Strip Reagen

Pemeriksaan kimia rutin terhadap urin telah berubah secara dramatis sejak hari-hari awal
pengujian urin, karena pengembangan metode strip reagen untuk analisis kimia. Strip reagen saat
ini menyediakan cara sederhana dan cepat untuk melakukan analisis kimia urin yang signifikan
secara medis, termasuk pH, protein, glukosa, keton, darah,bilirubin, urobilinogen,nitrit, leukosit,
dan gravitasi spesifik. Dua jenis utama reagen strip diproduksi di bawah nama dagang Multistix
(Siemens Medical Solutions Diagnostics, Tarrytown, NY) dan Chemstrip (Roche Diagnostics,
Indianapolis, Ind.). Produk-produk ini tersedia dengan satu atau beberapa area pengujian, dan
merek serta jumlah pengujian yang digunakan adalah masalah preferensi laboratorium. Variasi
tertentu yang berkaitan dengan reaksi kimia, sensitivitas, spesifisitas, dan zat yang mengganggu
terjadi di antara produk dan dibahas pada bagian berikut. Merek strip reagen juga ditentukan oleh
produsen instrumentasi. Strip reagen terdiri dari bantalan absorben yang diimpregnasi secara
kimia yang melekat pada strip plastik. Reaksi kimia penghasil warna terjadi ketika pad penyerap
bersentuhan dengan urin. Reaksi ditafsirkan dengan membandingkan warna yang dihasilkan
pada pad dengan grafik yang disediakan oleh produsen. Beberapa warna atau intensitas warna
untuk setiap zat yang diuji muncul di bagan. Dengan perbandingan warna pada grafik dan strip,
nilai jejak semikuantitatif, 1_, 2_, 3_, atau 4_ dapat dilaporkan. Perkiraan miligram per desiliter
yang ada tersedia untuk area pengujian yang sesuai. Pembaca strip reagen otomatis juga
menyediakan unit Système International. Perkiraan miligram per desiliter yang ada tersedia
untuk area pengujian yang sesuai. Pembaca strip reagen otomatis juga menyediakan unit
Système International. Perkiraan miligram per desiliter yang ada tersedia untuk area pengujian
yang sesuai. Pembaca strip reagen otomatis juga menyediakan unit Système International.

Teknik Strip Reagen

Metodologi pengujian termasuk mencelupkan reagen strip sepenuhnya, tetapi secara singkat, ke
dalam spesimen yang tercampur dengan baik, menghilangkan kelebihan urin dari strip dengan
menjalankan tepi strip pada wadah ketika menariknya dari spesimen, menunggu lama waktu
yang ditentukan untuk reaksi untuk terjadi, dan membandingkan reaksi berwarna terhadap bagan
pabrikan menggunakan sumber cahaya yang baik. Teknik yang tidak tepat dapat menyebabkan
kesalahan. Elemen yang terbentuk seperti sel darah merah dan putih tenggelam ke bagian bawah
spesimen dan akan tidak terdeteksi dalam spesimen yang tidak dicampur. Membiarkan strip tetap
berada dalam urin untuk waktu yang lama dapat menyebabkan pencucian reagen dari pembalut.
Demikian juga, sisa urin yang tersisa pada strip setelah dikeluarkan dari spesimen dapat
menghasilkan persinggahan antara bahan kimia pada bantalan yang berdekatan, menghasilkan
distorsi warna. Untuk memastikan tidak terjadi runover, sebaiknya jangan mengotori tepi strip
pada kertas penyerap dan menahan strip secara horizontal sambil membandingkannya dengan
bagan warna. Jumlah waktu yang diperlukan untuk reaksi berlangsung bervariasi antara tes dan
produsen, dan berkisar dari reaksi langsung untuk pH hingga 120 detik untuk leukosit. Untuk
hasil semiquantitatif terbaik, waktu yang dinyatakan produsen harus mengikutirendah; Namun,
ketika waktu yang tepat tidak dapat dicapai, produsen merekomendasikan bahwa reaksi dibaca
antara 60 dan 120 detik, dengan reaksi leukosit dibaca pada 120 detik. Sumber cahaya yang baik,
tentu saja, penting untuk interpretasi reaksi warna yang akurat. Strip harus dipegang dekat
dengan bagan warna tanpa benar-benar ditempatkan pada bagan. Instrumen strip reagen otomatis
menstandarkan interpretasi warna dan waktu reaksi dan tidak tunduk pada kekurangan
pencahayaan ruangan atau inkonsistensi di antara personel laboratorium (Lampiran A). Strip
reagen dan bagan warna dari berbagai produsen tidak dapat dipertukarkan. Spesimen yang telah
didinginkan harus dibiarkan kembali ke suhu kamar sebelum pengujian strip reagen, karena
enzimatik
Reaksi pada strip tergantung pada suhu.

Penanganan dan Penyimpanan Strip Reagen

Selain menggunakan teknik pengujian yang benar, strip reagen harus dilindungi dari kerusakan
yang disebabkan oleh kelembaban, bahan kimia yang mudah menguap, panas, dan cahaya. Strip
reagen dikemas dalam wadah buram dengan pengering untuk melindungi mereka dari cahaya
dan kelembaban. Strip dilepas sesaat sebelum pengujian, dan botol segera ditutup kembali. Botol
tidak boleh dibuka di hadapan uap yang mudah menguap. Pabrikan merekomendasikan bahwa
strip reagen disimpan pada suhu kamar di bawah 30_C. Semua botol dicap dengan tanggal
kedaluwarsa yang menunjukkan usia pakai fungsional bantalan kimia. Strip reagen tidak boleh
digunakan melewati tanggal kedaluwarsa. Harus diperhatikan untuk tidak menyentuh bantalan
kimia saat melepas strip.

Kontrol Kualitas Strip Reagen

Strip reagen harus diperiksa dengan kontrol positif dan negatif minimal sekali setiap 24 jam.
Banyak laboratorium melakukan pemeriksaan ini di awal setiap shift. Pengujian juga dilakukan
ketika botol strip reagen baru dibuka, hasil yang dipertanyakan diperoleh, atau ada kekhawatiran
tentang integritas strip. Semua hasil kontrol kualitas harus dicatat mengikuti protokol
laboratorium. Beberapa perusahaan memproduksi kontrol positif dan negatif. Air suling tidak
direkomendasikan sebagai kontrol negatif karena reaksi kimia strip reagen dirancang untuk
bekerja pada konsentrasi ion yang mirip dengan urin.1 Semua pembacaan kontrol negatif harus
negatif, dan pembacaan kontrol positif harus setuju dengan nilai yang dipublikasikan oleh _ satu
warna blok.
