LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM BIOKIMIA

“KARBOHIDRAT”
OLEH:
NAMA : FARREN AURORA
NIM : 191501109
HARI / KELOMPOK : RABU / 1
TANGGAL PRAKTIKUM : 21 OKTOBER 2020

LABORATORIUM BIOKIMIA
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2020
 LEMBAR PENGESAHAN
LABORATORIUM BIOKIMIA

OLEH :
FARREN AURORA
191501109

Medan, 23 Oktober 2020

Asisten, Praktikan,

Isni Deka Novi Setra Farren Aurora

 DAFTAR ISI
DAFTAR ISI..................................................................................................................i
BAB I PENDAHULUAN............................................................................................1
1.1. Latar Belakang.........................................................................................1
1.2. Prinsip percobaan.....................................................................................2
1.2.1. Uji Molisch...................................................................................2
1.2.2 Uji Iodium....................................................................................2
1.2.3 Uji Benedict..................................................................................2
1.3. Tujuan percobaan.....................................................................................2
1.4. Manfaat percobaan...................................................................................2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA..................................................................................3
2.1. Uraian Bahan.............................................................................................3
2.1.1. Akuades..........................................................................................3
2.1.2. Alpha naftol...................................................................................3
2.1.3. Asam sulfat....................................................................................3
2.1.4. Etanol.............................................................................................4
2.1.5. Glukosa..........................................................................................4
2.1.6. Natrium Karbonat..........................................................................4
2.1.7. Natrium Sitrat.................................................................................5
2.1.8. Sukrosa...........................................................................................5
2.1.7. Tembaga(II) suflfat........................................................................5
2.2. Uraian Umum.............................................................................................7
BAB III METODE PERCOBAAN............................................................................12
3.1. Alat...........................................................................................................12
3.2. Bahan.......................................................................................................12
3.3. Sampel......................................................................................................12
3.3. Prosedur Percobaan..................................................................................13
3.3.1. Pembuatan Reagen Uji Molisch...................................................13
3.3.2. Uji Molisch..................................................................................13
3.3.3. Pembuatan Reagen Uji Iodine.....................................................13
3.3.4. Uji Iodium....................................................................................13
3.3.5. Pembuatan Reagen Uji Benedict.................................................13
3.3.6. Uji Benedict.................................................................................14
3.4. Flowsheet.................................................................................................15
3.4.1. Pembuatan Reagen Uji Molisch...................................................15

i
 3.4.2. Uji Molisch..................................................................................15
3.4.3. Pembuatan Reagen Uji Iodine.....................................................16
3.4.4. Uji Iodium....................................................................................16
3.4.5. Pembuatan Reagen Uji Benedict.................................................17
3.4.6. Uji Benedict.................................................................................17
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN....................................................................18
4.1. Hasil........................................................................................................18
4.2. Perhitungan.............................................................................................18
4.3. Pembahasan............................................................................................18
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN....................................................................21
5.1. Kesimpulan...........................................................................................21
5.2. Saran.....................................................................................................21
DAFTAR PUSTAKA.................................................................................................22
LAMPIRAN ...............................................................................................................23

i
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Karbohidrat adalah kelompok senyawa yang mengandung unsur C, H,dan O.
Senyawa-senyawa karbohidrat memiliki sifat pereduksi karena adanya gugus karbonil
dalam bentuk aldehid atau keton. Senyawa ini juga memiliki banyak gugus hidroksil.
Karena itu, karbohidrat merupakan suatu polihidroksi aldehid atau polihidroksi keton,
atau turunan senyawa-senyawa tersebut. Senyawa karbohidrat yang memiliki tiga
sampai Sembilan atom karbon disebut monosakarida. Senyawa karbohidrat yang
memiliki tiga sampai sembilan atom karbon disebut monosakarida. Gabungan senyawa-
senyawa monosakarida akan membentuk senyawa karbohidrat yang lebih besar. Ikatan
penghubung antara dua buah monosakarida disebut ikatan glikosida atau glikosidik.
Dalam disakarida, terdapat satu ikatan glikosida yang menghubungkan dua
monosakarida. Sedangkan dalam trisakarida terdapat dua ikatan glikosida yang
menghubungkan tiga buah monosakarida(Ngili, 2009).
Banyak monosakarida maupun oligosakarida memiliki rasa manis, karena itu
karbohidrat yang massa molekul relative (Mr)-nya kecil sering disebut sebagai gula.
Terdapat dua jenis monosakarida, yakni aldosa dan ketosa. Aldosa mengandung gugus
aldehid (R-CHO), sedangkan ketosa mengandung gugus keton (R-CO-R’). Selain itu,
monosakarida juga dapat dikelompokkan menurut jumlah atom karbon yang
dimilikinya. Bila mengandung tiga atom karbon maka monosakarida tersebut disebut
triosa; sedangkan bila mengandung empat atom karbon maka disebut tetrosa; pentosa
untuk yang mengandung lima atom karbon;heksosa untuk yang mengandung enam
atom karbon; dan seterusnya (Ngili, 2009).
Unit pembangun semua karbohidrat adalah monosakarida. Monosakarida dapat
diartikan sebuah (mono-) unit gula (saccharide). Monosakarida adalah karbohidrat
paling sederhana karena monosakarida tidak dapat lagi dihidrolisis menjadi gula yang
lebih sederhana. Sifat monosakarida adalah larut di dalam air, berwarna putih, padat
kristalin, dan berasa manis. Kebanyakan monosakarida disintesis dari senyawa
sederhana pada proses yang dinamakan glukoneogenesis. Contoh monosakarida adalah
glukosa, fruktosa, galaktosa, dan ribosa (Azhar, 2016).

