Accelerat ing t he world's research.

PRAKTIKUM BIOKIMIA I
IDENTIFIKASI SENYAWA
KARBOHIDRAT FINAL
MUDRAWAN (4143331010) KIMIA
EKS DIK A 2014
dendy ismet

Related papers Download a PDF Pack of t he best relat ed papers 

LAPORAN ANALISIS KARBOHIDRAT KELOMPOK 3.docx

khusnul khot imah

Laporan Prakt ikum Uji Karbohidrat

mega affani

Laporan Uji Ident ifikasi Karbohidrat

Fairuz Rifdah Permanasari
PRAKTIKUM BIOKIMIA I

IDENTIFIKASI

SENYAWA KARBOHIDRAT

FINAL MUDRAWAN
(4143331010)
KIMIA EKS DIK A 2014

JURUSAN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA

DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS NEGERI MEDAN

2016
 ABSTRAK

Karbohidrat adalah polihidroksi aldehida atau keton dengan rumus empirik (CH2O)n,
dapat diubah menjadi aldehida dan keton dengan cara hidrolisis. Metode untuk uji kualitatif
karbohidrat adalah uji Molish untuk mengetahui adanya karbohidrat dengan menghasilkan
warna cincin ungu, uji Barfoed untuk mengetahui adanya gula monosakarida pereduksi
dengan menghasilkan warna orange, uji Benedict untuk mengetahui gula pereduksi dengan
warna merah bata, dan uji selliwanof untuk mengetahui adanya gula ketosa dengan
menghasilkan warna merah. Dari hasil pengujian yang telah dilakukan, pada uji Molish
semua sampel mengandung karbohidrat dengan memberikan hasil (+). Pada uji Barfoed
maltosa dan amilum memberikan hasil (-) sehingga maltosa dan amilum bukan termasuk gula
monosakarida pereduksi. Pada uji Seliwanof hanya fruktosa dan sukrosa yang memberikan
hasil (+), karena kedua sampel tersebut mengandung gugus keton. Pada uji benedict hanya
amilum yang memberikan hasil (-), karena amilum merupakan polisakarida dan bukan
termasuk gula pereduksi.

i
 KATA PENGANTAR

Segala puji skita ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa yang senantiasa menyertai
dan memberikan kasihNya yang tak berbatas bagi seluruh makhluk ciptaanNya. Hanya oleh
kehendakNya pula makalah ini, dapat diselesaikan dengan waktu yang telah di tentukan.

Semoga makalah ini dapat bermanfaat bagi kita semua dan dengan adanya
penyusunan makalah seperti ini, pembaca dapat belajar dengan baik dan benar mengenai
identifikasi ataupun uji reaksi terhadap karbohidrat

Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan dan kesalahan dalam pengerjaan
makalah ini. Penulis juga mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dan untuk
kemajuan pengetahuan terutama untuk dalam hal pelajaran kimia, sehingga diharapkan dapat
memberikan pedoman untuk mempebelajaran serta dapat memberikan petunjuk penulisan
yang teratur dan tersusun rapi tanpa ada unsur kesengajaan yang sama dari pihak lainnya.

Akhir kata, penulis berharap semoga makalah ini dapat memberikan manfaat bagi
penulis sendiri maupun bagi pembaca nya agar dapat memperluas pengetahuan kita semua.

Medan, Mei 2016

Penulis

ii
 DAFTAR ISI

ABSTRAK .................................................................................................................................i
KATA PENGANTAR..............................................................................................................ii
DAFTAR ISI........................................................................................................................... iii
DAFTAR GAMBAR................................................................................................................v
DAFTAR TABEL ...................................................................................................................vi
BAB I PENDAHULUAN.........................................................................................................1
1.1. Pengertian Karbohidrat..................................................................................................1
1.2. Perumusan Masalah.......................................................................................................2
1.3. Tujuan ............................................................................................................................2
BAB II PEMBAHASAN..........................................................................................................3
2.4. Karbohidrat ....................................................................................................................3
2.5. Jenis Jenis Karbohidrat ..................................................................................................3
2.2.1. Gula sederhana (monosakarida) .......................................................................3
2.2.2. Oligosakarida ...................................................................................................3
2.2.3. Polisakarida ......................................................................................................4
2.6. Contoh Karbohidrat .......................................................................................................4
2.6.1. Sukrosa .............................................................................................................4
2.6.2. Maltosa .............................................................................................................4
2.6.3. Laktosa .............................................................................................................5
2.6.4. Heksosa ............................................................................................................5
2.6.5. Hemiselulosa ....................................................................................................5
2.6.6. Pati....................................................................................................................5
2.7. Karbohidrat Polimer Tinggi ..........................................................................................6
2.7.1. Karbohidrat polimer yang sangat tinggi...........................................................6
2.7.2. Karbohidrat polimer tinggi...............................................................................7
2.8. Uji karbohidrat ..............................................................................................................7
2.8.1. Uji Benedict......................................................................................................8
2.8.2. Uji Barfoed.......................................................................................................8
2.8.3. Uji Molisch.......................................................................................................9
2.8.4. Uji Selliwanof ................................................................................................11
2.8.5. Uji Bial ...........................................................................................................12

