1

METODE IDENTIFIKASI KORBAN MELALUI

SALIVA DAN GOLONGAN DARAH
Darah adalah: merupakan cairan yang terdapat pada semua hewan tingkat tinggi yang
berfungsi mengirimkan zat O2, mengangkut bahan kimiawi, dan mengandung sel-sel imun.

Sampel darah adalah spesimen darah yang diambil untuk dilakukan identifikasi baik untuk
keperluan medis dan kepentingan penyelidikan

Golongan darah sistem ABO yang selanjutnya disebut golongan darah merupakan

salah satu indikator identitas seseorang. Pada orang hidup, golongan darah sering digunakan

untuk kepentingan transfusi dan donor, sementara pada orang yang sudah meninggal,

kegunaan golongan darah lebih tertuju pada identifikasi. Pada beberapa kasus kriminal dan non

kriminal misalnya kasus ragu keturunan (disputed parentage), golongan darah bisa menjadi

petunjuk identitas seseorang (Michino et al., 2005; Contreras, 1995). Pada beberapa kasus

kematian dengan barang bukti berupa bercak darah, identifikasi golongan darah ini penting

sekali dalam kaitannya dengan kecocokan golongan darah pada barang bukti karena golongan

darah memberikan data identitas yang spesifik (Dahlan, 2000).

Penentuan golongan darah dari jenazah yang masih baru bisa dilakukan langsung

dengan metode aglutinasi direk. Penentuan golongan darah pada bercak darah yang sudah kering

lebih sulit bila dibandingkan dengan penentuan golongan darah dari darah yang masih segar,

terlebih lagi bila bercak darah tersebut sangat tua, hal ini disebabkan sel-sel darah telah hancur

(Idries, 2008).

Penentuan golongan darah pada bercak darah yang sudah kering masih dimungkinkan

karena antigen yang terdapat pada permukaan sel tetap utuh walaupun sel-selnya telah hancur,

dengan pemeriksaan tertentu antigen tersebut dapat direaksikan dengan antibodi sehingga

golongan darah tetap dapat ditentukan, dengan kata lain penetapan golongan darah dilakukan

secara tidak
 langsung (Idris, 2008). Metode forensik konvensional untuk identifikasi golongan

darah adalah aglutinasi direk, kombinasi antigen-antibodi yang terdiri dari absorpsi, elusi

absorpsi, inhibisi absorpsi dan beberapa metode lain. Metode- metode inilah yang sering

digunakan dalam identifikasi forensik (Nishi et al., 2005a).

Pada identifikasi korban jenazah yang telah membusuk ataupun hangus terbakar,

sering sekali identifikasi forensik konvensional tidak dapat ditegakkan, sehingga diperlukan cara

identifikasi forensik lainnya yang lebih akurat yaitu analisis Deoxyribo Nucleic Acid (DNA)

(Yudianto et al., 2009), walaupun demikian pemeriksaan golongan darah dengan metode

konvensional masih banyak digunakan dalam kasus forensik, hal ini disebabkan masih sangat

tingginya biaya untuk pemeriksaan DNA (Gizela, 2005).

Teknik analisis DNA yang digunakan dalam genetika modern banyak menggunakan

petanda genetik sebagai alat bantu identifikasi genotip suatu individu. Petanda genetik, biasa

juga disebut dengan petanda atau marker, merupakan ekspresi pada individu yang terlihat oleh

mata atau terdeteksi dengan alat tertentu, yang menunjukkan dengan pasti genotip suatu individu.

Aplikasi petanda genetik sangat luas, khususnya dalam bidang medis (kedokteran) dan kepolisian

dalam melakukan proses identifikasi (Currant et al., 1980).

Kepentingan pemeriksaan DNA adalah mengetahui genotipnya. Penentuan golongan

darah dengan metode aglutinasi direk dan elusi absorpsi hanya bisa menentukan fenotip golongan

darah tersebut. Kelemahan metode aglutinasi direk dan elusi absorpsi adalah golongan darah

tidak bisa dibedakan apakah seseorang

 tersebut homozigot atau heterozigot, sehingga kepentingan identifikasinya sebatas

mengeksklusi yang bukan golongan darah tersebut. Pemeriksaan DNA, mendapatkan hasil yang

lebih spesifik karena dapat menentukan alel homozigot atau heterozigot dari seseorang,

sehingga hasil identifikasinya menjadi lebih akurat.

Penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Ishida dan kawan-kawan di Jepang tahun

2000, menemukan adanya kebermaknaan analisis DNA dalam menentukan golongan darah tipe

ABO dari rambut dan kuku dari mayat yang sudah membusuk sebagai pembanding fenotip

dengan metode elusi absorpsi. Pada penelitian tersebut ditemukan fenotip dengan metode elusi

absorpsi dan genotip dengan metode Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length

Polymorphism (PCR-RFLP) yang dapat diperiksa dengan metode DNA adalah 88,6 % dan

metode absorpsi elusi adalah 58,6% dari 70 sampel rambut dan kuku (Ishida et al., 2000).

Pada penelitian ini dilakukan terhadap sampel darah atau jaringan tubuh lain,

diharapkan ada kesesuaian atau konsistensi golongan darah dengan menggunakan tiga metode di

atas. Permasalahannya sering didapati hasil pemeriksaan darah pada jenazah dengan menggunakan

metode aglutinasi direk masih terjadi bias. Eritrosit yang menggumpal tampak jelas karena

adanya hemoglobin didalamnya. Pada proses pembusukan terjadi lisis pada dinding eritrosit

sehingga ikatan antiserum dengan antigen pada dinding eritrosit tidak teramati lagi secara visual.

Pada kondisi ini hemoglobin sudah terlepas ke cairan plasma (Contreras, 1995). Dari

penelusuran kepustakaan metode lain yang lebih

 memungkinkan untuk digunakan pada kasus dengan proses pembusukan, walaupun

prosedur pemeriksaannya lebih rumit dan biaya yang dibutuhkan lebih besar adalah elusi

absorpsi (Gizela, 2005).

Permasalahan yang sering timbul pada penentuan identitas seseorang adalah harus

ada pembanding antara temuan postmortem dengan temuan antemortem. Bila tidak ada

pembanding maka sulit ditentukan identitas seseorang. Penentuan golongan darah perlu diangkat

pada penelitian ini karena golongan darah merupakan salah satu data identifikasi yang

tercantum dalam setiap tanda pengenal seperti Kartu Tanda Penduduk (KTP) dan Surat Ijin

Mengemudi (SIM). Hal ini mempermudah proses identifikasi karena ada pembanding, sementara

tehnik identifikasi lain seperti pemeriksaan gigi dan profil DNA tidak ditemukan pada tanda

pengenal tersebut. Walaupun telah dilakukan pada sebagian besar layanan kedokteran forensik,

persoalannya di Indonesia mengalami kesulitan untuk melakukan pemeriksaan golongan darah

pada jenazah yang postmortemnya lebih dari satu hari.

Pada orang hidup, pemeriksaan golongan darah dengan metode aglutinasi direk

maupun elusi absorpsi sudah diyakini menjadi pemeriksaan standar yang akurasinya dapat

diandalkan, hal tersebut tidak terlepas dari masih aktifnya reaksi antigen antibodi di dalam tubuh

manusia. Namun berbeda halnya dengan jenazah. Pemeriksaan golongan darah pada jenazah

dengan menggunakan metode aglutinasi direk maupun elusi absorpsi secara teoritis masih

diragukan akurasinya, mengingat protein pada dinding sel darah merah setelah kematian

mengalami kerusakan sehingga reaksi antigen antibodi tidak dapat terdeteksi secara visual.
 Pada jenazah yang masih baru pemeriksaan golongan darah dapat dilakukan dengan

metode aglutinasi direk sampai suatu ketika protein pada dinding sel rusak, sementara untuk

jenazah yang sudah lama pemeriksaan dilakukan dengan elusi absorpsi. Sementara itu, pemeriksaan

DNA untuk menentukan golongan darah bukanlah sesuatu yang mudah dan murah, sehingga

diperlukan alternatip pemeriksaan yang mendekati keakuratan DNA tersebut yaitu metode

aglutinasi direk dan elusi absorpsi tersebut. Keuntungan dan kerugian ketiga metode pemeriksaan

golongan darah dapat dilihat pada tabel 1 di bawah ini: (Nishi et al., 2005b)

