SPEKTROFOTOMETER kalibrasi instrumen dengan standar

konsentrasi yang diketahui

SERAPAN ATOM
 TEORI

 ISI  SUMBER CAHAYA

- Prinsip AAS - Hollow Cathode Lamp adalah sumber
- Instrumentasi radiasi paling umum di AAS
- Aplikasi - Berisi anoda tungsten dan katoda
- Eksperimen silinder berlubang yang terbuat dari
elemen yang akan ditentukan, disegel
dalam tabung kaca yang diisi dengan
 PENDAHULUAN gas inert (neon atau argon)
- Spektrofotometer Serapan Atom adalah - Setiap elemen memiliki lampu
teknik yang sangat umum untuk spesifik untuk analisis
mendeteksi logam dan metaloid dalam
sampel  HOLLOW CATHODE LAMP
- Sangat handal dan mudah digunakan
- Dapat menganalisis lebih dari 62 elemen  NEBULIZER
- Dapat mengukur konsentrasi logam - Menyedot sampel cairan pada tingkat
dalam sampel yang terkontrol
- Membuat semprotan aerosol yang
 SEJARAH baik untuk dimasukkan ke dalam api
- Spektrofotometer Serapan Atom - Mencampurkan aerosol, bahan bakar,
pertama kali dibangun oleh ilmuwan dan oksidan secara menyeluruh ke
CSIRO Alan Walsh pada tahun 1954 dalam api

 PRINSIP
- Teknik ini menggunakan prinsip bahwa
atom bebas (gas) yang dihasilkan dalam
alat penyemprot dapat menyerap radiasi
pada frekuensi tertentu
- Spektroskopi Serapan Atom
mengkuantifikasi penyerapan atom pada
keadaan dasar dalam bentuk gas
- Atom-atom tersebut menyerap sinar
ultraviolet atau cahaya tampak dan
membuat transisi ke tingkat energi
elektronik yang lebih tinggi. Konsentrasi
analit ditentukan dari jumlah penyerapan
- Pengukuran konsentrasi biasanya
ditentukan dari kurva kerja setelah
 ATOMIZER
- Elemen yang akan dianalisa harus
dalam bentuk atom
- Atomisasi adalah pemisahan partikel
menjadi molekul individu dan
memecah molekul menjadi atom,
dilakukan dengan membakar analit ke
suhu tinggi dalam tungku api atau
grafit (flame or graphite furnace)
 FLAME ATOMIZER
- untuk membuat nyala api, perlu
mencampur gas oksidan dan gas
bahan bakar
 - yang paling sering digunanakan untuk pembacaan, atau selanjutnya
adalah udara-asetilena atau nyala dimasukkan ke stasiun data untuk
api oksida-asetilena dicetak dengan format yang diminta
- sampel cair biasanya
menggunakan flame atomizer  KURVA KALIBRASI
- Kurva Kalibrasi digunakan untuk
 GRAPHITE TUBE ATOMIZER menentukan konsentrasi unsur yang
- Menggunakan tungku tidak diketahui dalam suatu larutan.
dilapisi grafit untuk - Instrumen dikalibrasi menggunakan
menguapkan sampel beberapa konsentrasi yang diketahui
- Dalam sampel GFAAS, - Absorbansi setiap larutan diketaui,
sampel disimpan dalam diukur dan kemudian kurva kalibrasi
tabung dilapisi grafit kecil konsentrasi vc absorbansi diplot
yang kemudian dapat - Larutan sampel dimasukkan kedalam
dipanaskan untuk instrumen dan absorbansi sampel dalam
menguapkan dan larutan ini diukur
menyemprotkan analit - Konsentrasi elemen yang tidak diketahui
- Tabung grafit dipanaskan kemudian dihitung dari kurva kalibrasi
menggunakan catu daya arus
tinggi  APLIKASI
- Penentuan sejumlah kecil logam (timbal,
 MONOKROMATOR merkuri, kalsium, magnesium, dll)
- Bagian ini sangat penting dalam AAS, sebagai berikut :
digunakan untuk memisahkan ribuan  Studi Lingkungan : air minum, air
garis laut, tanah
- Monokromator digunakan untuk  Industri makanan
memilih panjang gelombang cahaya  Industri farmasi
tertentuu yang diserap oleh sampel dan
untuk mengecualikan panjang
gelombang lainnya
- Pemilihan cahaya tertentu
memungkinakan penentuan elemen yang
dipilih

