Jawetz, Melnick & Adelberg’s Medical Microbiology 27th edition. Mc Graw Hill: 2016.
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019. 2
Struktur dinding sel
• Streptococci
→ memiliki dinding sel yang mengandung peptidoglikan dan theicoic acid
• >> Streptococci KECUALI grup viridans
→ memiliki 1 grup C Carbohydrate (polisakarida)
Polisakarida
→ antigen
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Lancefield Classification
• Ekstraksi C carbohydrate dari dinding sel → Soluable antigen
→ tes serologi : antiserum dari berbagai grup C carbohydrate
5
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Gambaran hemolisis
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Diagnosis laboratorium
Ditemukan Coccus Gram Positif
4 langkah klasifikasi :
1.Gambaran hemolisis pada Blood Plate Agar(α-β-∂-hemolytic)
2.Pengelompokan Serologis (Lancefield classification)
3.Karakteristik fisiologis
4.Karakteristik biokimia
9
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Karakteristik fisiologik
Dibagi menjadi 4 grup :
❑ Pyogenic Streptococci :
❑ produksi pus → >> Streptococcus β-hemolitikus
❑ Lactococci :
❑ non hemolitikus dengan Lancefield group N antigen
❑ ditemukan pada produk susu sapi
❑ Enterococci :
❑ normal biota saluran cerna manusia
❑ Viridans Streptococci :
❑ normal biota saluran nafas manusia
12
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Sensitifitas Optochin
• Disk Optocin → ethylhydrocuprein hydrochloride
• Metode :
– Koloni dari kultur murni (α-hemolytic Streptococcus)
distreak pada SBA
– Letakan Optochin disk pada plate
– Inkubasi pada suhu 35-36°C, selama semalam pada
incubator CO2
→ zone inhibisi :
→ disk 6 mm (5μg optochin) : ≥14 mm
→ disk 10 mm (5μg optochin : ≥ 10 mm
15
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
PYR hydrolysis test
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Bile Esculin Test
Salt Tolerance Test
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Identifikasi non kultur
Immunoassays
• Identifikasi Streptococci dengan deteksi antigen spesifik dari koloni
atau dari spesimen langsing ( swab tenggorok)
• Ekstrak C carbohydrate dari koloni melalui dilusi asam /
pemanasan : antigen spesifik grup → capillary precipitin test /
slide agglutination test
• Capillary precipitin test :
• Antiserum + solution containing the streptococcal extract selama 5-10menit →
presipitat putih (Reaksi positif)
Patricia M.Tille. Bailey & Scott’s. Diagnostic Microbiology. Thirteenth Edition. Elsevier : 2014
23
Patogenesis & Spektrum penyakit infeksi
24
Patricia M.Tille. Bailey & Scott’s. Diagnostic Microbiology. Thirteenth Edition. Elsevier : 2014
Patogenesis & Spektrum penyakit infeksi
Patricia M.Tille. Bailey & Scott’s. Diagnostic Microbiology. Thirteenth Edition. Elsevier : 2014
Streptococcus pyogenes
• Termasuk Streptococcus β hemolyticus, Lancefield group A
( GAS )
• Fakultatif anaerob, tidak motile, tidak berspora
• Kolonisasi : tenggorokan & kulit → sumber transmisi primer
• Transmisi :
– Langsung : orang ke orang
– Tidak langsung : droplet
26
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2
S. pyogenes
Faktor virulensi
1. M protein
– Faktor virulensi paling esensial
– Berikatan dengan peptidoglycan, sampai permukaan sel bakteri
– Dikode oleh gene emm
– Menyebabkan sel streptococcus resisten terhadapa fagositositosis
– Berperan dalam penempelan sel bakteri terhadap mukosa sel host
– Memiliki 80 serotype → M1 (emm1), M2 (emm2), dst
– M1 serotype → paling sering pada pharyngitis
– Resistensi infeksi S. pyogenes : adanya antibodi spesifik terhadap
M protein
→ individu dengan antibodi M5 dilindungi dari infeksi S. pyogenes
dengan M5 protein tetapi tidak terlindungi dari serotype
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019 27
S. pyogenes
Faktor virulensi
2. Fibronectin-binding protein (protein F) memediasi
attachment
3. Lipoteichoic acid Streptococci pada
epitel sel host
Menempel pada protein di
permukaan sel bakteri
• Streptolysin O (SLO) :
– Bersifat sangat immunogenic
– Berperan terjadinya hemolysis pada SBA
yg diinkubasi anaerob
– O → hemolysin labil terhadap oksigen
– Melisiskan leukosit, platelet, RBC
– Px terinfeksi → antibodi (antistreptolysin O
/ASO) → test untuk infeksi S. pyogenes
• Streptolysin S :
– Non immunogenic
– Stabil terhadap oksigen
– Berperan terjadinya Hemolisis disekeliling
koloni yang diinkubasi aerob
30
S. pyogenes
• Streptokinase/Fibrinolisin :
– Berperan melisiskan fibrin clot
Streptokinase bakteri pada plasminogen :
plasminogen → plasmin (protease) aktif
→melisiskan fibrin clot.
