Alfia Elzam Zami - C1061201014 - ITP B - LaprakDDM

LAPORAN PRAKTIKUM DASAR-DASAR
MIKROBIOLOGI
Disusun oleh :
Nama : Alfia Elzam Zami
NIM : C1061201014
Kelompok :3
PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI

PANGAN
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS TANJUNGPURA
PONTIANAK
2021
i
KATA PENGANTAR
Puji syukur kita panjatkaan kehadirat Tuhan YME, karena atas rahmat dan
hidayah-Nya lah sehingga penulis dapat menyelesaikan Laporan Akhir Praktikum
ini tepat waktu.
Tak lupa pula, penulis mengucapkan terima kasih kepada Bapak Cico Jhon
Karunia Simamora, S.P., M.Si, Asisten Dosen, teman-teman serta semua pihak
yang terlibat dalam proses praktikum ini.
Penulis menyadari bahwa dalam proses penulisan laporan ini masih jauh dari
kesempurnaan baik materi maupun cara penulisannya. Namun demikian, penulis
telah berusaha dengan segala kemampuan dan pengetahuan yang dimiliki
sehingga dapat selesa dengan baik.
Penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi perbaikan
laporan-laporan praktikum penulis selanjutanya.
Pontianak, 14 Juni 2021
Penulis
ii
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ........................................................................................................ ii

ACARA 1. PENGENALAN ALAT DAN BAHAN ..........................................................xi
BAB I .................................................................................................................................. 1
PENDAHULUAN .............................................................................................................. 1
1.1 Latar Belakang .......................................................................................................... 1
1.2 Tujuan Praktikum...................................................................................................... 1
BAB II................................................................................................................................. 2
METODE PRAKTIKUM ................................................................................................... 2
2.1 Waktu dan Tempat .................................................................................................... 2
2.2 Alat dan Bahan.......................................................................................................... 2
2.3 Prosedur Kerja .......................................................................................................... 2
BAB III ............................................................................................................................... 5
HASIL DAN PEMBAHASAN........................................................................................... 5
3.1 Hasil .......................................................................................................................... 5
3.2 Pembahasan............................................................................................................... 5
BAB IV ............................................................................................................................. 10
PENUTUP ........................................................................................................................ 10
4.1 Kesimpulan ............................................................................................................. 10
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... 11
LAMPIRAN...................................................................................................................... 12
• Dokumentasi Praktikum tiap acara ....................................................................... 12
• LAPORAN SEMENTARA ACARA 1 ................................................................ 17
ACARA 2. PENGENALAN TEKNIK PENGENCERAN DAN ISOLASI ..................... 19
BAB 1 ............................................................................................................................... 20
PENDAHULUAN ............................................................................................................ 20
1.1 Latar Belakang .................................................................................................. 20
1.2 Tujuan Praktikum.............................................................................................. 20
BAB II............................................................................................................................... 21
METODE PRAKTIKUM ................................................................................................. 21
2.1 Waktu dan Tempat ...................................................................................................... 21
iii
2.2 Alat dan Bahan........................................................................................................ 21
2.3 Prosedur Kerja ........................................................................................................ 21
BAB III ............................................................................................................................. 23
HASIL DAN PEMBAHASAN......................................................................................... 23
3.1 Hasil ........................................................................................................................ 23
3.2 Pembahasan............................................................................................................. 23
BAB IV ............................................................................................................................. 25
PENUTUP ........................................................................................................................ 25
4.1 Kesimpulan ............................................................................................................. 25
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... 26
LAMPIRAN...................................................................................................................... 27
• Dokumentasi Praktikum........................................................................................ 27
• Laporan Sementara Acara 2 .................................................................................. 28
ACARA 3. PENGENALAN MIKROSKOP CAHAYA DAN STEREO......................... 30
BAB 1 ............................................................................................................................... 31
PENDAHULUAN ............................................................................................................ 31
1.1 Latar belakang ................................................................................................... 31
BAB II............................................................................................................................... 32
2.1 Waktu dan Tempat ............................................................................................ 32
2.2 Alat dan Bahan........................................................................................................ 32
2.3 Prosedur Kerja ........................................................................................................ 32
BAB III ............................................................................................................................. 33
3.1 Hasil ........................................................................................................................ 33
3.2 Pembahasan............................................................................................................. 35
BAB IV ............................................................................................................................. 37
PENUTUP ........................................................................................................................ 37
4.1 Kesimpulan ............................................................................................................. 37
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... 38
LAMPIRAN...................................................................................................................... 39
• Dokumentasi Per Acara ........................................................................................ 39
iv
ACARA IV. PEMBUATAN MEDIA ISOLASI .............................................................. 42
BAB 1 ............................................................................................................................... 43
PENDAHULUAN ............................................................................................................ 43
1.1 Latar Belakang .................................................................................................. 43
1.2 Tujuan Praktikum.................................................................................................... 43
BAB II............................................................................................................................... 44
2.1 Alat dan Bahan .................................................................................................. 44
2.2 Waktu dan Tempat ............................................................................................ 44
2.3 Prosedur Kerja .................................................................................................. 44
BAB III ............................................................................................................................. 45
3.1 Hasil .................................................................................................................. 45
3.2 Pembahasan............................................................................................................ 46
BAB IV ............................................................................................................................. 48
PENUTUP ........................................................................................................................ 48
4.1 Kesimpulan ............................................................................................................. 48
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... 49
LAMPIRAN...................................................................................................................... 50
ACARA V. ISOLASI MIKROORGANISME ................................................................. 53
BAB 1 ............................................................................................................................... 54
1.1 Latar Belakang .................................................................................................. 54
1.2 Tujuan praktikum .............................................................................................. 54
BAB II............................................................................................................................... 55
2.1 Waktu dan Tempat .................................................................................................. 55
2.4 Prosedur Kerja .................................................................................................. 55
BAB III ............................................................................................................................. 57
3.1 Hasil ........................................................................................................................ 57
3.2 Pembahasan............................................................................................................. 58
v
BAB IV ............................................................................................................................. 59
PENUTUP ........................................................................................................................ 59
4.1 Kesimpulan ....................................................................................................... 59
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... 60
LAMPIRAN...................................................................................................................... 61
• Dokumentasi Acara 5 ............................................................................................ 61
• Laporan Sementara ............................................................................................... 62
ACARA VI. IDENTIFIKASI MIKROORGANISME ..................................................... 64
BAB I ................................................................................................................................ 65
PENDAHULUAN ............................................................................................................ 65
1.1 Latar Belakang .................................................................................................. 65
Tujuan Praktikum kali ini adalah untuk mengenalkan karakteristik berbagai koloni
dalam setiap sampel yang berbeda. ............................................................................... 65
BAB II............................................................................................................................... 66
2.1 Waktu dan Tempat .................................................................................................. 66
2.2 Alat dan Bahan .................................................................................................. 66
2.3 Prosedur Kerja .................................................................................................. 66
BAB III ............................................................................................................................. 67
3.1 Hasil ........................................................................................................................ 67
3.2 Pembahasan....................................................................................................... 69
BAB IV ............................................................................................................................. 71
PENUTUP ........................................................................................................................ 71
4.2 Kesimpulan ....................................................................................................... 71
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... 72
LAMPIRAN...................................................................................................................... 73
• Dokumentasi Acara 6 ............................................................................................ 73
vi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. INKUBATOR ................................................................................................. 12
Gambar 2. LAMINER ...................................................................................................... 12
Gambar 3. AUTOCLAVE ................................................................................................ 12
Gambar 4. ERLENMEYER .............................................................................................. 13
Gambar 5. ALUMINIUM FOIL ....................................................................................... 13
Gambar 6. INOCULUM LOOP ........................................................................................ 13
Gambar 7. MIKROPIPET ................................................................................................. 13
Gambar 8. PINSET ........................................................................................................... 14
Gambar 9. GELAS BEAKER ........................................................................................... 14
Gambar 10. SEALER........................................................................................................ 14
Gambar 11. TIP................................................................................................................. 14
Gambar 12. PIPET UKUR ................................................................................................ 15
Gambar 13. PIPET TETES ............................................................................................... 15
Gambar 14. MIKROSKOP ............................................................................................... 15
Gambar 15. CAWAN PETRI ........................................................................................... 15
Gambar 16. BUNSEN ....................................................................................................... 16
Gambar 17. HAND SPRAYER ........................................................................................ 16
Gambar 18. TABUNG REAKSI DAN RAK.................................................................... 16
Gambar 19. MEDIA AGAR ............................................................................................. 16
Gambar 20. ALAT BAHAN 1 ......................................................................................... 27
Gambar 21. PENGENCERAN ......................................................................................... 27
Gambar 22. STEREO 4X .................................................................................................. 33
Gambar 23. STEREO 10x................................................................................................. 33
Gambar 24. STEREO 40x................................................................................................. 33
Gambar 25. CAHAYA 4x................................................................................................. 34
Gambar 26. CAHAYA 10x............................................................................................... 34
Gambar 27. CAHAYA 40x............................................................................................... 34
Gambar 28. CAHAYA 100x............................................................................................. 34
Gambar 29. dokumentasi acara 3 ...................................................................................... 39
Gambar 31. Dokumentasi acara 3 ..................................................................................... 39
Gambar 33. MEDIA PDA................................................................................................. 45
Gambar 34. MEDIA NA ................................................................................................... 45
gambar 35. dokumentasi acara 4 ....................................................................................... 50
gambar 36. dokumentasi acara 4 ....................................................................................... 50
gambar 37. Sampel NA ..................................................................................................... 57
gambar 38. Sampel NA ..................................................................................................... 57
gambar 39. Proses acara 5 ................................................................................................. 61
gambar 40. Proses Acara 5................................................................................................ 61
gambar 41. Sampel yang telah diinkubasi ........................................................................ 73
vii
gambar 42. Sampel yang telah diinkubasi ........................................................................ 73
gambar 43. Sampel Bakteri ............................................................................................... 73
viii
DAFTAR TABEL
Table 1. Alat dan Bahan Acara 1 ........................................................................................ 5
Table 2. Sampel NA air Galon .......................................................................................... 67
Table 3. Pengamatan Visual Sampel air Galon................................................................. 67
Table 4. Sampe NA air Sumur .......................................................................................... 67
Table 5. Pengamatan Visual Sampel air sumur ................................................................ 68
Table 6. Sampel PDA air Sungai ...................................................................................... 68
Table 7. Identifikasi Visual Sampel PDA air sungai ........................................................ 68
Table 8. Sampel PDA air cucian Beras ............................................................................. 68
Table 9. Identifikasi Visual Sampel PDA air cucian beras ............................................... 69
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. LS 1 .............................................................................................................. 17
Lampiran 2. LS2 ............................................................................................................... 28
Lampiran 3. LS 3 ................................................................................................................ 41
Lampiran 4. LS 4 ................................................................................................................ 52
Lampiran 6. ....................................................................................................................... 63
Lampiran 7. LS6 ................................................................................................................. 74
x
MIKROBIOLOGI
ACARA 1. PENGENALAN ALAT DAN BAHAN
Disusun oleh :
NIM : C1061201014
Kelompok :3

PANGAN
FAKULTAS PERTANIAN
PONTIANAK
2021
xi
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang

