PROPOSAL PENELITIAN

UJI AKTIVITAS EKSTRAK KOMBINASI DAUN SALAM (Syzygium Polyanthum) DAN

DAUN SIRSAK (Annona Muricata L.) TERHADAP PENYAKIT DIABETES MELITUS
PADA TIKUS PUTIH GALUR WISTAR.

MAMA : MARIA ANGELINA SILI WONGA

NIM : 15118007
SEMESTER : VI

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS KATOLIK WIDYA MANDIRA
KUPANG
2021
 KATA PENGANTAR

Segala puji syukur saya panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa karena dengan
limpahan rahmat dan berkata-Nya, saya dapat menyelesaikan proposal penelitian yang
berjudul Uji Aktivitas Ekstrak Kombinasi Daun Salam (Syzygium Polyanthum) dan Daun
Sirsak (Annona Muricata L.) Terhadap penyakit Diabetes pada Tikus Putih Galur Wistar.
Penelitian ini dilaksanakan sebagai salah satu syarat penulis untuk memperoleh nilai
Mata Kuliah Metode Penelitian di Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Kimia,
Universitas Katolik Widya Mandira Kupang.
Penulis menyadari bahwa penelitian ini tidak akan berjalan dengan baik tanpa bantuan
dan dukungan dari beberapa pihak yang terlibat, baik secara langsung maupun tidak langsung
dalam menyusun proposal ini. Oleh karena itu, penulis menyampaikan limpah terimakasih
kepada :
1. Bapak Drs. Aloysius M. Kopon, M.Si selaku Dosen Mata Kuliah Metode Penelitian
Kimia yang telah memberikan arahan dalam menyelesaikan proposal ini.
2. Teman-teman seangkatan yang selalu memberikan dukungan dengan caranya masing-
masing.
3. Seluruh pihak yang membantu dalam penyusunan proposal ini
Penulis menyadari ketidaksempurnaan dan keterbatasan dalam penyusunan proposal
ini. Oleh karena itu, kritik dan saran yang membangun sangat diharapkan oleh penulis.
Penulis berharap penelitian ini dapat bermanfaat sebagai informasi tentang penggunaan
bahan-bahan alam sebagai alternatif dalam menurunkan kadar gula darah pada penderita
diabetes melitus.

Kupang, April 2021

Penulis

DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL
KATA PENGANTAR.....................................................................................................i
DAFTAR ISI................................................................................................................ ii
DAFTAR TABEL.........................................................................................................iv
DAFTAR GAMBAR.....................................................................................................v
BAB I PENDAHULUAN...............................................................................................1
1.1 Latar Belakang.......................................................................................................1
1.2 Rumusan Masalah.................................................................................................2
1.3 Tujuan Penelitian...................................................................................................5
1.4 Manfaat Penelitian.................................................................................................5
1.5 Ruang Lingkup Penelitian......................................................................................6
1.6 Defenisih Operasional...........................................................................................6
BAB II KAJIAN PUSTAKA..........................................................................................7
2.1 Tanaman Daun Salam...........................................................................................7
2.2 Tanaman Daun Sirsak.........................................................................................12
2.3 Senyawa Metabolit Sekunder dan Identifikasi.....................................................18
2.4. Metanol......................................................................................................................32
2.5. Maserasi.............................................................................................................32
2.6 Sifat Fisikokimia .................................................................................................33
2.7 Analisis Komponen Senyawa Kimia....................................................................35
2.8 Penelitian Relevan...............................................................................................39
2.9 Penyakit Yang Akan Di Teliti...............................................................................40
2.10 Kerangka Konseptual........................................................................................48
2.11 Hipotesis Penelitian...........................................................................................49
BAB III METODOLOGI PENELITIAN........................................................................50
3.1 Jenis Penelitian ...................................................................................................50
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian..............................................................................50
3.3 Populasi dan Sampel...........................................................................................50
3.4 Variabel Penelitian ..............................................................................................50
3.5 Alat dan Bahan ...................................................................................................51
3.6 Prosedur Kerja ....................................................................................................54
3.7 Teknik Pengumpulan Data..................................................................................58
3.8 Instrumen Penilaian ............................................................................................58
3.9 Teknik Analisis Data............................................................................................58
DAFTAR PISTAKA....................................................................................................61

DAFTAR TABEL
2.1 Klasifikasi Tanaman Salam...................................................................................7
2.2Klasifikasi Tanaman Sirsak...................................................................................13
2.3 Klasifikasi Diabetes Melitus Berdasarkan Etiologi...............................................41
2.4 Kriteria Penegakan Diagnosis.............................................................................47

DAFTAR GAMBAR
2.1 Batang Salam........................................................................................................8
2.2 Bunga Salam.........................................................................................................9
2.3 Daun Salam...........................................................................................................9
2.4 Buah Salam.........................................................................................................10
2.5 Akar Salam..........................................................................................................10
2.6 Kandungan Senyawa Kimia Tanaman Salam.....................................................12
2.7 Batang Pohon Sirsak...........................................................................................14
2.8 Bunga Sirsak.......................................................................................................14
2.9 Daun Sirsak.........................................................................................................15
2.10 Buah Sirsak.......................................................................................................15
2.11 Akar Sirsak........................................................................................................16
2.12 Biji Sirsak...........................................................................................................16
2.13 Kandungan Senyawa Kimia Tanaman Sirsak...................................................18
2.14 Struktur Beberapa Senyawa Alkaloid................................................................20
2.15 Struktur Beberapa Jenis Flavonoid....................................................................24
2.16 Struktur Senyawa Tanin Terhidrolisis Dan Tanin Terkondensasi..................... 26
2.17 Reaksi Senyawa Tanin Dan Gelatin..................................................................28
2.18 Struktur Dasar Senyawa Saponin, Steroid Dan Triterpenoid............................29
2.19 Reaksi Senyawa Saponin Dan Air.....................................................................30
2.20 Struktur Senyawa Steroid Dan Triterpenoid......................................................31
2.21 Reaksi Lieberman-Buchard...............................................................................32
2.22 Struktur Kimia KLT.............................................................................................36
2.23 Kurva Toleransi Glukosa Normal Dan Pada Penderita DM Tipe 1....................48

BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 LATAR BELAKANG.
 Menurut Undang-Undang Republik Indonesia No.36 tahun 2009 tentang kesehatan
menyebutkan, kesehatan adalah keadaan sehat, baik secara fisik, mental spiritual maupun
sosial yang memungkinkan setiap orang untuk hidup produktif secara sosial dan
ekonomis. Menurut Menteri Kesehatan Indonesia, tanaman obat sudah diterima sebagai
obat alternatif dan bahkan secara resmi dianjurkan untuk digunakan oleh praktisi di dunia
kesehatan. Kesadaran terhadap penggunaan tanaman obat mulai diterima kembali oleh
masyarakat sebagai pengobatan alternatif untuk pemeliharaan kesehatan yang alamiah
dan aman. Karena tanaman herbal sebagai obat tradisional memiliki efek samping relatif
lebih sedikit daripada obat modern.
Data WHO 2002 menunjukkan 10 negara dengan jumlah penderita diabetes melitus
terbesar di dunia adalah India, China, Amerika Serikat, Indonesia, Jepang, Pakistan,
Rusia, Brazil, Italia, dan Bangladesh. Indonesia menempati urutan ke empat.
Diperkirakan pada tahun 2025 akan terjadi peningkatan jumlah penderita diabetes
mellitus dari 5 juta pada 1995 menjadi 12 juta penderita diabetes mellitus di dunia
(Munadjad, 2010). Jumlah penderita diabetes di Indonesia diperkirakan akan
meningkatkan dua kali lipat dari 8,4 juta pada tahun 2000 menjadi 21,3 juta orang pada
tahun 2030. Pola makan yang tidak sehat diduga menjadi salah satu faktor yang
berpengaruh (Mahendra dkk, 2008). Seseorang dikatakan menderita diabetes melitus
apabila kadar gula darah melebihi batas normal atau hiperglikemia (lebih dari 126mg/dl
pada saat puasa dan lebih dari 200 mg/dl dua jam sesudah makan). Komplikasi diabetes
bisa menyerang mata, jantung, ginjal, saraf, bahkan bisa sampai terjadi kemungkinan
amputasi kaki (Tandra,2015)
International Diabetes Federation tahun 2012 menyebutkan bahwa saat ini ada
sekitar 371 juta pasien diabetes. Angka ini melebihi jumlah seluruh penduduk Indonesia.
Di Asia jumlah pasien diabetes ada 70 juta orang, 7,6 juta diantaranya berada di
Indonesia. Kematian lantaran diabetes pada 2012 mencapai 4,8 juta orang. World
Diabetes Atlas edisi 2012 mencatat 471 miliar Dolar Amerika (atau sekitar 5.000 triliun
rupiah) telah dihabiskan pasien diabetes untuk biaya berobat. (Tandra,2017).
Diabetes Mellitus adalah penyakit saat tubuh tidak dapat memproduksi insulin
(Filho, et al., 2005) atau jumlah insulin cukup tetapi kerjanya kurang baik ditandai dengan
tingginya kadar gula dalam darah (Kariadi, 2009). Tubuh tidak mampu memproduksi
insulin dikarenakan sel β pulau Langerhans mengalami peradangan yang diakibatkan oleh
adanya virus seperti virus cochsakie, rubella, cito megalo virus (CMV), herpes dan lain-
lain (Ranakusuma et al, 1999). Kekurangan hormon insulin menyebabkan gangguan
proses biokimia di dalam tubuh, yaitu penurunan ambilan glukosa ke dalam sel dan
terjadi peningkatan glukosa dari hati ke sirkulasi (El-soud et al., 2007). Insulin membantu
proses penghancuran dan penyerapan glukosa, asam lemak dan asam amino. Bila insulin
tidak diproduksi oleh pankreas atau terjadi resistensi insulin maka kadar glukosa dalam
darah meningkat sehingga ginjal tidak dapat memproses glukosa tersebut dan dikeluarkan
melalui
urin. Faktor keturunan dan lingkungan ( D’adamo & Whitney, 2009), obesitas dan
kurangnya olah raga sangat mempengaruhi diabetes mellitus (Filho, et al., 2005).
Diabetes melitus dapat diatasi dengan pengobatan alami dengan memanfaatkan tanaman
berkhasiat obat. Tanaman berkhasiat obat dapat diperoleh dengan mudah, dapat dipetik
langsung untuk pemakaian segar atau dapat dikeringkan. Oleh karena itu, pengobatan
tradisional dengan tanaman obat menjadi langkah alternatif untuk mengatasinya (Prizka
dan Dwita, 2016).
Indonesia memiliki sumber bahan alam yang diduga berkhasiat sebagai
pengobatan, termasuk pengobatan diabetes melitus dan telah digunakan secara turun
temurun. Pengobatan diabetes melitus adalah pengobatan jangka panjang, sepanjang
umur hidup penderita. Oleh sebab itu masyarakat sering sekali melakukan pengobatan
dengan menggunakan obat-obat tradisional. Pengobatan secara tradisional lebih
menekankan pada
keluhan subyektif (Dalimartha, 1999). Banyak jenis tanaman yang selama ini dipercaya
dapat mengobati antidiabetes.

Salah satu obat tradisional yang sering digunakan oleh masyarakat yang diduga
dapat menurunkan kadar glukosa darah adalah Daun Salam (Syzygium
Polyanthum).Kandungan senyawa aktif dalam daun salam yang mendatangkan manfaat
kesehatan adalah minyak atsiri yang mengandung sitral, seskuiterpen, lakton, eugenol,
dan fenol. Senyawa lain yang terkandung Daun Salam antara lain saponin, triterpen,
flavonoid, tanin, polifenol dan alkaloid. (Soedarsono,2016).
Tanaman yang telah lama dimanfaatkan sebagai obat tradisional diantaranya adalah daun
sirsak, daun kemangi, daun mint, daun jambu biji, daun saga, daun sukun, daun
tempuyung, daun beluntas, daun binahong, daun salam, daun paliasa, daun sawo, daun
sambiloto dan daun sirih. Tanaman daun sirsak ini termasuk tanaman tahunan yang dapat
berbuah sepanjang tahun, sehingga mudah didapatkan dan sekarang sudah dikenal
sebagai tanaman
tradisional Indonesia.
Daun salam (Eugenia polyantha) merupakan salah satu tanaman yang digunakan
untuk mengobati diabetes mellitus. Daun salam selain dimanfaatkan sebagai pelengkap
bumbu masakan juga dikenal memiliki khasiat untuk menyembuhkan tekanan darah
tinggi, kolesterol tinggi (Dalimartha, 2006) diare, sakit maag, mabuk akibat alkohol, dan
diabetes
mellitus (Haryanto & Nugroho, 2006). Kandungan kimia pada daun salam yaitu tanin,
minyak atsiri (Kurniawati, 2010) sitral seskuiterpen, lakton, eugenol, dan fenol. Senyawa
lain yang terkandung dalam daun Salam antar lain saponin, triterpen, flavonoid, tanin,
polifenol dan alkaloid (Soedarsono,2016) Flavonoid yang terkandung di dalam daun
salam merupakan salah satu golongan senyawa yang dapat menurunkan kadar glukosa
darah (Nublah, 2011). Flavonoid sebagai antioksidan yang mempunyai peranan penting
dalam kesehatan manusia yaitu dapat mencegah penyakit degeneratif yang berhubungan
dengan stres oksidatif (Pourcel, et al., 2006) akibat penuaan sel-sel organ atau sistem
dalam tubuh salah satunya seperti diabetes mellitus (Tapan, 2005). Daun salam
mempunyai kemampuan sebagai astringen yaitu dapat mempresipitasikan protein selaput
lendir dan membentuk suatu lapisan yang melindungi usus, sehingga menghambat asupan
glukosa yang mengakibatkan laju penurunan glukosa darah (Widowati, 2008).
Menurut buku Profesor Hembing tentang tumbuhan berkhasiat, Pohon salam
(Syzygium polyanthum) terutama daunnya bisa digunakan untuk mengatasi gangguan
asam urat, kolesterol tinggi, radang lambung, stroke, diare, kencing manis, gatal-gatal dan
masih banyak lagi. (Handayani,2016).
Di Indonesia, Daun Salam tumbuh di Jawa Barat sampai Jawa Timur. Tanaman ini
tumbuh liar dihutan dan pegunungan, atau sengaja di tanam di pekarangan rumah. Daun
Salam tumbuh di dataran rendah sampai pegunungan yang mempunyai ketinggian
1.800m. (Sri Nooryani,2008).
Hasil penelitian Dewi (2013) menunjukkan ekstrak etanol daun salam dapat menurunkan
kadar glukosa darah. Dosis 312,5 mg/kg BB dapat menurunkan sampai kadar rata-rata
77±9,92 mg/dL, sedangkan dosis 625 mg/kg BB adalah 64,4±4,15 mg/dL dan dosis 1250
mg/kg BB adalah 71,2±17,71 mg/dL. ( Dewi,2013).
Penelitian dari Studiawan dan Santosa (2005) melaporkan bahwa kandungan
flavonoid dalam ekstrak etanol daun salam dapat menurunkan kadar glukosa. Uji
dilakukan pada 45 mencit jantan yang diinduksi aloksan terbagi menjadi satu kelompok
kontrol (glibenklamid) dan dua kelompok perlakuan dengan dosis 2,62 mg/ 20 g BB dan
5,24 mg/ 20 g BB mencit. Harga rerata penurunan kadar glukosa darah dari masing-
masing kelompok yaitu: kelompok kontrol -14,86 mg%, kelompok I 26,60 mg% dan
kelompok II 34,20 mg%. Hal ini menunjukkan bahwa mencit yang diberikan ekstrak
etanol daun salam mengalami penurunan kadar glukosa dibandingkan dengan kelompok
kontrol. Penelitian lain menunjukkan bahwa pemberian infus daun salam menurunkan
kadar glukosa darah pada dosis 175 mg/kg BB kelinci (Limawan, 1998).
Hasil penelitian telah membuktikan bahwa kandungan dari daun salam yaitu
golongan flavonoid, alkaloid, eugenol, saponin, seskuiterpen (Robinson, 1995 zat tanin,
dan minyak atsiri (Kurniawati, 2010). Golongan flavonoid, fenolik, alkaloid, dan
terpenoid merupakan golongan senyawa yang berpotensi menurunkan kadar glukosa
darah (Nublah, 2011). Flavonoid banyak terkandung pada tumbuhan nabati (Hollman,
et,al.,1999).
Mekanisme hipoglikemik diduga disebabkan oleh flavonoid yang dapat menghambat
reabsorbsi glukosa dari ginjal (Lukacinova, et, al., 2008) dan dapat meningkatkan
kelarutan glukosa darah sehingga mudah diekskresikan melalui urin ( Chairul et al., 2000
cit Fahri, dkk, 2005). Maka, diduga golongan flavonoid di dalam daun salam dapat
menurunkan kadar glukosa darah.

