Adenovirus adalah vektor yang berpotensi berguna untuk vaksinasi dan

terapi gen. Pemurnian ekstensif dilakukan selama produksi adenovirus

rekombinan untuk mendapatkan produk akhir murni. Namun, ketidakmurnian
yang terkait dengan produk, seperti agregat virus dan partikel tidak lengkap virus,
dapat hadir dalam produk akhir dan dapat menyebabkan efek samping atau
kurangnya kemanjuran. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapatkan
metode analitik yang sesuai untuk menentukan kemurnian adenovirus berdasarkan
pada konten pengotor yang terkait dengan produk. RP-HPLC digunakan untuk
membedakan antara partikel lengkap dan tidak lengkap berdasarkan profil protein.
Fase gerak adalah (A) 0,1% TFA dalam asetonitril 5% dan (B) 0,1% TFA dalam
99% asetonitril. Suhu kolom dan autosampler dipertahankan pada 45oC dan 4oC,
masing-masing. Laju aliran adalah 0,2 mL / menit dengan program gradien.
Kromatogram dipantau pada 280 nm. Metode yang diusulkan dapat digunakan
untuk menentukan kemurnian adenovirus.

Adenovirus (anggota keluarga Adenoviridae ) berukuran sedang (90-100

nm ), virus yang tidak berkembang (tanpa lapisan ganda lipid luar) dengan
nukleokapsid icosahedral yang mengandung genom DNA untai ganda. Nama
mereka berasal dari isolasi awal mereka dari kelenjar gondok manusia pada tahun
1953.

Mereka memiliki jajaran host vertebrata yang luas; pada manusia, lebih
dari 50 serotipe adenoviral yang berbeda telah ditemukan menyebabkan berbagai
penyakit , mulai dari infeksi saluran pernapasan ringan pada anak-anak (dikenal
sebagai flu biasa ) hingga penyakit multi-organ yang mengancam jiwa pada orang
dengan sistem kekebalan yang

Mikrograf elektron transmisi dari dua partikel adenovirus

Struktur

Adenovirus mewakili virus yang tidak dikembangkan yang terbesar yang

diketahui. Mereka dapat diangkut melalui endosom (yaitu, fusi amplop tidak
diperlukan). Virion juga memiliki "lonjakan" atau serat unik yang terkait dengan
setiap dasar penton kapsid (lihat gambar di bawah) yang membantu menempel
pada sel inang melalui reseptor pada permukaan sel inang . (Lihat Bagian
Replikasi di bawah ini untuk diskusi tentang beragam reseptor.)

Pada tahun 2010, para ilmuwan mengumumkan bahwa mereka telah memecahkan
struktur adenovirus manusia pada tingkat atom, membuat model resolusi tinggi
terbesar yang pernah ada. Virus ini terdiri dari sekitar 1 juta residu asam amino
dan beratnya sekitar 150 MDa . [8] [9]

Genom

Artikel utama: Genom Adenovirus

Diagram skematik dari genom adenovirus linier, menunjukkan gen Awal (E) dan
gen Akhir (L).

Genom adenovirus adalah DNA linear, non-segmented double-stranded

(ds) yaitu antara 26 dan 48 Kbp . Ini memungkinkan virus secara teoritis
membawa 22 hingga 40 gen . Meskipun ini secara signifikan lebih besar dari virus
lain dalam kelompok Baltimore , itu masih merupakan virus yang sangat
sederhana dan sangat bergantung pada sel inang untuk bertahan hidup dan
replikasi. Fitur yang menarik dari genom virus ini adalah ia memiliki terminal
protein 55 kDa yang terkait dengan masing-masing ujung 5 'dari linear dsDNA.
Ini digunakan sebagai primer dalam replikasi virus dan memastikan bahwa ujung-
ujung genom linier virus direplikasi secara memadai.