Perkembangan pada ilmu mikrobiologi pada masa sekarang ini, tidak bisa kita
lepaskan dari yang namanya alat maupun bahan. Alat dan bahan sudah menjadi
barang yang paling penting dalam keberhasilan pekerjaan di laboratorium.
Sehingga praktikum yang berjudul pengenalan alat dan bahan ini sangat penting
untuk dilakukan demi keselamatan dan kelancaran berlangsungnya penelitian di
kemudian hari.
Pengenalan alat dan bahan ini penting, karena membuat kita tidak salah dalam
menggunakan alat lab. Sehingga data penelitian yang dihasilkan adalah benar dan
sesuai faktanya. Dengan data tersebut, dapat terlihat kualitas yang ada pada
penelitian tersebut.
1.2 Tujuan Praktikum

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengenal bermacam-macam alat maupun
bahan yang ada di laboratorium mikrobiologi beserta cara penggunaannya.
Bekerja di laboratorium itu tidak akan bisa lepas dari berbagai kemungkinan yang
akan terjadi, baik yang dari jenis bahan kimia maupun jenis bahan yang sangat
berbahaya
1
BAB II
METODE PRAKTIKUM
2.1 Waktu dan Tempat

Praktikum mengenai pengenalan alat dan bahan laboratorium dilakukan pada hari
Kamis, 27 Mei 2021 pada pukul 11.00 WIB, bertempat di Laboratorium Penyakit
Tanaman Fakultas Pertanian Universitas Tanjungpura.
2.2 Alat dan Bahan

• Alat
- Erlenmeyer - Pipet
- Tisu - Pipet Filer
- Mikropipet - Tabung Reaksi
- Jarum Inokulum - Pipet Tetes
- Aluminium Foil - Mikroskop
- Silet - Inkubator
- Bunsen - Laminer
- Cawan Petri - Oven
- Gelas Beker - Autoclave
• Bahan
- Sprayer
- Media Agar
2.3 Prosedur Kerja

• Incubator
Nyalakan Inkubator dengan menghubungkan kabel power ke stop kontak, lalu atur
suhunya dengan menekan tombol set sambil memutar tombol ke kanan untuk
mengatur suhu yang diinginkan. Setelah itu, siapkan sampel yang akan
diinkubasikan, kemudian letakkan sampel ke rak yang terdapat dalam incubator
tersebut. Kemudian masukkan media pembiakkan berisi mikroorganisme yang
akan mau di Inkubasi. Jika menggunakan cawan Petri, maka bungkus dengan
kertas ataupun plastic.
• Laminer
Nyalakan lampu UV minimal selama 30 menit, sebelum laminar digunakan. Saat

sinar UV menyala, usahakan jangan ada yang didalam ruangan. Lalu, siapkan
semua alat-alat steril yang akan digunakan. Alat-alat yang dimasukkan dalam
laminar harus disemprot dengan alcohol 70% terlebih dahulu. Blower pada
laminar dihidupkan untuk menyalakan air flow. Lalu, hidupkan lampunya dan
laminar siap digunakan.
2
• Oven
Hubungkan oven dengan sumber listrtik, lalu tekan tombol “ON” dan tunggu
beberapa saat hingga display muncul. Lalu, sesuaikan timer dengan kebutuhan
anda dan tunggulah hingga suhu menyala. Setelah itu, letakkan alat lab yang ingin
di proses dalam oven kemudian tunggu hingga proses pengovenan selesai. Jika
sudah, matikan oven dengan cara menekan tombol “off” dan tunggulah hingga
display mati.
• Autoclave
Sebeum mulai menggunakan kita harus mengecek terlebih dahulu air yang
tertampung dalam autoclave. Apabila air yang ada ternyata masih kurang dari
batas minimu, maka tambahkan lagi air hingga mencapai batas yang diperlukan.
Masukkan peralatan dan juga bahan yang hendak disterilkan. Tutup autoclave
rapat-rapat dan kencangkan baut pengaman supaya tak ada uap keluar. Jangan
kencangkan klep pengaman terlebih dahulu. Nyalakan autoclave dan atur
timernya, tunggu hingga air mendidih agar uapnyamemenuhi kompartmen dan
terdesak keluar. Setelah itu barulah kencangkan klep pengaman dan tunggu
hibgga proses selesai. Setelah terdengar bunyi alarm yang menandakan bahwa
proses sudah selesai, jangan langsung dibuka. Tunggu sampai tekanan dalam
autoclave sama dengan tekanan lingkungan sekitar. Setelah itu, keluarkan isi
dalam autoclave secara hati-hati.
• Mikroskop
- Mikroskop Cahaya
Pegang mikroskop cahaya pada pegangan dan tempatkan pada permukaan yang
datar. Pastikan anda melakukan mikroskop pada ruangan yang kaya akan cahaya
alami, atur perbesaran pada lensa objektif pada titik yang rendah. Cari cahaa alami
maupun buatan dalam ruang pengamatan. Kemudian, atur cermin agar fungsi
mikroskop cahaya berjalan dengan sempurna dengan jumlah cahaya. Buka
diafragma dengan menggunakan tuas untuk menyesuaikan jumlah cahaya yang
diterima. Atur lensa objektif agar berada cukup jauh dari gelas preparat dengan
menggunakan makrometer searah jarum jam. Pasang preparat ditempatnya dan
3
jepit dengan penjepit preparat agar tidak bergeser, tepat dibawah lensa objektif.
Kemudian naikkan meja, bersiaplah untuk mendekatkan lensa objektif dengan
jarak sekitar 0.5 cm dengan menggunakan makrometer atau focus pada stage.
Lihat bayangan objek melalui lensa okuler dengan cara menaik turunkan preparat
dengan micrometer. Kemudian lihat persiapan objek dari samping sambil
menyesuaikan lensa objektif. Putar revolver di lensa objektif ke posisi semula
setelah melakukan pengamatan. Turunkan meja preparat dan naikkan tabung
mikroskop. Setelah itu, ambil preparat dan keluarkan dari mikroskop.
- Mikroskop stereo
Mikroskop stereo yang akan dgunakan diperiksa keadaannya dan dibersihkan

meja objek dengan kaim, sedangkan lensanya menggunakan kertas lensa. Meja
objek digunakan untuk kaca bening dan disinari dari bawah. Lensa okuler diatur
jaraknya sesuai jarak kedua mata. Objek difokuskan menggunakan sekrup
pengaruh dan dilihat menggunakan lensa okuler. Setelah pengamatan selesai,
mikroskop dibersihkan terutama lensanya disimpan.
4
BAB III
HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1 Hasil
Table 1. Alat dan Bahan Acara 1
NAMA ALAT/BAHAN FUNGSI

Erlenmeyer Menjadi Wadah /Tempat Mengukur/Mencampur
Cawan Petri Wadah unruk membiakkan sel
Bunsen Untuk Pemanasan
Aluminium Foil Penutup Erlenmeyer/Tabung Reaksi
Pipet Ukur Memindahkan cairan atau larutan ke wadah
Pipet Tetes Memindahkan cairan dengan volume kecil
Mikropipet Memindahkan cairan dengan jumlah kecil & akurat
tip Menampung cairan sementara
Tabung Reaksi & Rak Tempat mengembangkan mikroba dalam media cair
Pinset Menjept benda berukuran keci
Hand Sprayer Untuk membersihkan tangan dari mikroba
Sealer Untuk menutup/merekatkan alat
Jarum Ose Untuk mengambil/menggores sampel
Gelas Beaker Untuk mengukur Volume larutan
Media Agar Tempat kultivasi/pembiakkan bakter atau jamur
Laminer Tempat pengerjaan mikroba
Inkubator Menumbuhkan bakteri pada suhu tertentu
Oven Untuk mensterlkan alat yang tahan panas
Autoclave Untuk mensterilkan alat dengan penguapan
Mikroskop Untuk membesarkan dalam melihat benda
3.2 Pembahasan
Dari praktikum yang telah dilakukan, dapat kita ambil penjelasan mengenai alat
dan bahan yang ada di laboratorium, yaitu;
1. Mikroskop
Salah satu alat untuk melihat sel mikroba adalah mikroskop cahaya. Berikut ini
adalah penjelasan-penjelasan tiap bagian mikroskop.
1) Eyeplace/lensa okuler : untuk memperbesar bayangan yang dibentuk lensa

okuler
2) Revolving nosepleace/pemutar lensa objekif : untuk memutar objektif
hingga mengubah perbesaran
3) Tabung pengamatan : ruangan yang memantulkan objek
4) Stage : tempat untuk meletakkan specimen
5) Condenser : untuk mengumpulkan cahaya agar terfokus ke lensa objektif
6) Objective lense/ lensa objektif : lensa untuk memperbesar specimen
5
7) Pengatur kekuatan cahaya : untuk mengatur tingkat kecerahan lampu
8) Tombol utama : tombol untuk menghidupkan dan mematikan mikroskop
9) Specimen Holder : untuk menjepit specimen agar tidak bergerak
10) Horizontal feed knob : untuk menggeser specimen ke kanan dan kiri
11) Vertical feed knob : untuk menaik turunkan specimen
12) Sekrup focus halus : untuk menaikturunkan meja benda secara halus dan
lambat
13) Sekrup focus kasar : untuk menaikturunkan meja benda secara cepat atau
kasar
Prosedur operasi :
Pertama-tama tekan tombol on lalu atur pencahayaannya. Setelah itu, letakkan

object glass di atas stage. Kemudian dijepit menggunakan penjepit specimen, lalu
atur tinggi meja. Cari bagian yang akan diamati dengan memutar sekrup vertical
dan horizontal.
2. Autoclave
Autoclave adalah alat untuk mensterilkan berbagai macam alat dan bahan yang
digunakan dalam mikrobiologi dengan menggunakan tekanan uap sebagai alatnya.
Tekanan yang ada pada autoclave kurang lebih pada 15 Psi atau 2 ATM dengan
suhu 121°C. Lama sterilisasi yang dilakukan adalah 15 sampai 30 menit. Prinsip
kerja autoclave adalah menggunakan tekanan uap air panas untuk mrmbunuh dan
menghilangkan kotoran, mikroba serta bakteri yang menempel pada alat atau
bahan yang digunakan dalam praktikum.
Bagian-bagian autoclave:
1) Tombol pengatur waktu