1
1.2 Prinsip Percobaan
1.2.1 Prinsip Reaksi Molisch
Berdasarkan reaksi kualitatif pada karbohidrat, ikatan glikosida pada karbohidrat
akan terhidrolisis oleh H2SO4 pekat yang menghasilkan monosakarida yang kemudian
terhidrolisa menjadi bentuk furfural. Kemudian direaksikan dengan alpha Nafthol akan
memberikan cincin warna spesifik tertentu.
1.2.2 Prinsip Reaksi Iodium
Berdasarkan reaksi perubahan warna spesifik pada karbohidrat, senyawa
polisakarida akan memberikan warna spesifik jika direaksikan dengan iodium.
1.2.3 Prinsip Reaksi Benedict
Berdasarkan reaksi pengendapan pada karbohidrat, Cu2+ pada pereaksi akan
direduksi oleh gula pereduksi pada karbohidrat menjadi Cu+. Dalam hal ini akan
terbentuk endapan Cu2O. Reaksi akan dinyatakan positif apabila terbentuk endapan
berwarna biru kehijauan hingga merah bata.

1.3 Tujuan Percobaan

- Untuk mengetahui perubahan warna pada karbohidrat dari sampel dengan reaksi
mollish menggunakan pereaksi H2SO4 dan Alpha Nafthol.
- Untuk mengetahui perubahan warna pada karbohidrat dari sampel dengan reaksi
iodium dengan menggunakan pereaksi iodium.
- Untuk mengetahui warna hasil pengendapan pada karbohidrat dari sampel dengan
reaksi Benedict dengan menggunakan pereaksi CuSO4 5 H2O, Na2CO3 5 H2O, dan
Natrium Sitrat.

1.4 Manfaat Percobaan

- Agar praktikan dapat mengetahui perubahan warna pada karbohidrat dari sampel
dengan reaksi mollish menggunakan pereaksi H2SO4 dan Alpha Nafthol.
- Agar praktikan dapat mengetahui perubahan warna pada karbohidrat dari sampel
dengan reaksi iodium dengan menggunakan pereaksi iodium.
- Agar praktikan dapat mengetahui warna hasil pengendapan pada karbohidrat dari
sampel dengan reaksi Benedict dengan menggunakan pereaksi CuSO4 5 H2O, Na-
2CO3 5 H2O, dan Natrium Sitrat.

2
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Bahan
2.1.1 Akuades
Nama Resmi : Aqua Destilata
Nama Lain : Air Suling
Rumus Molekul : H2O
Berat Molekul : 18.02
Pemerian : Cairan tidak berwarna, tidak berbau, tidak berasa
Kelarutan : Larut dalam semua jenis larutan
Kegunaan : Zat pelarut
(Ditjen POM, 1979)
2.1.2 Alpha Naftol
Nama Resmi : 1-naftol P
Nama Lain : alpha naftol
Rumus Molekul : C10H7OH
Berat Molekul :-
Pemerian : Hablur tidak berwarna atau putih atau serbuk hablur
putih bau khas
Kelarutan : Larut dalam 5 bagian etanol (95%) P, membentuk
larutan, tidak lebih dari agak keruh, tidak berwarna atau
hampir tidak berwarna , tanpa warna kersen pucat
Kegunaan : Reagensia
(Ditjen POM, 1979)

2.1.3 Asam Sulfat

Nama Resmi : Acidum Sulfuricum

Nama Lain : Asam sulfat
Rumus Molekul : H2SO4
Berat Molekul : 98,07
Pemerian : Cairan jernih, seperti minyak, tidak berwarna, bau sangat
tajam dan korosif.

3
 Kelarutan : Bercampur dengan air dan dengan etano dengan
menimbulkan panas
Kegunaan : Reagensia
(Ditjen POM, 1979)
2.1.4 Etanol
Nama Resmi : Aethanolium
Nama Lain : Alkohol
Rumus Molekul : C2H6O
Berat Molekul : 46,07
Pemerian : Cairan jernih, tidak berwarna, bau khas, mudah menguap
Kelarutan : Sangat mudah larut dalam air, kloroform p, eter p
Kegunaan : Reagen, zat tambahan
(Ditjen POM, 1979)
2.1.5 Glukosa
Nama Resmi : Glucosum
Nama Lain : Glukosa
Rumus Molekul : C6H12O6
Berat Molekul : 198,17
Pemerian : Hablur tidak berwarna, serbuk hablur atau butiran putih; tidak
berbau; rasa manis
Kelarutan : Mudah larut dalam air; sangat mudah larut dalam air mendidih;
agak sukar larut dalam etanol (95%) P
Kegunaan : Bahan uji atau sampel
(Ditjen POM, 1979)
2.1.6 Natrium Karbonat
Nama Resmi : Natrii Karbonas
Nama Lain : Natrium Karbonat
Rumus Molekul : Na2CO3
Berat Molekul : 124,00
Pemerian : Hablur tidak berwarna atau serbuk hablur
Kelarutan : Mudah larut dalam air; lebih mudah larut dalam air mendidih
Kegunaan : Reagen