(lihat Bab 7). Demonstrasi strip reagen yang dapat diterima secara kimia tidak sepenuhnya
mengesampingkan kemungkinan hasil yang tidak akurat. Mengganggu zat dalam urin,
kecerobohan teknis, dan buta warna juga menghasilkan kesalahan. Pabrikan strip reagen telah
mempublikasikan informasi mengenai batasan reaksi kimianya, dan pegawai laboratorium harus
melakukannyaWaspadai kondisi ini. Seperti disebutkan dalam Bab 4, contoh utama gangguan
strip reagen adalah penyamaran reaksi warna oleh pigmen oranye yang terdapat dalam urin orang
yang menggunakan senyawa phenazopyridine. Jika pegawai laboratorium tidak mengenali
keberadaan pigmen ini atau pigmen lain, mereka akan melaporkan banyak hasil yang salah.
Prosedur pengujian strip non-reagen menggunakan tablet dan bahan kimia cair tersedia ketika
hasil yang dipertanyakan diperoleh atau spesimen berpigmen tinggi ditemukan. Di masa lalu,
banyak dari prosedur ini digunakan secara rutin untuk mengkonfirmasi hasil positif. Peningkatan
spesifisitas dan sensitivitas strip reagen dan penggunaan pembaca strip otomatis telah
mengurangi kebutuhan untuk penggunaan rutin prosedur ini. 2 Keandalan kimiawi dari prosedur
ini juga harus diperiksa menggunakan kontrol positif dan negatif. Tes cadangan khusus dibahas
dalam bab ini di bawah bagian yang ditujukan untuk parameter kimia yang digunakan.

pH
Seiring dengan paru-paru, ginjal adalah pengatur utama dari kandungan asam-basa dalam tubuh.
Mereka melakukan ini melalui sekresi hidrogen dalam bentuk ion amonium, hidrogen fosfat, dan
asam organik lemah, dan melalui reabsorpsi bikarbonat dari filtrat dalam tubulus yang berbelit-
belit (lihat Bab 2). Seseorang yang sehat biasanya menghasilkan spesimen pagi pertama dengan
pH sedikit asam 5,0 hingga 6,0; pH yang lebih basa ditemukan setelah makan (alkaline tide). PH
sampel acak normal dapat berkisar 4,5-8,0. Akibatnya, tidak ada nilai normal yang ditetapkan
untuk pH urin, dan itu harus dipertimbangkan bersamaan dengan informasi pasien lainnya,
seperti kandungan asam-basa darah, fungsi ginjal pasien, adanya infeksi saluran kemih, pola
makan pasien pemasukan,

Signifikansi Klinis
Pentingnya pH urin terutama sebagai bantuan dalam menentukan adanya gangguan asam-basa
sistemik asal metabolik atau pernapasan dan dalam pengelolaan kondisi urin yang mengharuskan
urin dipertahankan pada pH tertentu. Pada asidosis respiratorik atau metabolik yang tidak
berhubungan dengan gangguan fungsi ginjal, urin bersifat asam; sebaliknya, jika alkalosis
respiratorik atau metabolik hadir, urin bersifat basa. Oleh karena itu, pH urin yang tidak sesuai
dengan pola ini dapat digunakan untuk mengesampingkan kondisi yang dicurigai, atau, seperti
dibahas dalam Bab 2, itu mungkin menunjukkan gangguan yang disebabkan oleh
ketidakmampuan ginjal untuk mengeluarkan atau menyerap kembali asam atau basa. Curah
hujan bahan kimia anorganik yang terlarut dalam urin membentuk kristal urin dan batu ginjal.
Curah hujan ini tergantung pada pH urin dan dapat dikontrol dengan mempertahankan urin pada
pH yang tidak sesuai dengan pengendapan bahan kimia tertentu yang menyebabkan
pembentukan batu. Sebagai contoh, kalsium oksalat, konstituen yang sering dari batu ginjal,
mengendap terutama dalam urin asam dan bukan basa. Oleh karena itu, mempertahankan urin
pada pH basa menghambat pembentukan batu. Pengetahuan tentang pH urin penting dalam
identifikasi kristal yang diamati selama pemeriksaan mikroskopis dari sedimen urin. Ini akan
dibahas secara rinci dalam Bab 6. Pemeliharaan urin asam dapat bermanfaat dalam pengobatan
infeksi saluran kemih yang disebabkan oleh organisme pemecah urea karena mereka tidak
berkembang biak dengan mudah dalam media asam. Organisme yang sama ini juga bertanggung
jawab untuk pH sangat basa yang ditemukan dalam spesimen yang telah diizinkan untuk duduk
tanpa diawetkan untuk waktu yang lama. PH kemih dikendalikan terutama oleh pengaturan
makanan, meskipun obat-obatan juga dapat digunakan. Orang yang diet tinggi protein dan tinggi
cenderung menghasilkan urin asam, sedangkan urin dari vegetarian lebih basa, karena
pembentukan bikarbonat setelah pencernaan banyak buah dan sayuran. Pengecualian untuk
aturan ini adalah jus cranberry, yang menghasilkan urin asam dan telah lama digunakan sebagai
obat rumahan untuk infeksi kandung kemih kecil. Obat yang diresepkan untuk infeksi saluran
kemih, seperti methenamine mandelate (Mandelamine) dan fosfomycin tromethamine,
dimetabolisme untuk menghasilkan urin yang asam. PH urin yang baru dikeluarkan tidak
mencapai 9 dalam kondisi normal atau abnormal.

Reaksi Strip Reagen

Merek Multistix dan Chemstrip strip reagen mengukur pH urin dalam kenaikan 0,5 atau
1 unit antara pH 5 dan 9. Untuk membedakan unit pH di seluruh rentang yang luas ini,
keduanya
produsen menggunakan sistem indikator ganda metil merah
dan bromthymol biru. Metil merah menghasilkan perubahan warna
dari merah ke kuning pada kisaran pH 4 hingga 6, dan bromthymol
biru berubah dari kuning menjadi biru di kisaran 6 hingga 9. Oleh karena itu,
dalam kisaran pH 5 hingga 9 diukur dengan strip reagen,
kita melihat warna berkembang dari oranye pada pH 5 hingga kuning
dan hijau sampai biru tua pada pH 9.
Metil merah _ H_ → Bromthymol blue _ H_
(Merah-Oranye → Kuning) (Hijau → Biru)
Tidak ada zat yang diketahui mengganggu pengukuran pH urin
dilakukan oleh strip reagen. Namun, kehati-hatian harus diperhatikan.
untuk mencegah runover antara area pengujian pH dan
berdekatan, area pengujian protein sangat asam pada Multistix, sebagai
ini mungkin menghasilkan pembacaan asam yang salah dalam urin alkali.
■ ■ ● Protein
Dari tes kimia rutin yang dilakukan pada urin, paling banyak
indikasi penyakit ginjal adalah penentuan protein. Itu
Kehadiran proteinuria sering dikaitkan dengan ginjal dini
penyakit, membuat tes protein urin merupakan bagian penting dari
setiap pemeriksaan fisik. Urin normal mengandung sangat sedikit
protein: biasanya, kurang dari 10 mg / dL atau 100 mg per 24 jam
diekskresikan. Protein ini terutama terdiri dari berat molekul rendah
protein serum yang telah disaring oleh glomerulus
dan protein yang diproduksi di saluran genitourinari. Terhutang
berat molekulnya rendah, albumin adalah protein serum utama
ditemukan dalam urin normal. Meskipun hadir dengan tinggi
konsentrasi dalam plasma, albumin urin normal
konten rendah karena sebagian besar albumin disajikan
glomerulus tidak disaring, dan sebagian besar albumin yang disaring
diserap kembali oleh tubulus. Protein lain termasuk
sejumlah kecil mikroglobulin serum dan tubular, Tamm-
Protein Horsfall diproduksi oleh tubulus, dan protein dari
sekresi prostat, mani, dan vagina.
