RESUME IMUNSEROLOGI

RPR
Nama: Fahran Febryansyah
Kelas: P3.73.34.1.19.015

Pemeriksaan RPR
Digunakan dalam tes non-treponemal untuk tes serologi sifilis
Prinsip pemeriksaan RPR
Suspensi karbon partikulat dilapisi dengan kompleks lipid aglutinasi dengan
adanya reagen serum. Reagens adalah antibody yang ada di serum pasien sifilis.
Aglutinasi terlihat dalam bentuk gumpalan hitam yang dapat dilihat secara makroskopik
menunjukkan adanya antibody tersebut dalam sampel yang diuji

RPR CARBON ANTIGEN

1. Tutup biru = control positive
2. Tutup merah = control negative
3. Tutup putih = antigen
4. Botol tidak berlabel = Saline 0,9%
PERSIAPAN SPESIMEN
1. Dapatkan dari darah vena yang dimasukkan ke dalam tabung tanpa
antikoagulan, kemudian didiamkan sekitar 15-20 menit hingga darah
membeku
2. Sentrifuge specimen dengan kecepatan 3000 rpm selama 5 menit, sehingga
terpisah antara cairan serum dengan sel darah. Pindahkan serum ke cup serum
dan beri identitas
3. Suspensi karbon stabil dilapisi dengan kompleks lipid Sodium Azide 0,5 g/L
4. Simpan pada suhu 2 – 8oC
5. Serum atau plasma stabil selama 48 jam pada 2 – 8oC
6. Specimen harus bebas dari kontaminasi dan hemolysis
7. Specimen lipemik tidak akan mempengaruhi hasil tes, kecuali cukup parah untuk
mengaburkan keadaan partikel antigen

PERSIAPAN REAGEN
1. Resuspen Carbon Antigen dengan lembut untuk memastikan
pencampuran yang menyeluruh
2. Biarkan mencapai suhu kamar sebelum digunakan
ALAT
Tes Manual = 1. Rotator
2. Tempat specimen
3. Mikropipet
4. Stopwatch
5. Tip
Tes Otomatis = 1. Autoanalyzer
2. Pengaduk Magnet
CARA KERJA
Tes Kualitatif:
1. Letakkan sampel dan reagen pada suhu ruangan
2. Teteskan 50 µl sampel dan 1 tetes control ke lingkaran slide secara terpisah
3. Resuspensi antigen dengan perlahan
4. Teteskan 1 tetes antigen ke setiap lingkaran
5. Homogenkan dengan pipet/pengaduk sekali pakai secara menyeluruh
(menyebar diseluruh area yang tertutup oleh cincin) gunakan pengaduk baru
untuk sampel lainnya
6. Putar slide pada rotator kecepatan 100 rpm selama8 menit

Tes Semi-kuantitatif
1. Dengan menggunakan pipet semi otomatis, teteskan 50 µl saline ke lingkaran 2, 3,
4, dan 5. Jangan menyebar saline
2. Tambahkan 50 µl sampel pasien ke lingkaran 1 dan 2
3. Homogen saline dan sampel pada lingkaran 2 dengan cara dihisap dan
dikeluarkan dengan hati-hati untuk menghindari adanya gelembung
4. Pindahkan 50 µl dari lingkaran 2 ke saline pada lingkaran 3
5. Lakukan pengenceran serial dengan cara yang sama sampai lingkaran terakhir,
buang (abaikan) 50 µl dari lingkaran terakhir
6. Dengan menggunakan pipet/pengaduk, sebarkan sampel yang telah
diencerkan pada setiap lingkaran mulai dari lingkaran 5 ke lingkaran 1
7. Lanjutkan seperti test kualitatif dari langkah 3

Tes Kualitatif RPR dalam Plat Mikrotiter

1. Menggunakan plat mikrotitrasi datar, tambahkan 50 µl sampel pasien

2. Tambahkan 1 tetes reagen carbon antigen
3. Putar pada rotator mekanik selama 20 menit pada kecepatan 50 rpm
4. Baca secara makroskopis, baik di atas kotak cahaya atau dibawah lampu pijar
intensitas tinggi di atas permukaan putih
 QUALITY CONTROL
Setiap pengujian harus di validasi dengan kontrol positif dan negative

INTERPRESTASI HASIL

Aglutinasi yang diamati Pembacaan Laporan

Gumpalan sedang dan besar R Reaktif
Gumpalan kecil W Reaktif Lemah
Tidak ada gumpalan atau kekasaran N Non-Reaktif
sangat sedikit