4
 (Ditjen POM, 1979)
2.1.6 Natrium Sitrat
Nama Resmi : Natrii Citras
Nama Lain : Natrium Sitrat
Rumus Molekul : C6H5Na3O7
Berat Molekul : 294,10
Pemerian : Hablur tidak berwarna atau serbuk halus putih
Kelarutan : Mudah larut dalam air; sangat mudah larut dalam air mendidih;
praktis tidak larut dalam etanol (95%) P.
Kegunaan : Reagen
(Ditjen POM, 1979)
2.1.7 Sukrosa
Nama Resmi : Sucrosum
Nama Lain : Sakarosa
Rumus Molekul : C12H22O11
Berat Molekul : 342,30
Pemerian : Hablur putih atau tidak berwarna, massa hablur atau berbentuk
kubus, atau serbuk hablur putih; tidak berbau; rasa manis , stabil
di udara. Larutannya netral terhadap lakmus.
Kelarutan : Larutan sangat mudah larut dalam air ; lebih mudah larut dalam
air mendidih; sukar larut dalam etanol; tidak larut dalam
kloroform dan dalam eter praktis tidak larut dalam etanol (95%)
P.
Kegunaan : Bahan uji atau sampel
(Ditjen POM, 1979)
2.1.7 Tembaga(II) Sulfat
Nama Resmi : Cuprii Sulfas
Nama Lain : Tembaga(II) Sulfat
Rumus Molekul : Cu2SO4
Berat Molekul : 159,6
Pemerian : Prisma trisiklik atau serbuk hablur biru
Kelarutan : Larutan dalam 3 bagian air dan dalam 3 bagian gliserol P;

5
 sangat sukar dalam etanol (95%) P.
Kegunaan : Reagen
(Ditjen POM, 1979)

6
2.2 Uraian Umum
Karbohidrat atau sakarida (bahasa Yunani: sakcharon, artinya gula) adalah
komponen essensial semua organisme hidup. Karbohidrat merupakan kelompok
molekul biologi yang paling melimpah di bumi. Meskipun semua organisme dapat
mensintesa karbohidrat, namun kebanyakan karbohidrat dihasilkan oleh organisme
fotosintetik termasuk bakteri tertentu, alga dan tumbuhan. Organisme ini merubah
energi cahaya matahari menjadi energi kimia, kemudian energi kimia digunakan untuk
membuat karbohidrat dari karbondioksida (CO2). Karbohidrat memainkan peranan
sangat penting pada kehidupan organisme. Polimer karbohidrat pada binatang dan
tumbuhan, bertindak sebagai molekul penyimpan energi. Binatang dan manusia dapat
mencerna karbohidrat yang kemudian dioksidasi menghasilkan energi selama proses
katabolisme. Polimer karbohidrat juga ditemukan pada dinding sel dan sebagai
pelindung kebanyakan organisme. Polimer karbohidrat lainnya berfungsi sebagai
molekul penanda yang memungkinkan satu tipe sel mengenal dan berinteraksi dengan
tipe sel lainnya. Turunan karbohidrat ditemukan dalam sejumlah molekul biologi
termasuk beberapa koenzim dan asam nukleat. Sumber karbohidrat penting adalah biji-
bijian, roti, gula tebu, buah-buahan, susu dan madu. Sumber karbohidrat ini merupakan
sumber energi penting pada manusia dan binatang (Azhar, 2016).
Karbohidrat adalah senyawa organik yang terdiri dari unsur karbon (C),
hidrogen (H) dan oksigen (O) yang terbentuk dari peristiwa fotosintesis pada tumbuhan.
Karbohidrat memiliki peran sebagai sumber energi utama bagi manusia untuk
melakukan aktivitasnya. Penanganan, penyimpanan, dan pengawetan bahan pangan
sering menyebabkan terjadinya perubahan nilai gizi salah satunya adalah karbohidrat.
Proses pengolahan tersebut dapat bersifat menguntungkan terhadap karbohidrat yang
terkandung dalam bahan pangan tersebut, yaitu perubahan kadar kandungan karbohidrat
dan peningkatan daya cerna. Proses pemanasan bahan pangan dapat meningkatkan
ketersediaan karbohidrat (Widhyasari, dkk., 2017).
Pemahaman dari segi gizi, karbohidrat terdiri dari dua jenis, yaitu available
karbohidrat dan non-available karbohidrat. Available karbohidrat adalah karbohidrat
yang dapat dicerna oleh enzim pencernaan, diserap dalam bentuk glukosa oleh usus
halus, dan dimetabolisme oleh sel-sel tubuh. Serat pangan tidak termasuk kategori
available karbohidrat (Afandi, dkk., 2019).

