Nama : Haya Fathana

NIM : 1908203010006
Journal Resume about MS

Primary structure, conformation in aqueous solution, and intestinal

immunomodulating activity of fucoidan from two brown seaweed species
Sargassum crassifolium and Padina australis

Yoshiaki Yuguchi, Van Thi Thanh Tran, Ly Minh Bui, Shizuka Takebe, Shiho Suzuki, Nobukazu Nakajima,
Shinichi Kitamura, Thuy Thi Thu Thanh.

Carbohydrate Polymers 147 (2016) 69–78

Fucoidan adalah polisakarida tersulfasi yang berasal dari rumput laut coklat yang
mengandung kelompok fucosa dan sulfat dengan reseptor lain seperti galaktosa, xilosa, manosa
dan asam uronat. Fucoidan terdiri dari unit -l-fucosa yang dihubungkan oleh (1 → 4) - dan (1 →
3) - ikatan glikosidik dan tersulfasi pada posisi C-2 dan / atau C-3 dan / atau C-4. Tergantung
pada spesies alga, beberapa darinya mungkin memiliki tulang punggung linier yang dibangun
dari -l-fucopyranose residu dengan (1 → 3) – atau berganti-ganti (1 → 3) -, (1 → 4) - ikatan
glikosidik.

Penelitian ini dikhususkan untuk mengisolasi dan mengkarakterisasi dua struktur

fucoidan dari Sargassum crassifolium dan Padina australis dengan berbagai metode analitik, dan
menyelidiki aktivitas imunologi usus mereka melalui sel patch Peyer. Alga-alga tersebut
digunakan sebagai sumber potensial fucoidan bersama dengan spesies lain dari genus Sargassum
yang dikumpulkan dari pantai Vietnam.
Di antara teknik spektroskopi modern, spektrometri massa ionisasi hamburan elektro
(ESIMS) secara luas diakui sebagai metode analitis yang sangat kuat dan sangat sensitif untuk
karakterisasi oligosakarida tersulfasi, memberikan informasi langsung pada urutan monosakarida
dan posisi substitusi, terutama karena senyawa anionik ini mudah terionisasi dalam mode ESIMS
negatif. Namun, ESIMS hanya dapat memberikan informasi mengenai struktur oligosakarida
(Anastyuk et al., 2012a, 2012b; Daniel et al., 2007). Dengan pengembangan proses instrumental
seperti hamburan teknologi (mis. Hamburan cahaya, sinar-X dan hamburan neutron), adalah
mungkin untuk mempelajari konformasi polisakarida dalam larutan, yaitu, di dekat keadaan aktif
secara biologis. Penyebaran sinar-X sudut kecil (SAXS) adalah teknik yang kuat yang dapat
memberikan informasi struktural pada konformasi molekul dalam larutan dan struktur terkait
pada tingkat nano (Glatter & Kratky, 1982; Grantet al., 2011).

Terlepas dari pengamatan yang luas terhadap aktivitas biologis fucoidans dari rumput
laut dalam dekade terakhir, hubungan secara keseluruhan antara aktivitas polisakarida dan
strukturnya masih belum jelas, meskipun diyakini bahwa gugus sulfat, komposisi monosakarida,
berat molekul dan hubungan glikosidik semua mempengaruhi aktivitas biologis polisakarida
tersulfasi. Kegunaan Fucoidan dalam bidang farmasi terkait dengan sifat struktural yang
ditampilkan dalam larutan. Oleh karena itu, dalam penelitian ini, kami bertujuan untuk
menentukan struktur kimia dan konformasi dalam larutan menggunakan teknik ESIMS dan
SAXS. Selain itu, model molekul fucoidans dibangun berdasarkan pada struktur kimia yang
diperoleh, dan kemudian kurva hamburan dihitung dari model molekul dan diamati perbandingan
pengukuran SAXS untuk meyakinin struktur yang ditujukan.

Pembahasan mengenai hasil karakterisasi MS pada sampel

 Spektrum MS fucoidans terhidrolisis Fsc dan Fpa mengandung banyak sinyal. Sinyal
pada m/z 243 sesuai dengan molekul terdeprotonasi [MH] − dari monosulfated fucose [FucSO 3]
-, dan sinyal di m/z 389 dan 535 berasal dari difokosa [Fuc 2SO3] − dan monosulfated trifucose
[Fuc3SO3] - secara berurutan. Sinyal di m/z 405 menunjukan struktur [FucGalSO 3]-. Pola
fragmentasi MS/MS dari sinyal-sinyal itu dapat memberikan kita informasi tentang struktur
fucoidan.