2) Katup pengeluaran uap
3) Pengukur tekanan
4) Klep pengaman
5) Tombol on-off
6) Thermometer
7) Lempeng sumber panas
8) Aquades
9) Sekrup pengaman
10) Batas penambahan air
3. Oven
Oven berfungsi untuk mensterilkan alat-alat gelas yang tahan terhadap panas.
Digunakan saat sterilisasi udara kering dengan membebaskan alat dari segala
6
macam mikroba tanpa adanya kelembapan. Cara menggunakannya yaitu dengan
memasukkan alat-alat yang telah dibungkus ke dalam oven dan disusun di rak lalu
dipanaskan.
4. Inkubator
Incubator adalah alat untuk menginkubasi atau memeram mikroba pada suhu yang
terkontrol. Dalam alat ini, terdapat pengatur suhu dan pengatur waktu. Suhu yang
digunakan saat incubator bekerja adalah 10-70°C. Prinsip kerja dari alat ini
adalah dengan memasukkan atau menyimpan biakan murni mikroorganisme,
kemudian suhunya diatur.
5. Laminer
Laminar berfungsu untuk pengerjaan mikrobiologi secara aseptis. Aseptis sendiri

adalah upaya yang dilakukan untuk mencegah masuknya mikroorganisme ke
dalam tubuh yang kemungkinan besar akan mengakibatkan infeksi. Pengerjaan
laminar disebut aseptis karena mempunyai pola pengaturan dan penyaringan
aliran udara. Serta aplikasi sinar UV beberapa saat sebelum digunakan. Cara kerja
laminar adalah atur alat dan bahan yang akan digunakan kedalam laminar
sehingga pengerjaannya efektif dan steril. Kerja dalam laminar harus aseptis dan
pola aliran udaranya tidak boleh terganggu oleh aktivitas kerja. Saat
pengerjaannya telah selesai, biarkan 2-3 menit supaya kontaminan tidak keluar
dari laminar.
6. Erlenmeyer
Erlenmeyer adalah alat yang dipakai sebagai tempat atau wadah zat cair.
Erlenmeyer bisa juga digunakan untuk meracik atau menghomogenkan bahan-
bahan komposisi media, menampung akuades dan tempat kultivasi mikroba.
Terdapat banyak piliha ukuran volume Erlenmeyer, dari 25 ml sampai yang paling
besar 1000 ml.
7. Cawan petri
Cawan petri digunakan dalan mengembangbiakkan mikroba atau bisa disebut

kultivasi mikroba. Media dituang ke bagian dalam cawan lalu ditutup dengan
tutup cawan petri yang berbahan dasar kaca, sama seperti cawannya. Cawan petri
tersedia dalam berbagai ukuran, diameter yang biasa digunakan adalah yang 15
cm dan bisa menampung sebanyak kisaran 15-20 ml media.
8. Pipet ukur
Pipet ukur adalah sebuah alat yang berfungsi untuk memindahkan larutan dengan
volume yang jelas. Pipet ukur terdiri dari banyak macam ukurannya mulai dari
7
yang 1 ml, 5 ml, dan 10 ml. penggunaan pipet ini adalah dengan menyedot cairan
dengan bantuan filler sampai volume yang diinginkan.
9. Pipet Tetes
Fungsi pipet tetes sebenarmya sama dengan pipet ukur, tetapi yang
membedakannya ada di volumenya, karena pipet tetes tidak diketahui berapa
volume didalamnya.
10. Mikropipet
Mikropipet adalah alat untuk memindahkan cairan yang bervolume sangat kecil,
bisa kurang dari 1000 mikroliter.
11. Tip
Tip biasanya digunakan bersamaan dengan mikropipet, yaitu sebagai bagian yang
mengambil cairannya.
12. Tabung reaksi
Tabung reaksi berguna untuk menguji biokimiawi atau juga bisa menumbuhkan
mikroba. Isi dalam tabung reaksi bisa berupa media padat ataupun cair. Tutup
tabung reaksi dapat menggunakan kapas, tutup besi, tutup plastic ataupun
aluminium foil.
13. Gelas Beaker
Gelas beaker adalah gelas yang memounyai banyak fungsi, bisa digunakan untuk
preparasi media, menamoung akuades dan lain sebagainya.
14. Bunsen
Bunsen adalah alat yang berguna untuk membuat kondisi steril. Api yang hidup
dapat membuat aliran udara. Bagian api yang terbakar sangat cocok, untuk
mensterilkan jarum ose. Bahan bakarnya berupa spirtus.
15. Jarum inoculum
Jarum inoculum berfungsi untuk memindahkan biakan bakteri yang dibiakkan ke

media baru. Jarum ini terbuat dari kawat nichrome atau platinum sehingga saat
terkena panas, jarum ini berpijar. Jarum yang berbentuk bulat/ loop disebut jarum
ose sedangkan jarum yang lurus disebut jarum needle. Jarum yang bentuknya loop
cocok untuk melakukan streak pada media sedangkan yang needle cocok yang
inakulasi secara tusukan agar tetap stab.
8
16. pinset
Pinset berguna untuk mengambil barang-barang yang berukuran kecil saat

praktikum. Pinset biasanya terbuat dari besi.
17. Aluminium foil
Aluminium foil berguna untuk menutup tabung reaksi mauoun Erlenmeyer
18. Sealer
Sebenarnya fungsi sealer dan aluminium hamper mirip, yaitu untuk menutup atau
merekatkan. Namun, sealer biasanya digunakan pada cawan petri dan berbahan
dasar plastic transparan.
19. Hand sprayer
Hand sprayer adaah sprayer atau penyemprot yang berisi alcohol 70% untuk
mensterilkan alat yang akan digunakan.
20. Media agar
Sesuai dengan namanya, media agar berperan sebagai media pengembangbiakkan

bakteri yang bisa berupa cair, semi padat dan padat.
9
BAB IV
PENUTUP
4.1 Kesimpulan
Berdasarkan penjelasan yang kita lihat diatas, dapat disimpulkan bahwa alat-alat
yang digunakan dalam praktikum terbagi menjadi banyak bagian, ada yang alat
elektrik, ada alat yang berbahan gelas dan non gelas.
10
DAFTAR PUSTAKA
A.I, M. Y. (2021). Laporan Praktikum MIkrobiologi Kehutanan, 4-5.
Andriani, R. (2016). PENGENALAN ALAT-ALAT LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Untuk

MENGATASI KESELAMATAN KERJA DAN KEBERHASILAN PRAKTIKUM, 2-8.
Indrie Ramadhani, W. (2020). S.ST,M.Biomed. Purwokerto: CV. Pena Persada.
Pramesti, P. (2014). Dasar-Dasar Praktikum Mikrobiologi. Malang: Univ. Brawijaya.
11
LAMPIRAN
• Dokumentasi Praktikum tiap acara
Gambar 1. INKUBATOR
Gambar 2. LAMINER
Gambar 3. AUTOCLAVE
12
Gambar 4. ERLENMEYER
Gambar 5. ALUMINIUM FOIL
Gambar 6. INOCULUM LOOP
Gambar 7. MIKROPIPET
13
Gambar 8. PINSET
Gambar 9. GELAS BEAKER
Gambar 10. SEALER
Gambar 11. TIP
14
Gambar 12. PIPET UKUR
Gambar 13. PIPET TETES
Gambar 14. MIKROSKOP
Gambar 15. CAWAN PETRI
15
Gambar 16. BUNSEN
Gambar 17. HAND SPRAYER
Gambar 18. TABUNG REAKSI DAN RAK
Gambar 19. MEDIA AGAR
16
• LAPORAN SEMENTARA ACARA 1
Lampiran 1. LS 1
NIM : C1061201014
Hari, Tanggal : Kamis, 27 Mei 2021
Kelompok : 3
Judul : Pengenalan alat dan bahan dalam Pengerjaan Mikrobiologi
Alat dan Bahan
a. Alat :
Erlenmeyer, Tisu, Pinset, Mikropipet, Jarum Inokulum, Aluminium foil, silet,
bunsen, siper, gelas beker, pipet , pipet filer, cawan petri, pipet tetes, tabung
reaksi, inkubator,Laminer, oven, autoclave, mikroskop
b. Bahan
Sprayer, media agar
Prosedur Kerja
• Inkubator
Nyalakan inkubator dengan Menghubungkan kabel power dan stop kontak,
lalu atur suhunya dengan menekan tombol set sambil memutar tombol
kekanan untuk mengatu suhu yang diinginkan. Setelah itu, Siapkan sampel
yang akan diinkubasikan, kemudian letakan dalam rak yang terdapat dalam
inkubator tersebut. Kemudian masukkan media pembiakan berisi
mikroorganisme yang akan mau di inkubasi. Jika menggunakan cawan petri,
maka bungkus dengan kertas terlebih dahulu.
• Laminer
Nyalakan lampu UV, minimum selama 30 menit, sebelum laminer
digunakan. Hindarkan sinarnya dari mata. Siapkan semua alat-alat steril yang
akan dipergunakan. Alat-alat yang dimasukkan ke dalam laminer disemprot
terlebih dahulu dengan alcohol 70%. Meja dan dinding dalam laminer
disemprot dengan alkohol 70%. Blower pada laminer dihidupkan untuk
menjalankan air flow. Nyalakan lampu dalam laminer. Alat pun siap
digunakan
• Oven
Hubungkan oven dengan sumber listrik, lalu tekanlah tombol “ON” dan
tunggu beberapa saat hingga display muncul.Lalu sesuaikan timer dengan
kebutuhan Anda dan tunggu hingga suhu menyala. Setelah itu letakkan alat
Lab yang ingin Anda proses di dalam oven kemudian tunggulah hingga
proses pengovenan selesai.Jika sudah selesai, matikan oven dengan cara
menekan tombol “OFF” dan tunggulah hingga display mati.
17
• Autoclave
Sebelum mulai melakukan kita harus mengecek terlebih dahulu air yang
tertampung dalam autoclave. Apabila air yang ada ternyata masih kurang dari
batas minimum, maka tambahkan lagi air hingga mencapai batas tersebut.
Masukkan peralatan dan juga bahan yang hendak disterilkan. Tutup autoclave
rapat-rapat dan kencangkan baut pengaman supaya tak ada uap keluar. Jangan
kencangkan klep pengaman terlebih dahulu. Nyalakan autoclave dan atur
timernya, tunggu hingga air mendidih agar uapnya memenuhi kompartemen dan
terdesak keluar. Setelah itu barulah kencangkan klep pengaman dan tunggu
hingga prosesnya selesai. Apabila alarm telah berbunyi dan menandakan proses
telah selesai, tunggu sampai tekanan dalam kompartemen mulai turun dan
menjadi sama dengan tekanan udara pada lingkungan. Buka klep-klep pengaman
lalu keluarkan isi autoclave secara hati-hati.
• Mikroskop
- Mikroskop Cahaya
Pegang mikroskop cahaya pada pegangan dan tempat pada permukaan yang
datar. Pastikan Anda meletakkan mikroskop pada ruangan yang kaya cahaya
alami, atur perbesaran pada lensa objektif pada titik yang rendah.
Cari cahaya alami maupun buatan di dalam ruang pengamatan. Kemudian,
atur cermin agar fungsi mikroskop cahaya berjalan dengan sempurna dengan
jumlah cahaya. Buka diafragma dengan menggunakan tuas untuk
menyesuaikan jumlah cahaya yang diterima. Atur lensa objektif agar berada
cukup jauh dari gelas preparat dengan menggunakan makrometer searah
jarum jam. Pasang preparat di tempatnya dan jepit dengan penjepit preparat
agar tidak bergeser, tepat di bawah lensa objektif. Kemudian naikkan meja,
bersiaplah untuk mendekatkan lensa objektif dengan jarak sekitar 0,5 cm
dengan menggunakan makrometer atau focus pada stage. Lihat bayangan
objek melalui lensa okuler dengan cara menaikturunkan preparat dengan
mikrometer. Kemudian lihat persiapan objek dari samping sembari
menyesuaikan lensa objektif. Putar revolver di lensa objektif ke posisi semula
setelah Anda selesai melakukan pengamatan. Turunkan meja preparat dan
naikkan tabung mikroskop. Setelah itu, ambil preparat dan keluarkan dari
mikroskop.
- Mikroskop Stereo
Mikroskop stereo yang akan digunakan diperiksa keadaannya dan dibersihkan
meja objek dengan kain, sedangkan lensanya menggunakan kertas lensa. Meja
objek putih digunakan untuk objek yang gelap/ tidak transparan dan penyinaran
dari atas, sedangkan untuk melihat objek yang transparan menggunakan kaca
bening dan disinari dari bawah. Lensa okuler diatur jaraknya sesuai jarak kedua
mata. Objek difokuskan menggunakan sekrup pengarah dan dilihat
menggunakan lensa okuler. Setelah pengamatan selesai, mikroskop dibersihkan
terutama lensanya dan disimpan.
18
MIKROBIOLOGI
ACARA 2. PENGENALAN TEKNIK PENGENCERAN

DAN ISOLASI
Disusun oleh :
NIM : C1061201014
Kelompok :3

PANGAN
FAKULTAS PERTANIAN
PONTIANAK
2021
19
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang

Teknik pengenceran adalah tahapan dalam analisis laboratorium yang berguna
untuk mengencerkan jumlah mikroorganisme yang ada dalam sampel.
Pengenceran dilakukan dengan menambah larutan ke media yang akan dibiakkan.
Tujuan dari pengenceran ini untuk mengurangi jumlah mikroba yang tersuspensi
dalam cairan. Banyaknya tingkat pengenceran ditentukan berdasarkan perkiraan
banyaknya jumlah mikroba yang ada dalam sampel. Perbandingan yang
digunakan untuk sampel pertama dan seterusnya adalah 1:9, sehingga pada
pengenceran berikutnya mengandung 1/10 sel mikrooganisme dari pengenceran
sebelumnya.
Isolasi adalah suatu teknik untuk memisahkan suatu mikroba dari lingkungannya
dan menumbuhkan sebagai biakan murni dalam medium buatan. Memindahkan
bakteri dari medium lama ke dalam medium baru diperlukan ketelitian dan alat-
alat yang steril supaya tidak terjadi kontaminasi.
Dalam kegiatan mikrobiologi pembuatan isolasi dilakukan dengan mengambil

sampel mikroba dari lingkungan yang ingin diteliti. Dari sampel tersebut, lalu
dibiakkan dengan media selektif. Untuk mendapatkan atau menumbuhkan jenis
mikroorganisme tertentu, maka dilakukan isolasi. Dengan isolasi ini dapat
diintentifikasikan jenis bakteri tertentu.

