanol bekatul beras hitam adalah senyaw
a dengan m/z 193 dan rumus molekul C7H6O4. Menurut database GC-MS NIST14 yang digunakan, senya
wa ini adalah senyawa asam protokatekat (Gambar 10). Asam protokatekat memiliki ion [M-H]- (m/z193) (S
u et al. 2013). Menurut Robbins (2003) senyawa TMS derivat asam protokatekat memiliki fragmentasi (m/z)
193, 281, 355 dan 370. Selain itu, penelitian yang dilakukan oleh Canini et al. (2007) menunjukkan ekstrak
daun Carica papaya L. mengandung asam protokatekat yang dianalisis menggunakanGC-MS memiliki frag
mentasi (m/z) 73, 193, 355 dan 370.
KESIMPULAN

Hasil uji aktivitas sitotoksik menunjukkan nilai IC50 terendah terhadap sel WiDr ditemukan pada ekstr
ak bekatul beras hitam sebesar 213.68 μg/mL, diikuti oleh ekstrak bekatul beras merah, beras Jepang
, dan beras putih, masing-masing sebesar 252.08 μg/mL, 631.60 μg/mL, dan 768.28 μg/mL. Hasil OP
LS data GC-MS menunjukkan senyawa aktif yang diduga memiliki aktivitas sitotoksik terhadap prolifer
asi sel WiDr adalah asam protokatekat dan senyawa-senyawa oligo/polisakarida yang terkonjugasi de
ngan komponen fenolik. Berdasarkan analisis GC-MS, senyawa-senyawa oligo/polisakarida muncul p
ada waktu retensi 9.80 menit sedangkan asam protokatekat muncul pada waktu retensi 7.83 menit. H
asil juga menunjukkan bahwa ekstrak metanol bekatul beras hitam memiliki nilai IC50 lebih rendah di
bandingkan dengan bekatul beras merah, beras putih, dan beras Jepang, masing-masing sebesar 67.
58 μg/mL, 82.50 μg/mL, 410.02 μg/mL, dan 1108.71 μg/mL. Hasil analisis OPLS data GC-MS menunj
ukkan bahwa senyawa aktif yang diduga memiliki aktivitas antioksidan ialah asam protokatekat dan s
enyawa-senyawa oligo/polisakarida yang tersusun atas D-Glukosa, D-Manosa, D-(-)Fruktosa.
TUJUAN

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi waktu retensi yang merupakan komponen anti
bakteri Stapylococcus aureus yang berasal dari ekstrak bunga kecombrang (Etlingera elatior) dengan
menggunakan metode metabolomik berbasis HPLC
METODE PENELITIAN

• Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah bunga kecombrang segar yang berasal dari pen
gumpul di pasar Binjai, Sumatera Utara, etanol, n-heksan, kloroform, aquades, kultur bakteri Stap
hylococcus aureus, media Nutrient Agar (NA), media Nutrient Broth (NB), chloramphenicol, dimeth
yl sulfoxide (DMSO), aquabides, regenerated membrane, asetonitril, dan asam asetat.

• Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah oven, alat-alat gelas, refrigerator, penyaring 30 me
sh, freezer, timbangan, blender, vorteks, sentrifuge, rotary evaporator, timbangan analitik, inkubat
or 37 oC, inkubator 60 oC, penyaring vakum, HPLC Perkin Elmer Series 200 dengan Detektor UV-
VIS 785A dengan jenis kolom C18, 4 μm, 150x3,9 mm, dan software SIMCA (v.13.01).
Analisis Profil Kimia dengan HPLC

• Hasil kromatogram ekstrak dan fraksi dengan data serapan UV (250 nm, 270 nm, 290 nm, 310 nm
, 330 nm, dan 350 nm) pada waktu-waktu retensi dikorelasikan dengan aktivitas antibakteri yang d
iketahui. Kromatogram yang dihasilkan dari 3 kali ulangan ekstrak E (etanol), fraksi K (kloroform),
dan fraksi A (air) dengan 6 serapan UV adalah sebanyak 54 kromatogram. Data profil kimia dari kr
omatogram ditunjukkan dengan selang waktu retensi setiap 0,16 menit. Data profil kimia akan diko
relasikan dengan data aktivitas antibakteri menggunakan analisis OPLS.
Analisis Orthogonal Projection to the Least Square (OPLS)

