LAPORAN PRAKTIKUM IMMUNOSEROLOGI DASAR

PEMERIKSAAN TPHA (Treponema pallidum Hemaglutination Assay)

Disusun Untuk Memenuhi Tugas Mata Kuliah Immunoserologi Dasar yang dibimbing oleh
Bapak Roni Afriansya,S.T.,M.Si

disusun oleh

Nabila Intifa Ulya (P1337434319042)

PROGRAM STUDI SARJANA TERAPAN TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS

JURUSAN ANALIS KESEHATAN
POLITEKNIK KESEHATAN SEMARANG
2020
 Hari/tanggal : Selasa, 28 September 2020

Tujuan : untuk mendeteksi adanya antibodi spesifik terhadap Treponema pallidum dalam serum
manusia.

Prinsip : Antibodi spesifik untuk T.pallidum yang ada di dalam serum pasien akan beraglutinasi
dengan awetan eritrosit burung yang terdapat dalam reageant Plasmatec TPHA yang telah
dilapisi komponen antigenik patogen T.pallidum (Nichol Strain)  dan menunjukkan pola
aglutinasi pada sumur mikrotitrasi.

Alat dan bahan :

Alat : Bahan :
 Mikropipet 190 µl, 10 µl, 25 µl, dan 75  Serum
µl  Plasmatic TPHA Test Kit :
 Microplate  R1 : Test sel
 Yellow tip  R2 : Control sel
 R3 : Diluent
 R4 : Control positif
 R5 : Control negatif

Cara kerja

a. Uji Kualitatif

Mempersiapk Setiap Semua reagen Campur pada Campur pada

an alat dan komponen kit dihomogenka sumur 1 lalu sumur 1 lalu
bahan dan sampel n perlahan. pipet pipet
dikondisikan sebanyak 25 sebanyak 25
pada suhu Tambahkan µl dan µl dan
kamar diuents 190 ditambahkan ditambahkan
µl dan sampel pada sumur 2 pada sumur 2
10 µl dan 3 dan 3

Sampel yang Aglutinasi Sumur Test sel Control sel

menunjukan yang terjadi diinkubasi sebanyak 75 sebanyak 75
hasil diamati pada suhu µl µl
aglutinasi ruang selama ditambahkan ditambahkan
positif 45 – 60 menit pada sumur 3 pada sumur 2
dilanjutkan ke lalu lalu
uji semi dihomogenka dihomogenka
kuantitatif n n
 b. Uji Semi Kuantitatif

Alat dan Setiap Semua reagen Sumur Pengenceran

bahan komponen kit dihomogenka mikrotitrasi sampel dibuat
disiapkan dan sampel n perlahan disiapkan dan pada sumur
dikondisikan diberi label yang berbeda
pada suhu no. 1 sampai 8 dg campur
kamar 190 µl
diluents dan
10 µl sampel

Campuran Campuran Pada sumur Sumur Sumur

pada sumur 8 sumur 2 mikrotitrasi mikrotitrasi mikrotitrasi
dipipet 25 µl dipipet 25 µl no. 1 dan 2 no. 2 – 8 no. 1
dan dibuang tambahkan pd ditambahkan ditambahkan dikosongkan
sumur 3, lalu 25 µl sampel 25µl diluen
homogenkan. yang telah
Sampai sumur diencerkan
8

Control sel 75 Tes sel 75 µl Sumur Aglutinasi

µl tambahkan ditambahkan diinkubasi yang terjadi
pada sumur pada sumur pada suhu dibaca, dan
mikrotitrasi mikrotitrasi ruang selama ditentukan
no. 1 lalu no. 2-8 lalu 45 – 60 menit titernya
homogenkan homogenkan

Interpretasi hasil
 a. Uji kualitatif
Hasil positif ditandai dengan adanya bulatan berwarna merah dipermukaan sumur, sedangkan
hasil negative terlihat seperti titik berwarna merah di tengah sumur.
Tingkatan Aglutinasi :
+ 4 : bulatan merah pada seluruh permukaan sumur
+ 3 : bulatan merah terdapat di sebagian besar permukaan sumur
+ 2 : bulatan merah yang terbentuk tidak besar dan tampak seperti cincin
+ 1 : bulatan kecil dan tampak cincin terang
+/- : tampak cincin dengan warna bulatan merah yang samar
- : tampak titik berwarna merah di dasar sumur

b. Uji semi kuantitatif

Titer : pengenceran tinggi yang masih menunjukkan aglutinasi

Sumur 1 2 3 4 5 6 7 8
Titer (control 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560 1:5120
cell)

Pembahasan

Pemeriksaan TPHA merupakan suatu pemeriksaan serologi untuk sifilis. Manfaat pemeriksaan
TPHA sebagai pemeriksaan konfirmasi untuk penyakit sifilis dan mendeteksi respon serologis
spesifik untuk Treponema pallidum pada tahap lanjut atau akhir sifilis.

TPHA merupakan tes spesifik untuk melihat adanya antibody terhadap Treponema. Jika terdapat
bakteri, maka hasil positif. Tes akan menjadi negative setelah 6 – 24 bulan.

Keunggulan pemeriksaan TPHA :

a. Teknik pembacaan mudah dan tidak mendeteksi titer rendah

b. Bakteri selain Treponema tidak memberikan hasil positif

Kekurangan pemeriksaan TPHA :

a. Harganya mahal
b. Pengerjaannya butuh waktu yang lama

Daftar Pustaka

http://aldilagn16.mahasiswa.unimus.ac.id/sample-page/pemeriksaan-tpha-treponema-pallidum-
hemaglutination-assay/ . diakses 01 Oktober 2020