iii
 2.8.6. Uji Iodium ......................................................................................................13
2.9. Identifikasi Karbohidrat...............................................................................................13
2.9.1. Uji untuk karbohidrat, disakarida dan monosakarida dalam kertas tisu dan
faunated dan defaunated cacing tanah............................................................13
2.9.2. Uji gula pada nanas ........................................................................................14
2.9.3. Identifikasi karbohidrat pada kentang ............................................................15
2.9.4. Identifikasi karbohidrat pada ubi ganyong.....................................................15
2.9.5. Pengaruh pelarut dalam ekstraksi terhadap hasil uji karbohidrat...................16
BAB III KESIMPULAN........................................................................................................18
DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................................19

iv
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Butir-butir pati, salah satu jenis karbohidrat cadangan makanan pati tumbuhan,
dilihat dengan mikroskop cahaya...........................................................................6
Gambar 2.2 Reaksi umum uji Benedict .....................................................................................8
Gambar 2.3 Hasil Uji Benedict negatif (kiri) dan positif (kanan) .............................................8
Gambar 2.4 Reaksi umum uji Barfoed ......................................................................................9
Gambar 2.5 Hasil uji Barfoed negatif (kiri) dan positif (kanan)................................................9
Gambar 2.6. Reaksi umum uji Molisch ...................................................................................10
Gambar 2.7 Pembentukan senyawa kompleks biru uji Molisch..............................................10
Gambar 2.8 Hasil uji Molisch negatif (kiri) dan positif (kanan) .............................................10
Gambar 2.9 Reaksi uji Selliwanof ..........................................................................................11
Gambar 2.10 Hasil uji Selliwanof negatif (kiri) dan uji positif (kanan) ..................................11
Gambar 2.11 Reaksi uji Bial....................................................................................................12
Gambar 2.12 Hasil uji Bial negatif (kiri dan tengah) dan positif (kanan) ...............................12
Gambar 2.13 Pembentukan kompleks biru iod amilum...........................................................13
Gambar 2.14 Hasil uji Benedict tepung dan pati umbi ganyong ............................................15
Gambar 2.15 Hasil uji karbohidrat yang diekstraksi dengan berbagai pelarut ........................16

v
 DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Hasil uji selliawanof ................................................................................................11

Tabel 2.2 Hasil uji orsinol bial.................................................................................................12
Tabel 2.3 Reaksi dari kertas tisu dan pelet feses dari faunated dan defaunated cacing tanah
untuk uji karbohidrat yang berbeda .........................................................................14
Tabel 2.4 Hasil uji dengan gula pada nanas dengan tiga reagen .............................................14
Tabel 2.5 Hasil tes umum untuk polisakarida..........................................................................15
Tabel 2.6 Ringkasan dari uji atau reaksi di praktikum biokimia .............................................17

vi
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1. Pengertian Karbohidrat

Karbohidrat merupakan sumber energi utama bagi tubuh manusia, yang menyediakan
4 kalori (kJ) energi pangan pergram. Karbohidrat juga mempunyai peranan penting
dalammenentukan karakteristik bahan makanan, misalnya, rasa, warna, tekstur, dan lain-lain.
Sedangkan dalam tubuh, karbohidrat berguna untuk mencegah timbulnya ketois, pemecahan
tubuh protein yang berlebihan, kehilangan mineral, dan berguna untuk membantu
metabolisme lemak dan protein. Dalam tubuh manusia karbohidrat dapat dibentuk dari
beberapa asam amino dan sebagian lemak. Tetapi sebagian besar karbohidrat diperoleh dari
bahan makanan yang dimakan sehari-hari, terutama bahan makanan yang berasal dari
tumbuh-tumbuhan. Pada tanaman karbohidrat dibentuk dari reaksi CO2 dan H2O dengan
bantuan sinar matahari melalui proses fotosintesis dalam sel tanaman yang berklorofil
(Winarno, 2004).

Karbohidrat adalah zat organik utama yang terdapat dalam tumbuh-tumbuhan dan
biasanya mewakili 50 sampai 75 persen dari jumlah bahan kering dalam bahan makanan
ternak. Karbohidrat sebagian besar terdapat dalam biji, buah dan akar tumbuhan. Zat tersebut
terbentuk oleh proses fotosintesis, yang melibatkan kegiatan sinar matahari terhadap hijauan
daun. Hijauan daun merupakan zat fotosintetik aktif pada tumbuh-tumbuhan. Zat tersebut
merupakan molekul yang rumit dengan suatu struktur yang serupa dengan struktur
hemoglobin, yang terdapat dalam darah hewan. Hijauan daun mengandung magnesium serta
hemoglobin mengandung besi. Lebih terperinci lagi, karbohidrat dibentuk dari air (H 2O)
berasal dari tanah, karbondioksida (CO2) berasal dari udara dan energi berasal dari matahari.
Suatu reaksi kimiawi sederhana yang memperlihatkan suatu karbohidrat (glukosa) disintesis
oleh fotosintesis dalam tumbuh-tumbuhan adalah :

6CO2 + 6H2O + 673 cal  C6H12O6 + 6O2

Karbohidrat bersama seyawa lemak dan protein memegang peranan dasar bagi
kehidupan di bumi. Karbohidrat merupakan bahan makanan penting dalam sumber tenaga
yang terdapat dalam tumbuhan dan hewan. Selain itu karbohidrat juga menjadi komponen
stuktur penting pada mahluk hidup dalam bentuk serat (fiber), seperti selulosa, pektim, serta
lignin. Karbohidrat menyediakan kebutuhan dasar yang diperlukan tubuh (Sumardjo, 2009).
1
1.2. Perumusan Masalah

Dari persoalan di atas, rumusan masalahnya adalah:

1. Bagaimana cara mengetahui adanya karbohidrat dalam sampel?

2. Bagaimana karakteristik pati/amilum melalui uji iodium?
3. Bagaimana kehadiran gugus aldehid atau keton bebas pada karbohidrat yang dapat
mereduksi ion-ion logam tertentu (cu dan ag)/ gula reduksi?
4. Apa perbedaan antara monosakarida dan disakarida?
5. Apa bukti adanya gugus ketosa (fruktosa)?