Sirsak (Annona muricata L.) merupakan salah satu tanaman yang tumbuh di
Indonesia yang memiliki banyak manfaat dan kegunaan. Tiap bagian dari tanaman ini
memiliki banyak manfaat, salah satunya adalah daunnya. Daun sirsak telah digunakan
oleh sebagian masyarakat Indonesia sebagai obat tradisional, diantaranya sebagai obat
sakit pinggang, mengurangi rasa nyeri, gatal-gatal, reumatik, obat bisul dan penurun
panas (Mardiana, 2011). Daun sirsak mengandung flavonoid, alkaloid, asam lemak,
fitosterol, mirisil alkohol dan anonol. Senyawa pada daun sirsak yang memiliki khasiat
antidiabetes adalah senyawa alkaloid dan flavonoid (Purwatresna, 2012). Flavonoid dapat
merangsang efek insulin dengan mempengaruhi phosphokinase protein. Selain itu,
flavonoid juga memiliki aktivitas hipoglikemik atau penurunan kadar glukosa darah
dengan menghambat enzim-enzim penting yang berperan dalam pemecahan karbohidrat
menjadi monosakarida
yang dapat diserap oleh usus yaitu enzim alfa amilase dan enzim alfa glukosidase (Putri,
2012).
Daun sirsak mudah didapat di lingkungan sekitar kita. Sebagai obat tradisional,
daun sirsak lebih difokuskan sebagai obat kanker, (Adewole dan Ojewole, 2009), karena
mengandung senyawa cytotoxic (yaitu acetogenin), saponin, polipenol, dan bioflavonoid
yang berkhasiat sebagai antioksidan. Senyawa-senyawa tersebut mampu menghambat
hingga membunuh sel-sel tubuh yang mengalami pertumbuhan tidak normal (sel kanker)
(Adi Wicaksono, 2011). Kandungan antioksidan dalam daun sirsak tentu dapat
menangkal
radikal bebas dan mengatasi penyakit degeneratif seperti DM. .Penelitian daun sirsak
sebagai obat DM masih sangat sedikit, khususnya dalam khasiatnya sebagai
antihiperglikemik (Adi Wicaksono, 2011).
Tanaman sirsak memiliki manfaat yang baik untuk tubuh manusia, salah satunya
terdapat pada bagian daun. Adanya senyawa flavonoid, tanin, saponin, alkaloid, kalsium,
phosphor, vitamin A, B, dan C, karbohidrat, dan phytosterol pada daun sirsak mampu
berperan untuk mengobati radang sendi, diabetes, jantung, kanker, dan tumor (Haro, et
al., 2014). Para herbalis dan dokter di Indonesia mengaplikasikan daun sirsak dengan cara
daun sirsak dikeringkan, kemudian daun sirsak direbus hingga mendidih selama 15 menit,
lalu air rebusan disaring. Saringan air rebusan tersebut kemudian dikonsumsi oleh pasien
(Wijaya, 2012). Penggunaan daun sirsak sebagai obat asam urat dilakukan dua kali sehari
yaitu dengan cara mengkonsumsi sebanyak 6-10 lembar daun sirsak lalu direbus dengan
air (Sawant dan Rajendra, 2014).
Daun sirsak mengandung senyawa annonaceous acetogenins yang dapat
menghambat dan menghentikan pertumbuhan sel kanker (sitotoksik) (Puspitasari., et al.,
2016). Menurut Artini, et al. (2012) dan Purwatresna (2012), ekstrak daun sirsak juga
dapat digunakan sebagai penurun asam kadar asam urat dan kadar gula dalam darah.
Daun sirsak dapat digunakan sebagai antidiabetes dikarenakan daun sirsak memiliki
senyawa fitokimia
berupa tanin, flavonoid, dan triterpenoid yang dapat menghambat aktivitas enzim α-
glucosidase (Hardoko, et al., 2015). Menurut Rumakey (2014), senyawa flavonoid yang
terdapat pada daun sirsak dapat berperan dalam penurunan kadar asam urat dengan
menghambat kerja enzim xanthin oxidase. Menurut Artini, et al. (2012), ekstrak daun
sirsak yang berupa ekstrak kental metanol dengan fraksi n-butanol dosis 200 mg/kg BB
dapat menurunkan kadar asam urat pada tikus sebesar 86,29%.
Tanaman Sirsak ditemukan pertama kali dari Amerika Tengah, Amerika Selatan,
Amerika Utara, Amerika Timur Laut dan daerah Tenggara Brazil. Belum banyak yang
tahu bahwa tanaman sirsak ini sudah biasa dimanfaatkan sebagai obat tradisional. Daun
sirsak digunakan untuk mengobati abses, hipertensi, penyakit hati, sakit kepala, diabetes,
insomnia, cystitis, antiinflamasi, antispasmodik dan disentri.
Penelitian Yovitasari dkk melaporkan bahwa ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata
L.) dari konsentrasi 100% memiliki zona hambat 12,4 mm, 75% memiliki zona hambat
8,9 mm, 50% memiliki zona hambat 5,3 mm, dan 25% memiliki 4 mm terhadap
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus, dimana pada konsentrasi 100% dinyatakan
memiliki efektivitas tertinggi dengan ditemukannya zona hambat 12,4 mm.
 Berdasarkan penelitian Tani dkk, daging buah sirsak memiliki daya hambat terhadap
pertumbuhan bakteri Porphyromonas gingivalis. Menurut penelitian ini zona hambat
kurang dari 5 mm dikategorikan lemah, zona hambat 5-10 mm sedang, 11-20 mm kuat
dan 21-30 mm sangat kuat. Dengan zona hambat yang terbentuk sebesar 11,3 mm pada
konsentrasi 100% termasuk kategori kuat.

Berdasarkan konsep teoritis, fakta tradisional dan data hasil penelitian tanaman
daun salam dan daun sirsak. Penelitian sebelum-sebelumnya sudah melakukan penelitian
tunggal untuk menyembuhkan penyakit Diabetes Melitus. Maka perlu dilakukan
penelitian
dan kajian lebih ilmiah untuk mendapatkan ekstrak kombinasi daun Salam dan daun
sirsak. Oleh karena itu peneliti tertarik untuk melakukan penelitian dengan judul “UJI
AKTIVITAS EKSTRAK KOMBINASI DAUN SALAM (Syzygium Polyanthum)
DAN DAUN SIRSAK (Annona Muricata L) TERHADAP PENYAKIT DIABETES
MELITUS PADA TIKUS PUTIH GALUR WISTAR”

1.2 RUMUSAN MASALAH.

Berdasarkan latar belakang, mama masalah yang akan dikaji dirumuskan sebagai berikut:
1. Bagaimana sifat fisikokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak.
2. Komponen fitokimia apa saja yang terkandung dalam ekstrak kombinasi daun salam
dan daun sirsak.
3. Bagaimana aktivitas ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak terhadap penyakit
diabetes melitus pada tikus putih galur wistar.
1.3 TUJUAN PENELITIAN
Berdasarkan rumusan masalah tersebut maka Tujuan penelitian ini sebagai berikut:
1. Untuk mengetahui sifat fisikokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
2. Untuk mengidentifikasi komponen fitokimia yang terkandung dalam ekstrak
kombinasi daun salam dan daun sirsak.
3. Untuk menganalisis aktivitas ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak terhadap
penyakit diabetes melitus pada tikus putih galur wistar.
1.4 MANFAAT PENELITIAN
Manfaat yang diharapkan dari hasil penelitian ini sebagai berikut :
1. Sebagainya bahan informasi ilmiah sifat fisikokimia ekstrak kombinasi daun salam
dan daun sirsak.
2. Sebagai bahan informasi ilmiah komponen fitokimia yang terkandung dalam ekstrak
kombinasi daun salam dan daun sirsak.
3. Menambah konsep baru yang dapat dijadikan sebagai bahan rujukan penelitian lebih
lanjut.
1.5 RUANG LINGKUP PENELITIAN
Untuk menghindari salah penafsiran pembaca maka penelitian ini di batas pada:
1. Analisis sifat fisikokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
2. Analisis komponen fitokimia yang terkandung dalam ekstrak kombinasi daun salam
dan daun sirsak.
1.6 DEFINISIH OPERASIONAL.
Untuk menghindari salah pengertian pada penelitian ini maka perlu dijelaskan makna
beberapa kata /kalimat yang digunakan pada penelitian ini antar lain:
1. Ekstraksi adalah proses pemisahan berdasarkan perbedaan kelarutan simplisia dan
pelarut organik dengan cara maserasi atau perendaman simplisia.
2. Sifat fisikokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak merupakan sifat
fisika senyawa kimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak.
3. Komponen fitokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak merupakan
komponen metabolit sekunder antara lain kelompok senyawa flavonoid, alkaloid,
saponin, tanin, steroid dan triterpenoid dalam ekstrak kombinasi daun salam dan daun
sirsak.

BAB 2
KAJIAN PUSTAKA

2.1 TANAMAN DAUN SALAM (Syzygium Polyanthum)

2.1.1 Taksonomi Tanaman Daun Salam (Syzygium Polyanthum)
Kedudukan tanaman daun Syzygium polyanthum dalam sistematika (taksonomi)
diklasifikasikan sebagai berikut:

Kingdom Plantae
Super Sivisi Spermatophyta
Kelas Dicotiledoneae
Ordo Myrtales
Family Myrtaceae
Genus Syzygium
Species Syzygium Polyanthum
Tabel 2.1 Klasifikasi Tanaman Salam.

2.1.2 Ekologi Penyebaran Tanaman Daun Salam

 Pohon salam dikenal sebagai salah satu jenis tanaman yang berkhasiat sebagai obat dan
rempah-rempah di Indonesia. Tumbuhan dengan nama latin Syzygium
polyanthum mempunyai beberapa nama berbeda sesuai dengan daerahnya, yaitu ubai serai  di
masyarakat Melayu, manting oleh penduduk Jawa, dan juga gowok di daerah Sunda.
Tumbuhan salam tersebar di hutan primer dan sekunder, mulai dari tepi pantai hingga dataran
dengan ketinggian 1000 m (Jawa), 1200 m (Sabah) dan 1300 (Thailand). Pohon ini berasal
dan banyak tumbuh di daerah Asia Tenggara, seperti Burma, Indocina, Thailand,
Semenanjung Malaya, Sumatera, Kalimantan dan Jawa.

Di Indonesia pohon salam tumbuh di kebun, pekarangan warga, serta lahan wanatani lainnya
untuk diambil daunnya.

2.1.3 Nama Lain / Penamaan Tanaman Daun Salam

Tanaman salam adalah tanaman yang berasal dari Indonesia dan mempunyai banyak sebutan,
diantaranya:

 gowok (Sunda),

 manting (Jawa),

 kastolam (Kangean),

 ubar serai (Melayu),

 salam (Indonesia, Sunda, Jawa, Madura).

 Maselengan (sumatera)

Para ilmuwan luar negeri, daun salam yang biasa kita pakai sering kali disebut dengan
Indonesian Bay Leaf. Taksonomi daun salam Menurut Meselengan (Sumatera) (Utami, 2013
dan Dalimartha, 2005).

2.1.4 Morfologi Tanaman Daun Salam

2.1.4.1 Batang
Sebagai salah satu jenis tumbuhan perdu, pohon salam tumbuh dengan tinggi sekitar
18 meter sampai dengan 27 meter. Biasanya tumbuhan ini hidup secara liar di hutan dengan
arah pertumbuhan batang tegak lurus. Bentuk batangnya bulat dengan bagian permukaan
beralur dan batangnya bersifat kuat dan keras. Sementara itu, bentuk percabangan tumbuhan
salam bersifat monopodial. Sifat ini membuat batang pokoknya tampak sangat jelas, sehingga
mudah dibedakan antara batang dan cabangnya. Sifat monopodial ini juga yang menjadikan
arah tumbuh batang selalu tegak lurus.
 Gambar 2.1 batang salam

2.1.4.2 Bunga
Pohon salam ini memiliki bunga yang bersifat ‘banci’, artinya mempunyai 2 jenis
kelamin sekaligus, yaitu kelamin jantan dan kelamin betina. Jumlah kelopak bunga salam ini
4 sampai 5 helai dengan mahkota bunga yang diketahui berjumlah sama. Kadang-kadang
untuk mahkota bunga dari pohon salam ini akan tumbuh secara berlekatan. Bunga salam
mempunyai banyak benang sari dengan tangkai sari yang memiliki warna cerah. Pada
beberapa kondisi dari tangkai sari ini akan tumbuh melekat pada bunga. Bakal buahnya
terlihat terletak agak tenggelam serta mempunyai tangkai putik. Jumlah bijinya yaitu sekitar 1
sampai 8 dan mengandung sedikit zat endosperma, bahkan ada pula yang tidak memiliki
endosperm sama sekali.

Gambar 2.2 Bunga Salam

2.1.4.3 Daun
Daun tanaman daun salam ini berbentuk lonjong, elips, ataupun bentuk bulat telur
yang tumbuh terlihat secara sungsang. Pangkal dari daun ini berbentuk lancip, sedangkan
untuk bagian ujung daunnya tergolong tumpul. Secara keseluruhan untuk panjang daun ini
berkisar antara 50 mm sampai dengan 150 mm dengan lebar sekitar 35 mm sampai 65 mm.
Daun salam ini memiliki bentuk daun tunggal yang tumbuhnya secara berhadapan. Tekstur
dari daunnya ini bersifat licin dengan mempunyai warna hijau muda. Daun pohon salam ini
memiliki tangkai sepanjang kira-kira 5 mm sampai 12 mm dan jika akan diperhatikan lebih
dekat akan ada 6 sampai 10 urat daun. Karakteristik dari tanaman daun salam ini yaitu
aromanya yang cukup sangat harum.

Gambar 2.3 Daun Salam

2.1.4.4 Buah
Buah salam ini memiliki tekstur serta bentuk yang sangat menyerupai buah buni,
yaitu dalam pengertian botani hal ini merupakan buah berdaging yang terbentuk dari sebuah
bakal buah atau ovarium tunggal. Diameter dari buah pohon salam ini antara 8 sampai 9 mm.
Ketika masih muda maka buah salam ini berwarna hijau serta ketika sudah masak maka
warnanya akan berubah menjadi merah gelap. Jika sudah dicicipi, maka rasa buah salam
terasa agak sedikit sepat.

Gambar 2.4 Buah Salam

2.1.4.5 Akar
Jenis akar merupakan akar tunggang yang berbentuk seperti tombak meruncing ke ujung.
 Gambar 2.5 Akar Pohon Salam.