Signifikansi Klinis
Demonstrasi proteinuria dalam analisis rutin tidak
selalu menandakan penyakit ginjal; Namun, keberadaannya memang membutuhkan
pengujian tambahan untuk menentukan apakah protein mewakili
kondisi normal atau patologis. Proteinuria klinis adalah
diindikasikan pada ≥30 mg / dL (300 mg / L) .3 Penyebab proteinuria
Bervariasi dan dapat dikelompokkan ke dalam tiga kategori utama:prerenal,
ginjal,dan postrenal,berdasarkan asal protein.
Proteinuria Prerenal
Seperti namanya, proteinuria prerenal disebabkan oleh kondisi
mempengaruhi plasma sebelum mencapai ginjal dan,
oleh karena itu, tidak menunjukkan penyakit ginjal yang sebenarnya. Keadaan ini
sering bersifat sementara, disebabkan oleh peningkatan kadar molekul rendah
protein plasma berat seperti hemoglobin,
mioglobin, danreaktan fase akut berkaitan dengan
infeksi dan peradangan. Peningkatan penyaringan ini
protein melebihi kapasitas reabsorptive normal ginjal
tubulus, menghasilkan melimpahnya protein ke dalam urin.
Karena strip reagen mendeteksi terutama albumin, proteinuria prerenal
biasanya tidak ditemukan dalam urinalisis rutin.
Bence Jones Protein
Contoh utama proteinuria karena peningkatan protein serum
kadar adalah ekskresi protein Bence Jones oleh orang
dengan multiple myeloma. Pada multiple myeloma, proliferatif
gangguan sel plasma penghasil imunoglobulin, yang
serum mengandung kadar monoklonal yang sangat tinggi
rantai cahaya imunoglobulin (protein Bence Jones). Ini molekul rendah-
protein berat disaring dalam jumlah yang melebihi
kapasitas reabsorpsi tubular dan diekskresikan dalam urin.
Ketika protein Bence Jones dicurigai, tes skrining
yang menggunakan karakteristik kelarutan protein yang unik
dapat dilakukan. Tidak seperti protein lain, yang menggumpal dan
tetap terkoagulasi saat terkena panas, protein Bence Jones
mengental pada suhu antara 40_C dan 60_C dan larut
ketika suhu mencapai 100_C. Karena itu, spesimen
yang tampak keruh antara 40_C dan 60_C dan dihapus pada
100_C dapat diduga mengandung protein Bence Jones.
Gangguan karena protein endapan lainnya dapat dihilangkan
dengan memfilter spesimen pada 100_C dan mengamati spesimen
untuk kekeruhan karena mendingin antara 40_C dan 60_C. Tidak semua orang dengan multiple
myeloma mengeluarkan level Bence yang terdeteksi
Protein jones Kasus-kasus yang diduga multiple myeloma harus
didiagnosis dengan melakukan elektroforesis serum dan imunoelektroforesis.
Proteinuria Ginjal
Proteinuria yang berhubungan dengan penyakit ginjal sejati mungkin
hasil dari kerusakan glomerulus atau tubular.
Proteinuria Glomerular
Ketika membran glomerulus rusak, filtrasi selektif
terganggu, dan peningkatan jumlah protein serum dan
akhirnya sel darah merah dan putih melewati membran
dan diekskresikan dalam urin. Kondisi yang hadir
membran glomerulus dengan zat abnormal (misalnya,
bahan amiloid,zat beracun, dan kompleks imun
ditemukan pada lupus erythematosus dan streptokokus
glomerulonefritis) adalah penyebab utama proteinuria
kerusakan glomerulus.
Tekanan yang meningkat dari darah memasuki glomerulus
dapat mengesampingkan filtrasi selektif dari glomerulus,
menyebabkan peningkatan albumin memasuki filtrat. Keadaan ini
mungkin reversibel, seperti yang terjadi selama latihan berat
dan dehidrasi atau terkait dengan hipertensi. Proteinuria
yang terjadi selama bulan-bulan terakhir kehamilan mungkin mengindikasikan
keadaan pra-eklampsia dan harus dipertimbangkan bersamaan
dengan gejala klinis lainnya, seperti hipertensi,
untuk menentukan apakah kondisi ini ada.
Proteinuria Tubular
Peningkatan albumin juga hadir pada kelainan yang memengaruhi tubular
reabsorpsi karena albumin yang biasanya difilter tidak dapat
lagi diserap kembali. Protein lain dengan berat molekul rendah
yang biasanya diserap kembali juga ada. Penyebab tubular
disfungsi termasuk paparan zat beracun dan
logam berat, infeksi virus parah, danSindrom Fanconi.
Jumlah protein yang muncul dalam urin berikut
kerusakan glomerulus berkisar dari sedikit di atas normal hingga 4
g / hari, sedangkan kadar protein yang meningkat sangat jarang
terlihat pada kelainan tubular.
Penemuan protein, khususnya dalam sampel acak,
tidak selalu penting secara patologis, karena beberapa
penyebab jinak proteinuria ginjal ada. Proteinuria jinak
biasanya bersifat sementara dan dapat diproduksi oleh kondisi
seperti olahraga berat, demam tinggi, dehidrasi, dan paparan
dingin.
Proteinuria Orthostatik (Postural)
Proteinuria jinak persisten sering terjadi pada anak muda
orang dewasa dan diistilahkanortostatik, atau postural, proteinuria. Itu
terjadi setelah periode yang dihabiskan dalam posisi vertikal dan menghilang
ketika posisi horisontal diasumsikan. Tekanan meningkat
pada vena ginjal ketika dalam posisi vertikal diyakini
untuk memperhitungkan kondisi ini. Pasien yang dicurigai ortostatik
proteinuria diminta untuk mengosongkan kandung kemih mereka sebelum pergi
ke tempat tidur, kumpulkan spesimen segera setelah muncul di
pagi, dan kumpulkan spesimen kedua setelah tersisa di a
posisi vertikal selama beberapa jam. Kedua spesimen diuji
untuk protein, dan jika proteinuria ortostatik hadir, negatif
membaca akan terlihat pada spesimen pagi pertama, dan positif
Hasilnya akan ditemukan pada spesimen kedua.