Tabel 1. Perbandingan metode pemeriksaan golongan darah

Metode pemeriksaan Keuntungan Kerugian

Golongan darah ABO

Aglutinasi direk Cepat dan ringkas Pemeliharaan sampel sulit

Biaya murah Sulit diperiksa pada
pembusukan
Observasi langsung Kontaminasi bakteri Dasar
penentuan Perubahan antigenisitas oleh
bakteri

Elusi absorpsi Ringkas Butuh keterampilan dengan

teknik tertentu
Biaya murah Membutuhkan waktu
Pemeliharaan sampel Kontaminasi
mudah
Pemeriksaan ulang Observasi tidak langsung
mudah

METODE AGLUTINASI DIRECT

Pada metode ini, penetuan golongan darah dapat dilakukan seacara langsung seperti
penentuan paada golongan darah orang yang masih hidup, yaitu meneskan 1 tetes antiserum
ke atas 1 tetes darah dan didlihatabterjadinya aglutinasi. Aglutinasi yang terjadi pada suatu
anti serumnmerupakan golongan darah bercak yang diperiksa, contoh bila terjadi aglutionasi
pada anti serum A maka golongan darah bercak tersebut adalah A

METODE ELUSI ABSORPSI

Untuk sel darah yang rusak tidak buisa digunakan metode aglutinasi directmelainkan
harus digunakan metode elusi absorbsi. Prosedurnya adalah:
 1. Dua atau tiga benang yang mengandubf bercak kering difiksasi dengan metil alkohol selama
15 menit
2. Benang diangkat, dibiarkan mengeribg, kemudian diuraikan menjadi serat-serat halus
menggunakan sebuah jarum
3. Lakukan juga terhadao benang yang tidak mengandung bercak darah sebagai kontrol negatif
4. Masukan srat benang ke dalam 2 tabung reaksi
5. Tetskan serum anti A ke dalam tabung pertama dan serum anti B kedalam tabung kedua
HINGGA serabut benang tersebut terendam seluruhnya
6. Simpan tabung-tabung tersebut ke dalam lemari pendingin bersuhu 4˚ c selama 1 tahun
7. Cuci dengan larutan garam faal dingin 4 ˚ c sebanyak 5−6 kali
8. Tambahkan 2 tetes suspensi 2% sel indikator (sel darah merah golongan A pada tabung
pertama dan B pada tabung ke dua
9. Putar kecepatan 1000 RPM selama 1 menit
10. Bila tidak terjadi aglutinasi cuci sekali lagi dan kemudian ntambahkan 1-2 tetes larutan garam
faal dingin panaskan pada suhu 56˚ c selama 10 menit pada kecepatan 1000 PM

Terdapat empat jenis pemeriksaan lain untuk memastikan bercak darah benar berasal dari
manusia, yaitu :

1. CARA KIMIAWI

• Prinsip : Pembentukan kristal-kristal hemoglobin yang dapat dilihat dengan mata

telanjang atau dengan mikroskopik.
• Tes tersebut antara lain tes Teichmann dan tes Takayama.

a. Test Teichman (Tes kristal haemin)

• Pertama kali dilakukan oleh Teicmann (1853).
• Prinsip : Pembentukan kristal hematin setelah darah yang kering dipanaskan dengan
asam asetat glacial dan chloride === Kristal muncul dalam bentuk belah-belah
ketupat dan berwarna coklat (Secara mikroskopik)
• Kesulitan ® mengontrol panas dari sampel karena pemanasan yang terlalu panas atau
terlalu dingin dapat menyebabkan kerusakan pada sampel.

b. Test Takayama (Tes kristal B Hemokromogen)

• Prinsip : Pembentukan Kristal pyridine ferroprotoporphyrin atau hemokromogen
akibat heme dipanaskan dengan menggunakan pyridine dibawah kondisi basa dengan
tambahan sedikit gula seperti glukosa
• Secara mikroskopik : terlihat kristal halus berwarna merah jambu
• Kelebihan:
– efektif dilakukan pada sampel atau bercak yang sudah lama
– dapat memunculkan noda darah yang menempel pada baju
– memunculkan hasil positif pada sampel yang mempunyai hasil negative pada
test Teichmann. 
c. Pemeriksaan Wagenaar
• Seujung jarum bercak kering diletakkan pada kaca obyek, letakkan juga sebutir pasir,
lalu tutup dengan kaca penutup sehingga antara kaca obyek dan kaca penutup terdapat
celah untuk penguapan zat. Kemudian pada satu sisi diteteskan aseton dan pada sisi
lain di tetes kan HCL encer, kemudian dipanaskan.
• Hasil:
– Hasil positif bila terlihat Kristal aseton hemin berbentuk batang berwarna
coklat.
– Hasil negative selain menyatakan bahwa bercak tersebut bukan bercak darah,
juga dapat dijumpai pada pemeriksaan terhadap bercak darah yang struktur
kimiawinya telah rusak, misalnya bercak darah yang