Analisis OPLS akan menunjukkan beberapa plot seperti score plot, Y related coefficient plot, dan X va
rian plot dengan menggunakan software SIMCA (v.13.01). Score plot akan menunjukkan plot pengelo
mpokan ekstrak dan fraksi berdasarkan aktivitas antibakterinya. Selang waktu retensi yang signifikan
aktivitasnya akan dilihat penyebaran area puncaknya pada berbagai ekstrak dan fraksi dengan meng
gunakan X varian plot. Berdasarkan plot tersebut dapat diketahui pada ekstrak dan fraksi bunga keco
mbrang yang mana yang memiliki area puncak terbesar, hal ini mengindikasi adanya mempunyai kom
ponen aktif. Ekstrak atau fraksi tersebut dapat diidentifikasi waktu retensi komponen aktif yang memb
erikan aktivitas antibakteri yang signifikan terhadap bakteri Staphylococcus aureus.
PEMBAHASAN
Uji Aktivitas Antibakteri

Ekstraksi 150 g tepung bunga kecombrang dengan menggunakan etanol menghasilkan ekstrak E (eta
nol) berupa gum berwarna coklat (3,80 g). Hasil fraksinasi hanya diperoleh 0,2 g dari fraksi K (klorofor
m) dan 5 g dari fraksi A (air).
Penelitian Susanti et al. (2013) menunjukkan bahwa konsentrasi 10 μL ekstrak bunga kecombrang da
pat memberikan daya hambat sebesar 3 mm pada bakteri Staphylococcus aureus. Menurut Ghasemz
adeh et al. (2015), ekstrak bunga kecombrang. Kelantan pada konsentrasi 10 mg/mL memberikan day
a hambat sebesar 8,4 mm, pada konsentrasi yang sama ekstrak bunga kecombrang Johor memberik
an daya hambat sebesar 4,0 mm, dan ekstrak bunga kecombrang Pahang memberikan daya hambat
sebesar 9,2 mm. Perbedaan pada kondisi cuaca atau gizi dan jenis tanah tempat tumbuhnya kecombr
ang dapat mempengaruhi konsentrasi dan jenis komponen penyusun aktif pada bunga kecombrang (
Ghasemzadeh et al., 2015). Hal ini dapat memberikan pengaruh terhadap aktivitas penghambatan ek
strak bunga kecombrang pada bakteri Staphylococcus aureus. Selain itu, penelitian Abdelwahab et al.
(2010) juga menunjukkan adanya aktivitas penghambatan dari ekstrak seluruh bagian tanaman keco
mbrang pada konsentrasi 100 mg/mL terhadap bakteri Staphylococcus aureus dengan daya hambat s
ebesar 4,5 mm.
KESIMPULAN

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa aplikasi metabolomik berbasis HPLC dapat secara cepat digu
nakan untuk mengidentifikasi komponen aktif dari ektrak dan fraksi tanaman. Uji aktivitas antibakteri t
erhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus menunjukkan adanya daya hambat (DIZ) pada fraksi kl
oroform rata-rata sebesar 3,78 mm dengan konsentrasi 500 mg/mL. Hasil analisis OPLS menunjukka
n bahwa komponen yang diduga memiliki aktivitas antibakteri, yaitu komponen yang berkorelasi signif
ikan terhadap profil kimia ekstrak dan fraksi bunga kecombrang (Etlingera elatior) adalah area puncak
pada waktu retensi 0,96 - 1,12 menit dengan serapan UV λ = 250 nm dari fraksi kloroform. Hasil penel
itian ini dapat digunakan sebagai acuan untuk mengidentifikasi lebih lanjut komponen bioaktif dan me
ngisolasinya dengan cara yang lebih efisien.
THANK YOU