2.1.5 Manfaat Tanaman Daun Salam.

2.1.5.1 Kulit Batang

Hasil penelitian menunjukkan bahwa kulit batang pohon salam dapat digunakan sebagai
pewarna makanan, tetapi tidak dapat digunakan sebagai pengawet makanan. Kulit batang
tanaman Salam biasa digunakan sebagai bahan ramuan tradisional untuk menyembuhkan
sakit perut dan juga dapat mengatasi infeksi kulit seperti kudis dan gatal-gatal (Utami, 2008)

2.1.5.2 Bunga

Sebagai obat tradisional daun salam dimanfaatkan untuk mengatasi penyakit diabetes
mellitus, kolesterol tinggi, hipertensi, gastritis dan diare (de Guzman and Simeosma, 1999).

2.1.5.3 Daun

Daun salam (Syzygium Polyanthum) bermanfaat untuk mengobati kencing manis (diabetes
mellitus), tekanan darah tinggi (hipertensi), sakit maag (gastritis), diare dan asam urat (Utami,
2008).

2.1.5.4 Buah

Buah tanaman salam dapat mengatasi diare, radang, diabetes, asam urat, maag, kolesterol,
mata minus, memperlancar peredaran darah, melancarkan pencernaan dan mabuk alkohol
(Arsono Arwan, 2018)

2.1.5.5 Akar

Akar tanaman salam dapat mengatasi sakit perut, kudis dan gatal-gatal (Dikutip dari Buku
Ayo Mengenal Tanaman Obat, Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian Kementerian
Pertanian - Jakarta: IAARD Press, 2012, Halaman 40-41).

2.1.5.6 Biji

Biji tanaman salam dapat mengatasi diare, radang, diabetes, asam urat, maag, memperlancar
peredaran darah dan melancarkan pencernaan (Arsono Ariana, 2008)

2.1.6 Kandungan Senyawa Kimia Tanaman Salam.

Tanaman salam memiliki senyawa aktif saponin, triterpenoid, flavonoid, polifenol, alkaloid,
tanin dan minyak atsiri (Sudarsono et al., 2002)

Saponin Triterpenoid

Flavonoid Polifenol

Alkaloid Tanin Eugenol

Gambar 2.6 Kandungan senyawa kimia tanaman salam.

2.2 TANAMAN SIRSAK (Annona Muricata L.)

2.2.1 Taksonomi Tanaman Daun Sirsak

Berikut ini adalah klasifikasi tanaman sirsak secara ilmiah, yaitu:

Kerajaan Plantae

Angiospermae

Magnoliids

Ordo Magnoliales

Famili Annonaceae

Genus Annona

Spesies A. muricata

Tabel 2.2 Klasifikasi Tanaman Sirsak.

2.2.2 Ekologi Penyebaran Tanaman Sirsak

Sirsak berasal dari Amerika Tengah yang beriklim tropis, kemudian menyebar hampir ke
semua benua. Di Asia Tenggara, sirsak banyak ditanam di Filipina dan Indonesia (Sunarjono,
2007). Tanaman ini ditanam secara komersial untuk diambil daging buahnya. Tumbuhan ini
dapat tumbuh di sembarang tempat, paling baik ditanam di daerah yang cukup berair.
Tanaman ini ditanam secara komersial atau sambilan untuk diambil buahnya.

Di Indonesia sirsak dapat tumbuh dengan baik pada ketinggian 1000 m dari permukaan laut.
Sirsak dapat tumbuh dan bertahan hidup di tanah miskin unsur hara, tetapi tidak mampu
bertahan pada udara dingin. Tanaman ini akan optimal jika tumbuh di daerah dataran rendah
dengan ketinggian 0 sampai 1.200 meter di atas permukaan laut. Tanaman ini merupakan
pendatang di semua negara yang beriklim sedang atau subtropis.

2.2.3 Nama Lain / Penamaan Tanaman Sirsak

Tanaman sirsak merupakan tanaman yang berasal dari Indonesia dan mempunyai banyak
sebutan, diantaranya:

 nangka sebrang atau nangka landa (Jawa),

 nangka walanda (Sunda),
 nangka buris atau nangkelan (Madura),
 srikaya jawa (Bali),
 boh lôna (Aceh),
 durio ulondro (Nias),
 durian betawi (Minangkabau),
 jambu landa (Lampung),
 Nangko Belando (Palembang).

2.2.4 Morfologi Tanaman Sirsak.

2.2.4.1 Batang

Pohon berwarna coklat tua, batang berkayu berwarna coklat tua, silindris, permukaan kasar,
percabangan simpodial. Arah tumbuh batang tegak lurus, arah tumbuh cabang ada yang
condong ke atas dan ada yang mendatar, ketinggian mencapai 8-10 meter, dan diameter
batang 10-30 cm. Tidak berbanir, tajuk membulat;

Gambar 2.7 Batang pohon sirsak

2.2.4.2 Bunga

Bunga pada tanaman Sirsak berbentuk tunggal yaitu satu bunga terdapat banyak putik
sehingga dinamakan bunga berpistil majemuk;
 Gambar 2.8 Bunga tanaman sirsak

2.2.4.3 Daun.

Daun berwarna hijau muda sampai tua dengan panjang 6-18 cm, lebar 3-7 cm, permukaan
daun licin, berbentuk jorong atau ovalis, ujungnya lancip pendek, daun bagian atas mengkilap
hijau dan gundul pucat kusam di bagian bawah daun, berbentuk saraf lateral. Daun memiliki
bau tajam dengan tangkai daun pendek sekitar 3-10 mm, tepi daun rata;

Gambar 2.9 Daun tanaman sirsak

2.2.4.4 Buah.

Buah Sirsak memiliki bentuk sejati berganda yaitu buah yang berasal dari satu bunga dengan
banyak buah tetapi membentuk satu buah. Buah memiliki duri sisik halus, sudah siap dengan
daging tua buah berwarna putih, lembek dan berserat dengan banyak biji. Biji buah Sirsak
berwarna coklat agak kehitaman dan keras, berujung tumpul, permukaan halus mengkilat
dengan ukuran panjang kira-kira 16 mm dan lebar kira-kira 9 mm;
 Gambar 2.10 buah tanaman sirsak

2.2.4.5 Akar

Akar berwarna coklat muda, bulat dengan perakaran tunggang.

Gambar 2.11 Akar tanaman sirsak

2.2.4.6 Biji Sirsak

Biji buah sirsak berwarna coklat kehitaman berujung tumpul, permukaan halus mengkilat,
dan keras. Ukurannya kira-kira 16,8 mm x 9,6 mm, jumlah biji dalam setiap satu buah 20
sampai 70 butir biji normal, sedangkan biji yang tidak normal berwarna putih kecoklatan dan
tidak berisi.

Gambar 2.12 biji tanaman sirsak

2.2.5 Manfaat Tanaman Sirsak

2.2.5.1 Kulit Batang.

Kulit batang tanaman sirsak berkhasiat untuk pengobatan asma, mengobati flu, antiparasit,
anti kejang, batuk, penenang, diabetes dan hipertensi (Septarina, ST, hal 3)

2.2.5.2 Bunga

Bunga sirsak bisa digunakan oleh masyarakat Brazil untuk pengobatan penyakit samurai
pernapasan (bronkhitis) dan batuk.

2.2.5.3 Daun

Daun sirsak berkhasiat menyembuhkan penyakit lever (penyakit hati), kejang, batuk,
reumatik, radang sendi, rasa nyeri pada selalu saraf, mengatasi penyakit kanker, membantu
untuk meningkatkan energi, dan dapat membantu meningkatkan nafsu makan (Septarina, ST,
hal. 2)
2.2.5.4 Buah

Vitamin C yang terkandung dalam buah sirsak merupakan salah satu antioksidan yang
berfungsi untuk peningkatan daya tahan tubuh. Khasiat dari buah sirsak ternyata dapat
membuat kita awet muda. Buah sirsak dapat mengobati penyakit disentri, osteoporosis, asam
urat, demam, diabetes dan batu empedu (Septarina, ST, hal 2)

2.2.5.5 Akar

Akar sirsak biasanya diolah terlebih dahulu dalam bentuk teh berfungsi sebagai Anti kejang,
antidiabetes, obat penenang sekaligus menurunkan tekanan darah, penangkal racun,
pembasmi kutu (Septarina, ST, hal 3).

2.2.5.6 Biji

Senyawa alkaloid yang terkandung dalam biji buah sirsak biasa digunakan sebagai pestisida
nabati yang bisa digunakan untuk membunuh kecoak, sebagai pembersih permukaan kulit,
dan juga sebagai obat masuk angin. (Septarina, ST, hal 3).

2.2.6 Kandungan Senyawa Kimia Tanaman Sirsak.

Tanaman Sirsak mengandung senyawa aktif antar lain: tanin, alkaloid, flavonoid, minyak
atsiri (eugenol), saponin dan glikosida.
 Tanin Flavonoid Alkaloid Eugenol

Flavonoid Saponin

Gambar 2.13 Kandungan Senyawa Kimia Tanaman Sirsak

2.3 SENYAWA METABOLIT SEKUNDER DAN IDENTIFIKASI.

2.3.1 Alkaloid.

2.3.1.1 Konsep Alkaloid.

Alkaloid merupakan senyawa yang terdapat pada berbagai spesies tumbuhan berupa garam
asam organik, seperti asam asetat, asam malat, asam oksalat, asam suksinat, atau beberapa
asam tumbuhan spesifik lainnya (Kar, 2013: 427).

2.3.1.2 Sumber dan Klasifikasi Alkaloid

1). Sumber Alkaloid

Sumber utama alkaloid adalah pada tumbuhan angiospermae dan gimnospermae.

Terutama pada biji, daun, ranting dan kulit kayunya. Kadar alkaloid yang terkandung pada
masing-masing bagian berbeda-beda. Kulit kayu adalah bagian yang paling banyak terdapat
senyawa alkaloidnya yakni mengandung 10-15% alkaloid (Robinson, 1995:283).

2). Klasifikasi Alkaloid.

Alkaloid di klasifikasi menjadi 4 kelompok, antara lain:

❖ Klasifikasi Biosintetis.

Alkaloid hasil penelitian pada tumbuhan secara biosintetis, dikelompokan berdasarkan

prekursor yang sama, tetapi memiliki distribusi taksonomi dan aktifitas farmakologi berbeda.

Contoh:

 Alkaloid indol yang diturunkan dari triptofan.

  Alkaloid piperidin yang diturunkan dari lisin

 Alkaloid pirolidin yang diturunkan dari ornitin

 Alkaloid feniletilamin yang diturunkan dari tirosin

 Alkaloid imidazol yang diturunkan dari histidin

❖ Klasifikasi Kimia.

Alkaloid diklasifikasikan berdasarkan kriteria inti heterosiklik utama, antara lain:

 Alkaloid pirolidin, contohnya higrin

 Alkaloid piperidin, contohnya lobelin

 Alkaloid pirolizidin, contohnya senesionin

 Alkaloid tropana, contohnya atropin

 Alkaloid kuinolin, contohnya kuinin

 Alkaloid isokuinolin, contohnya morfin

 Alkaloid aporfin, contohnya boldin

 Alkaloid indol, contohnya ergometrin

 Alkaloid imidazol, contohnya pilokarpin

 Alkaloid diazosin, contohnya lupanin

 Alkaloid purin, contohnya kafein

 Alkaloid steroid, contohnya solanadium

 Alkaloid amino, contohnya efedrin

 Alkaloid diterpen, contohnya akonitin

❖ Klasifikasi Farmakologis

Contoh:

 Morfin sebagai analgestik narkotik

 Kuinin sebagai antimalaria

 Striknin sebagai rangsangan refleks

  Lobelin sebagai stimulan pernapasan

 Boldin sebagai koleretik dan laksatif

 Akonitin sebagai neuralgia

 Pilokarpin sebagai senyawa antiglaukoma dan miotik

 Ergonovin sebagai oksitoksik

 Efedrin sebagai bronkodilator

 Narkein sebagai analgesik (narkotik) dan antitusif.

❖ Klasifikasi Taksonomik.

Klasifikasi khusus ini berdasarkan kategori taksonomik. Taksa yang paling umum adalah
genus, subgenus, spesies, subspesies, dan sebagainya. Klasifikasi taksonomik mencakup
banyak alkaloid khususnya berdasarkan pada distribusi masing-masing dalam berbagai famili
tumbuhan. Beberapa contoh umum famili tumbuhan dan berbagai spesies yaitu:

 Alkaloid Cannabinaceae, contohnya Cannabis sativa Linn (ganja, mariyuana)

 Alkaloid Rubiaceae, contohnya Cinchona Sp (kinin), Mitragyana speciosa Korth

(katum, kratum, kutum).

 Alkaloid Solananceae, contohnya Atropa belladonna L (deadly nightshead,

belladona), Capsicum annum L (cabai manis, paprika), Mandragora officinaru L
(mandrak, tomat), Nicotiana glauca R. Grah (pohon tembakau) (Kar, 2013: 449-450).

Beberapa struktur senyawa alkaloid disajikan pada gambar berikut:

Gambar 2.14 Struktur Beberapa Senyawa Alkaloid (Achmad, 1986:48)

2.3.1.3 Sifat Fisika Dan Kimia Alkaloid

1. Sifat Fisika Alkaloid.

Senyawa alkaloid yang telah diisolasi mempunyai sifat fisik yang berbeda dan berupa
padatan kristal garam dan titik lebur tertentu, misalnya kokain dengan titik lebur
980C. Ada senyawa alkaloid yang tidak mempunyai bentuk yang teratur (amorf) dan
ada yang berupa cairan seperti nikotin dan konim. Pada senyawa alkaloid yang lain
kebanyakan tidak berwarna tetapi ada senyawa alkaloid yang kompleks mempunyai
warna seperti aromatik, misalnya berberin berwarna kuning dan betanin berwarna
merah. Senyawa alkaloid mempunyai warna tertentu juga dapat larut dalam pelarut
tertentu. Pada umumnya, senyawa alkaloid hanya dapat larut dalam pelarut organik.
Meskipun beberapa pseudoalkaloid larut dalam air (Tagi, 2015:38).

2. Sifat Kimia Alkaloid

Senyawa alkaloid bersifat basa, tergantung adanya pasangan elektron bebas pada
atom nitrogen. Jika suatu gugus fungsional pada posisi yang berdekatan dengan atom
nitrogen bersifat melepaskan elektron, misalnya gugus alkil, elektron pada atom
nitrogen akan menarik senyawa alkil sehingga senyawa nitrogen lebih bersifat basa.
Sebaliknya jika suatu gugus fungsional yang berdekatan dengan atom nitrogen
bersifat menarik elektron, misalnya gugus karbonil, maka kesediaan elektron
berkurang dan pengaruh yang ditimbulkan adalah alkaloid dapat bersifat netral atau
bahkan bersifat asam. Kebasaan senyawa alkaloid menyebabkan senyawa tersebut
sangat mudah mengalami dekomposisi, terutama oleh panas sinar matahari dengan
adanya oksigen. Hasil reaksi sering berupa N-oksida. Pembentukan garam dengan
senyawa organik seperti tartarat, sitrat, atau senyawa anorganik seperti asam
hidroklorida atau sulfat sering mencegah dekomposisi (Robinson,1995:284-285).

2.3.1.4 Manfaat Alkaloid

Alkaloid dapat dimanfaatkan untuk mengobati penyakit asma, mengurangi rasa sakit
akibat asam urat, sebagai antibiotik (untuk sakit tenggorokan, infeksi kulit), meningkatkan
daya pikir, menurunkan sekresi dan motilitas lambung (Robinson, 1995:283).