7
 Energi yang dihasilkan dari serat pangan sangat rendah, di bawah 4 kkal/gram,
yaitu antara 1,5–2,5 kkal/gram bahkan ada yang tidak memberikan energi. Nasi
merupakan pangan dengan available karbohidrat yang tinggi. Non-available karbohidrat
adalah karbohidrat yang tidak dapat dicerna oleh enzim pencernaan, tidak diserap dalam
bentuk glukosa oleh usus halus, dan tidak dimetabolisme oleh sel-sel tubuh. Bentuk
non-available karbohidrat seperti serat pangan banyak terdapat pada buah-buahan dan
sayur-sayuran. Bentuk non-available karbohidrat tidak dicerna oleh tubuh sehingga
memiliki IG rendah. Bentuk non-available karbohidrat seperti oligosakarida dalam
bentuk frukto oligosakarida (FOS) dan galakto oligosakarida (GOS), rafinosa, stakiosa,
dan verbaskosa terdapat pada kacang kedelai. Jenis non-available karbohidrat seperti
pati resisten dan serat juga terdapat pada biji-bijian utuh dan sagu sehingga keduanya
memiliki indeks glikemik yang rendah. Pangan dengan kadar amilosa yang tinggi
cenderung sulit dicerna akibat struktur amilosa yang tidak bercabang membuatnya
terikat lebih kuat sehingga sulit mengalami gelatinisasi, sedangkan amilopektin
strukturnya bercabang dan ukuran molekulnya lebih besar sehingga mudah mengalami
gelatinisasi. Hal tersebut mengakibatkan amilopektin mudah untuk dicerna (Afandi,
dkk., 2019).
Monosakarida merupakan unit terkecil dari struktur karbohidrat. Disakarida
terdiri dari dua residu monosakarida yang berikatan kovalen dengan nama ikatan
glikosida. Pada oligosakarida (bahasa Yunani: oligos artinya sedikit) terikat tiga sampai
kira-kira 20 residu monosakarida. Polisakarida dalam bahasa Yunani yaitu polys yang
artinya banyak adalah polimer yang mengandung banyak (biasanya lebih dari 20) residu
monosakarida. Disakarida, oligosakarida dan polisakarida tidak mempunyai rumus
empiris (CH2O)n karena air dikeluarkan selama pembentukan polimer. Oleh sebab itu,
disakarida, oligosakarida dan polisakarida tersusun dari residu unit monosakarida.
Istilah glycan lebih umum untuk polimer karbohidrat. Homoglycan merupakan polimer
dengan monomer gula identik, sedangkan heteroglycan adalah polimer dengan
monomer gula berbeda. Secara struktural karbohidrat merupakan polihidroksi aldehid
atau polihidroksi keton atau senyawa yang menghasilkan polihidroksi aldehid atau
polihidroksi keton pada produk hidrolisisnya. Molekul karbohidrat dapat berikatan
dengan molekul lain membentuk glycoconjugate. Glycoconjugate adalah turunan
karbohidrat dimana satu atau lebih rantai karbohidrat berikatan kovalen dengan peptida,

8
protein atau lipid. Turunan ini termasuk proteoglycan, peptidoglycan, glycoprotein, dan
glycolipid. Karbohidrat pada proteoglycan, peptidoglycan, glycoprotein dan glycolipid
merupakan heteroglycan (Azhar, 2016 ).
Secara struktur kimia, monosakarida adalah polihidroksi aldehid atau
polihidroksi keton. Monosakarida dapat dikelompokkan berdasarkan tipe gugus
karbonilnya dan jumlah atom karbonnya. Jika gugus karbonil monosakarida sebuah
aldehid maka dinamakan aldosa. Jika gugus karbonil monosakarida sebuah keton, maka
dinamakan ketosa. Aldosa dengan tiga, empat, lima, enam dan tujuh atom karbon
berturut-turut dinamakan aldotriosa, aldotetrosa, aldopentosa, aldohexosa dan
aldoheptosa. Ketosa dengan tiga, empat, lima, enam dan tujuh atom karbon berturut-
turut dinamakan ketotriosa, ketotetrosa, ketopentosa, ketohexosa dan ketoheptosa.
Monosakarida paling sederhana mengandung tiga-karbon. Gliseraldehid adalah sebuah
aldotriosa, sedangkan dihydroxyaceton adalah sebuah ketotriosa. Gula dengan lima
karbon yaitu ribosa terdapat pada RNA dan deoxyribosa terdapat pada DNA. Gula
dengan empat dan tujuh karbon memainkan peranan pada fotosintesa dan jalur lainnya.
Senyawa satu atau dua-karbon tidak mempunyai sifat-sifat khusus monosakarida
(Azhar, 2016 ).
Disakarida dibentuk ketika karbon anomerik dari satu molekul monosakarida
berinteraksi dengan satu dari beberapa gugus hidroksil molekul monosakarida lainnya.
Interaksi ini membentuk ikatan kovalen yang dinamakan ikatan glikosida. Ikatan
glikosida pada maltosa terbentuk antara gugus hidroksil pada hemiasetal α-D-Glukosa
dengan H pada gugus hidroksil atom C-4 pada β-D-Glukosa lainnya membentuk
maltosa (α-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranose). Dengan demikian, molekul
maltosa masih mempunyai hemiacetal. Disakarida yang paling umum ditemui adalah
maltosa (gula gandum), sellobiosa, laktosa (gula susu) dan sukrosa (gula tebu). Maltosa
adalah disakarida yang dilepaskan selama hidrolisis pati. Maltosa disusun oleh dua
molekul D-glukosa yang dihubungkan oleh ikatan α-glikosidik. Ikatan glikosidik
menghubungkan C-1 dari suatu residu dengan atom oksigen yang terikat pada C-4 dari
residu kedua .Oleh sebab itu, maltosa adalah α-D-glucopyranosyl-(1→4)-D-glucose
disingkat Glc(α1→4)Glc. Glukosa sebelah kanan pada maltosa adalah ujung pereduksi.
Sellobiosa ‘Cellobiose’ (β-D-glucopyranosyl-(1→4)-D-glucose) adalah dimer glukosa
berulang pada struktur selulosa(Azhar, 2016 ).