2. CARA SEROLOGIK

• Berguna untuk menentukan :

• spesies
• golongan darah
• Bahan yang dibutuhkan :
– antiserum terhadap protein manusia (anti human globulin)
– antiserum terhadap protein hewan
– antiserum terhadap golongan darah tertentu.
• Prinsip : reaksi antara antigen (bercak darah) dengan antibody (antiserum) yang dapat
merupakan reaksi presipitasi atau reaksi aglutinasi.

a. Test Presipitin Cincin 

• Prinsip : Menggunakan metode sentrifus sederhana antara dua cairan didalam tube
yaitu antiserum dan ekstrak dari bercak darah yang diminta untuk diperiksa.
• Cara pemeriksaan :
1. Antiserum ditempatkan pada tabung kecil dan sebagian kecil ekstrak bercak darah
ditempatkan secara hati-hati pada bagian tepi antiserum.
2. Biarkan pada temperatur ruang kurang lebih 1,5 jam.
3. Pemisahan antara antigen dan antibody akan mulai berdifusi ke lapisan lain pada
perbatasan kedua cairan.
• Hasil: Lapisan tipis endapan atau precipitate pada bagian antara dua larutan. Pada
kasus bercak darah yang bukan dari manusia maka tidak akan muncul reaksi apapun.

b. Reaksi Presipitasi Dalam Agar

• Cara pemeriksaan :
1. Gelas obyek dibersihkan dengan spiritus sampai bebas lemak, dilapisi dengan selapis tipis
agar buffer.
2. Setelah agak mengeras, dibuat lubang pada agar dengan diameter kurang lebih 2 mm, yang
dikelilingi oleh lubang-lubang sejenis.

3. Masukkan serum anti-globulin manusia ke lubang di tengah dan ekstrak darah dengan
berbagai derajat pengenceran di lubang-lubang sekitarnya.

4. Letakkan gelas obyek ini dalam ruang lembab (moist chamber) pada temperature ruang
selama satu malam.
• Hasil : Hasil positif memberikan presipitum jernih pada perbatasan lubang tengah dan
lubang tepi.

3. PEMERIKSAAN MIKROSKOPIK 
• Pemeriksaan ini bertujuan untuk melihat morfologi sel darah merah.
• Cara pemeriksaan :

Darah yang masih basah atau baru mengering ditaruh pada kaca obyek
kemudian ditambahkan 1 tetes larutan garam faal, dan ditutup dengan kaca penutup, lihat
dibawah mikroskop.
WE
• Hasil :
– Pemeriksaan mikroskopik kedua sediaan tersebut hanya dapat menentukan
kelas dan bukan spesies darah tersebut.
– Kelas mamalia mempunyai sel darah merah berbentuk cakram dan tidak
berinti, sedangkan kelas lainnya berbentuk oval atau elips dan tidak berinti
Bila terlihat adanya drum stick dalam jumlah lebih dari 0,05%, dapat
dipastikan bahwa darah tersebut berasal dari seorang wanita.
• Kelebihan: Dapat terlihatnya sel –sel leukosit berinti banyak.

4. PENENTUAN GOLONGAN DARAH 

• American Association of Blood Banks mendefinisikan golongan darah sebagai
kumpulan antigen yang diproduksi oleh alel gen.
• Golongan darah secara genetic dikontrol dan merupakan karakteristik yang seumur
hidup dapat diperiksa karena berbeda pada tiap individual.
• Di dlm eritrosit terdpat antigen (protein asing) yg digumpalkan yg disebut
aglutinogen, yg terdiri dari aglutinogen A, B dan tidak ada (O).
• Sementara di dlm plasma/serum terdapat antibodi ygn menggumpalkan yg disebut
aglutinin, yg terdiri dari a (alfa) atau anti A, b (beta) atau anti B.