1.3. Tujuan

Adapun tujuan melakukan praktikum uji kabohidrat, yaitu sebagai berikut :

1. Mengidentifikasi adanya karbohidrat dalam sampel,
2. Menentukan karakteristik pati/amilum melalui uji iodium,
3. Membuktikan kehadiran gugs aldehid atau keton bebas pada karbohidrat yang dapat
mereduksi ion-ion logam tertentu (Cu dan Ag)/ gula reduksi,
4. Membedakan antara monosakarida dan disakarida, dan
5. Membuktikan adanya gugus ketosa (fruktosa)

2
 BAB II
PEMBAHASAN

2.1. Karbohidrat

Secara biokimia, karbohidrat adalah polihidroksil-aldehida atau polihidroksil-keton,

atau senyawa yang menghasilkan senyawa-senyawa ini bila dihidrolisis. Karbohidrat
mengandung gugus fungsi karbonil (sebagai aldehida atau keton) dan banyak gugus hidroksil.
Pada awalnya, istilah karbohidrat digunakan untuk golongan senyawa yang mempunyai
rumus (CH2O)n, yaitu senyawa-senyawa yang n atom karbonnya tampak terhidrasi oleh n
molekul air. Namun, terdapat pula karbohidrat yang tidak memiliki rumus demikian dan ada
pula yang mengandung nitrogen, fosforus, atau sulfur. (https://id.wikipedia.org/)

Dalam kondisi rendah karbohidrat, tidak seperti orang-orang kelaparan, konsentrasi

glukosa tetap dipertahankan meskipun kurangnya asupan karbohidrat. Pemeliharaan dari
konsentrasi glukosa dan kurangnya pemecahan protein endogen merupakan perbedaan
penting antara kelaparan dan asupan karbohidrat sangat rendah. (Westman et al., 2007:277)

2.2. Jenis Jenis Karbohidrat

2.2.1. Gula sederhana (monosakarida)

Monosakarida yaitu senyawa yang mengandung enam atau lima atom karbon.
Monosakarida tidak terhidroilisis menjadi lebih sederhana lagi, tetapi hasil dari hidrolisis dari
tiga golongan yang lain. Monosakarida merupakan senyawa yang tidak berwarna,
mempunyai rasa manis dan berbentuk kristal dan larut dalam air. Salah satu jenis
monosakarida yang penting adalah glukosa atau gula yang memiliki enam atom karbon,
dengan rumus kimia yaitu C Glukosa merupakan monosakarida yang paling umum dan
senyawa organik yang paling banyak terdapat di alam.

2.2.2. Oligosakarida

Oligosakarida yaitu senyawa yang berisi dua atau lebih gula sederhana yang
dihubungkan oleh pembentukan asetal antara gugus aldehid atau keton dengan gugus
hidroksil. Jika dua gula sederhana digabung akan menjadi disakarida, tiga gula sederhana
digabung menjadi trisakarida. Ikatan penghubung bersama - sama gula ini disebut glikosida.
Senyawa ini juga larut dalam air, sedikit larut dalam alkohol dan tidak larut dalam eter.

3
Ikatan glikosida dapat terhidrolisis oleh asam encer menghasilkan komponen monosakarida.
Disakarida yang banyak terdapat di alam adalah sukrosa, laktosa dan maltosa.

2.2.3. Polisakarida

Polisakarida yaitu senyawa yang terdirir atas banyak ikatan gula sederhana yang
dihubungkan dalam ikatan glikosida. Polisakarida meliputi : pati, selulosa dan dekstrin,
merupakan substansi yang amorph yang sebagian tidak larut dalam air dan tidak berasa
(Hamidjojo, 2005).

2.3.Contoh Karbohidrat

2.3.1. Sukrosa

Sukrosa mengandung glukosa dan fruktosa. Sukrosa ditemukan dalam tebu. Sukrosa
adalah non gula pereduksi. Formula sukrosa C12H22O11. Sukrosa dihidrolisis oleh sukrase
menjadi fruktosa dan glukosa. Tanaman membentuk sukrosa dan hewan lainnya tidak bisa
membuat sukrosa. Hal ini secara alami ditemukan pada tanaman. Nenas dan aprikot
merupakan sumber utama dari sukrosa. Sukrosa dihidrolisis menjadi glukosa dan fruktosa.
Lebih dari konsumsi sukrosa memiliki efek yang merugikan kesehatan seperti karies gigi.
Karies gigi, bakteri mulut mengubah gula menjadi asam yang menyerang enamel gigi. Lebih
dari konsumsi sukrosa juga berhubungan dengan sindrom metabolik seperti diabetes mellitus.
Sebuah studi yang dilakukan pada tikus di mana tikus diberi makan diet yang mengandung
dua pertiga dari sukrosa, di tingkat trigliserida mulai meningkat dan kemudian pada resistensi
insulin dikembangkan. Pada tikus penelitian lain diberi makan diet kaya sukrosa yang
dikembangkan hipertrigliseridemia, hiperglikemia dan resistensi insulin.

