MAKALAH TEKNIK ANALISA KIMIA

SQUALENE

KELOMPOK 2 :

1. FAJAR MAULANA PUTRA 141411133013

2. EDEIT TYA LISTIANTO 141611233025
3. FINA FATIMATUS ZAHRO 141611233039
4. WINONA VALERIA 141611233062

FAKULTAS PERIKANAN DAN KELAUTAN

UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2019
 KATA PENGANTAR

Dengan menyebut nama Allah SWT yang Maha Pengasih lagi Maha
Panyayang, Kami panjatkan puja dan puji syukur atas kehadirat-Nya, yang telah
melimpahkan rahmat, hidayah, dan inayah-Nya kepada kami, sehingga kami dapat
menyelesaikan makalah tentang Squalene.

Makalah ini telah kami susun dengan maksimal dengan bantuan seluruh
anggota kelompok sehingga dapat memperlancar pembuatan makalah ini. Untuk itu
kami menyampaikan banyak terima kasih kepada semua anggota yang telah
berkontribusi dalam pembuatan makalah ini.

Terlepas dari semua itu, Kami menyadari sepenuhnya bahwa masih ada
kekurangan baik dari segi susunan kalimat maupun tata bahasanya. Oleh karena itu
dengan tangan terbuka kami menerima segala saran dan kritik dari pembaca agar
kami dapat memperbaiki makalah ilmiah ini.

Akhir kata kami berharap semoga makalah bertopik squalene ini bermanfaat
dan berguna bagi para pembaca.

Surabaya, 20 November 2019

Penyusun
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Indonesia dikenal sebagai Negara kepulauan terbanyak di dunia yang kaya

akan sumber daya alam bahari. Indonesiapun dikenal sebagai salah satu Negara
penghasil ikan laut terbesar di dunia. Tahun 2008, Indonesia menduduki peringkat
ketiga dunia setelah China dan Peru sebagai Negara penghasil ikan laut tangkapan
(FAO, 2010). Namun hal tersebut ternyata tidak selaras dengan jumlah produksi
minyak ikan di Indonesia. Tingginya nillai impor memperlihatkan akan tingginya
permintaan pasar dalam negeri terhadap minyak ikan yang belum mampu dipenuhi
oleh industri di Indonesia. Hal ini merupakan tantangan sekaligus peluang bagi
Indonesia untuk mengembangkan potensi minyak ikan sehingga mampu merebut
pasar dalam negeri dan pasar internasional (Hall et al., 2016).

Ikan merupakan salah satu organisme air yang mengandung protein, lemak,
vitamin, mineral yang sangat baik dan prospektif. Lemak yang terkandung dalam
ikan umumnya adalah asam lemak tak jenuh. Komponen aktif yang diunggulkan dari
minyak ikan adalah omega-3, omega-6, omega-9 dan squalene yang sangat
bermanfaat bagi kesehatan. Asam lemak jenuh dan asam lemak tidak jenuh yang
memiliki banyak manfaat untuk kesehatan ini banyak terdapat pada perairan air
tawar dan laut. Asam lemak tak jenuh mampu menurunkan kadar trigliserida dan
kolestrol darah. Asam lemak tak jenuh juga sangat baik untuk perkembangan otak
dan retina (Insani dkk., 2017).

1.2 Rumusan Masalah

1. Bagaimana cara mengekstraksi/isolasi squalene?

2. Bagaimana cara analisa squalene?

1.3 Tujuan Penelitian

Adapun maksud disusunnya makalah ini adalah untuk mengetahui metode

mengekstraksi/isolasi dan cara analisa bahan squalene.
1.4. Manfaat Penelitian

1. Memberikan wawasan tentang cara mengekstraksi/isoalsi squalene

2. Memberikan wawasan tentang cara melakukan analisa squalene
3. Memberikan informasi mengenai manfaat squalene bagi kesehatan
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Squalene

Squalene adalah senyawa organik alami yang terkandung dalam minyak

hewan seperti hati ikan hiu dan tanaman seperti padi, gandum dan zaitun. Squalene
adalah hidrokarbon utama yang banyak ditemukan dalam minyak hati ikan hiu hitam
genus Zameus. Squalene pertama kali diisolasi oleh Tsujimoto pada tahun 1906 dan
struktur kimianya ditemukan pada tahun 1931. Squalene memiliki enam buah ikatan
rangkap, bersifat tidak tersabunkan, tidak berwarna atau berwarna kuning muda,
berbau tidak enak dan kalau dibiarkan di tempat terbuka akan cepat tengik (Gracia et
al., 2017).