Replikasi

Adenovirus memiliki genom dsDNA linier dan mampu mereplikasi dalam

inti sel vertebrata menggunakan mesin replikasi inang.

Struktur adenovirus. 1 = pentom capsomeres 2 = hexon capsomeres, dan 3 =

genom virus (linear dsDNA)
Masuknya adenovirus ke dalam sel inang melibatkan dua rangkaian interaksi
antara virus dan sel inang. Sebagian besar tindakan terjadi di simpul. Masuk ke
dalam sel inang dimulai oleh domain tombol dari protein serat yang mengikat
reseptor sel. Dua reseptor yang saat ini didirikan adalah: CD46 untuk serotipe
adenovirus manusia kelompok B dan reseptor adenovirus coxsackievirus (CAR)
untuk semua serotipe lainnya. Ada beberapa laporan yang menyarankan molekul
MHC dan residu asam sialat yang berfungsi dalam kapasitas ini juga. Ini diikuti
oleh interaksi sekunder, di mana motif pada protein dasar penton (lihat capsomere
) berinteraksi dengan molekul integrin . Ini adalah interaksi co-reseptor yang
merangsang masuknya adenovirus. Molekul ko-reseptor ini adalah αv integrin .
Ikatan dengan αv integrin menghasilkan endositosis partikel virus melalui lubang
yang dilapisi clathrin . Lampiran pada integrin αv merangsang pensinyalan sel dan
dengan demikian menginduksi polimerisasi aktin yang mengakibatkan masuknya
virion ke dalam sel inang dalam endosom . [10]

Setelah virus berhasil masuk ke dalam sel inang, endosom mengasamkan, yang
mengubah topologi virus dengan menyebabkan komponen kapsid membubarkan
diri. Kapsid tidak stabil dan protein VI dilepaskan dari kapsid. [11] Perubahan-
perubahan ini, serta sifat beracun dari penton, menghancurkan endosom,
menghasilkan pergerakan virion ke dalam sitoplasma. Dengan bantuan
mikrotubulus seluler, virus diangkut ke kompleks pori nuklir, di mana partikel
adenovirus membongkar. DNA virus kemudian dilepaskan, yang dapat memasuki
nukleus melalui pori nuklir . [12] Setelah itu, DNA bergabung dengan molekul-
molekul histon . Dengan demikian, ekspresi gen virus dapat terjadi dan partikel
virus baru dapat dihasilkan.

Siklus hidup adenovirus dipisahkan oleh proses replikasi DNA menjadi dua fase:
fase awal dan fase akhir. Dalam kedua fase, transkrip primer yang secara alternatif
disambungkan untuk menghasilkan mRNA monokistronik yang kompatibel
dengan ribosom inang dihasilkan, memungkinkan produk diterjemahkan .

Gen awal bertanggung jawab untuk mengekspresikan terutama protein non-

struktural, regulator. Tujuan dari protein ini ada tiga: untuk mengubah ekspresi
protein inang yang diperlukan untuk sintesis DNA ; untuk mengaktifkan gen virus
lain (seperti DNA polimerase yang disandikan-virus); dan untuk menghindari
kematian dini sel yang terinfeksi oleh pertahanan host-imun (penyumbatan
apoptosis , penyumbatan aktivitas interferon , dan penyumbatan translokasi dan
ekspresi MHC kelas I ).

Beberapa adenovirus dalam kondisi khusus dapat mengubah sel menggunakan

produk gen awal mereka. E1A (pengikat protein penekan tumor Retinoblastoma )
telah ditemukan untuk mengabadikan sel primer secara in vitro yang
memungkinkan E1B (pengikat tumor p53 ) untuk membantu dan secara stabil
mengubah sel. Namun demikian, mereka bergantung satu sama lain untuk berhasil
mengubah sel inang dan membentuk tumor .
Replikasi DNA memisahkan fase awal dan akhir. Setelah gen awal telah
membebaskan protein virus yang memadai, mesin replikasi, dan substrat replikasi,
replikasi genom adenovirus dapat terjadi. Sebuah protein terminal yang secara
kovalen terikat pada ujung 5 'dari genom adenovirus bertindak sebagai primer
untuk replikasi. DNA polimerase virus kemudian menggunakan mekanisme
perpindahan untai, yang bertentangan dengan fragmen Okazaki konvensional
yang digunakan dalam replikasi DNA mamalia, untuk mereplikasi genom.