Mikroalbuminuria
Perkembangan nefropati diabetik mengarah ke berkurang
filtrasi glomerulus dan gagal ginjal akhirnya adalah umum
kejadian pada orang dengan diabetes tipe 1 dan tipe 2
mellitus. Onset komplikasi ginjal pertama kali dapat diprediksi
dengan mendeteksimikroalbuminuria,dan perkembangan
penyakit ginjal dapat dicegah melalui stabilisasi yang lebih baik
kadar glukosa darah dan mengendalikan hipertensi. Itu
Kehadiran mikroalbuminuria juga terkait dengan
peningkatan risiko penyakit kardiovaskular.4,5
Sebelum pengembangan metode strip reagen saat ini
yang spesifik untuk albumin, deteksi mikroalbuminuria
diperlukan koleksi spesimen urin 24 jam. Spesimen
diuji menggunakan prosedur kuantitatif untuk albumin.
Hasilnya dilaporkan dalam mg albumin / 24 jam atau sebagai
ekskresi albumin(AER) dalam _g / mnt. Dengan metode ini,
mikroalbumin dianggap signifikan bila 30 hingga 300 mg
albumin diekskresikan dalam 24 jam atau AER 20-200 _g / mnt.
Proteinuria Postrenal
Protein dapat ditambahkan ke spesimen urin saat melewati
struktur saluran kemih bagian bawah (ureter, kandung kemih,
uretra, prostat, dan vagina). Infeksi bakteri dan jamur
dan radang menghasilkan eksudat yang mengandung protein
cairan interstitial. Kehadiran darah sebagai hasilnya
cedera atau kontaminasi menstruasi berkontribusi protein, seperti
Apakah kehadiran cairan prostat dan sejumlah besar
spermatozoa.
Reaksi Strip Reagen
Pengujian strip reagen tradisional untuk protein menggunakan prinsip
darikesalahan indikator protein untuk menghasilkan kolorimetri yang terlihat
reaksi. Bertolak belakang dengan keyakinan umum bahwa indikator
menghasilkan warna tertentu sebagai respons terhadap tingkat pH tertentu,
indikator tertentu berubah warna di hadapan protein bahkan
meskipun pH medium tetap konstan. Ini adalah
karena protein (terutama albumin) menerima ion hidrogen
dari indikator. Tes ini lebih sensitif terhadap albumin
karena albumin mengandung lebih banyak gugus amino untuk menerima
ion hidrogen dari protein lain. Tergantung pada pabriknya,
area protein dari strip mengandung tetrabromphenol
biru atau 3 ′, 3 ′ ′, 5 ′, 5 ′ ′ - tetrachlorophenol-3, 4, 5,
6-tetrabromosulfonphthalein dan buffer asam untuk mempertahankan
pH pada tingkat yang konstan. Pada level pH 3, kedua indikator
tampak kuning tanpa adanya protein; Namun, sebagai proKonsentrasi teh meningkat, warnanya berlanjut
berbagai nuansa hijau dan akhirnya menjadi biru. Bacaan adalah
dilaporkan dalam hal negatif, jejak, 1_2_3_, dan 4_; atau
nilai semiquantitatif 30, 100, 300, atau 2000 mg / dL
sesuai dengan setiap perubahan warna. Nilai jejak dipertimbangkan
kurang dari 30 mg / dL. Interpretasi dari pembacaan jejak
bisa jadi sulit. Pelaporan nilai jejak mungkin merupakan laboratorium
pilihan. Berat jenis spesimen harus dipertimbangkan
karena jejak protein dalam spesimen encer lebih banyak
signifikan daripada dalam spesimen terkonsentrasi.
pH 3.0
Indikator _ Protein → Protein_ H_
(Kuning) Indikator _ H_
(Biru hijau)
Gangguan Reaksi
Sumber utama kesalahan dengan strip reagen terjadi dengan
urin alkali sangat tersangga yang menimpa buffer asam
sistem, menghasilkan kenaikan pH dan perubahan warna yang tidak terkait
untuk konsentrasi protein. Demikian juga, kesalahan teknis dalam mengizinkan
pad reagen agar tetap berhubungan dengan urin selama a
periode yang lama dapat menghapus buffer. Bacaan positif palsu
diperoleh ketika reaksi tidak terjadi di bawah
kondisi asam. Air seni sangat berpigmen dan kontaminasi
dari wadah dengan senyawa amonium kuaterner,
deterjen, dan antiseptik juga menyebabkan pembacaan positif palsu.
Pembacaan jejak positif palsu dapat terjadi pada spesimen dengan
gravitasi spesifik yang tinggi. Fakta bahwa strip reagen mendeteksi terutama
albumin dapat menghasilkan bacaan negatif palsu di
Kehadiran protein selain albumin.
Secara tradisional, sebagian besar laboratorium memilih untuk mengkonfirmasi semua positif
hasil protein menggunakan asam sulfosalisilat(SSA) pengendapan
uji. Praktek ini digantikan oleh lebih banyak
kriteria selektif untuk menentukan kebutuhan akan pengujian tambahan.
Misalnya, beberapa laboratorium hanya menjalankan pengujian SSA
urin sangat basa, dan yang lainnya mengasamkan spesimen dan
tes ulang menggunakan strip reagen. Juga, laboratorium dengan otomatis
pembaca strip dapat memilih untuk tidak merekam jejak pembacaan.
Uji Presipitasi Asam Sulfosalisilat
Tes SSA adalah tes presipitasi dingin yang bereaksi sama
dengan semua bentuk protein (Tabel 5–2). Berbagai konsentrasi dan jumlah SSA dapat digunakan untuk
mengendapkan protein, dan
metode sangat bervariasi di antara laboratorium. Semua presipitasi
tes harus dilakukan pada spesimen yang disentrifugasi untuk dilepaskan
kontaminasi dari luar.
Tentu saja, zat apa pun yang diendapkan oleh asam menghasilkan
kekeruhan palsu dalam uji SSA. Yang paling sering ditemui
zat adalah pewarna radiografi, metabolit tolbutamide,
sefalosporin, penisilin, dan sulfonamid.6 Itu
Kehadiran bahan radiografi dapat dicurigai ketika a
Diperoleh gravitasi spesifik yang sangat tinggi. Di hadapan
pewarna radiografi, kekeruhan juga meningkat saat berdiri
karena presipitasi kristal daripada protein. Itu
riwayat pasien memberikan informasi yang diperlukan tentang tolbutamide
dan konsumsi antibiotik. Berbeda dengan reagen
tes strip, urin yang sangat basa menghasilkan bacaan negatif palsu
dalam tes presipitasi, karena pH yang lebih tinggi mengganggu
pengendapan. Penggunaan solusi SSA yang lebih terkonsentrasi mungkin
mengatasi efek dari urin yang sangat buffered, urin.
Menguji Mikroalbuminuria
Beberapa metode strip reagen semiquantitatif telah
dikembangkan sehingga pasien yang berisiko untuk penyakit ginjal dapat
dipantau menggunakan spesimen acak atau pagi hari pertama. Ini
metode didasarkan pada uji imunokimia untuk albumin atau
strip reagen spesifik albumin yang juga mengukur kreatinin
menghasilkan rasio albumin: kreatinin.
Tes imunokimia termasuk Tes-Mikral (Roche
Diagnostik, Indianapolis, Ind.) Dan Immunodip (Diagnostik
Bahan Kimia Terbatas, Oxford, Kanada). Keduanya reagen
strip dibaca secara visual, dan spesimen pagi pertama direkomendasikan.