2.3.1.5 Identifikasi Alkaloid

Analisis senyawa alkaloid pada suatu ekstrak menggunakan beberapa reagen seperti reagen
Mayer, Wagner dan lain-lain sebagai berikut:

 Reagen Mayer

Reagen Mayer dibuat menggunakan KI 6 gram yang dilarutkan dalam aquades

sebanyak 10 mL dan HgCl2 1,358 gram yang dilarutkan dalam 60 mL aquades,
kemudian kedua larutan KI dan HgCl2 dicampur dan ditambahkan aquades hingga
volume larutan 100 mL. Reaksi kimia reagen Mayer:
 4 KI(aq) + HgCl2(aq) ⟶ K2HgI4 (aq) + 2KCl(aq)

K2HgI4 (aq) ⇌ 2K+(aq) + HgI42-(aq)

Hasil reaksi menunjukan positif mengandung senyawa alkaloid apabila terdapat

endapan putih dalam suasana sedikit asam (Mulyono, 2005:71). Reaksi alkaloid
dengan reagen Mayer sebagai berikut:

 Reagen Wagner .

Reagen Wagner dibuat menggunakan KI 5 gram dan serbuk I2 4 gram, dilarutkan

dalam aquades 100 mL. Reaksi kimia reagen Wagner sebagai berikut:

KI(aq) + I2 (aq) ⟶ K+(aq) + I3-(aq)

Hasil reaksi menunjukan positif mengandung senyawa alkaloid apabila terdapat

endapan coklat dalam suasana sedikit asam (Mulyono, 2005:65). Reaksi alkaloid
dengan reagen Wagner sebagai berikut:

2.3.2 Flavonoid

2.3.2.1 Konsep Flavonoid

Flavonoid merupakan jenis senyawa yang mengandung fenol yang banyak terdapat di
alam pada tanaman tingkat tinggi. Flavonoid banyak ditemukan pada bagian tumbuhan
seperti bunga, daun, ranting, buah, kayu, kulit kayu, dan akar. Golongan flavonoid dapat
digambarkan sebagai deretan senyawa C6-C3-C6. Artinya, kerangka karbon terdiri dari dua
gugus C6 (cincin benzena tersubsitusi). Deretan senyawa ini dapat menghasilkan 3 jenis
struktur yakni 1,3 diarilpropana (flavonoid), 1,2 diaril propana (isoflavonoid), dan 1,1 diaril
propana (neoflavonoid) (Robinson, 1995:191; Achmad, 1986:2-3).

2.3.2.2 Sumber dan Klasifikasi Flavonoid

1) Sumber Flavonoid

Flavonoid terdapat pada seluruh dunia tumbuhan mulai dari fungus sampai angiospermae.
Pada tumbuhan tinggi, flavonoid terdapat baik dalam bagian vegetatif maupun dalam bunga
(Robinson, 1995:191).

2) Klasifikasi Flavonoid.

Senyawa flavonoid memiliki beberapa turunan yang sangat bergantung pada tingkat oksidasi
rantai propana diantaranya flavonon, flavanonol, flavon, flavonol, isoflavon, kalkon, dan
sebagainya. Beberapa jenis flavonoid serta struktur dasar masing-masing jenis disajikan pada
Gambar 2.15 berikut ini.

Gambar 2.15 Struktur Beberapa Jenis Flavonoid (Achmad, 1986:16)

2.3.2.3 Sifat Fisika dan Kimia Flavonoid

1. Sifat Kimia Flavonoid.
Flavonoid banyak ditemukan sebagai glikosida dan bersifat basa apabila
bereaksi dengan asam mineral menghasilkan garam flavilium yang berwarna
(Achmad, 1986:17).
2. Sifat Fisika Flavonoid
Senyawa flavonoid merupakan zat yang berwarna merah, ungu, dan biru dan
sebagian zat berwarna kuning yang banyak ditemukan dalam tumbuhan.
Flavonoid larut dalam air, eter, kloroform dan dapat diekstraksi dengan etanol
70% (Achmad, 1986:17)
2.3.2.4 Manfaat Flavonoid
Manfaat flavonoid pada tumbuhan ialah sebagai pengatur tumbuh, pengaturan fotosintesis,
kerja anti mikroba dan anti virus. Flavonoid banyak digunakan untuk pengobatan tradisional
karena memilik efek terhadap macam-macam organisme. Flavonoid merupakan komponen
aktif tumbuhan untuk mengobati gangguan fungsi hati sebagai antioksidan dan berfungsi
menetralisir radikal bebas dan dengan demikian meminimalkan efek kerusakan pada sel dan
jaringan tubuh. Radikal bebas adalah molekul yang sangat reaktif dan tidak stabil akibat telah
kehilangan elektron (Robinson, 1995:191,193).
2.3.2.5 Identifikasi Flavonoid
Analisis flavonoid menggunakan pereaksi-pereaksi antara lain:
 Reagen Wilsater Sianidin
Reagen Wilsater Sianidin dibuat menggunakan larutan HCl dan serbuk magnesium
(Mg). Hasil reaksi menunjukan positif mengandung senyawa flavonoid apabila
terdapat warna merah, kuning atau orange yang dihasilkan.
Reaksi HCl dalam air sebagai berikut:

HCl(aq) H+(aq) + Cl-(aq)

Reaksi yang terjadi antara serbuk magnesium dengan larutan HCl

 sebagai berikut:

Mg(s) + 2H+(l) Mg2+(aq) + H2(g)

Reaksi flavonoid dengan reagen Wilstater Sianidin sebagai berikut:
 Jika tidak tercampur dengan pigmen lain, flavonoid dapat dideteksi dengan

uap amonia dan akan memberikan warna spesifik untuk masing-masing

golongan. Falavon dan flavonol akan memberikan warna kuning sampai
kuning kemerahan. Antosianin berwarna merah biru sedangkan flavononol
menimbulkan warna orange dan coklat.
 Pereaksi aluminium klorida dapat membentuk kompleks dengan flavonoid
menimbulkan warna kuning. Reaksi antara AlCl3 dengan golongan flavonoid
membentuk kompleks antara gugus hidroksil dan keton yang bertetangga atau
dengan gugus hidroksil yang saling bertetangga.
2.3.3 Tanin.
2.3.3.1 Konsep Tanin
Tanin merupakan bagian yang tersebar luas dalam tanaman, seperti daun, buah yang
belum matang, batang dan kulit kayu. Pada buah yang belum matang, tanin digunakan
sebagai energi dalam proses metabolisme dalam bentuk oksidasi tanin. Tanin dapat dikatakan
sebagai sumber asam pada buah (Robinson, 1995:71).
2.3.3.2 Sumber dan Klasifikasi Tanin
1) Sumber Tanin.
Tanin tersebar pada seluruh bagian tumbuhan, seperti pada daun, batang, kulit kayu, dan
buah. Distribusi tanin hampir di seluruh spesies tanaman dan biasanya ditemukan pada
gymnospermae dan angiospermae. Tanin terletak pada vakuola atau bagian permukaan
tanaman (Robinson, 1995:71).
2) Klasifikasi Tanin
Tanin diklasifikasikan sebagai tanin terhidrolisis dan tanin terkondensasi. Tanin terhidrolisis
mengandung ikatan ester yang dapat terhidrolisis jika dididihkan dalam asam klorida encer.
Hasil hidrolisis ester adalah gula sederhana seperti glukosa, dan asam polifenolat seperti
asam kuinat, asam fenolat dan asam galat (Robinson, 1995:71). Tanin terkondensasi atau
disebut proantosianidin, merupakan polimer dari katekin (flavan-3-ol) dan leukoantosianidin
(flavan-3,4-diol). Senyawa-senyawa ini termasuk kelompok senyawa flavonoid yang tersebar
luas di alam, dimana struktur senyawanya sebagai berikut: (Robinson, 1995:193).

Gambar 2.16 Struktur Senyawa Tanin Terhidrolisis dan Tanin Terkondensasi

(Robinson,1995:73, 193)
2.3.3.3 Sifat Fisika dan Kimia Tanin
1. Sifat Fisika Tanin
Sifat fisika tanin sebagai berikut:

 Merupakan senyawa kompleks dalam bentuk

 campuran polifenol yang sukar dipisahkan sehingga sukar mengkristal.
 Tanin dapat diidentifikasikan dengan kromatografi.
 Senyawa fenol dari tanin mempunyai aksi adstrigensia, antiseptik dan pemberi warna.

2. Sifat Kimia Tanin

Sifat kimia tanin sebagai berikut:

 Apabila dilarutkan ke dalam air, tanin akan membentuk koloid yang memiliki rasa
asam dan sepat.
 Mengendapkan larutan alkaloid.
 Larutan alkali tanin mampu mengoksidasi oksigen.
  Mengendapkan protein dari larutannya dan bereaksi dengan protein yang tidak
dipengaruhi oleh enzim protiolitik.
2.3.3.4 Manfaat Tanin
Manfaat tanin antara lain:

 Sebagai pelindung pada tumbuhan pada saat masa pertumbuhan bagian tertentu pada
tanaman, misalnya buah yang belum matang, pada saat matang taninnya hilang.
 Sebagai anti hama bagi tanaman sehingga mencegah serangga dan fungi.
 Digunakan dalam proses metabolisme pada bagian tertentu tanaman.
 Efek terapinya sebagai adstrigensia jaringan hidup misalnya pada gastrointestinal
kulit.
 Efek terapi yang lain sebagai antiseptik pada jaringan luka, misalnya luka bakar,
dengan cara mengendapkan protein.
 Sebagai pengawet dan penyamak kulit.
 Reagensia di Laboratorium untuk deteksi gelatin, protein dan alkaloid.
 Sebagai antidotum (keracunan alkaloid) dengan cara mengeluarkan asam tamak yang
tidak larut.

2.3.3.5 Identifikasi Tanin

Analisis tanin dilakukan menggunakan gelatin. Tanin dapat mengendapkan gelatin
(protein). Hasil reaksi menunjukkan positif mengandung senyawa tanin apabila
terdapat endapan coklat (Harborne, 1987: 133). Reaksi senyawa tanin dan gelatin
sebagai berikut :
 Gambar 2.17 Reaksi Senyawa Tanin dan Gelatin (Harborne, 1987: 133).
2.3.4. Saponin
2.3.4.1. Konsep Saponin
Saponin merupakan senyawa dalam bentuk glikosida yang terikat dengan steroid atau
triterpena. Senyawa saponin tersebar luas pada tumbuhan tingkat tinggi. Saponin diberi nama
demikian karena sifatnya yang menyerupai sabun atau “sapo” (Robinson, 1995:157)
2.3.4.2. Sumber dan Klasifikasi Saponin
1). Sumber Saponin
Senyawa saponin banyak dijumpai pada tanaman. Saponin juga ditemukan dalam
Gymnostemma pentaphyllum (Genus Gymnostemma, Famili Cucurbitaceae) dalam bentuk
yang disebut Gipenosida, dan ginseng (Genus Panax, Famili Araliaceae) dalam bentuk yang
disebut ginsenosida. Di dalam keluarga-keluarga tersebut, golongan senyawa saponin
dijumpai dalam berbagai bagian tanaman antara lain daun, batang, akar, biji, bunga dan buah
(Robinson, 1995:157).
2). Klasifikasi Saponin
Saponin dibedakan atas dua jenis yaitu saponin steroid dan saponin triterpenoid. Saponin
steroid tersusun atas inti steroid (C27) dengan molekul karbohidrat. Saponin steroid
dihidrolisis menghasilkan satu aglikon yang dikenal sebagai sapogenin. Saponin triterpenoid
tersusun atas inti triterpenoid dengan molekul karbohidrat. Dihidrolisis menghasilkan suatu
aglikon yang disebut sapogenin. Struktur senyawa saponin dapat disajikan sebagai berikut:
(Robinson, 1995:157).

Gambar 2.18 Struktur Dasar Senyawa Saponin Steroid dan Triterpenoid (Robinson,
1995:157)
2.3.4.3. Sifat Fisika dan Kimia Saponin
1). Sifat Kimia Saponin
Menghemolisa eritrosit, merupakan racun kuat untuk ikan dan amfibi, membentuk
persenyawaan dengan kolesterol dan hidroksi steroid, sulit untuk dimurnikan dan
diidentifikasi dan mempunyai berat molekul relatif tingi (Robinson, 1995:157).
2). Sifat Fisika Saponin
Saponin mempunyai rasa pahit, dalam air membentuk busa yang stabil.
2.3.4.4. Manfaat Saponin
Manfaat saponin sebagai berikut:
1. Mengusir kolesterol di usus besar sebelum terserap ke dalam aliran darah
2. Berfungsi sebagai pembersih sekaligus antiseptik.
3. Mampu mengikat kolesterol dalam darah (Robinson, 1995:157).
2.3.3.5. Identifikasi Saponin
Uji saponin dilakukan dengan metode Forth yaitu dengan cara memasukan sampel ke dalam
tabung reaksi, ditambahkan aquades, dikocok selama 30 detik. Diamati perubahan yang
terjadi. Apabila terbentuk busa yang mantap (tidak hilang selama 30 detik) maka identifikasi
menunjukan adanya saponin. Timbulnya busa pada uji Forth menunjukan adanya glikosida
yang mempunyai kemampuan membentuk buih dalam air yang terhidrolisis menjadi glukosa
dan senyawa lainya (Robinson, 1983: 157). Reaksinya sebagai berikut:

Gambar 2.19 Reaksi Senyawa Saponin dan Air (Robinson, 1983:158)

2.3.5. Triterpenoid dan Steroid
2.3.5.1. Konsep Triterpenoid dan Steroid
Triterpenoid merupakan senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari enam unit isoprena
dan secara biosintesis diturunkan dari hidrokarbon C30 asiklik. Senyawa ini berstruktur siklik
yang relatif kompleks, kebanyakan berupa alkohol, aldehida, atau asam karboksilat
(Harborne, 1987: 174)Sterol merupakan triterpena yang kerangka dasarnya sistem cincin
siklo pentana perhidro fenantrena (Harborne, 1987: 174). Nama sterol dipakai khusus untuk
alkohol, tetapi karena semua steroid tumbuhan berupa alkohol dengan gugus hidroksil pada
C-3, maka sering kali disebut sterol (Robinson, 1995: 154).
2.3.5. 2. Sumber dan Klasifikasi Triterpenoid dan Steroid
1). Sumber Triterpenoid dan Steroid
Triterpenoid tersebar luas dalam damar, gabus dan kutin tumbuhan. triterpenoid yang penting
adalah hidrokarbon skualena, yang diisolasi untuk pertama kali dari minyak hati ikan hiu,
tetapi ditemukan juga dalam minyak nabati ( misalnya minyak zaitun). Salah satu senyawa
triterpenoid yang paling dikenal adalah lanosterol terdapat dalam lemak wol, khamir dan
beberapa senyawa tumbuhan tinggi (Robinson, 1995: 152).
2). Klasifikasi Triterpenoid dan Steroid
Triterpenoid dapat dibagi menjadi 4 golongan senyawa yaitu triterpen sebenarnya, steroid,
saponin dan glikosida jantung. Menurut asalnya senyawa steroid dibagi atas:
1. Zoosterol, yaitu steroid yang berasal dari hewan misalnya kolesterol.
2. Fitosterol, yaitu steroid yang berasal dari tumbuhan misalnya sitosterol dan
stigmasterol (Harborne, 1987:148-149).
Adapun struktur dasar steroid dan triterpenoid sebagai berikut.