Memahami mekanisme pengenceran dan mempelajari cara mengisolasi mikroba.
20
BAB II
METODE PRAKTIKUM

Rabu, 2 Juni 2021 pada pukul 10.30 WIB, bertempat di Laboratorium Penyakit
2.2 Alat dan Bahan

• Alat
- Pipet Tetes - Tabung Reaksi & rak
- Mikropipet & Tip - Petri
- Pipet Ukur - Bunsen
• Bahan
- Media Agar
- NaCl
- Aquades
2.3 Prosedur Kerja
• Teknik Pengenceran
Tujuan dari teknik pengenceran adalah untuk memperkecil jumlah mikroba. Teknik
pengenceran terbagi menjadi 2 cara, yaitu dengan pipet tetes dan juga dengan
mikropipet. Tapi pengenceran dengan pipet tetes hanya untuk bahan kimia dan tidak
terfokus ke pengencerannya, sedangkan jika dengan menggunakan mikropipet,
terfokus ke pengencerannya. Ada 5 kali pengenceran, yaitu pengenceran pertama
yang bernilai 10-1, pengenceran kedua yang bernilai 10-2, dan seterusnya. Pertama-
tama siapkan air fisiologis (Campuran dari 0.85% NaCl dan Aquades) dan sampel
yang berupa bakteri. Lalu, tarik sampel dan pindahkan ke tabung pengenceran 1,
ganti , ambil sampel di tabung 2, lalu pindahkan ke tabung 3, homogenkan, dan
seterusnya. Setelah itu atur Mikropipet ke keadaan semula (1000 mikroliter).
• Isolasi
Metode Isolasi terbagi menjadi 2 yaitu dengan teknik tuang dan sebar. Untuk bahan
bahan yang digunakan pada kedua metode ini sama yaitu, media, bunsen, petri, dan
sealer. Metode ini dikerjakan di laminer.
- Metode Tuang
Siapkan Petri kosong, panaskan tepian petri dengan bunsen. Lalu, buka tutup bunsen
dan ambil sampel pengenceran 1 ml dengan mikropipet. Panaskan petri, dan
masukkan media lalu, putar petri seperti angka 8
21
lalu angkat petri dan sealer sampai benar-benar rapat dan tunggu sampai media padat
lalu dibalik, biasanya media memadat memakai waktu 10-15 menit.
- Metode Sebar
Tuang media dalam petri, lalu homogenkan. Setelah itu masukkan sampel dan ratakan
menggunakan Spreader, lalu panaskan petri dan rapatkan lalu sealer.
• Penggunaan Pipet Ukur

Pipet Ukur memiliki beberapa bagian, yaitu : katup A, katup S, dan katup E. Katup A
berguna untuk mengeluarkan udara, katup S untuk mengambil cairan dan katup E
untuk mengeluarkan cairan.
Pertama- tama tekan balon pada pipet ukur dan katup A hingga udaranya kosong, lalu
masukkan pipet ukur ke gelas yang berisi cairan. Setelah itu, tekan katup s untuk
mengambil cairan. Lalu, tekan katup E untuk mengeluarkannya.
22
BAB III
3.1 Hasil
3.2 Pembahasan
1. Teknik pengenceran
Mikroba dapat hidup pada beberapa kondisi tertentu, sehingga media pengenceran
yang digunakan pun berbeda-beda. Pada beberapa analisa terdapat banyak media
pengenceran, yang dapat digunakan untuk mikroba tertentu. Contohnya, jenis
media pengencer yang digunakan untuk mikroba anaerobic, media pengencer
yang digunakan untuk mikroba osmofilik dan halofilik, dll.
Pengenceran biasanya dilakukan secara decimal, yaitu;
1:10, 1:100, 1:1000, dan seterusnya
Pengambilan sampel diambil secara aseptic dan saat tiap kali pengenceran
dilakukan pengocokan untuk memsahkan sel-sel mikroba yang bergabung
menjadi satu. Prinsip pengenceran adalah menurunkan jumlah sehingga semakin
banyak jumlah pengenceran yang dilakukan, semakin sedikit mikroba yang
tersisa. Larutan yang digunakan untuk pengenceran harus memiliki sifat osmotic
yang sama dengan keadaan lingkungan asal mikroba untuk menghindari rusaknya
sel, selain itu juga dijaga agar tidak terjadi kontaminasi saat dilakukannya
pengenceran.
Proses Kerja :
- Mikropipet
• Sampel yang mengandung bakteri dimasukkan ke tabung pengenceran
pertama secara aseptis. Perbandingan berat sampel dengan volume tabung
pertama adalah 1:9.
• Ambil 1 ml dari tabung dengan mikropipet kemudian dipindahkan ke
tabung pengenceran yang kedua secara aseptis kemudian dihomogenkan.
Pemindahan dilanjutkan hingga tabung pengenceran terakhir dengan cara
yang sama. Pada setiap tingkatan pengenceran, tip mikropipet atau pipet
ukur harus baru/berbeda.
- Pipet filler
• Pastikan labu karet dalam keadaan kemps, jika belum tekan bagian E dan
tekan pula bagian gelembung karet hingga kemps
23
• Pasang labu karet pada pipa ukur
• Masukkan ujung pipet ke gelas
• Tekan bagia E sampai cairan masuk ke pipet
• Keluarkan larutan sampai tepat pada batas skala. Pindahkan pipet ke
wadah lain yang akan dimasukkan larutan tersebut. Keluarkan isi larutan
dalam pipet dengan menekan bagian S
• Diamkan pipet sesaat hingga tidak ada larutan yang keluar lagi.
2. Teknik Isolasi
• Metode Spread Plate
Teknik spread plate adalah teknik isolasi dengan cara menginokulasi kultur
mikroba secara sebaran di permukaan media agar yang telah memadat.
Cara Kerja :
Pertama-tama, pada petri tulis detail yang berkaitan dengan sampel dan
praktikum. Kemudian media yang berada pada botol diputar-putar dengan
perlahan. Setelah itu, pasang tip pada mikropipet yang berguna untuk mengambil
sampeldari media. Tutup piringan petri lalu angkat sampel dan inokulasikan
ditengah permukaan piringan. Setelah itu, inoculum tadi diratakan pada piringan
menggunakan spreader dengan sisi lipatan lebih pendek yang mengenai agar. Lalu
petri ditutup dan dibalik sebelum dimasukkan ke incubator.
• Metode Pour Plate
Tujuan dari teknik pour plate adalah untuk menyebarkan sel-sel bakteri tidak
hanya pada permukaan medium agar saja melainkan supaya sel terendam dalam
media sehingga terdapat sel yang tumbh dipermukaan agar yang kaya O2 dan ada
yang tumbuh dalam agar dengan kandungan oksigen sedikit. Teknik ini
memerlukan agar yang belum padat untuk dituang bersama suspense bakteri ke
cawan petri lalu kemudian dihomogenkan dan dibiarkan memadat.
Cara Kerja:
Yang pertama harus dilakukan adalah hidupkan laminar air flow. Bagian bawah
cawan petri kemudian diberi label. Cawan akan diisi dengan 1 ml sampel bakteri
dimasukkan ke petri dengan menggunakan pipet, kemudian pipet dipegang pada
sudut 45°dengan bagian ujung menyentuh bawah. Sampel mikroba kemudian
dimasukkan ke setiap petri. Masukkan media agar yang cair ke cawan petri.
Gerakkan cawan petri seperti membentuk angka 8 untuk mencampur agar dengan
baik. Cawan petri kemudian ditutup dan dibiarkan sedikit terbuka sampai agar
menjadi padat. Semua plat kemudian direkatkan lalu diletakkan dalam incubator.
24
BAB IV
PENUTUP
4.1 Kesimpulan
Pengenceran adalah proses untuk mengurangi bakteri yang ada dalam media yang
akan diamati. Teknik pengenceran bisa menggunakan mikropipet atau pipet filler.
Sedangkan proses isolasi adalah proses memisahkan mikroba dari campurannya
sehingga didapatkan kultur murni. Metode yang bisa digunakan dalam isolasi
adalah teknik pour plate atau biasa disebut teknik tuang dan teknik spread plate,
yaitu teknik sebar.
25
DAFTAR PUSTAKA
A.I, M. Y. (2021). Laporan Praktikum MIkrobiologi Kehutanan, 4-5.
Indrie Ramadhani, W. (2020). S.ST,M.Biomed. Purwokerto: CV. Pena Persada.
Murtius, W. S. (2018). Praktek Dasar Mikrobiologi. Padang: Universitas Andalas.
26
LAMPIRAN
• Dokumentasi Praktikum
Gambar 20. ALAT BAHAN 1
Gambar 21. PENGENCERAN
27
• Laporan Sementara Acara 2
Lampiran 2. LS2
NIM : C1061201014
Hari, Tanggal : Rabu, 2 Juni 2021
Kelompok : 3 / ITP B
Judul : Pengenalan Teknik Pengenceran sampel dengan pipet dan mikropipet
serta pengenalan metode isolasi sebar dan tuang
Alat dan Bahan
a. Alat
Pipet Tetes, Mikropipet, Pipet ukur, Tip Mikropipet, bunsen, Petri, Tabung
Reaksi, Rak tabung reaksi
b. Bahan
Media agar, NaCl, Aquades
Prosedur Kerja
• Teknik Pengenceran
Tujuan dari teknik pengenceran adalah untuk memperkecil jumlah mikroba.
Teknik pengenceran terbagi menjadi 2 cara, yaitu dengan pipet tetes dan juga
dengan mikropipet. Tapi pengenceran dengan pipet tetes hanya untuk bahan
kimia dan tidak terfokus ke pengencerannya, sedangkan jika dengan
menggunakan mikropipet, terfokus ke pengencerannya.
Ada 5 kali pengenceran, yaitu pengenceran pertama yang bernilai 10 -1,
pengenceran kedua yang bernilai 10-2, dan seterusnya.
Pertama-tama siapkan air fisiologis (Campuran dari 0.85% NaCl dan
Aquades) dan sampel yang berupa bakteri. Lalu, tarik sampel dan pindahkan
ke tabung pengenceran 1, ganti , ambil sampel di tabung 2, lalu pindahkan ke
tabung 3, homogenkan, dan seterusnya. Setelah itu atur Mikropipet ke
keadaan semula (1000 mikroliter).
• Isolasi
Metode Isolasi terbagi menjadi 2 yaitu dengan teknik tuang dan sebar. Untuk
bahan bahan yang digunakan pada kedua metode ini sama yaitu, media,
bunsen, petri, dan sealer. Metode ini dikerjakan di laminer.
- Metode Tuang
Siapkan Petri kosong, panaskan tepian petri dengan bunsen. Lalu, buka tutup
bunsen dan ambil sampel pengenceran 1 ml dengan mikropipet. Panaskan
petri, dan masukkan media lalu, putar petri seperti angka 8
28
lalu angkat petri dan sealer sampai benar-benar rapat dan tunggu sampai
media padat lalu dibalik, biasanya media memadat memakai waktu 10-15
menit.
- Metode Sebar
Tuang media dalam petri, lalu homogenkan. Setelah itu masukkan sampel
dan ratakan menggunakan Spreader, lalu panaskan petri dan rapatkan lalu
sealer.
• Penggunaan Pipet Ukur
Pipet Ukur memiliki beberapa bagian, yaitu : katup A, katup S, dan katup E.
Katup A berguna untuk mengeluarkan udara, katup S untuk mengambil
cairan dan katup E untuk mengeluarkan cairan.
Pertama- tama tekan balon pada pipet ukur dan katup A hingga udaranya
kosong, lalu masukkan pipet ukur ke gelas yang berisi cairan. Setelah itu,
tekan katup s untuk mengambil cairan. Lalu, tekan katup E untuk
mengeluarkannya.
29
MIKROBIOLOGI
ACARA 3. PENGENALAN MIKROSKOP CAHAYA