Squalene dapat digunakan sebagai bahan dasar dalam industry kosmetika

dan obat-obatan untuk perwatan kulit. Di bidang pengobatan squalen diaplikasikan
dalam bentuk salep karena mudah diabsorbsi ke dalam kulit. Squalen juga berperan
sebagai antioksidan dan memiliki aktivitas sebagai antikanker dan antitumor (Gracia
et al., 2017).

2.2 Minyak Ikan

Minyak ikan merupakan komponen lemak dalam jaringan tubuh ikan yang
telah diekstraksi dalam bentuk minyak. Beberapa ilmuwan mendefinisikan
minyak/lemak sebagai senyawa yang mengandung asam lemak atau senyawa yang
mirip dengan asam lemak seperti alcohol dan sfingosin (Rozi dkk., 2016).

Minyak ikan berbeda dengan jenis minyak yang lain, yaitu mempunyai jenis
asam lemak yang lebih beragam dengan asam lemak yang dominan adalah asam
lemak dengan jumlah atom karbon 20 dan 22 yang bersifat sangat tak jenuh karena
mempunyai 5 dan 6 ikatan rangkap dalam satu molekul. Asam lemak dominan ke
dalam kelompok asam lemak omega-3 (Rozi dkk., 2016).

2.3 Asam lemak

Asam lemak adalah asam organic berantai panjang yang mempunyai atom
karbon dari 4 sampai 24. Asam lemak memiliki gugus karboksil tunggal dan ekor
hidrokarbon nonpolar yang panjang, yang menyebabkan kebanyakan lipida bersifat
tidak larut di dalam air dan tampak berminyak atau berlemak. Asam lemak tidak
terdapat secara bebas atau berbentuk tunggal di dalam sel atau jaringan, tetapi
terdapat dalam bentuk yang terikat secara kovalen pada berbagai kelas lipida yang
berbeda. Hampir semua asam lemak di alam memiliki jumlah atom karbon yang
genap, asam-asam lemak dengan 16 dan 18 karbon adalah yang paling dominan
(Suseno dkk., 2011).

2.4 Ekstraksi

Ekstraksi merupakan peristiwa memindahkan zat aktif yang semula berada

di dalam sel ditarik oleh larutan penyari sehingga zat aktif larut dalam cairan penyari.
Dengan demikian senyawa tersebut dapat terpisahkan dari bahan, serta ekstrak
hanya mengandung sebagian besar senyawa kandungan yang diinginkan. Faktor
utama untuk pertimbangan pemilihan cairan penyari terdiri dari aspek selektivitas,
ekonomis, dan ramah lingkungan (Rozi dkk., 2016).
 BAB III

HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1 Ekstraksi squalene

Banyak teknik yang dapat digunakan untuk memulihkan lipid matriks biologis
dan mendapatkan senyawa spesifik. Ekstraksi Soxhlet merupakan metode yang
paling umum digunakan sebagai standar dan materi ekstrak dianggap 100% dapat
diekstraksi. Hexane merupakan pelarut yang digunakan untuk ekstraksi skala besar
karena biayanya yang relatif rendah dan efisiensi yang tinggi. Ekstraksi lipid
biasanya mencakup pelarut organik, pada skala industri umumnya digunakan cold
pers untuk menghindari degradasi senyawa termolabil karena metode ini berada
pada tekanan rendah dan hasil mungkin rendah, sehingga pengembangan teknik
baru pada tekanan yang lebih tinggi dapat membantu meningkatkan hasil dan waktu
proses. Ekstraksi ultrasonik dikombinasikan dengan ekstraksi organik yang dapat
mencapai hasil yang lebih tinggi (Gracia et al., 2017).