Berdasarkan aglutinogen, golongan darah dibagi menjadi 4 (dari hasil penyelidikan Karl
Landstener = Sistem ABO) yaitu:
a. Gol darah A; eritrosit mengandung aglutinogen A dan serum darahnya
mengandung aglutinin beta, rumus darahnya= A; b
b. Gol darah B; eritrosit mengandung aglitinogen B dan serum darah
mengandung aglutinin a, rumus darahnya = B; a
c. Gol darah AB; eritrosit mengandung aglutinogen A dan B, dan serum darah
tidak mengandung aglutinin, rumus =AB;-
 d. Gol darah O; eritrosit tidak mengandung aglutinogen, dan serum darah
mengandung aglutinin a dan b, rumusnya = --; a b

Bila didapatkan eritrosit dalam keadaan utuh, cara pemeriksaan :

e. Seperti pada penentuan golongan darah orang hidup, yaitu dengan meneteskan
1 tetes antiserum ke atas 1 tetes darah dan dilihat terjadinya aglutinasi.
f. Aglutinasi yang terjadi pada suatu antiserum merupakan golongan darah
bercak yang diperiksa
g. Contoh bila terjadi aglutinasi pada antiserum A maka golongan darah bercak
darah tersebut adalah A.

Bila eritrosit sudah rusak === penentuan golongan darah dilakukan dengan cara menentukan
jenis aglutinin dan antigen. Antigen mempunyai sifat yang jauh lebih stabil dibandingkan
dengan aglutinin
• Penentuan jenis antigen dapat dilakukan dengan cara:
• absorpsi elusi,
• absorpsi inhibisi,
• aglutinasi campuran

METODE IDENTIFIKASI KORBAN MELALUI

SALIVA DAN GOLONGAN DARAH
Saliva adalah:

 Saliva merupakan cairan yang sangat penting di rongga mulut yang dihasilkan oleh
kelenjar saliva mayor dan minor.
 Pemeriksaan dengan saliva dapat menjadi alat yang berguna dalam berbagai jenis
kasus kriminal, meskipun pemeriksaan saliva tidak diminta sesering pemeriksaan
untuk air mani atau darah.
 Pemeriksaan saliva masih memiliki banyak keterbatasan, saat ini metode yang paling
banyak digunakan di labolatorium forensik untuk pemeriksaan saliva adalah deteksi
amylase yaitu enzim yang ditemukan di air liur.

Metode identifikasi saliva:

A. Bekas gigitan

 Metode : Double swabbing.

 Alat Dan Bahan : Dua cotton bud steril dan 3 ml air salin.
 Prosedurnya :
– Basahi satu ujung cotton bud dengan air
 – Aplikasikan ujung cotton bud ini ke daerah dimana terdapat saliva dengan
gerakan memutar dan tekanan ringan
– Biarkan cotton bud pertama ini mengering di lingkungan bebas kontaminasi
– Segera setelah swab pertama diambil, aplikasikan ujung cotton bud kedua
yang kering ke daerah bekas saliva yang sudah dibasahi oleh cotton bud
pertama. Gunakan gerakan memutar dan tekanan ringan
– Biarkan cotton bud kedua ini mengering di lingkungan bebas kontaminasi
selama paling tidak 30 menit
– Setelah kering, kedua cotton bud dimasukkan ke satu tempat, ditutup dan
ditandai
– Sampel bisa dikirim ke laboratorium untuk diuji

B. Bercak air liur

Prosedur pengambilan sample saliva dari air liur yang telah mengering sebagai berikut :
 Ambil sepotong bahan dari benda yang terkena noda air liur, lalu simpan di dalam
tabung tes
 Masukkan 3-4 ml air salin, lalu rendam selama kurang lebih 12 jam. Lalu beri label
sebagai 'Extract'.
 Dari ekstrak, 0,5 ml diambil lalu disimpan dalam tabung reaksi yang lain dan sisanya
3,5 ml disimpan dalam inkubator di 37oC selama setengah jam.
 Setelah keluar dari incubator, 0,5 ml ekstrak ditambahkan
 Lalu tambahkan 0,75 ml asam sulfat (H2SO4) dan 0,25 ml natrium tungstat
 Larutan ini disentrifus selama 10 menit.
 Lalu 2 ml tembaga sulfat (CuSO4) basa ditambahkan
 Larutan ini disimpan selama 10 menit dalam air mandi mendidih.
 Larutan siap untuk di periksa3
C. mukosa oral

Metode : Buccal Swab.