2.3.2. Maltosa

Maltosa juga disebut gula malt. Ini berisi dua molekul glukosa yang bergabung
dengan α (1 → 4) linkage. Maltosa dihidrolisis oleh maltase dalam usus. Maltosa adalah gula
pereduksi dan membentuk osazon kristal. Maltosa terjadi dalam tubuh sebagai produk
setengah pati pencernaan. Ketika maltosa dihidrolisis, ia menghasilkan dua molekul glukosa.

4
2.3.3. Laktosa

Ini juga disebut gula susu. Laktosa adalah disakarida yang ditemukan dalam susu.
Laktosa adalah molekul gula besar yang terdiri dari dua molekul gula yang lebih kecil,
glukosa dan galaktosa. Laktosa dihidrolisis oleh laktase di usus. Intoleransi laktosa adalah
ketika seseorang memiliki kesulitan atau tidak dapat mencerna susu karena kurangnya
laktase. Anak-anak yang diduga intoleransi laktosa dapat dinilai secara klinis oleh eliminasi
laktosa diet atau dengan tes termasuk non-invasif pengujian napas hidrogen atau invasif
penentuan biopsi usus laktase (dan disaccharidase lainnya) konsentrasi. Manajemen
mencakup penggunaan produk laktase-diperlakukan susu atau suplemen laktase lisan,
pembatasan makanan yang mengandung laktosa, eliminasi orordairy. (Asif, 2011:002)

2.3.4. Heksosa

Heksosa, baik sebagai monomer (misalnya, glukosa) atau polimer (misalnya selulosa
dan amilosa), adalah karbohidrat yang paling umum dikonsumsi oleh ruminansia karena serat
dan pati dalam diet ruminansia. Selulosa adalah polisakarida paling melimpah di dinding sel
tumbuhan dan menganugerahkan kekuatan struktural untuk tanaman. Amilosa dan
amilopektin membentuk dua polisakarida penyimpanan yang paling melimpah di jaringan
tanaman.

2.3.5. Hemiselulosa

Hemiselulosa biasanya sebuah heteropolimer terdiri dari arabinose dan xylose dengan
jumlah yang lebih kecil dari glukosa, galaktosa dan rhamnose. (Pinder, 2012:715)

2.3.6. Pati

Dalam pati terdapat dua bagian, yaitu bagian yang larut dalam air disebut amilosa (10-
20%), dan bagian yang tak larut dalam air disebut amilopektin (80-90%). Amilosa dan
amilopektin mempunyai rumus empiris (C6H10O5), dan bila dihidrolisis menunjukkan adanya
sifat-sifat karbonil, dan pati tersusun atas satuan-satuan maltosa. Bila pati yang terdapat
dalam sel dihidrolisis oleh enzim maka pati akan pecah menjadi bagian yang lebih kecil
disebut dekstrin, sehingga diperoleh maltosa. Salah satu polisakarida yang terdapat dalam
tanaman disebut inulin yang bila dihidrolisis akan memberikan warna kuning akan
menghasilkan fruktosa dan sejumlah kecil dari glukosa (Sastrohamidjojo, 2005). Pati tidak
larut dalam air dan dalam analisis pati, memberikan warna biru dengan iodium. Hasil
hidrolisis pati/amilum adalah glukosa (Manatar dkk., 2012:89). Dalam proses hidrolisis rantai

5
polisakarida tersebut dipecah menjadi monosakarida-monosakarida. Hidrolisis adalah
pemecahan suatu senyawa menggunakan air. Hidrolisis dengan larutan asam biasanya
menggunakan larutan asam encer, dimana kecepatan reaksinya sebanding dengan
konsentrasi asam (Mastuti & Dwi, 2010:23).

Kadar glukosa dan ethanol pada hasil fermentasi onggok yang dihidrolisa dengan
asam klorida, asam sulfat, dan asam oksalat dengan konsentrasi asam, jumlah ragi, dan waktu
fermentasi hasil optimasi. Kadar glukosa untuk onggok yang dihidrolisis dengan asam sulfat
adalah 23,88%, asam klorida 23,73%, sedangkan asam oksalat 20,43%, karena pada proses
hidrolisis (pemanasan), asam oksalat akan terurai menjadi H2O dan CO2 (Yusrin & Ana,
2010:24).

Gambar 2.1 Butir-butir pati, salah satu jenis karbohidrat cadangan makanan
pati tumbuhan, dilihat dengan mikroskop cahaya
(https://id.wikipedia.org/wiki/Karbohidrat)