 DETEKTOR
- Cahaya yang dipilih oleh monokromator
diarahkan ke detektor yang biasanya
berupa tabung photomultiplier yang
fungsinya adalah mengubah sinyal
cahaya menjadi sinyal listrik yang
sebanding dengan intensitas cahaya
- Pemrosesan sinyal listrik dipenuhi oleh
penguat sinyal. Sinyal dapat ditampilkan
 PEDOMAN UNTUK PEMECAHAN
MASALAH DAN PEMELIHARAAN
SISTEM AA
 Masalah Umum AA yang Dilaporkan Oleh
Pelanggan
 Sensitifitas
- Sensitifitas lebih buruk daripada
sebelumnya
- Saya memiliki aplikasi baru dan saya
tidak bisa mendapatkan sensitifitas
yang saya butuhkan
- Kenapa saya tidak bisa mendapatkan
instrumen untuk memenuhi batas
deteksi yang dipublikasikan?
 Penyebab Presisi Nyala Api Buruk
 Presisi
- Kepekaan dapat diterima tetapi
presisi mengerikan
 Kebisingan Tinggi
- Bisa mendapatkan “jawaban yang
benar”, tetapi sinyal yang sangat
bising
- Ini juga memberikan presisi yang
buruk
 Penyebab Kebisingan Tinggi
 Akurasi
- Instrumen tidak memberikan hasil
yang “benar”
 Sampel Buruk Keseluruhan
- Seluruh instrumen perlu ditingkatkan
- Blok burner terlalu cepat
 Penyebab Sensitifitas Nyala Api Buruk
 Sistem Flame Atomisasi
- Nebulizer diblokir
- Burner kotor (mengurangi
panjangjalur)
- Impact bead rusak
 Optimisasi
- Optimisasi buruk
- Pengaturan optik – menggunakan
panjang gelombang/slit yang benar
- Kesalahan tipe burner
- Gangguan
 Preparasi Standar dan Sampel
- Tingkat kosong tinggi
- Persiapan standar benar?
- Persiapan sampel benar? –penekan
ionisasi
- Tekanan gas asetilen rendah –
akumulasi aseton
 Sistem flame atomisasi
- Pembakaran kotor ( api compang
camping )
 Optimalisasi
 Preparasi standar dan sampel
- Opimalisasi yang buruk
- Kemurnian gas
 Sistem flame atomisasi
- Burner kotor
-
 Optimalisasi
 Preparasi standar dan sampel
Tips sistem atomisasi flame - Jenis burner mengubah panjang jalur
( untuk elemen udara/asetilen )
Lakukan:
Periksa atomisasi setiap analisa
MEMBERSIHKAN SISTEM ATOMISASI
Periksa pengambilan nebulizer
Membersihkan burner
Sesuaikan dengan manik
- Semir dengan semir logam seperti
Periksa pembacaan blanko
brasso
Bilas antara sampel dan diakhir proses
Membersihkan spary chumber
Bilas harus sesuai dengan maatriks sampel
- Cuci dalam larutan detergen
Bersihkan burner/spary chumber secara - Periksa kondisi manik dampak dan
teratur diatur