9
 Sukrosa merupakan disakarida yang paling melimpah di alam. Sukrosa
dinamakan juga ‘gula meja’. Sukrosa disintesa hanya pada tumbuh-tumbuhan. Sukrosa
banyak terdapat pada tanaman tebu. Sukrosa adalah α-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-
fructofuranoside yang disingkat Glc(α1-2β)Fru atau Fru(β2-1α)Glc. Sukrosa dibedakan
dari tiga disakarida lainnya karena ikatan glikosidanya menghubungkan atom karbon
anomeric dari dua residu monosakarida (glukosa dan fruktosa). Oleh sebab itu,
konfigurasi dari residu glucopyranose dan fructofuranose di dalam sukrosa adalah tetap,
dan tidak ada residu yang bebas dalam kesetimbangan antara anomer α dan β. Laktosa
merupakan disakarida utama yang terdapat pada susu. Laktosa disintesa pada gelenjar
susu. Laktosa adalah β-D-galactopyranosyl-(1→4)-D-glucose yang dapat disingkat
Gal(β1→4)Glc. Secara alami laktosa anomer α berasa manis dan lebih stabil dari pada
anomer β (Azhar, 2016 ).
Pati dan selulosa. Dua polisakarida terpenting adalah pati dan selulosa.
Keduanya ini adalah polimer D-glukosa. Perbedaan mendasar antara keduanya polimer
adalah hubungan antara unit glukosa. Pati berhubungan dengan maltose dan selulosa
terkait dengan laktosa. Dari semua karbohidrat, menurut pati adalah favorit . Berbagai
jenis polisakarida sangat erat kaitannya dengan hubungan antara monomernya . Pati
adalah polimer dari α-D-glukosa. Ada tiga jenis umum pati: amilase, amilopektin, dan
glikogen. Amilase adalah kombinasinya dari kelompok glukosa α (1-4). Amilopektin,
seperti amilase, memiliki hubungan glukosa α ((1-4) tetapi, sebagai tambahan, memiliki
cabang α ((1-6). Glikogen, pati hewan, mirip dengan amilopektin kecuali bahwa ia
memiliki lebih banyak cabang. Ketiganya berguna dalam menyimpan glukosa, dan
ketiganya memberikan warna biru tua yang pekat di hadapannya yodium - tes sederhana
dan berguna (Moore,2008).
Selulosa mirip dengan pati kecuali keterkaitannya adalah β (1-4) glukosa.
Penggunaan utama seluloasa adalaha kehilangan di alam adalah struktur. Pemutusan
hubungan hanya mungkin dengan enzim yang diproduksi oleh bakteri atau jamur
tertentu. Untuk alasan ini, makhluk, seperti rayap, dan ruminansia seperti sapi, yang
memiliki enzim dalam saluran pencernaannya, dapat mencerna dan memanfaatkan
selulosa sebagai sumber energi. Selulosa adalah salah satu biokimia yang paling
melimpah di bumi. Satuan berulang dari turunan polisakarida ini adalah disakarida
(Moore,2008).