2.4. Karbohidrat Polimer Tinggi

2.4.1. Karbohidrat polimer yang sangat tinggi

Karbohidrat polimer yang sangat tinggi seperti selulosa, mannan, atau xylan, yang
menghasilkan kompleks yang tidak larut dalam alkali dengan solusi tembaga basa. Sebuah
kompleks jenis ini terdiri dari polisakarida yang bersangkutan, tembaga (II) atau besi (III),
logam alkali, dan hidroksi organik. Kompleks ini membentuk serpihan coklat dengan larutan
Fehling. Jika produk Maillard dihancurkan dengan klorin dioksida, kompleks tembaga biru
muda endapan. Jika ini diperlakukan dengan asam metanol-asetat, polisakarida berwarna atau
campuran polisakarida yang diperoleh. Campuran ini dapat secara kuantitatif ditentukan.
Jumlah polisakarida yang dapat diendapkan dengan cara ini tergantung pada tingkat
memanggang kopi. Kandungan endapan polisakarida meningkat sesuai dengan peningkatan
memanggang.
6
2.4.2. Karbohidrat polimer tinggi

karbohidrat polimer tinggi, polisakarida diendapkan dengan larutan tembaga alkali

terdiri dari mannan dan galactan. Biasanya glucan sedikit juga hadir. Dalam kasus biasanya
panggang kopi arabika polisakarida con tains sekitar 94% mannan dan 6% galactan
sementara ro busta kopi mengandung 88% mannan dan 10-12% galaktan. Biasanya kurang
dari 0,5% glukan. Angka-angka ini hanya berlaku untuk isi polisakarida endapan. (Arya &
Jagan 2007:63)

2.5. Uji karbohidrat

Analisis kualitatif karbohidrat umumnya didasarkan atas reaksi- reaksi warna yang
dipengaruhi oleh produk- produk hasil penguraian gula dalam asam-asam kuat dengan
berbagai senyawa organik, sifat mereduksi dari gugus karbonil dan sifat oksidasi dari
gugusan hidroksil yang berdekatan. Reaksi dengan asam-asam kuat seperti asam sulfat,
hidroklorat dan fosfat pada karbohidrat menghasilkan pembentukan produk terurai yang
berwarna. Beberapa analisis kualitatif karbohidrat yang sering dilakukan adalah uji Molish,
uji Seliwanof, uji Antrone, dan uji Fenol (Andarwulan et al., 2011).

Analisis kuantitatif karbohidrat dalam suatu bahan yaitu dengan cara kimiawi,
cara fisik, cara enzimatik atau biokimiawi dan cara kromatografi. Penentuan karbohidrat
yang termasuk polisakarida maupun oligosakarida memerlukan perlakuan pendahuluan yaitu
dihidrolisa terlebih dahulu sehingga diperoleh monosakarida. Penentuan karbohidrat
dengan cara kromatografi adalah dengan mengisolasi dan mengidentifikasi karbohidrat dalam
suatu campuran. Isolasi karbohidrat ini berdasarkan prinsip pemisahan suatu campuran
berdasarkan atas perbedaan distribusi rationya pada fase diam dan fase gerak (Sudarmaji,
2004 ).

Untuk mengidentifikasi adanya polisakarida dapat digunakan kromatografi lapis tipis

dengan cara menghidrolisis terlebih dahulu dengan asam. Hal ini dikarenakan polisakarida
perlu diderivatisasi agar dapat terlihat pada lempeng kromatografi dan sulit larut dalam
metanol. Karbohidrat terikat kuat pada fase diam sehingga fase gerak yang digunakan harus
sangat polar. Fase gerak yang sering digunakan adalah butanol:piridin:air (Kaminska et al.,
2009:42).

7
2.5.1. Uji Benedict

Uji Benedict bertujuan untuk mengetahui adanya gula pereduksi dalam larutan
sampel. Prinsip dari uji ini adalah gugus aldehid atau keton bebas pada gula reduksi yang
terkandung dalam sampel mereduksi ion Cu2+ dari CuSO4.5H2O dalam suasana alkalis
menjadi Cu+ yang mengendap menjadi Cu2O. Suasana alkalis diperoleh dari Na2CO3 dan Na
sitrat yang terdapat pada reagen Benedict. Pada uji ini menghasilkan endapan merah bata
yang menandakan adanya gula pereduksi pada sampel. Endapan yang terbentuk dapat
berwarna hijau, kuning atau merah bata tergantung pada konsentrasi gula reduksinya.
semakin berwarna merah bata maka gula reduksinya semakin banyak (Kusbandari, 2015).

Gambar 2.2 Reaksi umum uji Benedict (http://www.harpercollege.edu/tm-

ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/bened/benedict.htm)

Gambar 2.3 Hasil Uji Benedict negatif (kiri) dan positif (kanan)
(http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/the
disk/carbo/bene/benedict.htm)

2.5.2. Uji Barfoed

Pada uji Barfoed untuk mendeteksi karbohidrat yang tergolong monosakarida. Endapan
berwarna merah orange menunjukkan adanya monosakarida dalam sampel. Ion Cu2+ dari
pereaksi Barfoed dalam suasana asam akan direduksi lebih cepat oleh gula reduksi
monosakarida dari pada disakarida dan menghasilkan Cu2O (kupro oksida) berwarna merah
bata. Hal inilah yang mendasari uji Barfoed. Pada uji Barfoed, yang terdeteksi monosakarida
membentuk endapan merah bata karena terbentuk hasil Cu2O (Kusbandari, 2015).