Periksa kondusi dampak bead Melepas penyumbatan nebulizer

Ikuti rekomendasi di buku SOP - Bongkar sepenuhnya dan cuci dengan

deterjen
- Pasang kembali dan diuji
Jangan lakukan:
Asumsikan sistem masih dioptimalkan PENGATURAN DAMPAK BEAD
Asumsikan laju aliran nebulizer sama - Longgarkan sekerup
Gunakan blanko air - Putar pengatur eksternal sepenuhnya
searah jarum jam
Tunggu sampai tersumbat sebelum - Atur posisi bead ( 2 pengaturan kritis
dibersihkan )
1. Bead harus dipusatkan didepan
ventur
TIPS KESELARASAN BURNER 2. Jarak antara bead dan venturi
Burner harus 0,1 mm ( ketebalan selebar
kertas )
- Posisi burner harus dioptimalkan ( - Kencangkan pengatur untuk
posisi vertikal, horiozntal dan rotasi ) mengunci bead ditempat
- Gunakan “ area target “ pada kartu
penyelarasan burner untuk
memastikan sinar sejajar dengan slot FLAME ATOMISASI
burner
- Sesuaikan tinggi burner saat Untuk sebagian besar aas:
menghirup standar dan - Pasang mixing paddles
mengoptimalkan sinyal maksimal - Optimalkan dampak bead untuk
sensitifitas terbaik
 - Gunakan tabung kapiler bore sempit
Untuk sensifitas AAS tertinggi
- Lepaskan bantalan pencampuran
- Sesuaikan bead dampak lebih jauh
dari nebulizer
- Gunakan tabung kapiler bore lebar (
tingkat penyerapan tinggi )
Untuk sampel TDS yang tinggi :
- Paskan dengan dayung pencampur
- Sesuaikan manik dampak ½ ke 1 tum
searah jarum jam ( menuju nebulizer
) dari posisi sensisifitas optimal
- Gunakan tubing kapiler bore lebar (
untuk mengurangi kemungkinan
penyumbatan )
REKOMENDASI YANG DIANJURKAN
DIAKHIR ASPIRASI
1. Menyedot air suling beberapa menit
sebelum mematikan api
2. Biarkan burner menjadi dingin
3. Lepaskan burner dan bersihkan
dengan mengalirkan air ke dalamnya
4. Keringkan burner dengan mengocok
5. Tuangkan 500 mL air ke dalam spary
chumber melalui soket burner
6. Ganti burner
7. Kosongkan tempat limbah
PERFORMA FLAME AA – MANFAAT
Fleksibel, kemudahan penggunaan dan
performa flame yang unggul
Performa merdu berarti
- Sensitifitas api tertinggi > 0,9 abs
untuk 5 mg/L Cu
- Presisi terbaik < 0,5 % RSD
menggunakan pembacaan 10 x 5
detik
- Pengoprasian yang diperpanjang
dengan sampel yang sulit
- Tidak ada selang gas longgar dan
tidak ada alat yang diperlukan untuk
koneksi gas
- Pengubahan cepat ke operasi tungku (
manual - < 30 detik )
PENYEBAB SENSITIFITAS TUNGKU
BURUK AAS
 Tungku workhead
- Injeksi yang terlewatkan
- Tabung yang digunakan rusak
- Elektroda salah dipasang
 Optimalisasi
- Optimalisasi yang buruk(kondisi
pengeringan )
- Workhead tidak selaras
- Pengaturan optik – menggunakan
panjang gelombang yang benar?
- Tidak ada modifer/ modifer yang
diguanak salah
- Penggunaan nitrogen sebagai gas
inert
 Preparasi standar dan sampel
- Tidak mengandung asam dalam
larutan
- Tingkat level blanko
- Standar disiapkan dan disimpan
dengan benar?
- Sampel disiapkan dengan benar?
PENYEBAB TUNGKU BURUK
 Tungku workhead
- Injeksi yang terlewatkan
- Kapiler pengeluaran kotor
 - Menggunakan tabung grafit non-
agilen
- Kontak listrik yang buruk
 Optimalisasi
- Kemurnian gas
- Kehilangan langkah pendinginan
- Optimalisasi yang buruk
- Ketinggian pengeluaran yang salah
 Preparasi standar dan sampel
- Tidak ada asam dalam larutan
- Pencernaan tidak lengkap
PENYEBAB KEBISINGAN TINGGI
DITUNGKU AA
 Tungku workhead
- Jendela kotor di workhead
- Penggunaan platform
 Optimalisasi
- Tingkat latar belakang tinggi
- Tingkat absorbansi tinggi
- Arus operasi salah
- Workhead tidak sejajar
- Optimalisasi buruk – terutama lampu
HC
- Optikal kotor
- Kemurnian gas
 Preparasi standar dan sampel
- Pencernaan tidaksempurna – partikel
dalam larutan
TIPS SISTEM TUNGKU AA
Dilakukan :
- Periksa optimalisasi setiap analisa
- Periksa ketinggian pengeluaran
- Pastikan larutan pembilas memiliki
10 tetes HNO3 + 5 tetes triton X-100
- Menghilangkan residu dari kapiler
pengeluaran
- Periksa tabung grafit
- Periksa pembacaan blanko
- Bersihkan workhead secara teratur
- Periksa kondisi komponen grafit
- Ikuti rekomendasi SOP
Jangan dilakukan:
- Asumsikan sistem telah dioptimalkan
- Asumsikan tinggi pengeluaran adalah
sama
- Gunakan pembilasan air sederhana
- Mulai analisis dengan ujung kapiler
kotor
- Mulai analisis dengan tabung didekat
akhir masa pakai
PENYELARASAN WORKHEAD
 Tungku workhead
- Posisi workhead harus dioptimalkan (
ingin sinar melewati pusat tabung
grafit )
- Luruskan lampu terlebih dahulu (
tanpa workhead) kemudian letakkan
workhead diposisi dan sejajarkan
 Pengaturan dispenser sampel
- Sesuaikan kedalam injeksi
dengancermat
- Mudah dengan kamera tungku
TIPS SISTEM TUNGKU AA –
MENGATUR KEDALAMAN INJEKSI
- Ujung kapiler harus tetap
berhubungan dengan larutan selama
pengeluaran
- Mengurangi tinggi pengeluaran jika
sampel menyebar karena tegangan
permukaan rendah
- Pastikan tidak ad cairan di bagian luar
kapiler setelah pengeluaran
- Pasttikn tidak ada cairan didalam
ujung kapiler setelah pengeluaran
 - Sampel harus tetap sebagai jatuh di Sampel mendesis atau memerciki selama
tengah tabung tahap kering?
-dengarkan suara
PENGKONDISIAN TABUNG - gunakan cermin/ video tungku u/
memantau pengeringan sampel
Mengapa mengkondisikan tabung sebelum
digunakan?
- Membantu menghilangkan - SRM wizard mengoptimalisasikan
kontaminasi residu tungku
- Dengan lembut menempatkan tabung - Mengoptimalisasikan absorbansi
baru di sebagai fungsi dari pengerasan dan
1. Tempat penting saat menentukan suhu atomisasi
konsentrasi dekat batas deteksi - Secara otomatis membuat metode
2. Tempat penting dengan beberapa menggunakan kondisi yang
matriks kompleks disarankan
- Penting saat menggunakan pengubah - Mengurangi persyaratan pelathian
1. Membantu membangun lapisan untuk pengguna baru
didalam tabung
2. Meningkatkan efesiensi
pengubah MENGURANGI SENSITIVITAS
- Efesiensi meningkatkan kemampuan
reproduksi Mungkin diperlukan karena sensitivitas
teknik ini:
- Beralih ke panjang gelombang
Proses yg direkomendasikan alternatif
( panjang gelombang yangkurang
- Gunakan fasilitas “ kondisi tabung “ (
sensitif)
atau sebaliknya, tabung api 5-10 kali
- mengurangi volume sampel
menggunakan reagen kosong atau
- menggunakan laju ramp yang lebih
sampel yang representatif )
lambat untuk atomisasi
( memperluas puncak selama
atomisasi )
PARAMETER METODE
- menggunakan aliran gas rendah
Apa yang diperiksa? selama langkah atomisasi