Strip reagen Micral-Test mengandung antihuman berlabel emas
konjugat enzim-antibodi albumin. Strip dicelupkan
ke dalam urin hingga tingkat yang ditandai pada strip dan ditahan untuk
5 detik. Albumin dalam urin berikatan dengan antibodi. Itu
konjugat terikat dan tidak terikat bergerak ke atas strip dengan wicking
tindakan. Konjugasi tidak terikat dihapus dalam tawanan
zona dengan menggabungkan dengan albumin tertanam di strip. Itu
konjugasi terikat albumin urin berlanjut ke strip dan
mencapai area yang mengandung substrat enzim. Yang terkonjugasi
Enzim bereaksi dengan substrat, menghasilkan warna mulai
dari putih menjadi merah. Jumlah warna yang dihasilkan mewakili
jumlah albumin yang ada dalam urin. Warnanya dibandingkan
dengan grafik pada botol strip reagen setelah 1 menit.
Hasil berkisar dari 0 hingga 10 mg / dL.
Strip reagen Immunodip menggunakan imunokromografi
teknik. Strip secara individual dikemas secara khusus
wadah yang dirancang. Wadah ditempatkan di
spesimen urin selama 3 menit. Jumlah urin yang terkontrol melalui wadah melalui lubang ventilasi. Urin bertemu
partikel lateks biru dilapisi dengan antibodi albumin antihuman.
Albumin dalam urin berikatan dengan partikel yang dilapisi.
Partikel terikat dan tidak terikat terus bermigrasi ke atas
mengupas. Migrasi dikendalikan oleh ukuran partikel;
partikel yang tidak terikat tidak bermigrasi sejauh partikel yang terikat.
Pertama, pita biru dibentuk oleh partikel yang tidak terikat.
Partikel terikat terus bermigrasi dan membentuk sedetik
pita biru lebih jauh ke atas strip. Band teratas karenanya mewakili
partikel yang terikat (albumin urin) dan bagian bawah
pita mewakili partikel yang tidak terikat. Intensitas warna pada
band dibandingkan dengan bagan warna pabrikan. SEBUAH
pita bawah yang lebih gelap mewakili lebih dari 1,2 mg / dL, sama
warna pita mewakili 1,2 hingga 1,8 mg / dL, dan atasan yang lebih gelap
band mewakili 2,0 hingga 8,0 mg / dL albumin. Bagian bawah yang lebih gelap
band negatif, warna band sama adalah borderline, dan a
pita atas yang lebih gelap menunjukkan hasil positif.
Albumin: Rasio Creatinine
Strip reagen Clinitek Microalbumin dan Multistix
Strip pereaksi pro (Siemens Medical Solutions Diagnostics,
Tarrytown, NY) memberikan pengukuran albumin / simultan
protein dan kreatinin yang memungkinkan estimasi
Ekskresi mikroalbumin 24 jam.3 Sebagaimana dibahas dalam Bab 2,
kreatinin diproduksi dan diekskresikan pada tingkat yang konsisten untuk
masing-masing individu. Karena itu, dengan membandingkan ekskresi albumin
untuk ekskresi kreatinin, pembacaan albumin bisa
dikoreksi untuk overhidrasi dan dehidrasi secara acak
Sampel. Selain itu termasuk kreatinin pada reagen
strip, pad uji albumin diubah menjadi reaksi yang mengikat pewarna
yang lebih spesifik untuk albumin daripada kesalahan protein
Indikator reaksi pada strip yang mengukur protein.
Reaksi Strip Reagen
Albumin
Strip reagen albumin menggunakan pewarna bis (3′3′ ′, diodo-4′, 4′ ′-
dihydroxy-5′, 5′ ′-dinitrophenyl) -3,4,5,6-tetra-bromosulphonphtalein
(DIDNTB), yang memiliki sensitivitas dan
spesifisitas untuk albumin. Sedangkan reagen protein konvensional
bantalan memiliki sensitivitas≥30 mg / dL dan mungkin termasuk protein
selain albumin, strip DIDNTB dapat mengukur albumin
antara 8 dan 20 mg / dL (80 hingga 200 mg / L) tanpa dimasukkan
protein lainnya. Gangguan reaksi dengan buffered tinggi
urin alkali (selalu menjadi perhatian dengan pereaksi konvensional
strip) dikontrol dengan menggunakan kertas yang diolah dengan bis- (heptapropylene
glikol) karbonat. Penambahan vinil polimetil
ether menurunkan pengikatan spesifik asam poliamino ke
pad albumin. Hasilnya dilaporkan 10 hingga 150 mg / L (1 hingga
15 mg / dL). Warna berkisar dari hijau pucat ke biru aqua. Salah
hasil yang meningkat dapat disebabkan oleh urin yang berdarah, dan
urin berwarna abnormal dapat mengganggu pembacaan.7
Kreatinin
Prinsip strip reagen untuk kreatinin didasarkan pada
aktivitas pseudoperoxidase dari kompleks tembaga-kreatinin.
Reaksi mengikuti prinsip yang sama dengan reaksi untuk
darah pada strip reagen. Strip reagen mengandung tembaga sulfat
(CuSO4, 3,3′, 5,5′-tetramethylbenzidine (TMB) dan diisopropyl
benzene dihydroperoxide (DBDH). Kreatinin dalam
urin bergabung dengan sulfat tembaga untuk membentuk coppercreatinine
peroksidase. Ini bereaksi dengan peroksida DBDH,
melepaskan ion oksigen yang mengoksidasi kromogen TMB dan
menghasilkan perubahan warna dari oranye ke hijau ke biru.3
CuSO4 _ CRE → Cu (CRE) peroksidase
Cu (CRE) peroksidase
DBDH _ TMB → TMB teroksidasi _ H2HAI
(peroksidase) (kromogen)
Hasil dilaporkan sebagai 10, 50, 100, 200, 300 mg / dL atau
0,9, 4,4, 8,8, 17,7, atau 26,5 mmol / L kreatinin.
Strip reagen tidak dapat mendeteksi tidak adanya kreatinin.
Hasil yang terangkat secara salah dapat disebabkan oleh darah yang tampak
urin dan adanya obat pengurang asam lambung
cimetidine (Tagamet). Air seni berwarna abnormal juga
dapat mengganggu pembacaan.
Tidak ada pembacaan kreatinin yang dianggap abnormal, sebagai kreatinin
biasanya hadir dalam konsentrasi 10 hingga 300
mg / dL (0,9-26,5 mmol / L). Tujuan dari kreatinin
pengukuran adalah untuk mengkorelasikan konsentrasi albumin ke
konsentrasi urin, menghasilkan albumin semiquantitatif:
rasio kreatinin (A: C).