Cold Pres dengan mekanisme baru yang menggantikan hammer crusher

mencapai 90,1% ekstraksi dan minyak yang dihasilkan mencapai 65g/kg squalene.
Cold press, pelarut organik, dan supercritical fluid extraction diuji untuk
membandingkan hasilnya dan kesimpulannya adalah supercritical fluid extraction
(SCFE) mencapai hasil dan kemurnian tertinggi. Metode pemisahan lainnya adalah
kompleksasi ion perak pada reaksi kompleksasi antara Ag+ dan ikatan rangkap
karbon tak jenuh, diuji pada minyak Camellia yang diperoleh dari biji C. oleifera ,
kondisi optimalnya adalah 70% metanol (v/v), 0,6 mol/L AgNO3 selama 12 jam pada
0oC. Ekstrak kemurnian squalene mencapai 37,8%. Keuntungan dari metode ini
adalah biaya rendah, daur ulang pereaksi dan operasi berlanjut, kelemahan dari
metode ini adalah saponifikasi dan diesterifikasi sebelumnya esktraksi dan reagen
kimia dihapus dari ekstrak setelah ekstraksi (Xiao et al., 2016).

Supercritical fluid extraction (SCFE) dapat digunakan untuk ekstrak senyawa

polar. Cairan superkritis miliki difusivitas sebagai gas sehingga dapat menembus
bahan padat, tinggi kepadatan dan daya solvasi sebagai cairan. Cairan ini kompresif
dan sedikit tekanan dapat mengubah sifatnya. SCFE telah dipelajari karena
keunggulannya terhadap ekstraksi dan ekstrak konvensional memiliki kualitas yang
lebih baik, biostabilitas dan mudah dihilangkan dari matriks yang diekstraksi. CO2
digunakan untuk mengekstraksi minyak karena karakteristiknya mudah sebagai tidak
beracun, tidak mudah terbakar, mudah dihapus dan pelarut ekonomi dan juga
mengurangi degradasi termolabil dalam senyawa yang diekstraksi (Wejnerowska et
al., 2013).

Squalene SCFE telah dilakukan oleh beberapa orang peneliti bahkan ketika
teknologi dianggap mahal dan ekstrak yang dicapai dengan kemurnian tinggi. Benih
bayam sebagian besar telah diuji oleh squalene SCFE, beberapa kondisi adalah
sebagai berikut: 35MPa dan hasil adalah 0,305% dan dengan menambahkan pelarut
bersama mungkin mendapatkan lebih banyak squalene. Dalam pekerjaan lain, CO2
digunakan pada 50°C dan 300 bar mencapai 7,95% dalam minyak kondisi optimal
lainnya yang dilaporkan mengekstraksi squalene adalah 30MPa dan 40°C pada 90-
120 menit untuk memungkinkan ekstraksi minyak dan squalene tertinggi dan lebih
cepat dari Amaranthuscruentus . Pada suhu yang lebih tinggi (100°C) hasil terbaik
dilaporkan pada 55 MPa dan 1,5 jam waktu ekstraksi dari Amaranthuspaniculatus
(Wejnerowska et al., 2013).

3.2 Analisis kuantitatif squalene

Metode analitis modern yang digunakan untuk penentuan squalene kuantitatif

adalah kromatografi: kromatografi gas (GC) atau dibarengi dengan spektrometri
massa (GC / MS) atau kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) atau dibarengi dengan
spektrometri massa (HPLC / MS). Bueno (2005) menentukan squalene dalam fraksi
hidrokarbon yang diekstraksi dari minyak zaitun di wilayah Extremadura, Spanyol,
menggunakan GC-FID, dengan fase stasiun TRB-5 dan periode temperatur dalam
dua tahap; dengan metode ini ada penghitungan alkana, alkena, dan seskuiterpen
dari sampel minyak zaitun. Sebagai contoh metode HPLC, HPLC-RID (detektor
indeks bias) dapat disebutkan dengan fase terbalik (RP), fase gerak aseton-
asetonitril (1:1) yang memungkinkan penentuan squalene di hadapan trigliserida
(Popa et al., 2015).

Penyulingan pewangi, hasil samping yang diperoleh selama penyulingan

minyak nabati adalah murah dan pada saat yang sama, kaya akan sumber senyawa
berharga termasuk squalene. Analisis dari penyulingan pewangi adalah masalah
yang menantang. Kuantifikasi senyawa hadir dalam DD secara langsung analisis
sering kali sulit dilakukan, terutama ketika konstituen tumpang tindih DD hadir dalam
konsentrasi yang sangat rendah. Ini membutuhkan langkah pretreatment untuk
menghilangkan zat yang mengganggu. Biasanya, pretreatment melibatkan
saponifikasi dari penyulingan dan ekstraksi dari penghilang karbon yang tidak layak,
diikuti oleh pemisahan kromatografi melalui kolom dengan bahan yang berbeda,
tergantung pada komposisi DD dan senyawa yang diinginkan untuk dipisahkan.
Kuantifikasi dapat dibuat oleh alat dari GC ditambah dengan HPLC atau MS.
Saponifikasi sebelum analisis GC dapat menyebabkan degradasi senyawa bioaktif
dari DD, seperti squalene, tokoferol, dan FASE, masalah yang harus diperhitungkan
(Popa et al., 2015).