Parameter tungku
- Setel suhu dan waktu pengeringan
yang tepat ( 2-3 detik )
- Optimalkan suhu menggunakan SRM
optimalisasi
- Pastikan aliran gas OFF sesaat
sebelum atomisasi
TIPS UNTUK MENINGKATKAN - segera periksa kembali setelah
PREPARASI STANDAR digunakan
- pastikan standar yang dibeli masih
dalam tanggal masa pakai
sumber kontaminasi umum lainnya:
- gunakan pipet yang terkalibrasi dan
LT kelas A untuk pengenceran - air regaen
- secara berkala,periksa keakuratan dan - gelas bersih?
reproduktifitas pipet anda - Debu dilaboratorium
- gunakan air deionisasi ( tipe 1 – - Sarung tangan bubuk ( khusus Zn )
konduktivitas > 18 Md/cm3 ) - pipet
- nilai yang lebih rendah mungkin -jangan masukkan pipet ke larutan
memiliki kontaminasi asam
-tip berwarna dapat meningkatkan
berapa konsentrasi mereka?
kontaminasi( cu, fe, zn, cd )
Konsentrasi standar rendah memiliki
kehidupan yang terbatas:
TIPS UNTUK MENINGKATKAN
- siapkan standar konsentrasi ppb
AKURASI HASIL
setiap hari dari konsentrasi tertinggi
- siapkan standar konsentrasi rendah - persiapan sampel
perminggu -apakah pengenceran yang paling
tepat digunakan?
penyimpannanya?
-apakah semua analit ( secara
- menstabilkan dengan asam _ PH rendah kuantitatif ) dapat diproduksi dan
dilarutkan?
- pembuluh plastik memastiakn stabilitas
yang lebih baik

TIPS UNTUK MENGURANGI TIPS MEMBERSIHKAN OPTIK KOTOR

KONTAMINASI
Kontaminasi dapat berasal dari apapun yang
bersentuhan dengan sampel anda selama
penyimpanan, pengenceran dan analisis
 periksa kemurnian reagen
- selalu beli reagen terbaik
- selalu periksa sertifikat analisis untuk
kadar tinggi
- perhatikan ketika membeli dalam
jumlah besar:
-masih dalam masa pakai