• Dnase :
– 4 DNases: A, B, C, and D
– Antigenik → antibody dapat dideteksi setelah infeksi
• Erythrogenic toxin/Streptococcal
pyrogenic exotoxins :
– menyebabkan Scarlet fever (red spreading rash)
– SUPERANTIGEN
– 4 tipe exotoxin :SpeA, SpeB, SpeC dan SpeF
→interaksi dengan MHC kls II pada APC & rantai β reseptor
sel T →stimulasi proliferasi Sel T aktivasi poliklonal
→ pelepasan IL-1, TNF, sitokin lain
S. pyogenes
Klinis Infeksi
• Bacterial Pharyngitis and Tonsilitis
(Strep throat)
– Manifestasi S. pyogenes paling sering >>
anak2 antara 5-15 th
– Masa inkubasi : 1-4 hr
– Klinis : 3-5 hr
• Skin/Pyodermal Infections
→ impetigo, cellulitis, ersipelas, luka infeksi,
arthritis
33
S. pyogenes
• Scarlet fever
– Erythrogenic toxin/Streptococcal
pyrogenic exotoxin → Ruam, lidah
stroberi, deskuamasi kulit
• Necrotizing fascilitis
• Rheumatic fever
• Glomerulonefritis akut
• Streptococcus toxic shock
syndrome
34
S. pyogenes
Diagnosis laboratorium
• PERSIAPAN SAMPEL → swab pharynx
• Transport media tidak dibutuhkan pada kondisi normal
karena tahan pengeringan & dapat recovery kembali
• SBA plate → koloni : kecil, transparan, hemolysis jelas
• Gram : (+) rantai pendek.
– Spesimen kulit & upper respiratory → nilai diagnostic kecil
karena >> gram positif cocci sebagai flora normal
• Identifikasi : Tes Biokimia & tes Serologi
• Tes serologi
– ASO
– Anti-Dnase
– Anti streptokinase
– Titer antihialuronidase
35
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
S. pyogenes
• Key tests :
Bacitracin succeptibility ( sensitive) & PYR test (+)
• Bila spesimen bukan dari swab pharyngx (blood or sputum)
→ tes tambahan : CAMP test, hippurate hydrolysis, bile
esculin test, growth in 6.5% sodium chloride (NaCl) broth
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
S. agalactiae
Streptococcus agalactiae
• Lancefield Group B (GBS) → Antigen spesifik grup B
• Struktur antigen : acid-stable polysaccharide pada dinding
sel
– Serotypes Ia, Ib
– mengandung residu pada sialic acid
→ weakly immunogenic dan hambat aktivasi jalur
komplemen alternatif
→ Deteksi : Tes presipitin
• Habitat/reservoir : normal microbiota (female genital tract &
lower GIT)
• 10-30% ibu hamil → kolonisasi
37
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
S. agalactiae
• Transmisi:
– Kontak langsung (mother in utero/saat persalinan)
– infeksi nosokomial(unwashed hands)
38
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
S. agalactiae
Faktor virulensi
❑ Kapsul polisakarida mengandung Sialic Acid :
→ Mencegah fagositosis, tidak efektif setelah opsonisasi
❑ Hemolysin
❑ CAMP factor
❑ Neuraminidase
❑ Dnase
❑ Hyaluronidase
❑ Protease
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
39
S. agalactiae
Klinis Infeksi
Neonatus: Dewasa :
1. Pneumonia 1. Pneumonia
2. Sepsis 2. Bacteremia
3. Meningitis 3. Meningitis
4. Endocarditis
5. UTI
6. Skin & Soft tissue
infection
7. Osteomyelitis
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
S. agalactiae
Diagnosis laboratorium
1. SBA → koloni : grayish white, mucoid, small zone of β-
hemolysis
2. Gram :
– Spesimen langsung : gram (+) kokus, rantai pendek
– Koloni : gram (+) kokus, rantai panjang
3. Identifikasi : Tes biokimia
Hippurate hydrolysis (bacitracin) & CAMP
→ diferensiasi GBS dengan Streptococcus grup β-hemolysis
4. Tod-Hewitt broth → deteksi GBS pada wanita hamil
5. BD MAX GBS assay
6. Chromogenic agar
7. StreptB Carrot Broth (SCB)
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2
41
S. agalactiae
42
S. agalactiae
Streptococcus
pneumoniae
• Disebut juga Pneumococcus
• Termasuk grup Streptococcus mitis
• Kolonisasi : upper respiratory tract (anak2 >>)
• Transmisi :
– Kontak langsung (person to person with contaminated
respiratory secretion)
• Butuh nutrisi kompleks
• Sebagian isolate tumbuh CO2 >> utk tumbuh
• Autolisis → S.pneumonia tidak dapat bertahan lama
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Struktur antigen
• Dinding sel mengandung antigen : substansi C
– β Globulin dalam serum : CRP (C Reaktif Protein)
bereaksi dgn substansi C → presipitat.