Fase akhir dari siklus hidup adenovirus difokuskan pada produksi protein
struktural dalam jumlah yang cukup untuk mengemas semua bahan genetik yang
dihasilkan oleh replikasi DNA. Setelah komponen virus berhasil direplikasi, virus
tersebut dikumpulkan menjadi cangkang protein dan dilepaskan dari sel sebagai
hasil dari lisis sel yang disebabkan oleh virus.

Pengaktifan kembali multiplisitas

Adenovirus mampu mengaktifkan kembali multiplisitas (MR) [13] (Yamamoto dan

Shimojo, 1971). MR adalah proses di mana dua, atau lebih, genom virus yang
mengandung kerusakan mematikan berinteraksi dalam sel yang terinfeksi untuk
membentuk genom virus yang layak. MR tersebut diperlihatkan untuk adenovirus
12 setelah virion diiradiasi dengan sinar UV dan dibiarkan menjalani beberapa
infeksi sel inang. [13] Dalam sebuah ulasan, banyak contoh MR dalam berbagai
virus dijelaskan, dan disarankan bahwa MR adalah bentuk umum dari interaksi
seksual yang memberikan keuntungan kelangsungan hidup dari perbaikan
rekombinasi kerusakan genom. [14]

Epidemiologi

Transmisi

Adenovirus sangat stabil terhadap zat kimia atau fisik dan kondisi pH yang buruk,
memungkinkan kelangsungan hidup yang lama di luar tubuh dan air. Adenovirus
tersebar terutama melalui tetesan pernapasan, namun mereka juga dapat
disebarkan melalui rute tinja . Penelitian ke dalam mekanisme molekuler yang
mendasari transmisi adenoviral memberikan bukti empiris yang mendukung
hipotesis bahwa reseptor seluler untuk adenovirus dan coxsackievirus (CAR)
diperlukan untuk mengangkut adenovirus ke jenis sel naif / progenitor tertentu. [15]

Manusia

Artikel utama: Infeksi Adenovirus

Manusia yang terinfeksi adenovirus menunjukkan berbagai respons, mulai dari

tidak ada gejala sama sekali hingga infeksi parah yang khas dari serotipe
Adenovirus 14 .
Hewan

Lihat juga: Vaksin DA2PPC

Bat adenovirus TJM (Bt-AdV-TJM) adalah spesies baru dari genus

Mastadenovirus yang diisolasi dari Myotis dan Scotophilus kuhlii di Cina. [16] Ini
adalah virus DNA untai ganda tanpa urutan RNA. Hal ini paling terkait erat
dengan AdVs shrew dan canine pohon. [17]

Dua jenis adenovirus anjing dikenal, tipe 1 dan 2. Tipe 1 (CAdV-1) menyebabkan
infeksi hepatitis anjing , penyakit yang berpotensi fatal yang melibatkan vasculitis
dan hepatitis . Infeksi tipe 1 juga dapat menyebabkan infeksi pernapasan dan
mata. CAdV-1 juga mempengaruhi rubah (Vulpes vulpes, Vulpes lagopus) dan
dapat menyebabkan kecuali hepatitis juga ensefalitis. Canine adenovirus 2
(CAdV-2) adalah salah satu penyebab potensial batuk kandang . Vaksin inti untuk
anjing termasuk CAdV-2 hidup yang dilemahkan, yang menghasilkan kekebalan
terhadap CAdV-1 dan CAdV-2. CAdV-1 pada awalnya digunakan dalam vaksin
untuk anjing, tetapi edema kornea adalah komplikasi umum. [18]

Squirrel adenovirus (SqAdV) dilaporkan menyebabkan enteritis pada tupai merah

di Eropa, sementara tupai abu-abu tampaknya resisten. SqAdV paling dekat
hubungannya dengan adenovirus babi guinea (GpAdV).