Albumin / Protein: Rasio Kreatinin
Metode otomatis dan manual tersedia untuk menentukan
rasio A: C berdasarkan reaksi yang telah dibahas sebelumnya. Itu
Strip reagen Clinitek Microalbumin dirancang untuk berperan
gunakan saja. Strip dibaca di Clinitek Urine Chemistry
Analisis. Strip hanya mengukur albumin dan kreatinin
dan menghitung rasio A: C. Hasilnya ditampilkan dan dicetak
untuk albumin, kreatinin, dan rasio A: C di kedua konvensional
dan unit SI. Hasil abnormal untuk rasio A: C adalah
30 hingga 300 mg / g atau 3,4 hingga 33,9 mg / mmol.7
Strip reagen Bayer Multistix Pro 11 termasuk reagen
bantalan untuk kreatinin, protein-tinggi dan protein-rendah (albumin),
bersama dengan bantalan untuk glukosa, keton, darah, nitrit, leukosit
esterase, pH, bilirubin, dan berat jenis. Urobilinogen adalah
tidak termasuk dalam strip ini. Strip dapat dibaca secara manual
atau pada instrumen Clinitek otomatis. Reaksi protein-tinggi
menggunakan kesalahan protein dari prinsip indikator dan protein-
reaksi rendah adalah pengikat pewarna yang sebelumnya dibahas
metode. Hasilnya dilaporkan sebagai rasio protein: kreatinin,
meskipun hasil protein-rendah juga termasuk dalam perhitungan.
Bagan yang disediakan pabrikan digunakan untuk menentukan
rasio berdasarkan hasil protein-tinggi, protein-rendah,
dan pembacaan kreatinin.8
■ ■ ● Glukosa
Karena nilainya dalam deteksi dan pemantauan diabetes
mellitus, tes glukosa adalah bahan kimia yang paling sering
analisis dilakukan pada urin. Karena gejala yang tidak spesifik
terkait dengan timbulnya diabetes, diperkirakan
bahwa lebih dari separuh kasus di dunia tidak terdiagnosis.
Karena itu, tes glukosa darah dan urin dimasukkan dalam semua
pemeriksaan fisik dan seringkali menjadi fokus kesehatan massa
program penyaringan. Diagnosis dini diabetes mellitus
melalui tes glukosa darah dan urin memberikan sangat
peningkatan prognosis. Menggunakan stripmethod reagen yang tersedia saat ini untuk kedua tes glukosa darah dan
urin, pasien
dapat memantau diri mereka sendiri di rumah dan dapat mendeteksi peraturan
masalah sebelum pengembangan komplikasi serius.
Signifikansi Klinis
Dalam keadaan normal, hampir semua glukosa disaring
oleh glomerulus diserap kembali di proksimal berbelit-belit
pipa kecil; oleh karena itu, urin hanya mengandung sejumlah kecil glukosa.
Reabsorpsi glukosa secara tubular dilakukan dengan transpor aktif dalam
Menanggapi kebutuhan tubuh untuk mempertahankan konsentrasi yang memadai
glukosa. Haruskah tingkat glukosa darah menjadi
tinggi(hiperglikemia), seperti yang terjadi pada diabetes mellitus, the
transportasi tubular glukosa berhenti, dan glukosa muncul di
urin. Tingkat darah di mana reabsorpsi tubular berhenti
(ambang ginjal) untuk glukosa adalah sekitar 160 hingga 180
mg / dL. Kadar glukosa darah berfluktuasi, dan orang normal
mungkinglikosuria mengikuti makan dengan glukosa tinggi
kandungan. Oleh karena itu, hasil glukosa paling informatif adalah
diperoleh dari spesimen yang dikumpulkan dalam kondisi terkendali.
Puasa sebelum pengumpulan sampel untuk skrining
tes dianjurkan. Untuk keperluan pemantauan diabetes,
Spesimen biasanya diuji 2 jam setelah makan. Pagi pertama
spesimen tidak selalu mewakili spesimen puasa
karena glukosa dari makan malam mungkin tetap di dalam
kandung kemih semalaman, dan pasien harus disarankan untuk mengosongkan
kandung kemih dan kumpulkan spesimen kedua.9 Urin untuk glukosa
pengujian terkadang dikumpulkan bersamaan dengan
sampel darah diambil selama toleransi glukosa
Tes yang digunakan untuk mengkonfirmasi diagnosis diabetes mellitus
atau hipoglikemia.
Hiperglikemia yang terjadi selama kehamilan dan menghilang
setelah melahirkan disebut diabetes gestasional. Onsetnya
hiperglikemia dan glikosuria biasanya di sekitar
bulan keenam kehamilan. Hormon yang dikeluarkan oleh plasenta
memblokir aksi insulin, menghasilkan resistensi insulin
dan hiperglikemia. Deteksi diabetes gestasional adalah
penting untuk kesejahteraan bayi, karena glukosa silang
plasenta sedangkan insulin tidak. Bayi itu berkembang
kadar glukosa yang tinggi, menyebabkan pankreas bayi memproduksi
lebih banyak insulin. Kelebihan glukosa yang disajikan kepada bayi adalah
disimpan sebagai lemak, mengakibatkan bayi besar berisiko obesitas
dan kemudian diabetes tipe 2. Wanita yang menderita diabetes gestasional
juga rentan terhadap diabetes mellitus tipe 2
di tahun-tahun berikutnya.
Hiperglikemia asal nondiabetes terlihat dalam berbagai
gangguan dan juga menghasilkan glikosuria. Banyak dari ini
gangguan terkait dengan fungsi hormonal dan termasuk
pankreatitis, kanker pankreas, akromegali, sindrom Cushing,
hipertiroidisme, dan pheochromocytoma. Hormon-hormon itu
glukagon, epinefrin, kortisol, tiroksin, dan pertumbuhan
hormon, yang meningkat pada kelainan ini, bekerja di
oposisi terhadap insulin, sehingga menghasilkan hiperglikemia dan
glukosuria. Sedangkan fungsi utama insulin adalah untuk
mengubah glukosa menjadi glikogen untuk penyimpanan(glikogenesis), ini
menentang hormon menyebabkan pemecahan glikogen
glukosa(glikogenolisis),menghasilkan peningkatan level
glukosa yang bersirkulasi. Epinefrin juga merupakan penghambat kuat
sekresi insulin dan meningkat ketika tubuh dikenakan
untuk stres berat, yang menyebabkan glukosuria
terlihat bersama dengan trauma serebrovaskular dan miokard
infark.
Glikosuria terjadi tanpa adanya hiperglikemia saat
reabsorpsi glukosa oleh tubulus ginjal terganggu.
Ini sering disebut sebagai "glikosuria ginjal" dan
terlihat pada penyakit ginjal stadium akhir, sistinosis, dan Fanconi
sindroma. Glikosuria tidak berhubungan dengan diabetes gestasional
kadang - kadang dilihat sebagai akibat dari penurunan sementara dari
ambang batas ginjal untuk glukosa selama kehamilan.
Strip Reagen (Glukosa
Oksidase) Reaksi
Dua tes yang sangat berbeda telah digunakan oleh laboratorium untuk
ukur glukosa urin. Prosedur glukosa oksidase menyediakan
tes spesifik untuk glukosa, dan tes reduksi tembaga
adalah tes umum untuk glukosa dan zat pereduksi lainnya.