• Kapsul polisakarida → antigen
– Identifikasi : Neufield test → Quelung reaction
(kapsul membengkak)
S. pneumoniae
Faktor virulensi
1. Kapsul polisakarida
2. Hemolysin
3. Immunoglobulin Protease
4. Neuraminidase
5. Hyaluronidase
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
S. pneumoniae
Klinis infeksi
1. Pneumonia
– No. 1 penyebab Bacterial Pneumonia (CAP) terutama
pada usia tua & penyakit dasar
– Harus ada di Nasopharyngx
– Biasanya bukan infeksi primer tapi hasil gangguan
barrier pertahanan normal.
– Kondisi predisposisi, mis : alcoholism, anesthesia,
malnutrisi dan infeksi virus di sal.nafas atas.
2. Otitis Media
– Isolat >> → anak2 < 3 thn dengan recurrent Otitis Media
3. Meningitis
4. Endokarditis
5. Peritonitis
6. Bacteremia
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
S. pneumoniae
Diagnosis Laboratorium
1. Gram: coccus gram positif, single/diplococcus/rantai
pendek
2. Pewarnaan kapsul → Tes Neufeld
3. Media :
– BHI agar, Trypticase soy agar with 5% SBA,
Chocolate agar
→ Koloni SBA:
▪ zona α hemolysis yg lebar pada SBA yg mengelilingi koloni
▪ Kultur muda memiliki gambaran bulat, berkilau, basah,
mucoid, bentuk dome shaped → koloni tua: autolysis :
kolap di pusat koloni → gambaran koin
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier→ : 2019
S. pneumoniae
S. pneumoniae
Diagnosis laboratorium
4. Tes Identifikasi:
– Phadebact pneumococcus
– Coagglutination assay
– MALDI-TOF MS
– BinaxNOW S. pneumoniae antigen card
– FilmArray BCID panel
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
51
Streptococci viridans
• Normal microbiota pada GIT, genital tract wanita, cavum
oral, sal. nafas atas
• “viridans” = green → menunjukan α-hemolysis
• Organisme fastidious, butuh CO2 untuk tumbuh
• Klasifikasi Viridans grup:
1. S. mitis group → S. mitis, S. pneumoniae, S. sanguis, S. oralis
2. S. mutans group → S. mutans and S. sobrinus
3. S. salivarius group → S. salivarius and S. vestibularis
4. S. bovis group → S. equinus, S. gallolyticus, S. infantarius,
S. alactolyticus → ekspresi antigen D
5. S. anginosus group → S. anginosus, S. constellatus,
S. intermedius
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Viridans Strep.
Faktor virulensi
1. Polysaccharide capsule
2. Cytolisin S. anginosus group
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
53
Viridans Strep.
Klinis infeksi
54
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2019
Viridans Strep.
Diagnosis laboratorium
• Koloni : kecil, zona α-hemolysis /β hemolytic/
nonhemolytic
S. anginosus : sweet odor honeysuckle atau butterscotch
• Tes biokimia → PYR (-)
Leucine aminopeptidase (LAP) (+)
• Diferensiasi dengan S. pneumoniae (α hemolytic) :
→ optochin sensitivity, bile solubility, or anticapsular
antibody test
• Diferensiasi spesies dalam viridans group :
→ kemampuan fermentasi gula :
• Voges-Proskauer (VP) reaction,
• β-D-glucuronidase activity,
• Hippurate hydrolysis
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2
Viridans Strep.
56
Terapi & AST
Mahon CR, Lechman DC, Manuselis G. Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Elsevier : 2
Terapi & AST
Patricia M.Tille. Bailey & Scott’s. Diagnostic Microbiology. Thirteenth Edition. Elsevier : 2014
Lippincott’s Illustrated Reviews: Microbiology. Third edition. Lippincott. 2001
Pencegahan
• Single-dose, 23-valent vaccine (Pneumovax) untuk
mencegah >> serotype S. pneumoniae
• Rekomendasi CDC :
Pneumococcal conjugate vaccine (PCV13) utk anak < 5th,
dewasa >65 th, dan anak > 6th atau lebih dengan factor risiko
• Rekomendasi Pneumococcal polysaccharide vaccine
(PPSV23):
semua dewasa 65 thn atau lebih lbh dan dewasa 19 th
keatas dengan kondisi medis berisiko tinggi Pneumococcal
pneumonia.
• Lifetime chemoprophylaxis with penicillin:
→ bulanan (i.m) / harian (oral) → RHD utk mencegah bacterial
endocarditis pada kerusakan katup
Patricia M.Tille. Bailey & Scott’s. Diagnostic Microbiology. Thirteenth Edition. Elsevier : 2014
Terima kasih