Akibatnya, metode menggunakan fraksinasi awal sampel, prosedur yang

menyederhanakan analisis dan mempersingkat durasi, telah dikembangkan.
Pecahan kristalisasi merupakan proses ringan yang sering digunakan dalam industri
untuk modifikasi lemak. Nenadis dan Tsimidou (2002) melaporkan kristalisasi
fraksional awal sampel sebagai metode yang cepat, sederhana, dan murah untuk
penentuan squalene dari minyak zaitun murni. Sebelum kromatografi, mereka
melakukan sampel kristalisasi fraksional, berikut beberapa langkah: minyak
dilarutkan dan dikocok dalam campuran metanol-aseton (7:3, v/v) dan kemudian
disimpan selama beberapa jam di −22oC. Setelah filtrasi dan pelepasan pelarut
bertekanan rendah, sampel dilarutkan dalam fase aseton asetonasitril (4:6, v/v) dan
dipisahkan secara kromatografi oleh RP-HPLC dengan RID, dengan deteksi
squalene pada 208 nm (Popa et al., 2015).

3.3 Sumber bahan squalene

Sumber squalene terdapat pada bahan alami diantaranya hewani dan

tumbuhan.

3.3.1 Squalene dari Shark Liver Oil

Selama bertahun-tahun, minyak hati hiu telah menjadi sumber alami utama
squalene (Popa et al., 2015). Diperkirakan untuk memproduksi 1 ton squalene, itu
membutuhkan sebanyak 3.000 hiu (Ciriminna et al., 2014). Distilasi tunggal di bawah
vakum di suhu 200–230◦C yang diperlukan untuk pemulihan > 98% squalene murni
dari minyak hati (Ciriminna et al., 2014). Setiap tahun, sekitar 100 juta hiu dibunuh
secara brutal (Tsoi et al., 2016), dengan sebagian besar darinya untuk memenuhi
permintaan global squalene untuk industri kosmetik (Ciriminna et al., 2014).
3.3.2 Squalene dari Tumbuhan
Selain minyak hati ikan hiu, sebagian besar minyak nabati mengandung
squalene dalam jumlah kecil (Czaplicki et al., 2012). Phytosqualene ini memiliki tepi
atas squalene hiu, dalam hal itu sangat stabil, tidak beracun, tidak berbau, dan tidak
berwarna (Popa et al., 2014), lebih disukai penggunaannya dalam industri kosmetik
dan farmasi. Selain itu, squalene berbasis tanaman memiliki kemampuan untuk
mengurangi risiko berbagai jenis kanker dengan meminimalkan kadar kolesterol
serum (He et al., 2003). Phytosqualene pertama kali ditemukan dan diekstraksi dari
minyak zaitun dan sejak itu kemudian, pencarian alternatif masih berlangsung.
Menariknya, di antara sumber tanaman yang dikenal, minyak zaitun (0,9-12,45 g / kg
squalene) adalah satu-satunya sumber yang digunakan untuk tujuan komersial
(Lozano-Grande et al., 2018), meskipun fakta bahwa bayam memiliki kandungan
squalene tertinggi (600 g / kg) dari semua sumber tanaman yang dilaporkan
(Wejnerowska et al., 2013). alasan di balik ini adalah bahwa kandungan lipid hadir
dalam zaitun (6.67–26,67%) (Departemen Pertanian Amerika Serikat, 2018) lebih
besar dari biji bayam (4,8–8,1%) (Departemen Pertanian Amerika Serikat, 2018),
meskipun jumlah yang dipulihkan masih belum mencukupi untuk memenuhi tuntutan
global.