8
 Gambar 2.4 Reaksi umum uji Barfoed (http://www.harpercollege.edu/tm-
ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/barf/barfoed.htm)

Gambar 2.5 Hasil uji Barfoed negatif (kiri) dan positif (kanan)
(http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/the
disk/carbo/barf/barfoed.htm)

2.5.3. Uji Molisch

Uji Molisch ini adalah tes kimia sensitif untuk kehadiran karbohidrat, berdasarkan
dehidrasi karbohidrat oleh asam sulfat atau asam klorida untuk menghasilkan aldehida, yang
mengembun dengan dua molekul fenol (biasanya α - naftol, meskipun fenol lainnya (misalnya
resorsinol, timol) juga memberikan produk berwarna), menghasilkan senyawa merah- atau
ungu berwarna. Gula reduksi dioksidasi oleh ion tembaga dalam larutan untuk membentuk
asam karboksilat dan endapan kemerahan tembaga (I) oksida dalam waktu tiga menit.
Mengurangi disakarida menjalani reaksi yang sama, tetapi melakukannya pada tingkat lebih
lambat. (Anonymmous, 2014)

9
 Gambar 2.6. Reaksi umum uji Molisch (http://www.harpercollege.edu/tm
ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/molisch/molisch.htm)

Gambar 2.7 Pembentukan senyawa kompleks biru uji Molisch (Anonymmous, 2014)

Gambar 2.8 Hasil uji Molisch negatif (kiri) dan positif (kanan)
(http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/the
disk/carbo/molisch/molisch.htm)

10
2.5.4. Uji Selliwanof

Uji Seliwanoff digunakan untuk ketohesksosa. Reagen Ini terdiri dari resorsinol
(C6H4(OH)) dalam 6M HCl. Konsentrasi asam klorida memungkinkan ketosa mengalami
dehidrasi dibandingkan aldoses dan lebih lanjut membentuk produk merah ceri. Ketose
mengandung senyawa dapat menghasilkan hasil yang positif, Fruktose dan sukrosa adalah
ketosa sementara laktosa, glukosa, xilosa, dan galaktosa adalah aldosa.

Tabel 2.1 Hasil uji Selliawanof (Caragay et al., 2013).

Gula Hasil pengamatan

Fruktosa Produk merah ceri
Laktosa Larutan kuning
Glukosa Larutan kuning
Xilosa Larutan kuning
Sukrosa Produk merah ceri
Pati Larutan kuning

Gambar 2.9 Reaksi uji Selliwanof (http://www.harpercollege.edu/tm-

ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/seli/seli.htm)

Gambar 2.10 Hasil uji Selliwanof negatif (kiri) dan uji positif (kanan)
(http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/the
disk/carbo/seli/seli.htm)

11
2.5.5. Uji Bial

Tes Orsinol Bial menunjukkan hasil yang positif untuk pentosa dan digunakan untuk
membedakan pentosa dari heksosa. Reagen Bial terdiri dari orsinol, konsentrasi. (asam
klorida) HCl, dan (ferric chloride) FeCl. Pentosa diperbolehkan untuk dehidrasi unggul untuk
furfural yang mengembun orsinol dan ferric ion membentuk solusi hijau biru.

Tabel 2.2. Hasil uji Orsinol Bial (Caragay et al., 2013).

Gula Hasil
Fruktosa Larutan kuning keruh
Laktosa Larutan kuning jernih
Glukosa Larutan kuning jernih
Xilosa Larutan hijau kebiruan
Sukrosa Larutan coklat
Strach Larutan kuning jernih

Gambar 2.11 Reaksi uji Bial (http://www.harpercollege.edu/tm-

ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/bial/bials.htm)

Gambar 2.12 Hasil uji Bial negatif (kiri dan tengah) dan positif (kanan)
(http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/the
disk/carbo/bial/bials.htm)

12
2.5.6. Uji Iodium

Amilosa dalam pati bertanggung jawab untuk pembentukan warna biru di hadapan
yodium. Molekul Iodium berada dalam kumparan amilosa. Iodium sangat tidak larut dalam
air, oleh karena reagen Iodium dibuat dengan melarutkan Iodium dalam air dengan kalium
iodida. Hal ini membuat triiodida kompleks ion linear dengan larut. Ion ion triiodida
tergelincir ke dalam kumparan pati yang menyebabkan warna hitam biru intens.

Gambar 2.13 Pembentukan kompleks biru iod amilum

(www.elmhurst.edu/vchembook/548strachiodine.html)

2.6. Identifikasi Karbohidrat

2.6.1. Uji untuk karbohidrat, disakarida dan monosakarida dalam kertas tisu dan
faunated dan defaunated cacing tanah

Dari tes untuk karbohidrat, disakarida dan monosakarida dalam kertas tisu dan
florated dan defaunated cacing tanah, uji Molisch ini menunjukkan adanya karbohidrat di
kedua kertas tisu segar dan egested. Hasil negatif dari uji Benedict ditambah dengan hasil
positif dari uji Barfoed ini menunjukkan bahwa kertas tisu tersebut tertelan telah dicerna luar
disakarida ke level monosakarida. Uji Seliwanoff juga menegaskan bahwa produk
pemecahan adalah fruktosa monosakarida (Tabel 2.3).

13
Tabel 2.3 Reaksi dari kertas tisu dan pelet feses dari faunated dan defaunated cacing tanah
untuk uji karbohidrat yang berbeda (Aladesida et al., 2013).

Uji Kertas tisu Egested matter by Egested matter by

faunated earthworms defaunated earthworms

Molisch positif positif positif

Benedict negatif negatif negatif
Barfoed positif positif positif
Selliwanof positif positif positif

Hasil ini menunjukkan bahwa karbohidrat hadir di kedua kertas tisu segar dan
egested. Hasil positif dari Barfoed dan Seliwanoff tes pada kertas tisu egested dari kedua
cacing tanah faunated dan defaunated menunjukkan bahwa meskipun berkemih dari
mikroflora usus dalam cacing tanah defaunated, mereka masih mampu memecah selulosa
menjadi monosakarida dan khusus untuk fruktosa sebanyak cacing tanah faunated. Hal ini
menunjukkan bahwa selulosa yang diproduksi di cacing tanah ini adalah dari
baik endogen dan eksogen sumber. Tes yodium pada bahan egested negatif, menunjukkan
bahwa selulosa tidak dikonversi dengan pati (Aladesida et al., 2013).