Strip reagen menggunakan metode pengujian glukosa oksidase oleh
menghamili area pengujian dengan campuran glukosa oksidase,
peroksidase, kromogen, dan buffer menghasilkan double
reaksi enzim berurutan. Pada langkah pertama, glukosa oksidase
mengkatalisasi reaksi antara glukosa dan udara kamar untuk menghasilkan
asam glukonat dan peroksida. Pada langkah kedua, peroksidase
mengkatalisasi reaksi antara peroksida dan kromogen menjadi
membentuk senyawa berwarna teroksidasi yang mewakili keberadaan
glukosa.
glukosa
1. Glukosa _ HAI2 (udara) → asam glukonat_ H2HAI oksidase 2
peroksidase
2. H2HAI2 _ kromogen→ kromogen berwarna teroksidasi
_ H2HAI
Pabrikan strip reagen menggunakan beberapa kromogen berbeda,
termasuk kalium iodida (hijau menjadi coklat) dan
tetramethylbenzidine (kuning ke hijau). Glukosa urin dapat bereportasi dari segi negatif, jejak, 1_2_3_, dan 4_;
namun, bagan warna juga memberikan pengukuran kuantitatif
mulai dari 100 mg / dL hingga 2 g / dL, atau 0,1% hingga 2%. Itu
American Diabetes Association merekomendasikan kuantitatif
pelaporan.
Gangguan Reaksi
Karena metode glukosa oksidase khusus untuk glukosa,
reaksi positif palsu tidak diperoleh dari urin lain
konstituen, termasuk gula lain yang mungkin ada.
Namun, reaksi positif palsu dapat terjadi jika wadah
menjadi terkontaminasi dengan peroksida atau pengoksidasi kuat
deterjen.
Zat yang mengganggu reaksi enzimatik atau
zat pereduksi kuat, seperti asam askorbat, yang mencegah
oksidasi kromogen dapat menghasilkan false-negative
hasil. Untuk meminimalkan gangguan dari asam askorbat, reagen
produsen strip sedang memasukkan bahan kimia tambahan
ke dalam bantalan uji. Contohnya adalah iodate yang mengoksidasi askorbat
asam sehingga tidak dapat mengganggu oksidasi kromogen.
Literatur produk harus ditinjau dengan cermat
informasi terkini mengenai semua zat yang mengganggu. Tinggi
kadar keton juga memengaruhi tes glukosa oksidase pada glukosa rendah
konsentrasi; Namun, karena keton biasanya
disertai dengan glikosuria yang ditandai, ini jarang menghadirkan a
masalah. Gravitasi spesifik tinggi dan suhu rendah mungkin
mengurangi sensitivitas tes. Sejauh ini sumber terbesar
hasil glukosa palsu-negatif adalah kesalahan teknis dari pemberian izin
spesimen tetap tidak diawetkan pada suhu kamar untuk
periode diperpanjang. Hasil negatif palsu diperoleh dengan
baik glukosa oksidase dan metode reduksi tembaga
karena glikolisis glukosa yang cepat.
Uji Pengurangan Tembaga
Pengukuran glukosa dengan metode reduksi tembaga adalah
salah satu tes kimia paling awal yang dilakukan pada urin. Ujian
bergantung pada kemampuan glukosa dan zat lain untuk mengurangi
tembaga sulfat menjadi tembaga oksida di hadapan alkali dan
panas. Perubahan warna berkembang dari biru negatif
(CuSO4) melalui hijau, kuning, dan oranye / merah (Cu2O) terjadi
ketika reaksi berlangsung.
panas
CuSO4 (tembaga sulfida) _ mengurangi zat →
alkali
Cu2O (tembaga oksida) _ zat teroksidasi → warna
(biru hijau→ oranye / merah)
Solusi klasik Benediktus dikembangkan pada tahun 1908
dan mengandung tembaga sulfat, natrium karbonat, dan natrium
buffer sitrat.10 Urine ditambahkan ke larutan, panasnya
diterapkan, dan endapan yang dihasilkan diamati untuk
warna. Metode yang lebih nyaman yang menggunakan Benedict
prinsipnya adalah tablet Clinitest (Solusi Medis Siemens
Diagnostik, Tarrytown, NY). Tablet mengandung tembaga
sulfat, natrium karbonat, natrium sitrat, dan natrium
hidroksida. Setelah penambahan tablet ke air dan urin,
panas dihasilkan oleh hidrolisis natrium hidroksida dan
reaksinya dengan natrium sitrat, dan karbon dioksida dilepaskan
dari natrium karbonat untuk mencegah udara ruangan mengganggu
dengan reaksi reduksi. Tabung harus ditempatkan
di rak dan tidak dipegang di tangan karena reaksinya panas
dapat menyebabkan luka bakar. Di akhir effervescent
reaksi, tabung terguncang dengan lembut, dan warnanya mulai
dari biru ke oranye / merah dapat dibandingkan dengan pabrikan
bagan warna untuk menentukan jumlah perkiraan
mengurangi zat.
Kehati-hatian harus dilakukan untuk mengamati reaksi dengan cermat seperti apa adanya
terjadi, karena pada kadar glukosa tinggi, sebuah fenomena
dikenal sebagai "melewati" dapat terjadi. Ketika ini terjadi, itu
warna yang dihasilkan melewati tahap oranye / merah dan
kembali ke warna hijau-cokelat, dan jika tidak diamati, tinggi
kadar glukosa dapat dilaporkan sebagai negatif. Metode alternatif
menggunakan dua tetes bukannya lima tetes urin dapat meminimalkan
terjadinya "melewati." Bagan warna yang terpisah harus
digunakan untuk menafsirkan reaksi. Bagan ini memberikan nilai ke atas
hingga 5 g / dL, sedangkan metode lima-tetes dibatasi hingga 2 g / dL.
Sensitivitas Clinitest terhadap glukosa dikurangi menjadi a
minimal 200 mg / dL. Sebagai tes khusus untuk mengurangi
zat, Clinitest dapat mengalami gangguan dari yang lain
gula pereduksi, termasuk galaktosa, laktosa, fruktosa, maltosa,
pentosa, asam askorbat, metabolit obat tertentu, dan
antibiotik seperti sefalosporin. Karena itu, Clinitest
tidak memberikan tes konfirmasi untuk glukosa.
Tablet teruji sangat higroskopis dan harus
disimpan dalam paket yang tertutup rapat. Warna biru yang kuat diPerbandingan Glukosa
Oksidase dan Klinik
Ada beberapa penjelasan untuk menemukan pertentangan
hasil antara dua tes glukosa. Seperti yang dinyatakan, Clinitest
tidak sepeka tes glukosa oksidase, demikian temuan
a 1_ pembacaan strip reagen dan Clinitest negatif tidak boleh
mengejutkan. Strip reagen yang sangat positif dan negatif
Clinitest, bagaimanapun, harus menimbulkan kekhawatiran tentang kemungkinan kontaminasi
oleh agen pengoksidasi yang kuat. Yang paling signifikan
perbedaan adalah strip reagen negatif dengan Clinitest positif.