DAN STEREO
Disusun oleh :
NIM : C1061201014
Kelompok :3

PANGAN
FAKULTAS PERTANIAN
PONTIANAK
2021
30
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar belakang

Mikroskop adalah alat bantu dalam praktikum yang ditujukan untuk melakukan
pengamatan dan penelitian karena dapat digunakan untuk mempelajari struktur
dan bentuk-bentuk benda yang tidak dapat dilihat oleh mata. Karena kemampuan
indra penglihatan itu terbatas maka mikroskop memegang peranan penting dalam
ilmu biology.
Pada awalnya mikroskop dibuat tahun 1590 oleh Zaccharias Janssen dan Hans.
Beberapa tahun kemudian, Antonie Van Leuwenhoek membuat mikroskop
dengan lensa perbesaran 300 kali. Perbesaran mencerminkan beberapa kali objek
dibesarkan disbanding dengan ukuran sebenarnya.
Pada mikroskop banyak bagian-bagian yang harus diketahui dan diperhatikan oleh
para peneliti agar dapat memakai mikroskop dengan benar agar tidak terjadi
kerusakan pada mikroskop.

Maksud dan tujuan dari praktikum ini adalah agar dapat mengetahui dan
menggunakan mikroskop serta bagian-bagian dari mikroskop dan fungsinya.
31
BAB II
METODE PRAKTIKUM

Kamis, 3 Juni 2021 pada pukul 10.30 WIB, bertempat di Laboratorium Penyakit
2.2 Alat dan Bahan

• Alat
- Mikroskop Cahaya
- Mikroskop Stereo
- Preparat
• Bahan
Sampel( Lycopodium)
2.3 Prosedur Kerja

• Mikroskop Stereo
Mikroskop stereo berguna untuk mengamati koloni atau bakteri. Perbesaran Yang
digunakan pada mikroskop stereo adalah 4-40 kali.
Langkah-langkah menggunakan mikroskop stereo adalah sebagai berikut;
Sambungkan Mikroskop sumber listrik, lalu letakkan preparat pada meja preparat.
Setelah itu, hidupkan lampu untuk pencahayaannya dan atur tingkat
kecerahannya. Lalu, atur jarak pada preparat dengan meja. Setelah itu atur
fokusnya dengan sekrup fokus halus dan sekrup fokus kasar. Lalu, atur vertikal
dan horizontal preparatnya, dan lihat objeknya apakah sudah ditemukan atau
belum.
• Mikroskop Cahaya
Mikroskop cahaya digunakan untuk mengamati sel, dan perbesarannya dimulai
dari 4 sampai 100 kali.
Langkah-langkah menggunakan mikroskop cahaya adalah :
Pertama-tama sambungkan mikroskop ke listrik, lalu letakkan preparat dan atur
fokusnya. Setelah itu, naikkan meja preparatnya hingga bertemu dengan objek
lalu fokuskan dengan sekrup fokusnya.
32
BAB III
3.1 Hasil
Gambar 22. STEREO 4X
Gambar 23. STEREO 10x
Gambar 24. STEREO 40x
33
Gambar 25. CAHAYA 4x
34
3.2 Pembahasan
Banyak sekali inovasi yang dikembangkan demi menlengkapi keperluan para
ilmuwan dalam kegiatan laboratoriumnya, salah satu inovasinya adalah
mikroskop. Banyak sekali jenis-jenis mikroskop yang sekarang tersebar di dunia,
contohnya mikroskop cahaya dan mikroskop stereo.
Mikroskop cahaya memiliki perbesaran hingga 1000X, mikroskop ini memiliki

kaki yang kokoh agar dapat berdiri dengan stabil. Mikroskop cahaya memiliki 3
dimensi, yaitu: lensa objektif, lensa okuler dan lensa kondensor. Lensa okuler dan
lensa objektif terletak pada ujung-ujung tabung mikroskop. Pada bagian bawah
mikroskop terdapat dudukan lensa yang dibawahnya terdapat meja untuk
meletakkan preparat yang memiliki besi penjepitnya.
Pada mikroskop konvensional, menggunakan sumber cahaya dari matahari

langsung yang dipantulkan oleh cermin yang memiliki 2 sisi , yaitu datar dan
cekung. Cermin akan memancarkan cahaya dari luar lalu dipantulkan oleh
kondensor. Namun, pada mikroskop modern sekarang sudah terdapat lampu pada
bagian bawah untuk membantu kita dalam melihat bakteri pada saat meneliti.
Lensa objektif pada mikroskop modern bekerja sebagai pembentuk bayangan
pertama dan lensa ini juga menentukan struktur dan bagian dari yang kita teliti.
Lensa okuler merupakan lensa likroskop yang berada pada bagian atas tabung.
Lensa ini bertugas untuk memperbesar bayangan yang dihasilkan lensa objektif.
Lensa kondensor berfungsi mendukung terciptanya pencahayaan objek yang akan
difokuskan.
Pada mikroskop terdapat makrometer dan juga micrometer yaitu, pemutar kasar
untuk menaikturunkan tabung mikroskop secara tepat dan cepat. Sedangkan
micrometer atau pemutar halus berguna untuk mengatur tsbung secara tepat dan
perlahan. Revolver memiliki fungsi utama untuk mengatur perbesaran dan
pengecilan lensa objektif yaitu dengan cara memutar kekiri dan kekanan. Untuk
bagian badannya terdapat lengan mikroskop yang berguna menjadi bagian
pegangan dari mikroskop dan bagian kakinya berguna untuk menyangga
mikroskop agar tidak mudah jatuh.
Mikroskop stereo biasanya digunakan untuk jenis benda yang relative besar,
karena perbesarannya hanya dari 4-40 kali. Komponen utama dari mikroskop
stereo sebenarnya hampir sama dengan mikroskop cahaya. Namun ada beberapa
perbedaan antara mereka, yaitu;
35
1. Ruang ketajaman lensa mikroskop stereo jauh lebih tinggi dibandingkan
mikroskop cahaya sehingga kita dapat melihat bentuk 3 dimensi.
2. Sumber cahaya berasal dari atas sehingga objek yang tebal dapat diamati.
Pada bagian bawah mikroskop terdapat meja preparat. Pada daerah dekat
lensa objektif terdapat lampu yang dihubungkan dengan transformator.
Pengaturan focus objek terletak di bagian samping mikroskop.
36
BAB IV
PENUTUP
4.1 Kesimpulan
Adapun kesimpulan yang dapat kita ambil adalah mikroskop adalah alat yang
digunakan untuk melihat benda-benda yang tidak bisa dilihat oleh mata atau bisa
disebut mikroskopis, mikroskop memiliki bagian dan fungsi yang penting masing-
masing. Dan sebenarnya mikroskop itu tidak memiliki perbedaan yang cukup
besar, biasanya perbedaannya di kualitas hasil gambar benda yang kita dapat,
sumber cahayanya dan jenis konvensional atau modernnya mikroskop tersebut.
37
DAFTAR PUSTAKA
Lubis, M. (2013). Praktikum Biologi Mikroskop. Bengkulu: Universitas Bengkulu.
Murtius, W. S. (2018). Praktek Dasar Mikrobiologi. Padang: Universitas Andalas.
Yudiarti, T., & Endang Widiastuti, R. T. (2004). Petunjuk Praktikum Biologi. Semarang:
Universitas Diponegoro.
38
LAMPIRAN
• Dokumentasi Per Acara
Gambar 29. dokumentasi acara 3
Gambar 31. Dokumentasi acara 3
39
NIM : C1061201014
Hari, Tanggal : Kamis, 3 Juni 2021
Kelompok : 3/ITP B
Judul : Pengenalan prosedur penggunaan mikroskop stereo dan cahaya
Alat dan Bahan

a. Alat
Mikroskop stereo, Mikroskop Cahaya, preparat
b. Bahan
Sampel (lycopodium)
Prosedur Kerja
Mikroskop stereo berguna untuk mengamati koloni atau bakteri.
Perbesaran Yang digunakan pada mikroskop stereo adalah 4-40 kali.
Langkah-langkah menggunakan mikroskop stereo adalah sebagai berikut;
Sambungkan Mikroskop sumber listrik, lalu letakkan preparat pada meja
preparat. Setelah itu, hidupkan lampu untuk pencahayaannya dan atur
tingkat kecerahannya. Lalu, atur jarak pada preparat dengan meja. Setelah
itu atur fokusnya dengan sekrup fokus halus dan sekrup fokus kasar. Lalu,
atur vertikal dan horizontal preparatnya, dan lihat objeknya apakah sudah
ditemukan atau belum.
Mikroskop cahaya digunakan untuk mengamati sel, dan perbesarannya
dimulai dari 4 sampai 100 kali.
Langkah-langkah menggunakan mikroskop cahaya adalah :
Pertama-tama sambungkan mikroskop ke listrik, lalu letakkan preparat
dan atur fokusnya. Setelah itu, naikkan meja preparatnya hingga bertemu
dengan objek lalu fokuskan dengan sekrup fokusnya.
Perbedaan mikroskop cahaya dan stereo ada di letak pencahayaannya,

mikroskop stereo menggunakan pantulan permukaan objeknya sebagai
sumber pencahayaannya sedangkan mikroskop cahaya menggunakan
cahaya matahari sebagai pencahayaannya. Tingkat ketajaman gambar
pada mikroskop stereo lebih tinggi daripada mikroskop cahaya, sehingga
kualitas gambarnya pun lebih bagus.
40
Pada kedua mikroskop ini terdapat 2 skrup yang berfungsi untuk menaik turunkan
meja, yaitu skrup fokus kasar yang berguna untuk menaik turunkan meja secara
kasar atau terlihat dengan jelas dan skrup fokus halus yang berguna untuk menaik
turunkan meja secara halus atau secara samar-samar untuk mencari fokusnya Dan,
kedua mikroskop ini juga memiliki navigasi meja objek yang mengatur mejanya
secara vertikal maupun horizontal.
Lampiran 3. LS 3
41
MIKROBIOLOGI
ACARA IV. PEMBUATAN MEDIA ISOLASI
Disusun oleh :
NIM : C1061201014
Kelompok :3