10
 Amilum adalah polisakarida yang terdiri dari banyak glukosa, sehingga mikroba
membutuhkan waktu yang lebih lama untuk mengkonsumsinya karena harus memecah
amilum menjadi maltosa dan dekstrin-dekstrin terlebih dahulu dengan bantuan enzim α-
amilase. Namun, ini hanya terjadi pada fase awal reaksi metabolisme karena pada tahap
selanjutnya amilum telah dipecah menjadi glukosa sehingga lebih mudah dikonsumsi
oleh bakteri Lactobacillus plantarum. Glukosa hasil hidrolisis tersebut akan diuraikan
menjadi piruvat melalui reaksi glikolisis yang selanjutnya masuk ke siklus kreb dan
diteruskan ke dalam rantai transfer elektron dan fosforilasi oksidatif menghasilkan
sejumlah elektron dan proton (Ainun dan Suyati, 2018).
Polisakarida, kebanyakan karbohidrat yang ditemukan di alam sebagai
polisakarida. Polisakarida dinamakan juga glikan. Antara glikan dapat berbeda dalam
hal unit monosakarida penyusunnya, panjang rantai polisakarida, tipe ikatan antara unit
monosakarida dan jumlah (derajat) percabangan. Polisakarida dapat dikelompokkan
menjadi dua kelompok besar yaitu homopolisakarida dan heteropolisakarida.
Homopolisakarida dinamakan juga homoglikan yaitu polisakarida yang mengandung
hanya satu tipe residu monosakarida, sedangkan heteropolisakarida dinamakan juga
heteroglikan yaitu polisakarida yang mengandung residu monosakarida lebih dari satu
tipe. Homoglikan dan heteroglikan dapat berbentuk rantai lurus atau bercabang (Azhar,
2016 ).
Uji Molish, prinsipnya yaitu karbohidrat bila diperlakukan dengan H2SO4
pekat, mengalami dehidrasi untuk memberi turunan furfural yang memadat dengan
Alpha naphthol untuk membentuk produk berwarna. Penafsiran pada uji molish yaitu
merupakan tes yang sensitif tetapi tes non-spesifik diberikan positif oleh semua jenis
karbohidrat. Jika ada oligosakarida atau polisakarida, mereka yang pertama dihidrolisis
menjadi monosakarida yang kemudian didehidrasi untuk memberikan hasil positif
(Jahangirpuria, dkk., 2017).
Uji iodin, iodin membentuk kompleks koordinat antara polisakarida melingkar
heliks rantai dan iodin terletak di cantral helix karena adsorpsi. Warnanya digabungkan
tergantung pada panjang rantai tidak bercabang atau linier yang tersedia untuk
kompleks pembentukan positif .Uji benedict memliki prinsip yaitu karbohidrat dengan
aldehida bebas atau gugus keton memiliki kemampuan mereduksi larutan berbagai ion
logam . Interpretasi uji benedict adalah tes semi kuantitatif (Jahangirpuria, dkk., 2017).

11
 BAB III
METODE PERCOBAAN

3.1 Alat
- Aluminium foil
- Batang pengaduk
- Beaker glass
- Corong
- Erlenmeyer
- Gelas ukur
- Label
- Neraca analitik
- Penangas air
- Penjepit tabung
- Pipet tetes
- Plat tetes
- Pot sampel
- Rak tabung
- Serbet
- Spatula
- Tabung reaksi
- Tissue

3.2 Bahan
- Akuades (H2O)
- Alpha Naftol (C10H7OH)
- Asam Sulfat (H2SO4)
- Etanol (C2H6O)
- Natrium Karbonat (Na2CO3)
- Natrium Sitrat (C6H5Na3O7)
- Tembaga(II) Sulfat (Cu2SO4)
Sampel :
- Glukosa (C6H12O6)

12
 - Sukrosa (C12H22O11)

3.3 Prosedur Percobaan

3.3.1 Pembuatan Reagen Uji Molisch
- Disiapkan alat dan bahan
- Dilarutkan 2,5gr alfa-naftol dalam 50ml etanol

3.3.2 Uji Molisch

- Dilarutkan masing masing sampel dengan 100mL akuades
- Diambil 2 ml larutan masing masing sampel yang telah dilarutkan dan
dimasukkan kedalam tabung reaksi berbeda
- Ditambahkan larutan alfa naftol sebanyak tiga tetes kedalam tabung reaksi
- Diuji degan asam sulfat pekat
- Ditambahkan asam sulfat pekat pada sampel glukosa melalui dinding tabung
secara perlahan-lahan, usahakan posisi tabung reaksi sedikit miring
- Diamati perubahan yang terjadi
3.3.3 Pembuatan Reagen Uji Iodine
- Disiapkan alat dan bahan
- Dilarutkan 2,538gr I2 dan 3,6gr KI kedalam 50ml akuades.
- Diaduk hingga homogen
3.3.4 Uji Iodium
- Dilarutkan masing-masing sampel dalam 100 ml akuades
- Diambil 3 tetes masing-masing sampel menggunakan pipet tetes dan diteteskan
pada plat tetes
- Ditambahkan larutan iodium sebanyak 2 tetes pada plat yang berisi sampel
glukosa
- Diaduk masing masing campuran tersebut
- Dilihat perubahan warna yang terjadi
3.3.5 Pembuatan Reagen Uji Benedict
- Disiapkan alat dan bahan
- Dilarutkan 8,65gr natrium sitrat dan 5gr Na2CO3 anhidrat dalam 40ml akuades
diatas waterbath.
- Disaring dan diencerkan campuran tersebut sampai volume larutan 850 ml.

13
 - Dilarutkan pula 0,865 gr CuSO4.5H2O dalam 5 ml akuades.
- Ditambahkan secara perlahan-lahan larutan CuSO4 tersebut ke dalam larutan
campuran natrium sitrat dan Na2CO3 tersebut saat mulai dingin
- Diencerkan dengan akuades hingga 50ml.