Alat dan bahan : Cotton bud steril.
 Minta donor untuk berkumur dengan air
 Aplikasikan ujung cotton bud dengan mantap di daerah mukosa 10 kali,
dengan sedikit memutar ujung cotton bud setiap kali melakukan swab
 Ulangi langkahnya dari awal pada mukosa bukal di kontralateral
 Biarkan kedua swab mengering di lingkungan bebas kontaminasi selama
paling tidak 30 menit
 Masukkan kedua swab di pembungkus, kemudian masukkan ke container yang
sejuk, kering, bebas sinar UV.
 Sampel siap dikirim ke laboratorium4

Pendeteksian Golongan Darah ABO melalui Saliva

 Di berbagai laboratorium kesehatan, penetuan golongan darah tidak hanya dilakukan
dari bahan pemeriksaan darah saja tetapi bisa juga dilakukan dengan pemeriksaan
cairan tubuh lain seperti saliva.
 Substansi A, B, H dapat ditemukan di jaringan tubuh dalam bentuk larut (misal,
saliva). Kemampuannya mensekresikan substansi ABH terletak di gen sekretor (Se)
yang juga terdapat di kromosom 9. Semua sekretor memiliki substansi H didalam
 salivanya. Para sekretor golongan A, B, atau AB masing-masing memiliki substansi
A, B atau kedua substansi A dan B d saliva mereka. Orang yang tidak memiliki gen
sekretor tidak memiliki substansi A, B atau H di dalam saliva mereka, apapun
golongan darah ABO mereka. Pemeriksaan status sekretor dapat bermanfaat di
forensik.

Pendeteksian Golongan Darah ABO Melalui Saliva:

1. Golongan Sekretor dan Non-sekretor

Individu yang termasuk golongan sekretor adalah individu yang memiliki gen
SeSe atau Sese, dimana mereka dapat mensekresikan antigen golongan darahnya pada
sekresi dan cairan tubuhnya selain pada sel darah merah. Individu sekretor
mensekresikan substansi antigen yang identik secara imunologik dengan substansi
pada eritrositnya. Sedangkan golongan non sekretor yang memiliki genotip sese,
hanya mensekresikan sedikit sekali atau tidak sama sekali antigen golongan darahnya
ke cairan tubuhnya sehingga cairan tubuhnya tidak mengandung antigen tersebut. Hal
ini diketahui dari penelitian Yamakami pada tahun 1926 yang menemukan adanya
antigen A dan B pada saliva, lalu pada tahun 1930, Lehrs dan Putkonen menyatakan
bahwa karakter tersebut bersifat dimorphic dengan ditemukannya golongan non-
sekretor yang tak memiliki antigen pada salivanya, selain golongan sekretor.
Beberapa ahli kemudian menemukan bahwa substansi antigen golongan darah
tersebut tidak hanya terdapat pada sel darah merah, tapi tersebar secara meluas pada
seluruh tubuh manusia, baik pada jaringan lunak maupun keras. Selain itu substansi
A, B, dan H juga terdapat sebagai mukopolisakarida dalam sekresi kelenjar seperti
saliva, keringat, dan cairan lambung.
Pada akhirnya diketahui bahwa sekresi mukopolisakarida ini dikontrol oleh
gen Se dan se, dimana Se dominan terhadap se. Pada individu sekretor, penentuan
golongan darah selain dapat dilakukan menggunakan sampel darahnya, juga dapat
dilakukan menggunakan sampel cairan tubuh seperti saliva, dimana antigen pada
cairan tubuhnya biasanya terdapat dalam bentuk larut (soluble form glycoprotein).
Sedangkan pada individu non-sekretor, penentuan golongan darahnya hanya dapat
dilakukan dengan prosedur konvensional menggunakan sel darah merahnya.
2. Penentuan Status Sekretor
Untuk mengetahui apakah seseorang itu bersifat sekretor atau nonsekretor
dapat ditentukan dengan tes penentuan status sekretor (secretory test). Pada tes ini
 prinsip yang digunakan adalah Aglutinasi-inhibisi, yang prosesnya terdiri dari 2 tahap,
yaitu:
a. Penetralan antibodi
Pada tahap ini saliva dicampur dengan antiserum komersial (Anti-A atau Anti-
B) yang telah dilarutkan dengan aquades sehingga titer antibodinya akan
mendekati level antigen di dalam saliva, kemudian biarkan untuk beberapa waktu
agar keduanya bereaksi. Jika subyeknya sekretor maka antigen golongan darah
yang larut dalam saliva akan bereaksi dengan dan menetralkan antibodi dalam
antiserum.
b. Aglutinasi-inhibisi
Pada tahap selanjutnya ditambahkan sel darah merah sesuai dengan
golongan darah yang akan dites ke dalam campuran tersebut. Jika subyeknya
sekretor, maka tidak terjadi aglutinasi sebab tidak ada lagi antibodi yang tersisa
untuk menggumpalkan sel darah merah, karena sebelumnya telah bereaksi dengan
antigen golongan darah di dalam saliva. Reaksi yang menunjukkan aglutinasi
negatif ini diinterpretasikan status sekretornya positif. Namun jika subyeknya non-
sekretor, maka tidak ada antigen golongan darah di dalam saliva sehingga antibodi
di dalam antiserum tidak akan dinetralkan dan akan bebas bereaksi dengan sel
darah merah yang ditambahkan. Reaksi aglutinasi positif menunjukkan hasil tes
status sekretor yang negatif.
3. Metode Pendeteksian Golongan Darah Menggunakan Saliva
Pendeteksian golongan darah melalui material selain darah dapat dilakukan
dengan cara tidak langsung, yaitu dengan metode absorpsi-inhibisi (untuk cairan
tubuh, misal : saliva, semen, dan sebagainya), absorpsi-elusi (untuk bahan padat,
misal : tulang, rambut, gigi, dan sebagainya), dan absorpsi campuran (untuk bahan
padat).
Pendeteksian golongan darah dengan cara aglutinasi langsung tidak mungkin
dilakukan untuk deteksi antigen dalam cairan tubuh seperti pada saliva. Hal ini
dikarenakan antigen/substansi golongan darah dalam cairan tubuh terdapat dalam
bentuk yang larut (soluble form). Metode yang digunakan untuk pemeriksaan
golongan darah melalui saliva adalah metode absorpsi-inhibisi, yaitu bila terdapat
suatu bahan yang mengandung antigen yang sesuai dengan antiserum yang
ditambahkan maka akan terjadi proses absorpsi yang spesifik. Proses absorpsi ini akan
mengakibatkan titer antiserum berkurang (inhibisi). Sehingga jika kemudian
 ditambahkan sel darah merah yang sesuai kepada antiserum yang telah terikat dengan
antigen dalam bahan, maka tidak akan ditemukan aglutinasi karena antiserum telah
berikatan dengan antigen dalam bahan sehingga tidak dapat lagi berikatan dengan
antigen pada dinding sel darah merah. Inhibisi aktifitas antiserum ini ditentukan
dengan membandingkannya dengan titer antiserum mula-mula.

Pemeriksaan golongan darah mempunyai berbagai manfaat dan mempersingkat waktu

dalam identifikasi. Golongan darah penting untuk diketahui dalam hal kepentingan transfusi,
donor yang tepat serta identifikasi pada kasus kedokteran forensik seperti identifikasi pada
beberapa kasus criminal

1. Luntz, L. L. Hand book for dental identification, 1973; 74-9, 91-7, 123, 125-6, 130, 132,
134
2. tandyasraya, j. forum ilmiah FKG TRISAKTI. Jakarta, 1984, 33-4, 37-8
Guyton, Arthur C. 1990. Fisiologi Manusia dan Mekanisme Penyakit.
Terjemahan. Jakarta: Kedokteran EGC
Notoatmodjo, S. 2003. Ilmu Kesehatan Masyarakat. Jakarta : PT.
Rineka Cipta
Omegawati, Wigati. 2010. Biologi Umum. Klaten: Intan Pariwara
Rustam, Mochtar. 1998. Darah edisi I. Jakarta: EGC
Santoso. 2010. Golongan Darah Manusia