PANGAN
FAKULTAS PERTANIAN
PONTIANAK
2021
42
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Mikroorganisme tidak dapat diamati jika tidak ada media tempat mikroba tersebut
untuk tumbuh. Dalam media harus terpenuhi segala kebutuhan kehidupannya,
seperti senyawa organic. Mikroorganisme memerlukan sumber atau media
pertumbuhan yang sesuai dengan kebutuhan akan zat atau mineral bagi
perkembangan serta reproduksinya.
Ada beberapa cara yang dapat dilakukan untuk memperoleh biakan murni dari
biakan campuran. Dua diantaranya adalah teknik tuang dan teknik sebar. Kedua
metode ini berdasar pada prinsip pengenceran organisme dengan anggapan bahwa
setiap koloni terpisah yang tampak pada petri setelah masuk ke inkobator.
Di lingkungan sekitar kita terdapat berbagai macam jenis media mikroba yang
sangat beraneka ragam dan jumlahnya juga banyak. Alaminya bakteri akan
ditemukan dalam populasi campuran, dimana dalam populasi tersebut, banyak
macam dan jenis mikrobanya. Cara untuk menemukan mikroba dalam keadaan
murni adalah dengan isolasi bakteri. Isolasi bakteri adalah cara untuk memisahkan
mikroorganisme tertentu dari lingkungan sehingga diperoleh biakan murni.

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui cara pembuatan media
nutrient agar dan potato dekstrose agar.
43
BAB II
METODE PRAKTIKUM
2.1 Alat dan Bahan

• Alat
- Gelas Beker - Label
- Cawan Petri - Aluminium Foil
- Erlenmeyer - Kapas
- Kompor - Sendok dan Saringan
- Panci - Autoklaf
• Bahan
- Bahan untuk PDA
Potato 100 gr, Dextrose 7.5 gr, agar 7.5 gr, aquadest 500 ml
- Bahan untuk NA
Beef Extract 1.75 gr, Peptone 2.5 gr, NaCl 2.5 gr, Glukosa 1.25 gr, agar
7.5 gr, aquadest 500 ml

Sabtu, 5 Juni 2021 pada pukul 10.30 WIB, bertempat di Laboratorium Penyakit
2.3 Prosedur Kerja

• Cara membuat NA (Natrium Agar)
Pertama-tama rebus aquades hingga agak panas, lalu masukkan satu per satu bahan-
bahannya yang meliputi; peptone, beef extract, NaCl, dan glukosa. Lalu, dimasak
hingga halus. Setelah bahn larut, masukkan agar dan tunggu hingga agarnya larut.
Jika agar telah larut, masukkan aquade ke larutan hingga menjadi 500 ml. Setelah itu,
masukkan larutan ke erlenmeyer dan tutup erlenmeyer meyer menggunakan kapas,
lalu sealer erlenmeyernya.
• Cara membuat PDA (Potato Dextrose Agar)

Masukkan aquades dan kentang ke panci, lalu rebus hingga kaldu kentang keluar.
Setelah itu saring kaldu kentangnya dan tambah aquades ke kaldu hingga sebanyak
500 ml. Panaskan kembali kaldu sambil dimasukkan dextrose, setelah dextrose larut
masukkan agar ke kaldu kentang. Jika agar dan kaldunya sudah larut dan tidak
menggumpal, matikan kompornya. Lalu, masukkan kaldu ke erlenmeyer dan tutup
menggunakan kapas dan sealer erlenmeyernya.
44
BAB III
3.1 Hasil
Gambar 33. MEDIA PDA
Gambar 34. MEDIA NA
45
3.2 Pembahasan
Media pertumbuhan mikroba adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-
zat makanan yang diperlukan mikroba untuk pertumbuhannya. Nutrisi dalam
mikroba yang berupa molekul kecil dimanfaatkan untuk menyusun komponen sel.
Dalam media harus mengandung unsur-unsur yang diperlukan metaboisme sel,

yaitu unsur makro, (C,H,O,N,P) dan juga unsur mikro yaitu Fe, Mg,dll. Dan juga
terdapat bahan tambahan yang dimasukkan ke media dengan tujuan tertentu,
seperti phenol red untuk mengindikasikan pH. Antibiotic juga terkadang
ditambahkan untuk menghambat pertumbuhan mikroba yang bukan target atau
disebut kontaminan.
Media terdiri dari berbagai macam jenis, seperti berdasarkan sifat fisik, komposisi
dan tujuan. Media yang berdasarkan sifat fisik dibagi menjadi 3,yaitu;
• Media Padat(mengandung agar 15%)

• Media setengah padat( mengandung 0.3-0.4 % air)
• Media Cair ( tidak mengandung air )
Media berdasarkan Komposisi
• Media sintetis ( Komposisi zat kimianya diketahui jenis dan takarannya)

• Media semi sintetis ( Sebagian komposisinya diketahui)
• Media non sintetis ( Komposisi zatnya tidak dapat diketahui secara pasti )
Media berdasarkan Tujuan
• Media untuk isolasi( media umum )

• Media selektif (Penghambat)
• Media diperkaya (enrichment)
• Media untuk peremajaan kultur
• Media untuk menentukan kebutuhan nutrisi spesifik
• Media untuk karakterisasi bakteri
• Media diferensial
46
Pada percobaan kali ini, media yang dibuat adalah media NA dan PDA.
• Media PDA
Berdasarkan sifat fisiknya, media ini termasuk ke media padat, karena media ini
dipadatkan menggunakan agar. Media PDA termasuk ke media umum, karena
berguna untuk membiakkan jamur. Bahan yang terkandung dalam media ini yaitu;
- Kentang berfungsi untuk sumber vitamin, nitrogen organic dan senyawa

karbon
- Dekstrose untuk sumber karbon
- Agar bertugas untuk memadatkan media
- Aquadest sebagai pelarut untuk menghomogenkan media
• Media NA
Berdasarkan sifat fisik atau konsistensinya, media ini jua termasuk ke media padat
dan media ini juga sebagai media umum untuk menumbuhkan bakteri. Bahan
yang terkandung dalam media ini berfungsi untuk;
- Ekstrak beef berfungsi sumber vitamin, asam amino dan garam

- Pepton untuk sumber utama nitrogen organic
- Agar untuk memadatkan media
- Aquadest sebagai pelarut untuk menghomogenkan media
Pada praktikum ini menggunakan teknik tuang untuk mencampurkan media.

Keuntungan dari teknik tuang adalah data yang diperoleh valid dan
kekurangannya adalah jumlah media yang digunakan lebih banyak daripada
metode sebar.
47
BAB IV
PENUTUP
4.1 Kesimpulan
Untuk menelaah mikroorganisme di laboratorium, kita harus menumbuhkan
mereka. Mikroorganisme dapat berkembang dengan alami maupun dengan
bantuan manusia. Bakteri dan jamur merupakan mikroorganisme yang dapat
ditumbuhkan dengan media. Media sebagai tempat dimana bakteri dan jamur
tumbuh dan akan menyelesaikan fase hidupnya.
NA merupakan media buatan yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri yang

didalamnya terkandung beef extract, pepton, agar, NaCl, glukosa. Sedangkan
media PDA adalah media buatan untuk menumbuhkan jamur yang terdiri dari
ekstrak kentang, dextrose dan agar. Kondisi media yang baik adalah media yang
tidak kontaminasi.
48
DAFTAR PUSTAKA
Seniati, M. N. (2017). Kajian Uji Konfrontasi terhadap bakteri pathogen dengan

mengggunakan metode sebar, metode tuang dan metode gores. Jurnal Galung
Tropika, 6(1), 42-48.
Umkeketo, T. (2010). Pembuatan Media dan Inokulasi Bakteri. Makassar: Poltekkes

Makassar.
Yudiarti, T., & Endang Widiastuti, R. T. (2004). Petunjuk Praktikum Biologi. Semarang:
Universitas Diponegoro.
49
LAMPIRAN
• Dokumentasi
gambar 35. dokumentasi acara 4
gambar 36. dokumentasi acara 4
50

NIM : C1061201014
Hari, Tanggal : Sabtu, 5 Juni 2021
Kelompok : 3/ ITP B
Judul : Pembuatan media isolasi untuk bakteri, cendawan dan yeast
Alat dan Bahan
a. Alat
Gelas beker, cawan petri, erlenmeyer, kompor, panci, label, alumunium foil,
kapas, sendok, saringan dan autoklaf
b. Bahan
• Bahan untuk PDA
Potato 100 gr, Dextrose 7.5 gr, agar 7,5 gr, aquadest 500 ml
• Bahan untuk NA
Beef extract 1.75 gr, peptone 2.5 gr, NaCl 2.5 gr, glukosa 1.25 gr, agar 7.5 gr,
aquadest 500 ml
Prosedur Kerja
Bahan pembuat media terbagi menjadi 3, yaitu ; Dasar, Nutrisi dan bahan
pelengkap
Media juga terbagi menjadi beberapa macam, yaitu;
• sifat fisik = padat (mengandung agar 15%), semi padat (agar 0.3-0.4 %) dan
cair (tidak mengandung agar)
• Komposisi = Sintetis, semi sintetis dan non sintetis
• Tujuan = untuk isolasi, untuk peremajaan kultur dan selektif
Cara membuat NA (Natrium Agar)
Pertama-tama rebus aquades hingga agak panas, lalu masukkan satu per satu
bahan-bahannya yang meliputi; peptone, beef extract, NaCl, dan glukosa.
Lalu, dimasak hingga halus. Setelah bahn larut, masukkan agar dan tunggu
hingga agarnya larut. Jika agar telah larut, masukkan aquade ke larutan
hingga menjadi 500 ml. Setelah itu, masukkan larutan ke erlenmeyer dan
tutup erlenmeyer meyer menggunakan kapas, lalu sealer erlenmeyernya.
Cara membuat PDA (Potato Dextrose Agar)
Masukkan aquades dan kentang ke panci, lalu rebus hingga kaldu kentang
keluar. Setelah itu saring kaldu kentangnya dan tambah aquades ke kaldu
hingga sebanyak 500 ml. Panaskan kembali kaldu sambil
51
dimasukkan dextrose, setelah dextrose larut masukkan agar ke kaldu kentang.
Jika agar dan kaldunya sudah larut dan tidak menggumpal, matikan
kompornya. Lalu, masukkan kaldu ke erlenmeyer dan tutup menggunakan
kapas dan sealer erlenmeyernya.
Setelah kedua media tersebut di sealer, berikan nama pada kedua larytan
tersebut. Setelah itu, sterilkan media menggunakan autoklaf selama 30 menit.
Lampiran 4. LS 4
52
MIKROBIOLOGI
ACARA V. ISOLASI MIKROORGANISME
Disusun oleh :
NIM : C1061201014
Kelompok :3