3.3.6 Uji Benedict

- Dilarutkan masing masing sampel dalam 100 ml akuades
- Dimasukkan masing masing sampel sebanyak 1 ml ke dalam tabung reaksi
berbeda menggunakan pipet tetes
- Ditambahkan 2 ml larutan benedict kedalam tabung reaksi yang berisi masing
masing sampel
- Dipanaskan diatas water bath dan ditunggu beberapa menit
- Dilihat perubahan warna yang terjadi

14
3.4 Flowsheet Percobaan
3.4.1 Pembuatan Reagen Uji Molisch

2,5 gr alfa-naftol

- Dimasukkan ke dalam labu ukur

- Ditambahkan dengan 50 ml etanol
- Diaduk hingga homogen

Larutan alfa-naftol 5%

3.4.2 Uji Molisch

Sampel : glukosa dan sukrosa

- Dilarutkan masing-masing sampel dengan

100 ml akuades
- Diambil 2 ml larutan masing-masing
sampel yang sudah dilarutkan kedalam dua
tabung reaksi berbeda
- Ditambahkan masing-masing tabung reaksi
dengan 3 tetes larutan alfa-naftol
- Ditambahkan juga masing-masing tabung
reaksi dengan beberapa tetes H2 SO4 pekat
melalui dinding tabung
- Diusahakan agar tabung sedikit miring
- Diamati perubahan yang terjadi
Hasil :
- Pada sukrosa : membentuk cincin ungu melengkung
- Pada glukosa : membentuk cincin ungu

15
3.4.3 Pembuatan Reagen Uji Iodine

0.635 g I2 dan 0.9 g KI

- Dimasukkan ke dalam labu ukur

- Ditambahkan dengan 50 ml akuades
- Diaduk hingga homogen

Larutan Iodine 0.1 N

3.4.4 Uji Iodium

Sampel : glukosa dan sukrosa

- Diambil 3 tetes masing-masing sampel

- Diteteskan ke plat tetes
- Ditambahkan larutan iodium sebanyak 2
tetes pada masing-masing plat yang berisi
sampel
- Diaduk masing-masing campuran tersebut
- Dilihat perubahan yang terjadi

Hasil :

- Pada glukosa : warna sama seperti warna larutan iodine (hasil negatif)
- Pada sukrosa : warna sama seperti warna larutan iodine (hasil negatif)

16
3.4.5 Pembuatan Reagen Uji Benedict

8,65 g Natrium Sitrat dan 0,865 gr

5 g Na2CO3.5H2O
- Dimasukkan ke dalam labu ukur
- Ditambahkan 40 ml akuades
- Dipanaskan diatas waterbath
- Diaduk hingga larut
- Disaring dan filtrat diencerkan
sampai volume larutan 45 ml
CuSO4.5H2O
- Dimasukkan ke dalam labu
ukur
- Ditambahkan 5 ml akuades
- Diaduk hingga larut

- Ditambahkan secara perlahan-lahan larutan CuSO4

tersebut ke dalam larutan campuran natrium sitrat dan
Na2CO3 tersebut saat mulai dingin
- Diadkan dengan akuades hingga 50 ml.
Larutan Reagen Benedict

3.4.6 Uji Benedict

Sampel : glukosa dan sukrosa

- Dimasukkan 1 ml masing-masing sampel ke

dalam tabung reaksi berbeda
- Ditambahkan 2 ml larutan benedict pada
masing-masing tabung
- Dipanaskan diatas waterbath selama beberapa
menit
- Diamati perubahan warna yang terjadi

Hasil :
- Pada glukosa : terbentuk endapan merah bata
- Pada sukrosa : terbentuk endapan hijau kehitaman

17
 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil
No Sampel Molish Iodium Benedict

1 Glukosa Cincin Ungu Warna sama dengan Endapan merah

(positif) iodin bata
(negatif) (positif)
2 Sukrosa Cincin Ungu Warna sama dengan Hijau kehitaman
Melengkung iodin (negatif)
(positif) (negatif)

4.2 Perhitungan
4.2.1 Reaksi Molisch
Dik: Alfa nafthol 5% dalam 50 ml etanol
% = g/V x 100%
5% = g/50 x 100%
G = 2,5 gr
4.2.2 Reaksi Iodium
Dik: Iodium 0,1 N dalam 50 ml Aquadest
N = g/BM x 1000/V x valensi
0,1 N = g/254 x 1000/50 x 2
g = 0,635 g
4. 3 Pembahasan

Karbohidrat adalah komponen bahan pangan yang tersusun oleh 3 unsur utama,
yaitu karbon (C), hidrogen (H) dan oksigen (O). Susunan atom-atom tersebut dan
ikatannya membedakan karbohidrat satu dengan yang lainnya, sehingga ada karbohidrat
yang masuk kelompok struktur sederhana seperti monosakarida dan disakarida dan
dengan struktur kompleks atau polisakarida seperti pati, glikogen, selulosa dan
hemiselulosa. Analisis kualitatif karbohidrat umumnya didasarkan atas reaksi-reaksi
warna yang dipengaruhi oleh produk-produk hasil penguraian gula dalam asam-asam
kuat dengan berbagai senyawa organik, sifat mereduksi dari gugus karbonil dan sifat