Pola fragmentasi ion [FucSO3] pada m/z 243 [Fuc2SO3] pada m/z 389 dan [Fuc3SO3] pada
m/z 535 kedua fucoidans Fpc dan Fpa hampir sama.Tissot, Salpin, Martinez, Gaigeot, & Daniel
(2006) mempelajari pengaruh posisi sulfat pada pola fragmentasi fokosa yang dipolakan dengan
monosul [FucSO3]-. ESI-MS / MS ion pada m/z 243 dari Fsc ditunjukkan pada Gambar. 2a.
Sinyal dari sulfat C-4 (m/z 183) dan C-2 (m/z 139) terdeteksi dari residu -l-Fucose terdeteksi. Ion
0,2 0,2
fragmen pada m/z 183 dan m/z 139 masing-masing ditetapkan untuk fragmen ion, A dan X.
Tidak ada bukti untuk sulfasi pada C-3 yang terdeteksi, karena tidak ada fragmen yang sesuai
pada m/z 169 yang diamati. Hasil ini menunjukkan bahwa unit fucosyl dari dua fucoidans adalah
posisi sulfatedat C-2 dan C-4, mirip dengan fucoidans dari T. ornata (Thanhet al., 2013) dan S.
polycystum (Bilan et al., 2013).

Gambar fragmen yang terbentuk pada monosulfatfukosa

ESI.MS/MS dari ion [Fuc2SO3]. pada m/z 389 (Gbr. 2b) mengandung beberapa sinyal
yang timbul dari pembelahan ikatan glikosidik: fragmention C1 dari [FucSO3]. pada m/z 243 dan
bentuk dehidrasi B1 pada m/z 225, dan bentuk ion dehidrasi [Fuc2SO3]. pada m/z 371. Ion 0,2A2 di
m/z 329 bersama dengan 0,2X1 pada m/z 285 menguatkan hubungan antara (1 ¨ 4) - residu fucosa.
0,3
X1 ion pada m/z 315 diamati; mungkin berasal dari (1 ¨ 3) residu-fosa (Anastyuket al., 2010;
Anastyuk et al., 2012a). Oleh karena itu, MS/MS fragmentasi ion pada m/z 389 sesuai dengan
campuran tiga difososis monosulfated seperti yang diilustrasikan pada Gambar. 2b.

Gambar fragmen pada senyawa monosulfat difukosa

ESI-MS/MS dari ion [Fuc3SO3] - pada m/z 535 (Gbr. 2c) menunjukkan sinyal berlimpah
pada m/z 225, yang ditetapkan ke bentuk dehidrasi B1 dari residu fucosa sulfat tersulfasi dari ion
C1 pada m/z 243. Sebuah fragmen yang kurang intensif dari pembelahan ikatan glikosidik C 2
0,2
ditemukan pada m/z 389 yang ditetapkan sebagai residu fukosa sulfat. ion X1 pada m/z 431
0,2
dapat timbul dari residu fukosa tersulfat pada posisi O-2. Kelimpahan ion A1 yang sangat
0,2
rendah pada m/z 329 dibandingkan dengan ion X1 pada m/z 431 menggambarkan bahwa
kemungkinan struktur ion induk [Fuc3SO3] adalah prevalensi (1 → 3) - keterkaitan lebih dari (1
→ 4).
 ESI-MS / MS dari ion [FucGalSO3] - pada m / z 405 dari Fsc (Gbr. 3a) mengandung dua
sinyal residu fucosa sulfat yang terdehidrasi (ion Z1 pada m / z 225) dan residu galaktosa sulfat
yang didehidrasi (Z2ionat m / z 241), keduanya dari ujung yang tidak mengurangi. Namun,
residu fucose sulfat yang berselorilasi (m / z 243) dan sulfat galactoseresidue (m / z 259) tidak
dapat dideteksi, menunjukkan bahwa residu fososa sulfatedgalactose dan sulfated terletak di
reduksi. Tidak adanya ion fragmen 0,2X0 pada m/z 138 menunjukkan tidak ada sulfasi pada posisi
O-2 pada ujung pereduksi residu residu sulfat, sementara fragmen 0,2 X'1, 0,2X1 dan 0,3X1
pada m/z 285, 301 dan 331, masing-masing, mengungkapkan bahwa residu galaktosa dan fucosa
0,2
yang tidak mereduksi mungkin juga 2-O-tersulfasi. Kehadiran ion A2 pada m/z 345 dan Z2
menunjukkan varian struktural → 4) -Gal- (1 → (Marais & Joseleau, 2001; Anastyuk et al.,
2012b). Tidak ada bukti untuk (1 → 3) -kaitan dapat dideteksi, mungkin semua residu galaktosa
berada dalam (1 → 4) -kaitan baik di cabang dan dalam keterkaitan dengan rantai utama. Oleh
karena itu, fragmen ion MS/MS pada m/z 405 sesuai dengan campuran dari dua mono sulfated
fucose-galactose seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 3a.