2.6.2. Uji gula pada nanas

Tiga reagen yang berguna untuk karakterisasi gula adalah reagen Benedicts, Reagen
Phenylhydrazine dan Selliwanoff. Hasil sebagai berikut diperoleh ketika pengujian terhadap
sampel yang disebutkan di atas gula.

Tabel 2.4 Hasil uji dengan gula pada nanas dengan tiga reagen (Okonkwo et al., 2012)

Reagen dan uji Pengamatan

Reagen Benedict Glukosa dan nanas menunjukkan hasil positif dari endapan
merah tembaga oksida
Reagen Selliwanoff’s Glukosa dan nanas menunjukkan hasil positif warna merah

Phenyhydrazine Sebuah endapan kristal kuning terbentuk dan maltosa dan

laktosa mudah dlarutkan dalam air panas. Gugus gula dari
glukosa dan fruktosa sama. Nanas juga mennujukkan hasil
sama, sedangkan sukrosa tidak demikian.

14
2.6.3. Identifikasi karbohidrat pada kentang

Uji Molisch adalah tes umum untuk karbohidrat. Hasil positif adalah interfase violet
yang disebabkan oleh dehidrasi karbohidrat oleh asam sulfat untuk menghasilkan aldehida,
yang kemudian mengembun dengan dua molekul fenol (α -naftol) untuk membentuk produk
berwarna ungu. Pati yang diekstrak dari kentang menghasilkan hasil positif ini.

Tabel 2.5 Hasil Tes Umum untuk polisakarida (Caragay et al., 2013).

Uji Hasil
Uji Molisch Cincin ungu (+)
Raksi Iodium Warna merah (+)

2.6.4. Identifikasi karbohidrat pada ubi ganyong

Pada uji ini menghasilkan endapan merah bata yang menandakan adanya gula
pereduksi pada sampel. Endapan yang terbentuk dapat berwarna hijau, kuning atau merah
bata tergantung pada konsentrasi gula reduksinya. semakin berwarna merah bata maka gula
reduksinya semakin banyak. Terlihat bahwa pati ganyong yang sudah dihidrolisis berwarna
merah bata dibandingkan tepung, hal ini menandakan bahwa pati yang terhidrolisis
mengandung gula reduksi yang lebih banyak.

standart

glukosa sukrosa fruktosa maltosa manosa

sampel

tepung tepung ganyong pati pati ganyong

ganyong hasil hidrolisis ganyong hasil hidrolisis

Gambar 2.14 Hasil uji Benedict tepung dan pati umbi ganyong (Kusbandari, 2015)

15
2.6.5. Pengaruh pelarut dalam ekstraksi terhadap hasil uji karbohidrat

Tes untuk karbohidrat menunjukkan adanya jumlah yang sangat rendah karbohidrat di
petroleum eter dibandingkan dengan ekstrak lainnya. Namun, tes Fehling negatif hanya
dalam petroleum eter dan uji Barfoed adalah negatif baik dalam kasus petroleum eter
dan ekstrak kloroform menunjukkan tidak adanya gula pereduksi. Tes Seliwanoff ini
menunjukkan adanya gula keto di semua ekstrak menunjukkan jumlah rendah di ekstrak
petroleum eter. ( Roopalat ha & Vij ay, 2013) .

Gambar 2.15 Hasil uji karbohidrat yang diekstraksi dengan berbagai pelarut (Roopalatha &
Vijay, 2013)

16
 Tabel 2.6 Ringkasan dari uji atau reaksi di praktikum biokimia (http://site.iugaza.edu.ps/).

Seny Reaksi Uji Hasil uji positif contoh Pengamatan

awa untuk dan warna

Uji Molisch’s Karbohidrat Semua karbohidrat Cincin ungu (violet)

Uji Anthron Karbohidrat Semua karbohidrat Kehijauan atau hijau kebiruan
Uji Benedict's Gula pereduksi Semua Endapan merah
mono/disakarida
Uji Barfoed's Reaksi dengan kecuali sukrosa
semua monosakarida Endapan merah
K
A monosakarida
R lebih cepat
B dibanding
O disakarida
H
I Uji asam pikrat Gula pereduksi Semua Merah
D mono/disakarida
R kecuali sukrosa
A
Phenyl Gula pereduksi Semua Kristal kuning
T
Hydrazine mono/disakarida
Reaction kecuali sukrosa
Uji Bial's Pentosa Xilosa , Aribinosa , Hijau kebiruan
(Orcinol) Ribosa
Uji Anilin Asetat Pentosa Xilosa , Aribinosa , Bright red color
Ribos
Uji Seliwanoff's Ketosa dan Fruktosa , Sukrosa Merah ceri
(Resorcinol) disakarida
yang
mengandung
ketosa
Uji iodium ploisakarida pati , Dekstrin , -Biru dengan pati
Glikogen , selulosa -Biru kemerahan / Ungu
dengan dekstrin
-Merah dengan glikogen
-Tidak berwarna dengan
Mucic Acid Test Galaktosa dan gula -Galaktosa selulosa
Kristal putih berpasir
yang menghasilkan -laktosa
galaktosa saat Raffinosa setelah
dihidrolisis hidrolisis