PANGAN
FAKULTAS PERTANIAN
PONTIANAK
2021
53
BAB 1
1.1 Latar Belakang
Mikroorganisme dapat diperoleh dari lingkungan air, tanah, udara, substrat yang
berupa bahan pangan, tanaman dan hewan. Jenis mikroorganisme yang dimaksud
dapat berupa bakteri, khamir, dan lain-lain. Populasi dari mikroba yang ada sangat
beragam hingga dalam proses isolasi diperlukan beberapa tahap penanaman
hingga diperoleh koloni tunggal. (Ferdiaz, 1992)
Teknik isolasi adalah usaha untuk menumbuhkan mikroba diluar lingkungan

alaminya. Tujuannya adalah untuk mendapatkan biakan bakteru yang tidak
bercampur. Banyak cara atau metode yang dilakukan untuk mendapatkan biakan
murni, yang paling sering adalah metode gores dan tuang.
Beberapa factor yang perlu diperhatikan dalam melakukan isolasi, yaitu :
1. Sifat mikroba 5. Cara inokulasi

2. Asal mikroba 6. Cara menguji
3. Media pertumbuhan yang sesuai 7. Cara memelihara
4. Cara inkubasi
1.2 Tujuan praktikum

Tujuan dari praktikum ke 5 ini adalah untuk mengetahui cara isolasi pada setiap
sampel.
54
BAB II
METODE PRAKTIKUM

Rabu, 9 Juni 2021 pada pukul 10.30 WIB, bertempat di Laboratorium Penyakit
2.2 Alat dan Bahan
• Alat
- Laminer - Hand sprayer
- Tabung Reaksi dan rak - Aluminium foil
- Mikropipet dan tip - Sealer
- Gelas beker - Label
- Erlenmeyer - Plastik dan karet
- Cawan Petri - Bunsen
• Bahan
- Sampel ( air sungai, air sumur, air galon, air cucian beras)
- Media NA
- Media PDA
2.4 Prosedur Kerja

• Spray laminer dan tangan menggunakan hand sprayer
• Hidupkan bunsen menggunakan korek api
• Siapkan mikropipet bisa menggunakan yang 100 mikroliter atau 1000 mikroliter
• Ambil sampel air yang akan diteliti dan masukkan ke pengenceran 10-1 dan
ganti tipnya
• Homogenkan
• Pindahkan sampel yang ada di pengenceran 10-1 ke pengenceran 10-2 dan ganti
tipnya
• Homogenkan lagi
• Pindahkan sampel yang ada di pengenceran 10-2 ke pengenceran 10-3
• Siapkan cawan petri
• Sterilkan tepi petri dengan cara mendekatkan dan memutar tepi petri ke bunsen
• Ambil mikropipet dengan tip yang baru, dan masukkan sampel ke cawan petri
- Untuk yang menggunakan mikropipet 100 mikroliter, masukkan sampel
sebanyak 10×
sebanyak 1×
• Sterilkan kembali petrinya
• Siapkan media, untuk kelompok kami menggunakan media PDA
• Goyangkam media lalu buka tutup kapasnya dan sterilkan mulut erlenmeyer
yang berisi media PDA
• Tuangkan media hingga menutupi semua bagian alas dari petri yang sudah ada
sampelnya
55
• Sterilkan kembali cawan petri
• Homogenkan Petri dengan cara memutarkan seperti angka 8
• Lalu, Sealer petri hingga bagian bawah petri tertutup
• Ketika media dalam petri sudah beku, balikkan petri agar medianya tidak
kontaminasi
56
BAB III
3.1 Hasil
gambar 37. Sampel NA
gambar 38. Sampel NA
57
3.2 Pembahasan
Isolasi mikroorganisme berarti melakukan proses pengambilan mikroorganisme
dari lingkungan untuk ditumbuhkan dalam media dalam laboratorium. Prinsip
kerja isolasi bakteri sederhana, yaitu menginokulasi jumlah kecil bakteri pada
suatu media tertentu yang dapat menyususn kehidupan bakteria. Tujuan dari
pemindahahan biakan adalah untuk menguasai teknik pemindahan biakan bakteri
dari satu wadah ke wadahlain secara aseptic, hingga biakan murni dapat
diharapkan tumbuh disana. Kegagalan dalam isolasi bisa terjadi karena
kontaminasi dari pertumbuhan mikroba yang tidak diinginkan.
Sebelum mikroba diisolasi, pertama-tama kita harus melakukan pengenceran.

Suatu sampel dari satu suspense yang merupakan campuran dari bermacam jenis
spesies alu diencerkan dalam tabung reaksi. Hasil pengenceran kemudian diambil
1 ml untuk diencerkan lebih lanjut. Lalu, pada pengenceran ketiga diambil 0.1 ml
untuk disebarkan di media untuk mendapatkan beberapa koloni yang akan diteliti.
Saat 0.1 ml hasil pengenceran disebar dimedia, menggunakan metode tuang atau
pour plate. Cairan yang disebarkan memencar keseluruh media lalu ditunggu
hingga media memadat.saat media sudah memadat dan di sudah diinkubasi selama
24 jam maka media siap diamati.
58
BAB IV
PENUTUP
4.1 Kesimpulan
Proses isolasi adalah proses untuk memisahkan mikroba dari lingkungan
alaminya. Banyak cara untuk melakukan isolasi, contohnya pour plate. Sebelum
menggunakan teknik pour plate, sampel yang akan diteliti harus diencerkan
dahulu. Pengerjaan dari praktikum ini harus dilakukan secara aseptis.
59
DAFTAR PUSTAKA
Jutono. (1972). Dasar- Dasar Mikrobiologi umum. Yogyakarta: Departemen Mikrobiologi
Fakultas Pertanian UGM.
Meganda Hiaranya Putri, S. y. (2017). MIKROBIOGI. Kemenkes RI.
Tri handayabi Kurniati, R. I. (2018). Penuntun Praktikum Biologi. Jakarta: UNJ.
60
LAMPIRAN
• Dokumentasi Acara 5
gambar 39. Proses acara 5
gambar 40. Proses Acara 5
61
• Laporan Sementara
lampiraLS Nama : Alfia Elzam Zami

NIM : C1961201014
Hari, Tanggal : Rabu, 9 Juni 2021
Kelompok : 3/ITP B
Judul : Isolasi mikroorganisme bakteri, cendawan dan yeast dengan media
selektif
Alat dan Bahan
a. Alat
Laminer, Tabung Reaksi dan rak, mikropipet dan tip, gelas beker,
erlenmeyer, cawan petri, bunsen, hand sprayer, aluminium foil, sealer, label,
plastik dan karet
b. Bahan
Sampel (air sungai), media NA, media PDA
Prosedur Kerja
Untuk kelompok kami, yaitu kelompok 3 sampel yang digunakan adalah air
sungai. Jadi kami meneliti apakah dalam air sungai tersebut terdapat
mikroorganisme.
• Spray laminer dan tangan menggunakan hand sprayer
• Hidupkan bunsen menggunakan korek api
• Siapkan mikropipet bisa menggunakan yang 100 mikroliter atau 1000
mikroliter
• Ambil sampel air yang akan diteliti dan masukkan ke pengenceran 10 -1 dan
ganti tipnya
• Homogenkan
• Pindahkan sampel yang ada di pengenceran 10-1 ke pengenceran 10-2 dan
ganti tipnya
• Homogenkan lagi
• Pindahkan sampel yang ada di pengenceran 10-2 ke pengenceran 10-3
• Siapkan cawan petri
• Sterilkan tepi petri dengan cara mendekatkan dan memutar tepi petri ke
bunsen
• Ambil mikropipet dengan tip yang baru, dan masukkan sampel ke cawan
petri
sebanyak 10×
sebanyak 1×
62
• Siapkan media, untuk kelompok kami menggunakan media PDA
• Goyangkam media lalu buka tutup kapasnya dan sterilkan mulut
Erlenmeyer yang berisi media PDA
• Tuangkan media hingga menutupi semua bagian alas dari petri yang sudah
ada sampelnya
• Sterilkan kembali cawan petri
• Homogenkan Petri dengan cara memutarkan seperti angka 8
• Lalu, Sealer petri hingga bagian bawah petri tertutup
• Ketika media dalam petri sudah beku, balikkan petri agar medianya tidak
kontaminasi
Lampiran 5.
63
MIKROBIOLOGI
ACARA VI. IDENTIFIKASI MIKROORGANISME
Disusun oleh :
NIM : C1061201014
Kelompok :3

PANGAN
FAKULTAS PERTANIAN
PONTIANAK
2021
64
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang

Mikroorganisme sangat berkaitan dengan kehidupan manusia, ada sebagian yang
menguntungkan dan sebagian yang lain merugikan kita. Mikroorgsnisme dapat
kita temukan dimana-mana, mereka adalah komponen penting dalam ekosistem.
Dihabitat aslinya, mereka hidup dalam suatu komunitas yang terkumpul dalam
berbagai jenis mikroorganisme.
Ketika mikroorganisme dibiakkan dalam media, mikroorganisme akan

menonjolkan perbedaannya secar mikroskopik. Perbedaan tersebut disebut dengan
karakterikstik biakan yang digunakan untuk dasar pemisahan microorganism.
Semua diidentifikasi berdasarkan pembiakkan bakteri dalam media, pola
pertumbuhan pada setiap media dapat menununjukkan ciri khas dari mikroba yang
ada dalam petri, masing-masing mikroba akan membentuk koloni yang berbeda-
beda.
Tujuan Praktikum kali ini adalah untuk mengenalkan karakteristik berbagai koloni
dalam setiap sampel yang berbeda.
65
BAB II
METODE PRAKTIKUM

Jum’at, 11 Juni 2021 pada pukul 15.15 WIB, bertempat di Laboratorium Penyakit
Tanaman Fakultas Pertanian Universitas Tanjungpura
2.2 Alat dan Bahan

• Alat
- Hand Tally Counter
- Mikroskop
- Senter
• Bahan
- Sampel yang sudah diinkubator
2.3 Prosedur Kerja

Pertama-tama letakkan petri yang berisi sampel diatas senter. Lalu, amati dan
tandai bakteri serta cendawan yang berkembang didalam petri tersebut.
Menghitung cendawan dan bakteri bisa dengan menggunakan hand tally counter.
Setelah itu, bisa langsung kita identifikasi bagaimana ciri-ciri dari bakteri atau
cendawan tersebut, bisa dilihat dari bentuk, kemuringan, pinggir serta
permukaannya.
66
BAB III
3.1 Hasil
Table 2. Sampel NA air Galon
No. Pengenceran Rata-Rata Bakteri
1. NA 10-1 U1 & U2 3.665 x 103 CFU/ ml
2. NA 10-2 U1 & U2 3.21 x 105 CFU/ ml
3. NA 10-3 U1 & U2 5.6 x 104 CFU/ ml
Table 3. Pengamatan Visual Sampel air Galon
No. Bentuk Kemiringan Pinggir Permukaan Warna
1. Irregular Umbonate Undulate Rugose Putih Kekuningan
2. Irregular Umbonate Undulate Rugose Putih Kekuningan
3. Circular Convex Erose Smooth Putih Kekuningan
4. Circular Convex Entire Smooth Putih Kekuningan
5. Irregular Umbonate Undulate Smooth Putih Kekuningan
Table 4. Sampe NA air Sumur
Pengenceran Bakteri
10-1 2,99 x 103 CFU/ml
10-2 3,595 x 104 CFU/ ml
10-3 8,65 x 104 CFU/ml
67
Table 5. Pengamatan Visual Sampel air sumur
Bentuk Kemiringan Pinggir Permukaan Warna
Rhizoid Flat Lobate Radiately Putih