3.3.3 Squalene dari Mikroorganisme

Mikroorganisme adalah salah satu sumber alami yang menonjol dari

squalene. Padahal mereka tidak menumpuk sebanyak-banyaknya jumlah seperti hiu
dan tanaman, mereka cepat dan luar biasa pada pertumbuhan bersama dengan
kemudahan untuk insinyur membuat mereka menjadi lebih baik alternatif untuk
produksi squalene. Eukariotik yang dipelajari dengan baik organisme model
Saccharomyces cerevisiae (ragi) dilaporkan untuk menghasilkan sejumlah kecil
squalene, hingga 1,6 mg / g kering berat sel (DCW) (Mantzouridou dan Tsimidou,
2010).
 BAB IV

PENUTUP

4.1 Kesimpulan

Berdasarkan uraian diatas dapat ditarik kesimpulan bahwa cara

mengekstraksi squalene umumnya menggunakan metode soxhlet dengan
penggunaan pelarut hexan. Kemudian cara analisa squalene dapat memakai metode
analisis modern yang digunakan untuk penentuan squalene kuantitatif yakni
kromatografi: kromatografi gas (GC) atau dibarengi dengan spektrometri massa (GC
/ MS) atau kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) atau dibarengi dengan
spektrometri massa (HPLC / MS).
 DAFTAR PUSTAKA

Ciriminna, R., Pandarus, V., Béland, F., and Pagliaro, M. 2014. Catalytic
hydrogenation of squalene to squalane. Org. Process Res. Dev. 18, 1110–
1115

Czaplicki, S., Ogrodowska, D., Zadernowski, R., and Derewiaka, D.2012.

Characteristics of biologically-active substances of amaranth oil obtained by
various techniques. Pol. J. Food Nutr. Sci. 62, 235–239.

Gracia, R. T., Martinez, J. C., Ortiz, D. G. 2017. Squalene Extraction: Biological

Sources and Extraction Methods. International Journal of Environment,
Agriculture and Biotechnology, 2(4): 1662-1670.

Hall, D. W., N. Marshall. S., C. Gordon. K., P. Killen. D. 2016. Rapid Quantitative
Determination of Squalene in Shark Liver Oils by Raman and IR
Spectroscopy. Lipids, 51: 139-147.

Insani, A. S., Suseno, H.S., Jacoeb, M.A. 2017.Karakteristik Squalene Minyak Hati
Ikan Cucut Hasil Produksi Industri Rumah Tangga Pelabuhan Ratu. Aceh
Barat. Universitas Teuku Umar Meulaboh.

Lozano-Grande, M. A., Gorinstein, S., Espitia-Rangel, E., Dávila-Ortiz, G., and

Martínez-Ayala, A. L. 2018. Plant sources, extraction methods, and uses of
squalene. Int. J. Agron. 2018:1829160.

Mantzouridou, F., and Tsimidou, M. Z. 2010. Observations on squalene accumulation

in Saccharomyces cerevisiae due to the manipulation of HMG2 and ERG6.
FEMS Yeast Res. 10, 699–707.

Nenadis, N and M. Tsimidou. 2002. Determination of squalene in olive oil using

fractional crystallization for sample preparation. Journal of the American Oil
Chemists’ Society, vol. 79, no. 3, pp.
257–259.

Popa, I., Ba˘beanu, N. E., Nita˘, S., and Popa, O. 2014. Squalene - natural resources
and applications. Farmacia 62, 840–862.

Popa, O., N. E. Bsbeanu., I. Popa, S. Nita, C. E. Dinu-Pârvu. 2015. Methods for

Obtaining and Determination of Squalene from Natural Sources. Journal of
BioMed Research International, 16 pp.
Rozi A, Suseno SH, Jacoeb AM. 2016. Ekstraksi dan Karakterisasi minyak hati cucut
pisang. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 19(2):100-109.

Tsoi, K. H., Chan, S. Y., Lee, Y. C., Ip, B. H. Y., and Cheang, C. C.2016. Shark
conservation: an educational approach based on children’s knowledge and
perceptions toward sharks. PLoS ONE 11:e0163406.

Wejnerowska, G.; Heinrich, P.; Gaca, J. 2013. Separation of squalene and oil from
amaranthus seeds by supercritical carbon dioxide. Sep. Purif. Technol, 110:
39–43.

Xiao, H., Yao, Z., Peng, Q., Ni, F., Sun, Y., Zhang, C. X., Zhong, Z. X. 2016.
Extraction of squalene from camellia oil by silver ion complexation. Sep. Purif.
Technol, 169: 196–201.