Gambar 2.20 Struktur Senyawa Steroid dan Triterpenoid (http:// www. chemspider. com/
Chemical-Structure. 8229811. html)

2.3.5. 3. Sifat Fisika dan sifat Kimia Triterpenoid dan Steroid

1. Sifat Fisika Triterpenoid dan Steroid
Pada temperatur kamar, triterpenoid dan steroid merupakan cairan tidak berwarna, tetapi jika
teroksidasi. Warna triterpenoid akan berubah menjadi gelap. Triterpenoid dan steroid
mempunyai bau yang khas, indeks bias tinggi, kebanyakan merupakan senyawa optik aktif,
kerapatan lebih kecil dari air, larut dalam pelarut organik seperti eter dan alkohol (Sirait,
2007:213).
2. Sifat Kimia Triterpenoid dan Steroid
Triterpenoid dan steroid merupakan senyawa tidak jenuh (rantai terbuka ataupun siklik).
Isoprenoid kebanyakan bentuknya kiral dan terjadi dalam dua bentuk enantiomer (Sirait,
2007:213).
2.3.5.4. Manfaat Triterpenoid dan Steroid
Senyawa triterpenoid dan steroid memiliki komponen aktif sebagai obat yang digunakan
untuk terapi penyakit diabetes, gangguan mensturasi, pautkan ular, gangguan kulit, kerusakan
hati dan malaria (Robinson, 1983:154).
2.3.5.5. Identifikasi Triterpenoid dan Steroid
Analisis triterpenoid dan steroid banyak digunakan ialah reaksi Lieberman-Burchard
(anhidrat asetat-H2SO4 pekat), dengan kebanyakan triterpena dan sterol memberikan warna
hijau-biru (Sirait, 2007:213). Reaksinya sebagai berikut.

Gambar 2.21 Reaksi Lieberman-Burchard (Sirait, 2007:213)

2.4 METANOL
Metanol merupakan senyawa kimia dengan rumus kimia CH3OH, dikenal sebagai metil
alkohol yang merupakan bentuk alkohol sederhana. Metanol digunakan sebagai bahan
pelarut, bahan bakar dan sebagai bahan adiktif bagi industri etanol.
Sifat kimia dan sifat fisika metanol adalah sebagai berikut:
1. Sifat kimia.
Metanol dapat bereaksi dengan asam karboksilat dan turunannya membentuk ester
dengan reaksi sebagai berikut:

2. Sifat fisika.
 Titik didih : 64,5 0 C
 Berat jenis : 0,79 g/mL pada suhu 20 0 C.
 Kelarutan dalam air : larutan
 Sifat sebagai pelarut : melarutkan senyawa polar (Fessenden, 1986;2061)

2.5 MASERASI
Maserasi merupakan proses perendaman terhadap bahan yang akan diekstraksi menggunakan
pelarut pada suhu kamar selama beberapa waktu. Pelarut yang digunakan akan menentukan
efisiensi proses penarikan zat berkhasiat dari bahan alam (Agoes, 2009:32).
Secara umum pelarut metanol merupakan pelarut yang banyak digunakan dalam proses
isolasi senyawa organik bahan alam karena dapat melarutkan seluruh golongan metabolit
sekunder. Rumus untuk menghitung rendemen (Agoes, 2009:32):

Keuntungan metode maserasi:

1. Alat yang dipakai sederhana, hanya dibutuhkan bejana perendam.
2. Biaya operasionalnya relatif rendah.
3. Tanpa pemanasan.
Kelemahan metode maserasi:
 1. Proses penyaringannya tidak sempurna, karena zat aktif hanya mampu terekstraksi
sebesar 50% saja.
2. Prosesnya lama, butuh waktu beberapa hari (Ibrahim dan Sitorus, 2013 :16).

2.6 SIFAT FISIKOKIMIA

2.6.1. Massa Jenis
Massa jenis atau Density (ρ) didefinisikan sebagai massa persatuan volume. Massa jenis
merupakan sifat khas dari suatu zat murni. Massa jenis rata-rata setiap benda merupakan total
massa dibagi degan total volumenya. Secara matematis dapat dituliskan sebagai berikut:

Massa jenis suatu zat tidak ditentukan oleh massa, volume, dan bentuk benda, melainkan
ditentukan oleh jenis zat. Massa jenis suatu bahan obat memiliki hubungan terhadap
aktivitasnya di dalam tubuh manusia. Semakin besar massa jenis suatu bahan obat
menunjukan molekul obat semakin besar, hal ini berpengaruh terhadap proses difusi obat
dalam sel tubuh semakin lama.
2.6.2. Kelarutan
Kelarutan atau solubilitas merupakan kemampuan suatu zat terlarut, agar larut dalam suatu
pelarut. Kelarutan dinyatakan dalam jumlah maksimum zat terlarut yang larut dalam suatu
pelarut pada kesetimbangan. Larutan hasil disebut larutan jenuh. Daya larut zat berbeda-beda,
tergantung sifat zat terlarut dan pelarutnya. Ada beberapa zat yang mudah larut dan ada pula
yang sukar larut. Kelarutan dapat dinyatakan dalam gram zat terlarut per 100 mL atau 100
gram pelarut (Santoso, 2008:86).
Faktor-faktor yang mempengaruhi kelarutan:
1. Pengaruh Jenis Zat
Zat-zat dengan struktur kimia yang mirip umumnya dapat saling bercampur dengan
baik, sedangkan zat-zat yang struktur kimianya berbeda umumnya kurang dapat
saling bercampur. Senyawa bersifat polar akan mudah larut dalam pelarut polar,
sedangkan senyawa nonpolar akan mudah larut dalam pelarut nonpolar. Misalnya
alkohol dan air bercampur sempurna, air dan eter bercampur sebagian, sedangkan
minyak dan air tidak bercampur (Santoso, 2008:87).
2. Pengaruh Temperatur
Kelarutan gas umumnya berkurang pada temperatur yang lebih tinggi. Misalnya jika
air dipanaskan, timbul gelembung-gelembung gas yang keluar dari dalam air,
sehingga gas yang terlarut dalam air menjadi berkurang. Kebanyakan zat padat
kelarutannya lebih besar pada temperatur yang lebih tinggi. Ada beberapa zat padat
yang kelarutannya berkurang pada temperatur yang lebih tinggi, misalnya natrium
sulfat dan serium sulfat (Santoso, 2008:87)
3. Pengaruh tekanan pada kelarutan
Perubahan tekanan pengaruhnya kecil terhadap kelarutan zat cair atau padat.
Perubahan tekanan sebesar 500 atm hanya merubah kelarutan NaCl sekitar 2,3% dan
NH4Cl sekitar 5,1%. Kelarutan gas sebanding dengan tekanan parsial gas itu
(Santoso, 2008:88).Kelarutan suatu kelompok senyawa obat bahan alam erat
hubungannya dengan aktivitas obat tersebut dalam tubuh manusia. Polar atau non
polarnya suatu senyawa yang masuk ke dalam tubuh akan menentukan larutnya
senyawa tersebut terhadap cairan tubuh manusia. Apabila senyawa yang masuk ke
dalam tubuh bersifat polar maka akan larut dalam cairan tubuh yang bersifat polar,
sebaliknya apabila senyawa yang masuk ke dalam tubuh bersifat non polar maka akan
larut dalam cairan tubuh yang bersifat non polar (Siswandono, 1998:7).
2.6.3. Titik Didih
Titik didih adalah suhu pada saat tekanan uap sama dengan tekanan atmosfer. Titik didih
cairan tergantung besarnya tekanan atmosfer. Makin besar tekanan atmosfer, makin tinggi
suhu yang diperlukan untuk memberikan tekanan uap yang dapat menandinginya. Titik didih
pada tekanan 1 atm (760 torr) dinamakan titik didih normal. Titik didih merupakan salah satu
sifat fisika yang dapat digunakan untuk memperkirakan secara tidak langsung kuatnya gaya
tarik antarmolekul dalam cairan. Cairan yang gaya tarik antarmolekulnya kuat memiliki titik
didih yang tinggi (Brady, 1999: 562-563).

2.7 ANALISIS KOMPONEN SENYAWA KIMIA

2.7.1. Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Kromatografi lapis tipis (KLT) merupakan metode pemisahan campuran analit degan
mengelusi analit melalui lempeng kromatografi lalu melihat komponen/analit yang terpisah
dengan penyemprotan atau pengecatan. Dalam bentuk yang sederhana, lempeng-lempeng
kromatografi lapis tipis dapat disiapkan di laboratorium, lalu lempeng diletakan pada wadah
dengan ukuran yang sesuai. Selanjutnya kromatogram hasil dapat discanning secara visual.
Dalam bentuk yang lebih canggih, terdapat berbagai jenis lempeng kromatografi lapis tipis.
Teknik penotolan sampel, termasuk alat penotolan sampel yang diotomatisasi, tempat
pengembangan, alat pendeteksi, serta penyerap (fase diam). Pada kromatografi lpis tipis fase
diam berupa lapisan yang seragam (uniform) pada permukaan bidang datar yang didukung
oleh lempeng kaca, aluminium, atau lempeng plastik. Fase gerak sebagai pelarut pengembang
akan bergerak sepanjang fase diam karena pengaruh kapiler pada pengembangan secara
mekanik, atau karena pengaruh gravitasi pada pengembangan secara menurun. Beberapa
keuntungan kromatografi lapis tipis sebagai berikut :
1. Kromatografi lapis tipis banyak digunakan untuk tujuan analisis.
2. Identifikasi pemisahan komponen dapat dilakukan dengan pereaksi warna,
fluoresensi, atau dengan cara radiasi menggunakan sinar UV.
3. Dapat dilakukan elusi secara menaik, menurun, atau dengan cara emisi dua dimensi.
4. Ketepatan penentuan kadar akan lebih baik karena komponen yang akan ditentukan
merupakan bercak yang tidak bergerak (Gandjar dan Rhoman, 2012: 329).
Struktur kimia KLT sebagai berikut:

Gambar 2.22 Struktur Kimia KLT

Komponen-komponen yang terdapat dalam kromatografi lapis tipis antara lain:
1. Fase diam atau penjerap
Fase diam yang digunakan dalam kromatografi lapis tipis (KLT) merupakan penyerap
berukuran kecil dengan diameter partikel 10-30 µm, semakin kecil ukuran rata-rata
partikel fase diam dan semakin sempit kisaran fase diam, maka semakin baik kinerja
kromatografi lapis tipis dalam hal efisiensi dan resolusinya.
Penjerap yang paling sering digunakan adalah silika, serbuk selulosa, sementara
mekanisme sorpsi yang utama pada kromatografi lapis tipis adalah partisi dan
adsorbsi. Lempeng kromatografi lapis tipis telah tersedia di pasaran dengan berbagai
ukuran dan telah ditambah dengan reagen fluoresen untuk memfasilitasi deteksi
bercak solut (Gandjar dan Rohman, 2012:334). Beberapa fase diam yang sering
digunakan dalam KLT (Gandjar dan Rohman, 2012:335-341) antara lain
 a. Silica gel
Silica gel merupakan penyerap yang paling sering digunakan dalam
kromatografi lapis tipis. Silica gel disiapkan dengan hidrolisis natrium silikat
dengan asam polisilikat yang mengalami kondensasi dan polimerisasi lebih
lanjut menghasilkan bahan silica gel.
Daya pisah dan efisiensi pemisahan yang diperoleh tergantung pada ukuran
dan distribusi ukuran partikel. Daya pisah akan meningkat seiring dengan
semakin seragam dan kecilnya ukuran partikel. Lempeng kromatografi lapis
tipis silica gel yang beredar di pasaran mempunyai rata-rata ukuran partikel 10
m dengan kisaran ukuran partikel yang lebih sempit. Lempeng-lempeng
kromatografi lapis tipis tersedia dengan indikator fluoresen (bahan yang
berfluoresensi atau berpendar), yang biasanya berupa seng silikat atau fosfor
yang diaktivasi oleh mangan, yang akan mengemisikan suatu fluoresensi hijau
ketika diradiasi/disinari dengan lampu UV pada panjang gelombang 254 nm.
Senyawa-senyawa yang mampu menyerap sinar UV akan muncul
sebagai bercak-bercak.
b. Keiselguhr (Celit)
Keiselguhr (Celit) merupakan tanah yang tersusun atas organisme laut
mikroskopi yang kaya akan silica dan disebut dengan diatom. Bahan ini
mempunyai polaritas dan luas permukaan yang besar. Keiselguhr sendiri tidak
mempunyai sifat absorptive yang kuat, tetapi keiselguhr dapat dilapiskan pada
fase diam cair berlilin; karena alasan inilah maka bahan ini digunakan sebagai
pendukung fase diam dalam kromatografi partisi. Keiselguhr (Celit) yang
dilapiskan dengan cairan paraffin digunakan dalam uji farmakope untuk
trigliserida dan asam-asam lemak dalam minyak.
c. Alumina
Alumina (aluminium oksida) merupakan penyerap yang kuat dan dapat
berfungsi sebagai penukar ion amfoterik, tergantung pada sifat permukaan dan
pelarut yang digunakan.
d. Serbuk selulosa
Lapisan-lapisan serbuk selulosa merupakan agregasi partikel-partikel dengan
ukuran yang sangat kecil sehingga diperlukan aliran fase gerak yang lebih
banyak dengan difusi senyawa-senyawa terlarut yang kecil. Selulosa
mengandung air yang teradsorbsi yang tertahan
pada struktur glukopiranosa dengan ikatan hidrogen. Dengan demikian
pemisahan terjadi melalui mekanisme partisi. Bahan-bahan selulosa hampir
digunakan secara eksklusif untuk pemisahan senyawa-senyawa hidrofilik
seperti asam amino dan gula.
2. Fase gerak atau pelarut pengembang
Fase gerak merupakan medium angkut yang terdiri atas satu atau beberapa pelarut.
Fase gerak bergerak di dalam fase diam, yaitu suatu lapisan berpori, karena ada gaya
kapiler. Profil pada pemisahan kromatografi lapis tipis dapat dimodifikasi dengan
mengubah rasio distribusi, mengubah komposisi fase gerak, memperhatikan polaritas
dan kekuatan elusinya. Sistem yang paling sederhana adalah campuran dua pelarut
 organik karena daya elusi campuran kedua pelarut tersebut dapat mudah diatur
sedemikian rupa sehingga pemisahan dapat terjadi secara optimal. Pelarut/fase gerak
yang digunakan harus cukup murah dan mempunyai kemurnian yang sangat tinggi
karena kromatografi lapis tipis merupakan teknik yang sensitif.
Daya elusi fase gerak harus diatur sedemikian rupa sehingga harga Rf terletak antara
0,2-0,8 untuk memaksimalkan pemisahan (Gandjar dan Rohman, 2012: 342).
3. Aplikasi (penotolan) sampel
Suatu sampel ditotolkan pada lempeng kromatografi lapis tipis. Lempeng
kromatografi lapis tipis tidak boleh rusak selama penotolan sampel. Biasanya
ditotolkan 1-10 µl larutan. Untuk menotolkan disarankan agar menggunakan
mikropipet berujung runcing, khusus berskala 1 µl dan bervolume 10 µl (Stahl, 1985 :
10). Pemisahan pada kromatografi lapis tipis akan lebih optimal jika sampel yang
ditotolkan berada dalam bercak yang sekecil dan sesempit mungkin.
Apabila sampel yang ditotolkan terlalu banyak maka akan menurunkan resolusi
(Gandjar dan Rohman, 2012:345).
4. Pengembangan kromatografi lapis tipis
Pengembangan adalah proses pemisahan senyawa akibat pelarut pengembang
merambat naik dalam lempeng kromatografi lapis tipis. Pemisahan senyawa
dilakukan dalam suatu bejana kromatografi (chamber) yang telah dijenuhkan dengan
uap eluen. Tujuan penjenuhan bejana kromatografi adalah untuk memperoleh
homogenitas atmosfer dalam bejana, sehingga dapat meminimalisir penguapan pelarut
pada lempeng kromatografi lapis tipis selama dalam pengembangan (Stahl, 1985:11).
Bejana kromatografi harus dalam keadaan tertutup setelah eluen dimasukkan dan saat
lempeng kromatografi lapis tipis dimasukkan setelah penotolan, bejana tidak boleh
dibiarkan terbuka terlalu lama, karena jika terbuka lama maka dapat menyebabkan
penyebaran elusi tidak merata atau tidak horizontal. Pada saat dimasukkan ke dalam
bejana, lempeng kromatografi lapis tipis yang telah ditotoli harus tercelup kurang
lebih 0,5-1 cm. Tinggi eluen dalam bejana harus berada di bawah totolan pada
lempeng kromatografi lapis tipis (Gandjar dan Rohman, 2012:346).
5. Deteksi bercak/noda
Bercak pemisahan pada kromatografi lapis tipis umumnya merupakan bercak yang
tidak berwarna, sehingga untuk penentuannya dapat dilakukan dengan cara kimia
maupun fisika. Secara kimia dapat dilakukan dengan mereaksikan bercak dengan
suatu pereaksi tertentu melalui penyemprotan sehingga bercak menjadi jelas
menunjukkan adanya suatu kelompok senyawa tertentu. Cara fisika yang dilakukan
adalah dengan proses radioaktif dan fluorensi dibawa sinar ultra violet (UV) dengan
panjang gelombang 254 atau 366 nm (Gandjar dan Rohman, 2012:351).
Dalam kromatografi lapis tipis dan kromatografi kertas, hasil yang diperoleh
digambarkan dengan mencantumkan nilai Rf yang merujuk pada migrasi relatif analit
terhadap ujung depan fase gerak atau eluen. Nilai Rf dapat didefinisikan sebagai:
 Pemisahan kromatografi lapis tipis dikendalikan oleh rasio distribusi komponen
dalam sistem fase diam/ penyerap dan eulen tertentu. Pemisahan pada kromatografi
lapis tipis dapat dimodifikasi dengan mengubah rasio distribusi dengan mengubah
komponen fase gerak dengan memperhatikan polaritas dan kekuatan elusinya. Berikut
adalah beberapa petunjuk dalam memilih dan mengoptimalisasi fase gerak:
1. Fase gerak harus mempunyai kemurnian yang sangat tinggi karena
kromatografi lapis tipis merupakan teknik yang sensitif.
2. Daya elusi gerak harus diatur sedemikian rupa sehingga harga Rf terletak
antara 0,2-0,8 untuk memaksimalkan pemisahan.
3. Untuk pemisahan dengan menggunakan fase diam polar seperti silika gel,
polarisasi fase gerak akan menentukan kecepatan mugrasi solut yang berarti
juga menentukan nilai Rf. Penambahan pelarut yang bersifat sedikit polar
seperti dietil eter ke dalam pelarut non polar seperti metil benzena akan
meningkatkan harga Rf secara signifikan.
4. Solut-solut ionik dan solut-solut polar lebih baik digunakan campuran pelarut
sebagai fase geraknya seperti campuran air dan metanol dengan perbandingan
tertentu. Penambahan sedikit asam etanoat atau amonia masing-masing akan
meningkatkan solut-solut bersifat basa dan asam (Gandjar dan Rohman, 2012:
342).
2.8 PENELITIAN RELEVAN
Penelitian-penelitian relevan yang telah dilakukan pada ekstrak kombinasi daun salam dan
daun sirsak antara lain:
1. Robertino Ikalinus, Sri Kayati Widyastut, Ni Luh Eka Setiasih, (2015), “Skrining
fitokimia ekstrak etanol daun salam diperoleh kelompok senyawa flavonoid, alkaloid,
tanin, steroid, fenolat, tanin
2. Putri Yuliana Mangindaan, I Ketut Berata, Ni Luh Eka Setiasih (2014), “Pemberian
ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak terhadap gambaran mikroskopis ginjal
tikus yang diinduksi Aloksan,” menunjukkan bahwa pemberian ekstrak daun salam
dosis 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB dan 400 mg/KgBB tidak berpengaruh terhadap
gambaran mikroskopik ginjal tikus wistar yang diinduksi aloksan.
3. Vaswani Samaria Napitupulu, I Ketut Berata, Ni Luh Eka Setiasih (2014), “ Ekstrak
Kombinasi daun salam dan daun sirsak Terhadap Perubahan Histopatologi Testis
Tikus yang diinduksi Aloksan”, menunjukan bahwa pemberian ekstrak kombinasi
daun salam dan daun sirsak terhadap perubahan histopatologi testis tikus wistar yang
diinduksi aloksan dengan dosis 100mg/kg bb, 200mg/kg bb dan 400 mg/kg bb tidak
memberikan hasil yang berbeda nyata (p>0,05).