Ridoed
Spindel Shape Raised Lobate Smooth Putih
Irregular Umbonate Curled Smooth Putih
Circular Umbonate Erose Countoured Putih
Circular Pulvinate Entire Smooth Putih
Table 6. Sampel PDA air Sungai
Pengenceran Rata-rata bakteri Rata-rata cendawan

10-1 (U1 & U2) 3,3 × 102 CFU/ml -
10-2 (U1 & U2) 3,3 × 103 CFU/ml 3 × 102 CFU/ml
10-3 (U1 & U2) 8 × 103 CFU/ml 1 × 103 CFU/ml
Table 7. Identifikasi Visual Sampel PDA air sungai
Sampel Bentuk Kemiringan Pinggir Permukaan Warna

1 Circular Convex Entire Smooth Putih
2 Rhizoid Flat Lobate Rugose Putih
3 Circular Convex Erose Concentrically ringed Putih
4 Circular Convex Entire Smooth Putih
5 Circular Umbonate Entire Smooth Putih
Table 8. Sampel PDA air cucian Beras
Pengenceran Cendawan Bakteri

10-1 2,4 x 102CFU/ml 7,6 x 102CFU/ml
10-2 4 x 102CFU/ml 9,5 x 102CFU/ml
10-3 1 x 103CFU/ml 6,5 x 103CFU/ml
68
Table 9. Identifikasi Visual Sampel PDA air cucian beras
Sampel Bentuk Kemiringan Pinggir Permukaan Warna

1 Irregulaar Raised Lobate Contoured Putih
2 Irregular Flat Lobate Smooth Putih
3 Circular Pulvinate Entire Smooth Putih
4 Circular Flat Entire Smooth Putih
5 Rhizoid Flat Filamentas Rugose Putih
6 - - - - Putih
7 - - - - Putih
3.2 Pembahasan
Koloni adalah kumpulan dari mikroba yang memiliki kesamaan sifat-sifat seperti
bentuk, susunan, permukaan, kemiringan, pinggir, dan warna. Koloni yang
tumbuh pada media agar dapat dilihat secara visual dan dapat dihitung dengan
cara menghitung populasinya secara umum.
Jumlah mikroba yang ada dalam suatu sampel sangat bervariasi tergantung pada
komposisi dan factor lingkungan yang mempengaruhinya. Penghitungan bakteri
bisa menggunakan banyak cara, seperti hitungan langsung dan hitungan tidak
langsung. Hitungan langsung adalah penghitungan sel mikroba secara langsung
dengan menggunakan hand tally counter. Metode ini pengerjaannya tidak
memerlukan banyak alat dan cepat pengerjaannya. Namun, penghitungan ini sulit
dilakukan jika sel yang diamati berukuran kecil. Hitungan tidak langsung adalah
metode yang digunakan untuk menghitung total sel baik yang hidup maupun yang
mati atau bisa salah satunya tergantung metode yang ingin digunakan. Pada tiap
perhitungan, ketepatan berkurang dengan meningkatnya konsentrasi sel. Begitu
begitu juga jika jumlah yang dihitung terlalu kecil.
Pada sampel 1, yaitu air galon. Berdasarkan data yang telh didapatkan, pada
pengenceran pertama hingga ketiga jumlah mikroba yang didapat semakin kecil.
Berdasarkan identifikasi visualnya, bakteri pada air galon terbanyak berbentuk

irregular dan circular dengan kemiringan jenis umbonate dan convex serta
memiliki pinggiran undulate. Bakterinya berwarna putih kekuningan dengan
npermukaan smooth dan rugose.
Pada sampel 2, yaitu air sumur dapat dilihat bahwa jumlah bakteri dari
pengenceran pertama hingga pengenceran ketiga itu semakin besar, karena terjadi
kesalahan pada saat membuat media dan sampel tidak terhomogenkan dengan
baik sehingga memengaruhi jumlah koloni tiap pengenceran.
69
Berdasarkan identifikasi visualnya, sampel air sumur warna dari bakterinya adalah
putih, bentuknya ada yang rhizoid, irregular dan circular. Kemiringannya ada
yang fat, raised umbonate dan pulivinate. Bakterinya memiliki pinggir lobate,
curled, erose dan entire serta memiliki permukaan yang sebagian besar smooth.
Pada sampel 3, yaitu air sungai ditemukan bakteri sebanyak 3.3x 102 dan tidak
ada cendawan pada pengenceran pertama. Lalu pada pengenceran kedua jumlah
bakterinya adalah 3,3x103dan terdapat cendawan sebanyak 3x102 lalu pada
pengenceran ketiga terdapat 8x103 bakteri serta 1x103 jumlah cendawan.
Berdasarkan data,bentuk bakteri terbanyak adalah circular dengan kemiringan

convex dan pinggiran entire. Bakterinya berwarna putih dengan permukaan yang
smooth. Sedangkan pada cendawan, identifikasinya hanya lewat warna, yaitu
terdapat 1 cendawan berwarna hitam dan 2 berwarna putih.
Pada sampel terakhir yaitu air cucian beras, terdapat 7,6 bakteri dan 2,4x102
cendawan. Lalu, pada pengenceran kedua terdapat 9.5x102 bakteri dan 4 x 102
cendawan serta yang pengenceran terakhir terdapat 6,5 x 103 dan 1 x 103
cendawan.
Untuk pengamatan visualnya, bakteri dari air cucian beras berbentk irregular,
circular dan rhizoid degan kemiringan yang paling banyak adalah flat dan
pinggirannya lobate dan entire serta permukaan yang smooth. Untuk warnanya,
baik bakteri maupun cendawan air cucian beras ini adalah putih.
70
BAB IV
PENUTUP
4.2 Kesimpulan
Setelah melakukan praktikum dan mendapatkan data, dapat kita simpulkan bahwa
media NA untuk mengembangkan bakteri, sedangkan media PDA bisa untuk
mengembangkan media bakteri dan cendaawan. Serta, semakin tinggi tingat
pengenceran maka semakin sedikit jumlah mikroba yang ada didalamnya.
71
DAFTAR PUSTAKA
Azhar, M. Y. (2021). Laporan Praktikum Mikrobiologi Kehutanan BW-3205. Bandung: ITB.
Meganda Hiaranya Putri, S. y. (2017). MIKROBIOGI. Kemenkes RI.
Tri handayabi Kurniati, R. I. (2018). Penuntun Praktikum Biologi. Jakarta: UNJ.
72
LAMPIRAN
• Dokumentasi Acara 6
gambar 41. Sampel yang telah diinkubasi
gambar 42. Sampel yang telah diinkubasi
gambar 43. Sampel Bakteri
73

NIM : C1061201014
Hari, Tanggal : Jumat, 11 Juni 2021
Kelompok : 3 / ITP B
Judul : Identifikasi morfologi koloni cendawan dan bakteri
Alat dan Bahan

a. Alat
Hand tally Counter, Mikroskop, Senter
b. Bahan
Sampel air sungai pada media PDA
Prosedur Kerja
Untuk mengamati koloni, yang harus dilakukan pertama-tama adalah menyiapkan
sampel yang akan di amati. Setelah itu, untuk bisa melihat koloni-koloni yang
tumbuh, bisa di lihat dengan cara mengamati dengan mikroskop. Namun, pada
kesempatan kali ini, penggunaan mikroskop tidak dapat digunakan karena saat
dilihat pada lensanya, ternyata sampel terlihat lebih gelap dan buram. Jadi, selain
menggunakan mikroskop bisa dengan menggunakan senter dan hand tally counter.
Caranya, pertama-tama letakkan petri yang berisi sampel diatas senter. Lalu, amati
dan tandai bakteri serta cendawan yang berkembang didalam petri tersebut.
Menghitung cendawan dan bakteri bisa dengan menggunakan hand tally counter.
Setelah itu, bisa langsung kita identifikasi bagaimana ciri-ciri dari bakteri atau
cendawan tersebut, bisa dilihat dari bentuk, kemuringan, pinggir serta
permukaannya
Lampiran 6. LS6
74

Alfia Elzam Zami - C1061201014 - ITP B - LaprakDDM

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi Asli:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Alfia Elzam Zami - C1061201014 - ITP B - LaprakDDM

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN PRAKTIKUM DASAR-DASAR

PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI

Pontianak, 14 Juni 2021

KATA PENGANTAR ........................................................................................................ ii

ACARA 1. PENGENALAN ALAT DAN BAHAN

PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI

1.1 Latar Belakang

1.2 Tujuan Praktikum

2.1 Waktu dan Tempat

2.2 Alat dan Bahan

2.3 Prosedur Kerja

Nyalakan lampu UV minimal selama 30 menit, sebelum laminar digunakan. Saat

Mikroskop stereo yang akan dgunakan diperiksa keadaannya dan dibersihkan

HASIL DAN PEMBAHASAN

NAMA ALAT/BAHAN FUNGSI

1) Eyeplace/lensa okuler : untuk memperbesar bayangan yang dibentuk lensa

Pertama-tama tekan tombol on lalu atur pencahayaannya. Setelah itu, letakkan

1) Tombol pengatur waktu

Laminar berfungsu untuk pengerjaan mikrobiologi secara aseptis. Aseptis sendiri

Cawan petri digunakan dalan mengembangbiakkan mikroba atau bisa disebut

12. Tabung reaksi

13. Gelas Beaker

15. Jarum inoculum

Jarum inoculum berfungsi untuk memindahkan biakan bakteri yang dibiakkan ke

Pinset berguna untuk mengambil barang-barang yang berukuran kecil saat

17. Aluminium foil

Aluminium foil berguna untuk menutup tabung reaksi mauoun Erlenmeyer

19. Hand sprayer

20. Media agar

Sesuai dengan namanya, media agar berperan sebagai media pengembangbiakkan

Andriani, R. (2016). PENGENALAN ALAT-ALAT LABORATORIUM MIKROBIOLOGI Untuk

Indrie Ramadhani, W. (2020). S.ST,M.Biomed. Purwokerto: CV. Pena Persada.

Pramesti, P. (2014). Dasar-Dasar Praktikum Mikrobiologi. Malang: Univ. Brawijaya.

• Dokumentasi Praktikum tiap acara

Gambar 5. ALUMINIUM FOIL

Gambar 6. INOCULUM LOOP

Gambar 9. GELAS BEAKER

Gambar 10. SEALER

Gambar 11. TIP

Gambar 13. PIPET TETES

Gambar 14. MIKROSKOP

Gambar 15. CAWAN PETRI

Gambar 17. HAND SPRAYER

Gambar 18. TABUNG REAKSI DAN RAK

Gambar 19. MEDIA AGAR

ACARA 2. PENGENALAN TEKNIK PENGENCERAN

PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI

1.1 Latar Belakang

Dalam kegiatan mikrobiologi pembuatan isolasi dilakukan dengan mengambil

1.2 Tujuan Praktikum

2.1 Waktu dan Tempat

2.2 Alat dan Bahan

2.3 Prosedur Kerja

• Penggunaan Pipet Ukur

Pengenceran biasanya dilakukan secara decimal, yaitu;

1:10, 1:100, 1:1000, dan seterusnya

• Metode Pour Plate

Indrie Ramadhani, W. (2020). S.ST,M.Biomed. Purwokerto: CV. Pena Persada.

Murtius, W. S. (2018). Praktek Dasar Mikrobiologi. Padang: Universitas Andalas.

Pramesti, P. (2014). Dasar-Dasar Praktikum Mikrobiologi. Malang: Univ. Brawijaya.

Gambar 20. ALAT BAHAN 1

Gambar 21. PENGENCERAN