17
 BAB III
KESIMPULAN

1. Adanya karobohidrat dalam sampel dapat diketahui dengan terbentuknya cincin berwarna
ungu sampel yang di uji dengan pereaksi Molisch.
2. Dalam uji iodium, pati/amilum akan menghasilkan warna biru (kompleks biru iod
amilum).
3. Gula reduksi pada suatu karbohidrat dapat dibuktikan dengan terbentuknya endapan
berwarna merah bata pada dedak, jagung, maltosa, fruktosa, glukosa. Sedangkan pada
amilum dan sukrosa berwana biru.
4. Monosakarida dan disakarida dapat dibedakan dengan terbentuknya endapan merah bata
pada monosakarida sedangkan pada disakarida tidak terbentuk endapan merah bata
dengan uji Barfoed.
5. Pada pengujian ketosa dengan uji Seliwanoff dibuktikan dengan terbentuknya senyawa
kompleks berwarna merah orange pada fruktosa dan sukrosa sehingga mengandung
ketosa.

18
 DAFTAR PUSTAKA

Aladesida, A.A., Owa, S.O., Dedeke, G.A., Osho, B.A. & Adewoyin, O.A. 2013. Cellulase
Sources in the Eudrilid Earthworm, Eudrilus Eugeniae. J. Chem. Bio. Phy. Sci., 3(3):1829-
1834.

Andarwulan, N., Kusnandar, F & Herawati, D. 2011. Analisis Pangan. Dian Rakyat. Jakarta.

Anonymous, 2014. Molisch's Test. https://en.wikipedia.org/wiki/Molisch's test

Arya, Meenakshi & L J.M. Rao. 2007. An Impression of Coffe Carbohydrates. Cri. Rev. In
Food Sci. Nutr., 47(1):51-67.

Asif, H. M., M. Akram, T. Saeed, M.I. Khan, N. Akhtar, R. ur Rehman, et al. 2011.
Carbohydrates . Int. Res. J. Biochemistry and Bioinformatics, 1(1):001-005.

Caragay, C.A., et al. 2013. Isolation, Hydrolysis and Color Reactions of Starch from Potato.
PH BIOCHEM, Manila.

Hamidjojo, H.S. 2005. Kimia Organik. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.

http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/barf/barfoed.htm

http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/bene/benedict.htm

http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/bial/bials.htm

http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/molisch/molisch.htm

http://www.harpercollege.edu/tm-ps/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/seli/seli.htm

https://id.wikipedia.org/wiki/Karbohidrat

Kaminska, A.S., Matysik, G., Kosior, M.W., Donica, H., & Sowa, I. 2009. Thin Layer
Chromatography Of Sugars In Plant Material. Annales Universitatis Mariaecurie
Sklodowska, 22(42).

Kusbandari, Aprilia. 2015. Analisis Kualitatif Kandungan Sakarida Dalam Tepung Dan Pati
Umbi Ganyong (Canna edulis Ker.) Pharmaҫiana, 5(1):35-42.

Manatar J.E., J. Pontoh, M.R.J. Runtuwene. 2012. Analisis Kandungan Pati Dalam Batang
Tanaman Aren (Arenga pinnata). Jurnal Ilmiah Sains, 12(2):89-92.

Mastuti, Endang & Dwi Ardiana S. 2010. Pengaruh Variasi Temperatur Dan Konsentrasi
Katalis Pada Kinetika Reaksi Hidrolisis Tepung Kulit Ketela Pohon. Ekuilibrium, 9(1):23
27.

Okonkwo S.I., Ogbuneke R.U., & Uyo B.K. 2012. Elucidation of Sugar in Edible Fruit –
Pineapple (Ananas Comosus). J. Chem. Sci., 2(1), 20-24.

19
Pinder, R. S., J.A. Patterson, C.A. O’bryan, P.G. Crandall, & S.C. Ricke. 2012. Dietary Fiber
Content Influences Soluble Carbohydrate Levels in Ruminal Fluids. Journal of
Environmental Science and Health, 47:710–717.

Roopalatha, U.C. & V.M. Nair. 2013. The Phytochemical Screening Of The Pericarp Of
Fruits Of Terminalia Chebula Retz. Int. J. Pharm. Bio. Sci., 4(3):550-559.

Sastrohamidjojo. H., 2005. Kimia Organik, Stereokimia, Karbohidrat, Lemak, dan Protein.
Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.

Sudarmadji, S., Haryono, B., & Suhardi. 2004. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian.
Liberty. Yogyakarta.

Westman, E. C., R.D. Feinman, J.C. Mavropoulos, M.C. Vernon, J.S. Volek, J.A. Wortman,
et al. 2007. Low-Carbohydrate Nutrition And Metabolism. Am. J. Clin. Nutr., 86:276 –84.

Winarno, F.G. 2004. Kimia Pangan dan Gizi. Gramedia. Jakarta.

www.elmhurst.edu/vchembook/548strachiodine.html

Yusrin & Ana H.M. 2010. Proses Hidrolisis Onggok Dengan Variasi Asam Pada Pembuatan
Ethanol. Prosiding semninar nasional unimus (http://jurnal.unimus.ac.id).

20