2.9 PENYAKIT YANG AKAN DITELITI

2.9.1 Konsep Teoritis Penyakit Diabetes.
 Istilah diabetes melitus berasal dari kata diabere yang berarti siphon atau tabung untuk
mengalirkan cairan dari satu tempat ke tempat lain, dan mellitus yang memiliki arti madu.
Istilah tersebut dipakai karena dahulu para cendekiawan menggambarkan penyakit ini seperti
melelehnya daging dan tulang ke dalam urin dan mereka berpendapat bahwa urin penderita
memiliki rasa manis seperti bergelimang madu dan gula (Suyono, 2009).
Diabetes Melitus merupakan penyakit kelainan metabolisme yang disebabkan kurangnya
hormon insulin hormon insulin normal hanya reseptor insulin kurangnya sehingga glukosa
menumpuk di dalam darah kemudian menyebabkan kadar gula darah meningkat. Hormon
insulin dihasilkan oleh sekelompok sel beta di kelenjar pankreas dan sangat berperan dalam
metabolisme glukosa dalam sel tubuh.
Diabetes melitus adalah penyakit yang disebabkan oleh gagalnya penguraian zat gula didalam
tubuh (darah) pada tubuh normal, zat gula harus diurai menjadi glukosa dan glikogen oleh
hormon insulin yang diproduksi sel beta pankreas. Glukosa dan glikogen inilah yang
kemudian oleh tubuh melalui proses metabolisme atau pembakaran diubah menjadi energi
(Hartini, 2009).
Diabetes melitus sangat tepat didefinisikan sebagai serangkaian gangguan atau sindoma, di
mana tubuh tidak mampu mengatur secara tepat pengolahan, atau metabolisme karbohidrat,
lemak dan protein. Ini disebabkan oleh kekurangan baik maupun utlakinsulin hormon
penting, yang dihasilkan dan dilepas oleh sel-sel khusus/sesel beta yang terletak di pankreas.
(Bogdan Mc Wright, MD. 2008)
Diabetes Melitus adalah suatu kumpulan gejala yang timbul pada seseorang yang disebabkan
adanya peningkatan kadar glukosa darah akibat kekurangan insulin baik absolut maupun
relatif. Untuk dapat memahami definisi itu lebih jelas , ada baiknya diterangkan terlebih
dahulu apa yang terjadi pada orang yang tidak menderita diabetes.(Syafrii Syahbudin, 2002).
Menurut Colberg (2010), diabetes melitus adalah suatu penyakit metabolik yang diakibatkan
oleh kelainan dalam sekresi insulin, kerja insulin atau kombinasi dari keduanya. Insulin
merupakan salah satu hormon yang diproduksi oleh pankreas yang dapat mengontrol kadar
glukosa darah dengan cara menstimulasi pemasukan glukosa ke dalam sel untuk digunakan
sebagai sumber energi dan membantu penyimpanan glikogen di dalam sel otot dan hati,
gangguan pada kerja insulin dapat berakibat pada kejadian hiperglikemi serta gangguan
metabolisme karbohidrat, lemak dan protein.

2.9.2 Klasifikasi Penyakit Diabetes

Berdasarkan penyebab yang melatar belakangi penyakit, maka diabetes di kelompokkan
menjadi diabetes tipe 1, diabetes tipe 2, diabetes tipe lain dan diabetes gestasional. Berikut
adalah tabel klasifikasi diabetes melitus berdasarkan etiolginya :

Jenis DM Etiologi
Tipe 1 Destruksi sel beta, umumnya menjurus ke defisiensi
insulin
 absolut
 Autoimun
 Idiopatik
Tipe 2 Bervariasi, mulai yang dominan resistensi insulin disertai
defisiensi relative sampai yang dominan defek sekresi
insulin disertai resistensi insulin
Tipe lain  Defek genetik fungsi sel beta
 Defek genetik kerja insulin
 Penyakit eksokrin pankreas
 Endokrinopati
 Karena obat atau zat kimia
 Infeksi
 Sebab imunologi
 Sindrom genetik lain yang berkaitan dengan DM
Diabetes Melitus gestasional. -

Tabel 2.3 Klasifikasi Diabetes Melitus berdasarkan etiologi.

2.9.3 Patofisiologi Penyakit Diabetes

Pengolahan bahan makanan dimulai di mulut kemudian ke lambung dan selanjutnya ke
usus. Di dalam saluran pencernaan itu makanan di pecah menjadi bahan dasar dari makanan
itu. Karbohidrat menjadi glukosa, protein menjadi asam amino, dan lemak menjadi asam
lemak. Ketiga zat makan itu akan diserap oleh usus dan kemudian masuk ke dalam pembuluh
darah dan diedarkan ke seluruh tubuh untuk dipergunakan oleh organ-organ didalam tubuh
sebagai bahan bakar. Supaya dapat berfungsi sebagai bahan bakar, zat makanan itu harus
masuk dulu ke dalam sel supaya dapat diolah. Di dalam sel, zat makan terutama glukosa
dibakar melalui proses kimia yang rumit, yang hasil akhirnya adalah timbulnya energi. Proses
ini disebut metabolisme. Dalam proses metabolisme itu insulin memegang peran yang sangat
penting yaitu bertugas memasukkan glukosa ke dalam sel, untuk selanjutnya dapat
dipergunakan sebagai bahan bakar. Insulin ini adalah suatu zat atau hormon yang dikeluarkan
oleh sel beta di pankreas (Suyono, 2004).
Pada DM type II jumlah insulin normal, malah mungkin lebih banyak tetapi jumlah reseptor
insulin yang terdapat pada permukaan sel yang kurang. Reseptor insulin ini dapat di ibaratkan
sebagai lubang kunci pintu masuk ke dalam sel. Pada keadaan tadi lubang kuncinya yang
kurang, hingga meskipun anak kuncinya (insulin) banyak, tetapi karena lubang kuncinya
(reseptor) kurang, maka glukosa yang masuk sel akan sedikit, sehingga sel akan kekurangan
bahan bakar (glukosa) dan glukosa di dalam pembuluh darah meningkat (Suyono, 2004).
Efek samping insulin adalah penambahan berat badan yang mungkin diduga karena tiga
penyebab : (Bogdan Mc Wright, MD. 2008)
1. Insulin diketahui memiliki efek anabolik (pembentukan tubuh).
 2. Ketika kontrol terdapat glisemia yang baik mulai dicapai karena adanya terapi insulin,
sedikit gula yang hilang didalam urin.
3. Pengobatan insulin membuat orang merasa lebih baik.

2.9.4 Penyebab Penyakit Diabetes

Penyebab DM adalah kurangnya produksi dan ketersediaan insulin dalam tubuh yang
mencukupi maka tidak dapat bekerja secara normal atau terjadinya gangguan fungsi insulin.
Insulin berperan utama dalam mengatur kadar glukosa dalam darah, yaitu 60-120 mg/dl
waktu puasa dan dibawah 140 mg/dl pada dua jam sesudah makan (orang normal)
(Tjokroprawiro, 2006).
Kekurangan Insulin disebabkan karena terjadinya kerusakan sebagian kecil atau sebagian
besar dari sel-sel beta pulau Langerhans dalam kelenjar pankreas yang berfungsi
menghasilkan insulin. Ada beberapa faktor yang menyebabkan DM sebagai berikut :
a) Genetik atau Faktor Keturunan
Diabetes mellitus cenderung diturunkan atau diwariskan, bukan ditularkan. Anggota
keluarga penderita DM memiliki kemungkinan lebih besar terserang penyakit ini
dibandingkan dengan anggota keluarga yang tidak menderita DM. Para ahli kesehatan
juga menyebutkan DM merupakan penyakit yang terpaut kromosom seks. Biasanya
kaum laki-laki menjadi penderita sesungguhnya, sedangkan kaum perempuan sebagai
pihak yang membawa gen untuk diwariskan kepada anak-anaknya (Maulana, 2008).
b) Virus dan Bakteri
Virus yang menyebabkan DM adalah rubella, mumps, dan human coxsackievirus B4.
Diabetes mellitus akibat bakteri masih belum bisa dideteksi. Namun, para ahli
kesehatan menduga bakteri cukup berperan menyebabkan DM (Maulana, 2008).
c) Bahan Toksin atau Beracun
Ada beberapa bahan toksik yang mampu merusak sel beta secara langsung, yakni
allixan, pyrinuron (rodentisida), streptozotocin (produk dari sejenis jamur) (Maulana,
2008).
d) Asupan Makanan
Diabetes mellitus dikenal sebagai penyakit yang berhubungan dengan asupan
makanan, baik sebagai faktor penyebab maupun pengobatan. Asupan makanan yang
berlebihan merupakan faktor risiko pertama yang diketahui menyebabkan DM. Salah
satu asupan makanan tersebut yaitu asupan karbohidrat. Semakin berlebihan asupan
makanan semakin besar kemungkinan terjangkitnya DM (Maulana, 2008).
e) Obesitas
Retensi insulin paling sering dihubungkan dengan kegemukan atau obesitas. Pada
kegemukan atau obesitas, sel-sel lemak juga ikut gemuk dan sel seperti ini akan
menghasilkan beberapa zat yang digolongkan sebagai adipositokin yang jumlahnya
lebih banyak dari keadaan pada waktu tidak gemuk. Zat-zat itulah yang menyebabkan
resistensi terhadap insulin (Hartini, 2009).
2.9.5 Gejala Penyakit Diabetes
Gejala penyakit diabetes mellitus dapat digolongkan menjadi dua yaitu gejala angkut
dan gejala kronik.
a. Gejala Angkut dikenal beberapa istilah :