Adenovirus dalam Reptil kurang dipahami, tetapi penelitian saat ini sedang
berlangsung.

Adenovirus juga diketahui menyebabkan infeksi pernapasan pada kuda , sapi ,

babi , domba , dan kambing . Equine adenovirus 1 juga dapat menyebabkan
penyakit fatal pada anak kuda Arab yang immunocompromised, yang melibatkan
pneumonia dan penghancuran jaringan kelenjar pankreas dan saliva . [18] Tupaia
adenovirus (TAV) (Shrew pohon adenovirus 1) telah diisolasi dari shrews pohon.

Otarine adenovirus 1 telah diisolasi dari singa laut (Zalophus californianus). [19]

Adenovirus unggas dikaitkan dengan banyak kondisi penyakit pada unggas rumah
tangga seperti hepatitis tubuh inklusi, sindrom hidroperikardium, sindrom
penurunan telur, puyuh bronkitis, erosi gizzard dan banyak kondisi pernapasan.
Mereka juga telah diisolasi dari Layang-layang Hitam liar (Milvus migrans). [20]

Adenovirus monyet Titi diisolasi dari koloni monyet. [21]

Penelitian F1000
Mekanisme patogenesis adenovirus yang muncul [versi
1; wasit: 2 disetujui]
James Cook, Jay Radke
Divisi Penyakit Menular, Departemen Kedokteran, Pusat Medis Universitas
Loyola, 2160 South First Avenue, Maywood, IL 60153,
Amerika Serikat
Abstrak
Wabah infeksi adenovirus manusia secara berkala dapat menyebabkan
penyakit yang parah di Indonesia orang tanpa kondisi predisposisi yang diketahui.
Alasan untuk ini meningkat patogenisitas virus tidak pasti. Adenovirus terus
menerus mengalami mutasi selama sirkulasi dalam populasi manusia, tetapi
terkait fenotipik perubahan virus jarang terdeteksi karena jarangnya terjadi wabah
dan studi biologi terbatas dari strain yang muncul. Mutasi dan rekombinasi
genetik telah diidentifikasi dalam jenis baru ini. Namun, keterkaitan antara
perubahan genetik ini dan peningkatan patogenisitas kurang dipahami. Telah
diamati baru-baru itu perbedaan imunopatogenesis yang diinduksi virus dapat
dikaitkan dengan perubahan ekspresi gen virus non-mutan terkait dengan
perubahan viral
modulasi inang respon imun bawaan. Studi hewan kecil awal menunjukkan bahwa
perubahan dalam ekspresi gen virus ini dapat dikaitkan dengan imunopatogenesis
ditingkatkan . Bukti yang tersedia menunjukkan in vivo hipotesis bahwa ada
ambang kritis ekspresi gen virus tertentu yang menentukan keberlanjutan
penularan virus pada manusia populasi dan peningkatan imunopatogenesis. Studi
tentang ini kemungkinan akan memerlukan perpanjangan analisis strain virus
wabah dari a fokus berbasis sequencing untuk studi biologi tentang hubungan
antara virus ekspresi gen dan respons patogen. Kemajuan di bidang ini akan
membutuhkan peningkatan koordinasi di antara organisasi kesehatan masyarakat,
diagnostik laboratorium mikrobiologi, dan laboratorium penelitian untuk
mengidentifikasi, katalog, dan secara sistematis mempelajari perbedaan antara
prototipe dan galur virus yang muncul yang menjelaskan peningkatan
patogenisitas yang dapat terjadi selama klinis wabah