Meskipun zat yang mengganggu mempengaruhi tes mungkin
menyebabkan masalah ini, penyebab paling sering adalah kehadiran
gula pereduksi lainnya dalam urin. Biasa ditemukan berkurang
gula termasuk galaktosa, fruktosa, pentosa, dan laktosa, dari
galaktosa mana yang paling signifikan secara klinis. Galaktosa dalam
urin bayi yang baru lahir mewakili "kesalahan metabolisme bawaan"
di mana kekurangan enzim galaktosa-1-fosfat
uridyl transferase mencegah kerusakan galaktosa yang tertelan
dan mengakibatkan kegagalan untuk berkembang dan komplikasi lainnya,
termasuk kematian. Semua bayi baru lahir harus diskrining untuk galaktosuria
karena deteksi dini diikuti oleh pembatasan diet
kendalikan kondisinya. Tergantung pada populasi laboratorium,
Klinik sering dilakukan pada spesimen pediatrik dari
pasien paling tidak berusia 2 tahun. Banyak negara
memasukkan skrining untuk galaktosemia ke dalam kebutuhan mereka
program penyaringan bayi baru lahir (lihat Bab 9). Penampilan
gula pereduksi lainnya biasanya klinis minimal
signifikansi, dan laktosa sering ditemukan dalam urin
ibu menyusui. Perlu diingat bahwa gula meja adalah sukrosa, a
gula yang tidak berkurang, dan tidak bereaksi dengan Clinitest atau glukosa
strip oksidase.
■ ■ ● Keton
Istilah keton mewakili tiga produk antara
metabolisme lemak, yaitu, aseton, asam asetoasetat, dan betahidroksibutirat
asam. Biasanya, jumlah yang terukur
keton tidak muncul dalam urin, karena semua dimetabolisme
lemak sepenuhnya dipecah menjadi karbon dioksida dan
air. Namun, ketika penggunaan karbohidrat tersedia sebagai
sumber energi utama menjadi terganggu, penyimpanan tubuh
lemak harus dimetabolisme untuk memasok energi. Keton kemudian
terdeteksi dalam urin.
Signifikansi Klinis
Alasan klinis untuk peningkatan metabolisme lemak termasuk
ketidakmampuan untuk memetabolisme karbohidrat, seperti yang terjadi pada diabetes
mellitus; peningkatan kehilangan karbohidrat akibat muntah; dan
asupan karbohidrat yang tidak memadai terkait dengan kelaparan
dan malabsorpsi.
Pengujian untuk keton kemih adalah yang paling berharga dalam manajemen
dan pemantauan diabetes yang tergantung pada insulin (tipe 1)
mellitus.Ketonuriamenunjukkan defisiensi insulin,
menunjukkan perlunya mengatur dosis. Ini sering kali awal
indikator dosis insulin tidak mencukupi pada diabetes tipe 1 dan
pada pasien dengan diabetes yang mengalami masalah medis selain diabetes. Peningkatan akumulasi keton dalam
darah menyebabkan ketidakseimbangan elektrolit, dehidrasi, dan, jika tidak
dikoreksi, asidosis dan akhirnya koma diabetes. Untuk membantu
pemantauan diabetes, tes keton tidak hanya termasuk dalam
semua strip tes berganda, tetapi juga dikombinasikan dengan glukosa aktif
strip yang digunakan terutama untuk pengujian di rumah oleh pasien yang didiagnosis
dengan diabetes.
Penggunaan strip uji berganda di laboratorium rumah sakit
sering menghasilkan tes keton positif yang tidak terkait dengan diabetes
karena penyakit pasien baik mencegah asupan yang memadai atau
penyerapan karbohidrat atau menghasilkan kerugian yang dipercepat,
seperti dalam kasus muntah. Penurunan berat badan dan gangguan makan
klinik dapat menggunakan aplikasi praktis ketonuria yang diproduksi
dengan menghindari karbohidrat untuk memantau pasien. Sering
olahraga berat dapat menyebabkan terlalu banyak mengonsumsi karbohidrat
dan menghasilkan ketonuria.
Reaksi Strip Reagen
Tiga senyawa keton tidak sama
jumlah dalam urin. Baik aseton dan asam beta-hidroksibutirat
diproduksi dari asam asetoasetat (Gbr. 5-1). Proporsi
78% beta-hydroxybutyric acid, 20% acetoacetic acid,
dan 2% aseton relatif konstan pada semua spesimen.
Tes strip reagen menggunakan natrium nitroprusside (nitroferricyanide)
reaksi untuk mengukur keton. Dalam reaksi ini, asetoasetat
Asam dalam media alkali bereaksi dengan natrium
nitroprusside menghasilkan warna ungu. Tes tidak
mengukur asam beta-hidroksibutirat dan hanya sedikit sensitif
untuk aseton ketika glisin juga ada; Namun, sejauh
senyawa ini berasal dari asam asetoasetat, keberadaannya
dapat diasumsikan, dan tidak perlu melakukan individu
tes. Hasil dilaporkan secara kualitatif sebagai negatif,
jejak, kecil (1_), sedang (2_), atau besar (3_), atau secara semikuantitatif
sebagai negatif, jejak (5 mg / dL), kecil (15 mg / dL),
sedang (40 mg / dL), atau besar (80 hingga 160 mg / dL).
basaasetoasetat _ sodium nitroprusside _ (glisin) →
(dan aseton) warna ungu
Tablet Asetat
Dalam kasus ketosis parah, mungkin perlu melakukan tes
pada pengenceran serial untuk memberikan informasi lebih lanjut tentang
tingkat ketosis. Ini dilakukan menggunakan tes tablet.
Acetest (Siemens Medical Solutions Diganostics, Tarrytown,
NY) menyediakan natrium nitroprussida, glisin, disodium
fosfat, dan laktosa dalam bentuk tablet. Penambahan laktosa
memberikan diferensiasi warna yang lebih baik. Keuntungan dari Acetest
tablet adalah bahwa mereka juga dapat digunakan untuk serum dan tubuh lainnya
pengujian cairan. Tablet asetat bersifat higroskopis; jika spesimennya
tidak sepenuhnya diserap dalam 30 detik, tablet baru
seharusnya digunakan.
Gangguan Reaksi
Spesimen yang diperoleh mengikuti prosedur diagnostik menggunakan
pewarna phenolsulfonphthalein dan bromsulphalein dapat
menghasilkan warna merah yang mengganggu dalam media uji alkali,
seperti halnya urin merah berpigmen tinggi. Levodopa dalam jumlah besar
dan obat-obatan yang mengandung kelompok sulfhidril, termasuk
natrium merkaptoetana sulfonat (MESNA) dan
kaptopril, dapat menghasilkan reaksi warna atipikal. Reaksi
dengan zat mengganggu sering memudar saat berdiri,
sedangkan pengembangan warna dari asam asetoasetat meningkat,
menghasilkan hasil positif palsu dari pembacaan yang waktunya tidak tepat.
Nilai-nilai menurun secara salah karena volatilisasi aseton
dan pemecahan asam asetoasetat oleh bakteri
terlihat pada spesimen yang tidak diawetkan dengan benar.