 Hipoglikemia : keadaan seseorang dengan kadar glukosa darah di bawah nilai normal.
Gejala ini ditandai dengan munculnya rasa lapar, gemetar, mengeluarkan keringat,
pusing, gelisah dan penderita bisa jadi koma.
 Ketoasidosis diabetik yang diartikan sebagai keadaan tubuh yang sangat kekurangan
insulin dan bersifat mendadak akibat infeksi, luka suntik insulin, pola makan yang
terlalu besar atau stres.
 Koma hiposmoler non kronik yang diakibatkan adanya dehidrasi berat, hipotensi, dan
shock.
Gejala penyakit diabetes melitus dari satu penderita ke penderita yang lain tidaklah
selalu sama tetapi terhadap keluhan yang umumnya timbul seperti banyak makan (polifagia),
banyak minum (polidipsia), dan banyak kencing (poliuria). Apabila keadaan tersebut tidak
segera diobati maka lama kelamaan mulai timbul gejala yang disebabkan oleh kurangnya
insulin. Kurangnya insulin menyebabkan gejala yang timbul hanya polidipsia, poliuria,
penurunan berat badan dengan cepat, mudah lelah, dan nafsu makan berkurang.
(Tjokroprawito,2006)
b. Gejala Kronik
Komplikasi kronis diartikan sebagai kelainan pembuluh darah yang akhirnya bisa
menyebabkan serangan jantung, gangguan fungsi ginjal, dan gangguan saraf. Komplikasi
kronik sering dibedakan berdasarkan bagian tubuh yang mengalami kelainan, seperti kelainan
di bagian mata, mulut, urogenital, saraf dan kulit. Kadang – kadang penderita diabetes
melitus tidak menunjukan gejala angkut atau mendadak tetapi baru menunjukkan gejala
sesudah beberapa bulan atau beberapa tahun mengidap penyakit diabetes melitus . Gejala
kronik yang sering timbul pada penderita diabetes melitus adalah kesemutan, kulit terasa
panas, rasa tebal dikulit, kram, capai, mudah mengantuk, mata kabur, gatal disekitar
kemaluan, gigi mudah goyang atau mudah lepas, kemampuan seksual menurun atau bahkan
impotensi, bagi ibu hamil sering mengalami keguguran atau berat bayi lahir lebih dari 4 kg.
(Tjokroprawito,2006)
2.9.6 Pengobatan penyakit Diabetes
Ada dua cara dalam penatalaksanaan diabetes yang pertama terapi tanpa obat dan yang
kedua adalah terapi dengan obat. Dalam penatalaksanaan DM, langkah pertama yang harus
dilakukan adalah terapi tanpa obat berupa pengaturan diet dan olah raga. Apabila dengan
langkah pertama ini tujuan penatalaksanaan belum tercapai, dapat dikombinasikan dengan
langkah farmakologis berupa terapi insulin atau terapi obat hipoglikemik oral, atau kombinasi
keduanya.
2.9.6.1 Terapi Tanpa Obat
1. Pengaturan Diet
Diet yang baik merupakan kunci keberhasilan penatalaksanaan diabetes. Diet yang
dianjurkan adalah makanan dengan komposisi yang seimbang dalam hal karbohidrat, protein
dan lemak, sesuai dengan kecukupan gizi baik sebagai berikut:

 Karbohidrat : 60 – 70%
 Protein : 10 -15%
 Lemak : 20 -25%

Jumlah kalori disesuaikan dengan pertumbuhan, status gizi, umur, stres akut dan kegiatan
fisik, yang pada dasarnya ditujukan untuk mencapai dan mempertahankan berat badan ideal.
Penurunan berat badan telah dibuktikan dapat mengurangi resistensi insulin dan memperbaiki
respons sel-sel p terhadap stimulus glukosa. Dalam salah satu penelitian dilaporkan bahwa
penurunan 5% berat badan dapat mengurangi kadar HbAlc sebanyak 0,6% (HbAlc adalah
salah satu parameter status DM), dan setiap kilogram penurunan berat badan dihubungkan
dengan 3-4 bulan tambahan waktu harapan hidup. Selain jumlah kalori, pilihan jenis bahan
makanan juga sebaiknya diperhatikan. Masukan kolesterol tetap diperlukan, namun jangan
melebihi 300 mg per hari. Sumber lemak diupayakan yang berasal dari bahan nabati, yang
mengandung lebih banyak asam lemak tak jenuh dibandingkan asam lemak jenuh. Sebagai
sumber protein sebaiknya diperoleh dari ikan, ayam (terutama daging dada), tahu dan tempe,
karena tidak banyak mengandung lemak.
Masukan serat sangat penting bagi penderita diabetes, diusahakan paling tidak 25 g per hari.
Disamping akan menolong menghambat penyerapan lemak, makanan berserat yang tidak
dapat dicema oleh tubuh juga dapat membantu mengatasi rasa lapar yang kerap dirasakan
penderita DM tanpa risiko masukan kalori yang berlebih. Disamping itu makanan sumber
serat seperti sayur dan Buah - buahan segar umumnya kaya akan vitamin dan mineral.
2. Olah Raga
Berolah raga secara teratur dapat menurunkan dan menjaga kadar gula darah tetap normal.
Saat ini ada dokter olah raga yang dapat dimintakan nasihatnya untuk mengatur jenis dan
porsi olah raga yang sesuai untuk penderita diabetes. Prinsipnya, tidak perlu olah raga berat,
olah raga ringan asal dilakukan secara teratur akan sangat bagus pengaruhnya bagi kesehatan.
Olahraga yang disarankan adalah yang bersifat CRIPE (Continuous, Rhytmical, Interval,
Progressive, Endurance Training). Sedapat mungkin mencapai zona sasaran 75-85% denyut
nadi maksimal (220-umur), disesuaikan dengan kemampuan dan kondisi penderita. Beberapa
contoh olah raga yang disarankan, antara lain jalan atau lari pagi, bersepeda, berenang, dan
lain sebagainya. Olahraga aerobik in! paling tidak dilakukan selama total 30-40 menit per
hari didahului dengan pemanasan 5-10 menit dan diakhiri pendinginan antara 5-10 menit.
Olah raga akan memperbanyak jumlah dan meningkatkan aktivitas reseptor insulin dalam
tubuh dan juga meningkatkan penggunaan glukosa.
2.9.6.2 Terapi Obat
 Apabila penatalaksanaan terapi tanpa obat (pengaturan diet dan olah raga) belum
berhasil mengendalikan kadar glukosa darah penderita, maka perlu dilakukan langkah
berikutnya berupa penatalaksanaan terapi obat, baik dalam bentuk terapi obat hipoglikemik
oral terapi insulin, atau kombinasi keduanya.
2.9.6.3 Terapi Insulin
Terapi insulin merupakan satu keharusan bagi penderita DM Tipe 1. Pada DM Tipe I,
sel-sel p Langerhans kelenjar pankreas penderita rusak, sehingga tidak lagi dapat
memproduksi insulin. Sebagai penggantinya, maka penderita DM tipe I harus mendapat
insulin eksogen untuk membantu agar metabolisme karbohidrat di dalam tubuhnya dapat
berjalan normal. Walaupun sebagian besar penderita DM Tipe 2 tidak memerlukan terapi
insulin, namun hampir 30% ternyata memerlukan terapi insulin disamping terapi
hipoglikemik oral.
2.9.6.4 Terapi Obat Hipoglikemik Oral
Obat-obat hipoglikemik oral terutama ditujukan untuk membantu penanganan pasien
DM Tipe II. Pemilihan obat hipoglikemik oral yang tepat sangat menentukan keberhasilan
terapi diabetes. Bergantung pada tingkat keparahan penyakit dan kondisi pasien,
farmakoterapi hipoglikemik oral dapat dilakukan dengan menggunakan satu jenis obat atau
kombinasi dari dua jenis obat Pemilihan dan penentuan rejimen hipoglikemik yang
digunakan harus mempertimbangkan tingkat keparahan diabetes (tingkat glikemia) serta
kondisi kesehatan pasien secara umum termasuk penyakit-penyakit lain dan komplikasi yang
ada.
Berdasarkan mekanisme kerjanya, obat-obat hipoglikemik dapat dibagi menjadi 3 golongan,
yaitu:
a. Obat-obat yang meningkatkan sekresi Insulin, meliputi obat hipoglikemik oral
golongan sulfonilurea dan glinida (meglitinida dan turunan fenilalanin).
b. Sensitiser insulin (obat-obat yang dapat meningkatkan sensitifitas sel terhadap
insulin, meliputi obat-obat hipoglikemik golongan biguanida dan
tiazolidindion, yang dapat membantu tubuh untuk memanfaatkan insulin
secara lebih efektif.
c. Inhibitor katabolisme karbohidrat, antara lain Inhibitor a- glukosidase yang
bekerja menghambat absorpsi glukosa dan umum digunakan untuk
mengendalikan hiperglikemia post prandial
d. (post meal hyperglycemia). Disebut Juga "starch blocker".
2.9.6.4 Terapi Kombinasi
Pada keadaan tertentu diperlukan terapi kombinasi dari beberapa OHO atau OHO
dengan insulin. Kombinasi yang umum adalah antara golongan sulfonilurea dengan
biguanida. Sulfinilurea akan mengawali dengan merangsang sekresi pankreas yang
memberikan kesempatan untuk senyawa biguanida bekerja efektif. Kedua golongan obat
hipoglikemik oral ini memiliki efek terhadap sensitivitas reseptor insulin, sehingga kombinasi
keduanya mempunyai efek saling menunjang. Pengalaman menunjukkan bahwa kombinasi
kedua golongan ini dapat efektif pada banyak penderita diabetes yang sebelumnya tidak
bermanfaat bila dipakai sendiri -sendiri.
2.9.7 Diagnosis Penyakit Diabetes
Diagnosis klinis DM umumnya akan diperkirakan apabila ada keluhan khas DM berupa
poliuria, polidipsia, polifagia, dan penurunan berat badan yang tidak dapat dijelaskan
penyebabnya. Keluhan lain yang mungkin disampaikan penderita antara lain badan terasa
lemah, sering kesemutan, gatal-gatal, mata kabur, disfungsi ereksi pada pria, dan pruritus
vulvae pada wanita.
Apabila ada keluhan khas, hasil pemeriksaan kadar glukosa darah sewaktu > 200 mg/dl sudah
cukup untuk menegakkan diagnosis DM. Hasil pemeriksaan kadar glukosa darah puasa > 126
mg/dl juga dapat digunakan sebagai patokan diagnosis DM untuk lebih jelasnya dapat dilihat
pada tabel 3 berikut Ini.
Tabel 2.4 Kriteria penegakan diagnosis.

Glukosa Plasma Glukosa Plasma

Puasa 2 dam setelah makan
Normal < 100 mg/dL < 140 mg/dL
Pra diabetes 100 -125 mg/dL -
IFG atau lGT - 140'199mg/dL
Diabetes > 126 mg/dL > 200 mg/dL

Untuk kelompok tanpa keluhan khas, hasil pemeriksaan kadar glukosa darah abnormal tinggi
(hiperglikemia) satu kali saja tidak cukup kuat untuk menegakkan diagnosis DM. Diperlukan
konfirmasi atau pemastian lebih lanjut dengan mendapatkan paling tidak satu kali lagi kadar
gula darah sewaktu yang abnormal tinggi (>200 mg/dL) pada hari lain, kadar glukosa darah
puasa yang abnormal tinggi (>126 mg/dL), atau dari hasil uji toleransi glukosa oral
didapatkan kadar glukosa darah paska pembebanan >200 mg/dL.
Secara umum, langkah-langkah penegakan diagnosis DM digambarkan oleh Soegondo
(2004) sebagaimana yang terlihat dalam gambar 1.
 Gambar 2.23 Kurva toleransi glukosa normal dan pada
penderita DM Tipe 1. Garis titik-titik menunjukkan
kisaran kadar glukosa darah normal

2.9.8 Pencegahan Penyakit Diabetes

Pada diabetes tipe 1, antara lain:

 Menjalani pengobatan intensif jika terdapat anggota keluarga yang mengidap diabetes
tipe 1
 Menjalani tes DNA untuk mengetahui adanya gen pembawa atau penyakit diabetes
tipe 1
Pada Diabetes tipe 2, antara lain:

 Mempertahankan berat badan ideal dengan mengonsumsi makanan rendah lemak.

 Mengonsumsi makanan tinggi serat seperti buah dan sayur
 Mengurangi konsumsi makanan dan minuman manis
 Berolahraga secara rutin dan banyak melakukan aktivitas fisik
 Mengurangi waktu duduk diam terlalu lama seperti ketika menonton televisi
 Menghindari atau berhenti merokok

2.10 KERANGKA KONSEPTUAL

Tanaman daun salam dan daun sirsak merupakan salah satu tanaman yang memiliki banyak
manfaat sebagai obat herbal tradisional, baik akar, kulit batang, daun, buah, dan daunnya
(Paliwal et al., 2011 ; Jaiswal et al., 2009). Secara terperinci, daun salam selain dimanfaatkan
sebagai pelengkap bumbu masakan juga dikenal memiliki khasiat untuk menyembuhkan
tekanan darah tinggi, kolesterol tinggi (Dalimartha, 2006) diare, sakit maag, mabuk akibat
alkohol, dan diabetes mellitus (Haryanto & Nugroho, 2006).
Menurut buku Profesor Hembing tentang tumbuhan berkhasiat, Pohon salam (Syzygium
polyanthum) terutama daunnya bisa digunakan untuk mengatasi gangguan asam urat,
kolesterol tinggi, radang lambung, stroke, diare, kencing manis, gatal-gatal dan masih banyak
lagi. (Handayani,2016).
Daun sirsak telah digunakan oleh sebagian masyarakat Indonesia sebagai obat tradisional,
diantaranya sebagai obat sakit pinggang, mengurangi rasa nyeri, gatal-gatal, reumatik, obat
bisul dan penurun panas (Mardiana, 2011).

2.11 HIPOTESIS PENELITIAN

Berdasarkan kajian pustaka dan kerangka konseptual, maka hipotesis penelitian dirumuskan
sebagai berikut
1. Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak memiliki sifat fisikokimia tertentu
yang khas antara lain massa jenis, titik didih, kelarutan dan putar optik
2. Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak memiliki komponen kelompok
senyawa fitokimia tertentu yang khas antara lain flavonoid, alkaloid, tanin, saponin,
steroid dan triterpenoid.
 BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 JENIS PENELITIAN
Jenis Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental design laboratorium

3.2 WAKTU DAN TEMPAT PENELITIAN

3.2.1 Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan April 2021.

3.2.2 Tempat Penelitian

Laboratorium Kimia UNWIRA KUPANG

3.3 POPULASI DAN SAMPEL

3.3.1 Populasi
Populasi pada penelitian ini adalah: tanaman Salam dan tanaman sirsak yang tumbuh di
semua areal di kota Kupang.

3.3.2 Sampel
Sampel pada penelitian ini adalah: daun salam dan daun sirsak diambil di daerah Penfui-Kota
Kupang.

3.4 Variabel Penelitian

Variabel penelitian adalah sifat atau nilai dari suatu obyek yang mempunyai variasi tertentu
yang ditetapkan open penelitian untuk dipelajari dan kemudian ditarik kesimpulannya. Pada
penelitian ini ada dua jenis variabel antara lain:

3.4.1 Variabel bebas

Variabel bebas adalah variabel yang menjadi sebab perubahan atau timbulnya variabel
terikat. Variabel bebas pada penelitian ini adalah:
1. Ekstrak Kombinasi daun salam dan daun sirsak
2. Pelarut metanol
3.4.2 variabel terikat
Variabel terikat adalah variabel yang dipengaruhi atau variabel yang menjadi akibat karena
adanya variabel bebas. Variabel terikat pada penelitian ini adalah:
1. Sifat fisikokimia komponen senyawa dalam ekstrak Kombinasi daun salam dan daun
sirsak
2. Komponen fitokimia dalam ekstrak Kombinasi daun salam dan daun sirsak

3.5 ALAT DAN BAHAN

3.5.1 Alat
3.5.1.1 Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Pisau, kantong plastik, blender baskom, gelas kimia 1000mL, neraca analitik ZSA 21, labu
erlenmeyer 3000 mL, corong, kapas muka, alumunium foil, batang pengaduk, sendok dan
kertas saring.

3.5.1.2 Uji pelarut metanol ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Tabung reaksi, rak tabung reaksi dan pipet tetes.

3.5.1.3 Analisis sifat fisikokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
3.5.1.3.1 Penetapan massa jenis ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Gelas kimia 25 mL, neraca analitik ZSA 21, oven INB 500 Germany, pipet volum 10 mL,
pipet ukur, desikator, stop watch, dan silinder ukur 10 mL.

3.5.1.3.2 Uji kelarutan ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Tabung reaksi, rak tabung reaksi, pipet tetes, gelas kimia 50 mL, silinder ukur 10 mL.

3.5.1.3.3 Penentuan titik didih ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Tabung reaksi, pipet tetes, thermometer 100 0 C, kaki tiga, kawat kasa, pembakar spritus,
gelas kimia pyrex 250 mL dan penyumbat gabus.

3.5.1.3 4 Penentuan putar optik ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Labu erlenmeyer 150 mL, gelas kimia 250 mL, silinder ukur 50 mL, polarimeter AP 300,
lampu natrium.

3.5.1.4 Analisis komponen fitokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
3.5.1.4.1 Uji alkaloid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Neraca analitik N. J 07392, tabung reaksi, alumunium foil, gelas kimia 100 mL, labu
volumetrik 100 mL, batang pengaduk, silinder ukur 50 mL, botol reagen.

3.5.1.4.2 Uji flavonoid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Tabung reaksi pyrex, silinder ukur 10 mL, gelas kimia 100 mL, labu volumetrik

3.5.1.4.3 Uji saponin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Tabung reaksi, kawat kasa, kaki tiga, gelas kimia pyrex 100 mL, silinder ukur 10 mL.

3.5.1.4.4 Uji tanin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Gelas kimia 100 mL, batang pengaduk, tabung reaksi.

3.5.1.4.5 Uji Triterpenoid dan steroid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Tabung reaksi, silinder ukur 10 mL, gelas kimia 50 mL, plat tetes, botol reagen.

3.5.1.4.5 Analisis Komponen Senyawa Kimia Ekstrak Kombinasi daun salam dan daun
sirsak
3.5.1.5.1 Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Kombinasi daun salam dan daun
sirsak
Labu Erlenmeyer 150 mL, pipet tetes, botol chamber, plat kromatografi lapis tipis (KLT),
gelas kimia 250 mL, gunting, penggaris 30 cm, pensil, silinder ukur 50 mL, tabung reaksi,
rak tabung reaksi, pipa kapiler, lampu UV 254 nm dan kaca arloji

3.5.2 Bahan
3.5.2.1 Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Daun salam dan daun salam, metanol 96% pa, kapas wajah.

3.5.2.2 Uji pelarut metanol ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, Minyak goreng, asam sulfat 98%

3.5.2.3 Analisis sifat fisikokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
3.5.2.3.1 Penetapan massa jenis ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak

3.5.2.3.2 Uji kelarutan ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, Kloroform 95%pa, metanol 96% pa, aseton
98% pa, dietil eter 95% pa, aquades.

3.5.2.3.3 Penentuan titik didih ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, aquades,

3.5.2.3.4 Penentuan putar optik ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, metanol 96% pa.

3.5.2.4 Analisis komponen fitokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
3.5.2.4.1 Uji alkaloid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, aquades, HCl 2%, regen mayer dan reagen
wagner.

3.5.2.4.2 Uji flavonoid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, pita magnesium, metanol 96% pa, HCl 30%

3.5.2.4.3 Uji saponin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, aquades, HCl 1,2 N
3.5.2.4.4 Uji tanin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, agar-agar, aquades.

3.5.2.4.5 Uji triterpenoid dan steroid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, asam asetat anhidrat 98%, asam sulfat 98%,
kloroform 98%.
3.5.2.4.5 Analisis Komponen Senyawa Kimia Ekstrak Kombinasi daun salam dan daun
sirsak
3.5.2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Kombinasi daun salam dan daun
sirsak
Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak, etanol 96% pa, kloroform 98% pa, aquades.

3.6 PROSEDUR KERJA.

3.6.1 Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak

 Timbang masing-masing 50 gr daun salam dan daun sirsak yang dihaluskan
 Masukan daun salam dan daun sirsak yang sudah dihaluskan ke dalam labu
erlenmeyer 2000 mL
 Tambahkan 650 mL metanol 96% pa.
 Tutup rapat labu erlenmeyer dengan alumunium foil
 Kocok campuran hingga neraca.
 Simpan / maserasi selama 3 hari sambil sesekali dikocok
 Saring ekstrak menggunakan corong dan kapas wajah
 Biarkan dalam gelas kimia 100 mL selama 14 hari hingga metanol menguap
 Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak dimasukan ke dalam penangas air,
dipanaskan beberapa menit hingga mencapai suhu 5p-60 0 C
 Di saring menggunakan kertas saring untuk menghilangkan pengotor.
 Ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak tersebut di simpan untuk menganalisis
sifat fisikokimia antara lain massa jenis kelarutan, titik didih dan putar optik serta
analisis komponen fitokimia antara lain Alkaloid, flavonoid, saponin, tanin,
triterpenoid dan steroid

3.6.2 Uji pelarut metanol ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
  Masukan 4 mL minyak goreng kedalam kaca arloji
 Tambahkan 0,01 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak pada minyak
goreng.
 Tambahkan 3 tetes asam sulfat 98%.
 Amati aroma yang dihasilkan, apabila tercium wangi maka ekstrak tersebut masih
mengandung pelarut metanol, jika aroma yang dihasilkan tidak ada aroma harum
maka ekstrak tidak mengandung metanol dan merupakan ekstrak murni.

3.6.3 Analisis sifat fisikokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
3.6.3.1 Penetapan massa jenis ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Timbang gelas kimia 10 mL dengan neraca analitik
 Panaskan gelas kimia 10 mL pada suhu 100 0 C selama 15 menit
 Dinginkan dalam desikator
 Timbang berat gelas kimia tersebut
 Lakukan langkah 2,3,4 secara berulang sampai mendapat berat gelas kimia yang
konstan
 Masukan 1 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak ke dalam gelas kimia
10 mL
 Tambahkan 1 mL metanol 96%, aduk hingga homogen
 Ukur volume larutan ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Catat hasil yang diperoleh
 Tetapkan massa jenis ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak tersebut.

3.6.3.2 Uji kelarutan ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Siapkan 5 buah tabung reaksi ukuran 5 mL yang bersih. Berikan label 1,2,3,4 dan 5
pada tiap tabung reaksi.
 Masukan 2 mL ke dalam masing-masing tabung 1 dengan aquades, tabung 2 dengan
metanol 96% pa, tabung 3 dengan aseton 98% pa, tabung 4 dengan kloroform 95%
pa, dan tabung 5 dengan dietil eter 95%.
 Tambahkan 0.01 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak secara perlahan-
lahan dalam masing-masing tabung. Kocok campuran tersebut.
 Amati kelarutan yang terjadi.

3.6.3.3 Penentuan titik didih ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Ukur 0,1 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Masukan 0,01 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak ke dalam cawan
petrik yang telah dilengkapi dengan thermometer 110 0 C pada statip
 Panaskan hingga mencapai suhu tertinggi
 Catat hasil pengamatan suhu yang diperoleh.
3.6.4 Analisis komponen fitokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
3.6.4.1 Uji alkaloid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Siapkan reagen mayer
Larutan A : larutkan 1,358 gr HgCl2 dalam 60 mL aquades
Larutan B : larutkan 3 gr KI dalam 10 mL dalam aquades. Tuangkan larutan A dalam
larutan B, encerkan dengan aquades sampai volume larutan menjadi 100 mL.
 Siapkan reagen wagner
Larutkan 6 gr KI dalam 100 mL aquades, tambahkan 2 gr I2 dan aduk hingga
campuran homogen
 Siapkan 2 buah tabung reaksi yang bersih. Beri label A dan B pada tiap tabung
 Masukan 0,01 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak ke dalam masing-
masing tabung A dan B
 Tambahkan 0,5 mL HCl 2% pada tabung A, kocok hingga campuran homogen
 Tambahkan 2-3 tetes reagen mayer ke dalam tabung A.
 Tambahkan 2-3 tetes reagen wagner ke dalam tabung B.
 Jika pada tabung A terbentuk endapan putih dan tabung B terbentuk endapan coklat
maka ekstrak positif mengandung alkaloid.

3.6.4.2 Uji flavonoid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Masukan 0,01 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak ke dalam tabung
reaksi
 Tambahkan 0,4 mL amil alkohol 30%, 2 cm pita magnesium dan 4 mL metanol 96%
 Kocok campuran dan Amati perubahan yang terjadi
 Jika terbentuk warna merah, kuning, atau jingga pada lapisan amil alkohol
menunjukan adanya flavonoid.

3.6.4.3 Uji saponin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Masukan 0,01 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak ke dalam tabung
reaksi
 Tambahkan 2 mL air panas ke dalam ekstrak Kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Amati perubahan yang terjadi
 Jika terbentuk busa dan dengan penambahan 1 mL HCl 2N busa tersebut tidak hilang
selama 30 detik maka ekstrak positif mengandung saponin

3.6.4.4 Uji tanin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Masukan 0,01 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak ke dalam tabung
reaksi. Tambahkan 10 mL aquades aduk sampai homogen
 Tambahkan sedikit gelatin
  Apabila terdapat endapan coklat maka ekstrak positif mengandung tanin

3.6.4.5 Uji triterpenoid dan steroid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Masukan 0,01 mg ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak ke dalam tabung
reaksi. Dikocok dengan 2 mL kloroform 98% pa.
 Pisahkan lapisan kloroform, teteskan pada plat tetes dan biarkan sampai kering.
 Setelah kering, tambahkan 5 tetes asam asetat anhidrida 98% dan 3 tetes H2SO4 98%
pa ke dalam ekstrak.
 Amati perubahan yang terjadi
 Jika terbentuk warna merah, orange, kuning menunjukan positif mengandung
triterpenoid sedangkan terbentuk warna hijau menunjukan positif mengandung
steroid.
3.6.5 Analisis Komponen Senyawa Kimia Ekstrak Kombinasi daun salam dan daun
sirsak
3.6.5 Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Kombinasi daun salam dan daun sirsak
 Plat kromatografi lapis tipis (KLT) dipanaskan di dalam oven pada suhu 1000C
selama 30 menit.
 Plat didinginkan di udara terbuka selama 1 jam
 Potong plat kromatografi lapis tipis (KLT), dengan panjang 5 cm dan lebar 2 cm.
 Beri garis batas bawah 1 cm dan batas atas 0,5 cm dengan pensil.
 Masukkan 8 mL metanol dan 2 mL air ke dalam botol chamber, ditutup, dan diaduk
sehingga homogen.
 Biarkan beberapa menit. Campuran metanol-air digunakan sebagai eluen atau fase
geraknya.
 Teteskan 2 tetes ekstrak pada kaca arloji dan tambahkan 20 tetes metanol pada kaca
arloji
 Campurkan ekstrak dan metanol hingga bercampur secara homogen.
 Totolkan campuran ekstrak-metanol pada plat kromatografi lapis tipis (KLT) pada
batas bawah.
 eringkan beberapa menit
 Masukkan plat kromatografi lapis tipis (KLT) ke dalam botol chamber yang telah
berisi fase gerak
 Biarkan beberapa menit, sampai ekstrak yang dibawa oleh fase gerak mendekati batas
atas pada plat kromatografi lapis tipis (KLT).
 Angkat kertas kromatografi lapis tipis (KLT) dari botol chamber.
 Biarkan beberapa menit.
 Amati noda hasil pada plat kromatografi lapis tipis (KLT) menggunakan lampu UV
pada panjang gelombang 254 nm.
 Buatlah lingkaran noda pada plat kromatografi lapis tipis (KLT).
 Amati warna noda.
 Hitung nilai Rf.
3.7 TEKNIK PENGUMPULAN DATA
Adapun teknik pengumpulan data yang digunakan pada penelitian ini yaitu analisis
laboratorium.
Teknik ini digunakan untuk memperoleh data sifat fisikokimia antara lain: massa jenis,
kelarutan, titik didih dan putar optik serta analisis komponen fitokimia antara lain: alkaloid,
flavonoid, saponin, tanin, triterpenoid dan steroid.

3.8 INSTRUMEN PENILAIAN

Instrumen yang digunakan untuk mengumpulkan data pada penelitian ini adalah polarimeter

3.9 TEKNIK ANALISIS DATA

Pada penelitian ini teknik yang digunakan untuk mengumpulkan data sebagai berikut:
3.9.1 Maserasi atau rendaman
Data hasil jumlah rendaman ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis
menggunakan rumus ( Tangi, 2015: 136)

Keterangan :
P : massa jenis ( gram / mL)
m : massa (gram)
V : volume (mL)

3.9.2 Uji pelarut metanol ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil uji pelarut ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis menggunakan
perbandingan teori esterifikasi dimana hasil positif menunjukan tidak ada aroma ester yang
terbentuk.

3.9.3 Analisis sifat fisikokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
3.9.3.1 Penetapan massa jenis ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil penetapan massa jenis ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis
menggunakan rumus ( Tangi, 2015:137)

3.9.3.2 Uji kelarutan ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil uji kelarutan ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis
menggunakan jumlah volume pelarut
3.9.3.3 Penentuan titik didih ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil Penentuan titik lebur ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis
menggunakan data titik didih tertinggi
3.9.3.4 Penentuan putar optik ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil penentuan putar optik ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis
menggunakan rumus (Hart, 1987:118)

3.9.4 Analisis komponen fitokimia ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
3.9.4.1 Uji alkaloid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil uji alkaloid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis dengan
membandingkan data teoritis reagen mayer dan reagen wagner
3.9.4.2 Uji flavonoid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil uji flavonoid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis dengan
membandingkan data teoritis Wilstater Sianidin ( HCl dan logam Mg)
3.9.4.3 Uji saponin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil uji saponin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis dengan
membandingkan data teoritis metode Forth
3.9.4.4 Uji tanin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil uji tanin ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di analisis dengan
membandingkan data teoritis uji tanin
3.9.4.5 Uji triterpenoid dan steroid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak
Data hasil uji triterpenoid dan steroid ekstrak kombinasi daun salam dan daun sirsak di
analisis dengan membandingkan data teoritis pereaksi Liebermann- Buchard.

DAFTAR PUSTAKA

Pumamasari, Dyah. 2009. Diagnosis dan Klasifikasi Diabetes Melitus. Dalam: Sudoyo. Buku
Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Interna Publishing, Jakarta, Indonesia. Hal 1882-1883.
Waspadji, S. 2006. Komplikasi Kronik Diabetes: Mekanisme Terjadinya, Diagnosis dan
Strategi Pengelolaan. Dalani . Sudoyo A.W., Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Edisi 4. Pusat
Penerbitan Departemen Ilmu Penyakit Dalam FKUI. Jakarta. Indonesia.
American Diabetes Association, 2009. Diagnosis and Classification o f Diabetes Mellitus.
USA. America.
American Diabetes Association. 2015. Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus.
USA. America.
Dewi,L,I.2013.Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Daun Salam (Eugenia Polyantha)
Terhadap Tikus Galur Wistar Yang Diinduksi Aloksan: Surakarta
Dalimarta, S. 2005. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Diabetes Mellitus. Penebar
Swadaya:Jakarta
Ahmad, N.A.B. (2014). Chemical Composition, Antioxidant and Antibacterial Activity of
Essential Oil From Leaf Of Syzygium Polyanthum (Wight) Walp.. [Thesis]. Faculty of
Industrial Sciences and Technology. Universiti Malaysia Pahang.
Noveriza, R. & Miftakhurohmah. (2010). Efektivitas Ekstrak Metanol Daun Salam (Eugenia
Polyantha) dan Daun Jeruk Purut (Cytrus histrix) Sebagai Antijamur Pada Pertumbuhan
Fusarium Oxysporum. Jurnal Littri 16 (1): 6 -11.
Prahastuti, S., Tjahjani, S., Hartini, E. (2011). The Effect of Bay Leaf Infusion (Syzygium
polyanthum (Wight) Walp) to Decrease Blood Total Cholesterol Level In Dyslipidemia
Model Wistar Rats. Jurnal Medika Planta 1(4).
Pal, D. & Verma, P. (2013). Flavonoids: A Powerful and Abundant Source of Antioxidants.
International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 5(3): 95- 98.