18
oksidasi dari gugusan hidroksil yang berdekatan. Reaksi dengan asam-asam kuat
seperti asam sulfat, hidroklorat dan fosfat pada karbohidrat menghasilkan pembentukan
produk terurai yang berwarna. Beberapa analisis kualitatif karbohidrat yang sering
dilakukan adalah uji Molish, uji Seliwanof, uji Antrone, dan uji Fenol (Kusbandari,
2015).
Berdasarkan percobaan kali ini dilakukan reaksi umum terhadap karbohidrat
dimana reaksi-reaksi yang digunakan adalah reaksi molish, reaksi iodium, dan reaksi
benedict. Sampel yang digunakan adalah sukrosa dan glukosa.
Pada percobaan reaksi molish, sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi lalu
ditambahkan dengan larutan α-naftol dan asam sulfat pekat. Hasil yang diperoleh yaitu
terbentuk cincin ungu pada kedua sampel yaitu sukrosa dan glukosa. Uji molish
merupakan uji umum untuk mengidentifikasi adanya karbohidrat secara kualitatif.
Prinsip percobaan ini adalah didasarkan pada bahan yang mengandung senyawa
monosakarida bila direaksikan dengn H2SO4 pekat akan terhidrolisis membentuk
furfural. Furfural ini akan membentuk persenyawaan dengan naftol ditandai dengan
terbentuknya warna violet (cincin) (Septorini, 2008).
Pada percobaan reaksi iodium, sampel yang digunakan adalah glukosa dan sukrosa,
sampel dimasukkan kedalam plat tetes sebanyak 2 tetes lalu ditambahkan larutan
iodium, hasil yang diperoleh adalah negatif untuk kedua sampel. Hal ini disebabkan
polisakarida dengan penambahan iodium akan membentuk kompleks adsorpsi berwarna
yang spesifik. Amilum atau pati dengan iodium menghasilkan warna biru, dekstrin
menghasilkan warna merah anggur, sedangkan glikogen dan sebagian pati yang
terhidrolisis akan membentuk warna merah. Sehingga ketika sampel ditambahkan
larutan iodium, hasil negatif karena sampel bukan merupakan polisakarida (Hasanah,
2014).
Pada percobaan reaksi benedict, sampel yang digunakan adalah sukrosa dan
glukosa, sampel dilarutkan kedalam air lalu dimasukkan masing-masing 1 ml ketabung
reaksi kemudian ditambahkan pereaksi benedict sebanyak 2 ml, lalu kedua sampel
dipanaskan diatas waterbath selama beberapa menit, Hasil yang diperoleh adalah pada
sampel glukosa terbentuk endapan warna merah bata, sedangkan pada sampel sukrosa
diperoleh endapan warna biru kehijauan. Pada sampel glukosa, positif terdapat gula
pereduksi, sedangkan pada sukrosa, negatif terdapat gula pereduksi. Gula pereduksi

19
adalah golongan gula (karbohidrat) yang dapat mereduksi senyawa-senyawa penerima
elektron. Contohnya adalah glukosa dan fruktosa. Ujung dari suatu gula pereduksi
adalah ujung yang mengandung gugus aldehida atau keton bebas. Semua monosakarida
(glukosa, fruktosa, galaktosa) dan disakarida (laktosa, maltosa), kecuali sukrosa dan pati
(polisakarida), termasuk sebagai gula pereduksi (Afriza dan Ismanilda, 2019).
Prinsip dari uji ini adalah gugus aldehid atau keton bebas pada gula reduksi yang
terkandung dalam sampel mereduksi ion Cu2+ dari CuSO4.5H2O dalam suasana alkalis
menjadi Cu+ yang mengendap menjadi Cu2O. Suasana alkalis diperoleh dari Na2CO3
dan Na sitrat yang terdapat pada reagen Benedict. Pada uji ini menghasilkan endapan
merah bata yang menandakan adanya gula pereduksi pada sampel. Endapan yang
terbentuk dapat berwarna hijau, kuning atau merah bata tergantung pada konsentrasi
gula reduksinya. semakin berwarna merah bata maka gula reduksinya semakin banyak
(Kusbandari, 2015).

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan

20
 - Dari percobaan yang dilakukan , Pada reaksi molish diperoleh perubahan warna
pada sampel glukosa dan sukrosa berupa cincin ungu pada larutan sampel yang
menunjukkan kedua sampel positif mengandung karbohidrat.
- Dari percobaan yang dilakukan, Pada reaksi iodium tidak terjadi perubahan
warna pada kedua sampel yaitu glukosa dan sukrosa yang menunjukkan kedua
sampel bukan merupakan karbohidrat jenis polisakarida.
- Dari percobaan yang dilakukan , Pada reaksi benedict diperoleh hasil pada
glukosa berupa endapan warna merah bata pada larutan, sedangkan pada sukrosa
diperoleh hasil warna biru kehijauan yang menunjukkan glukosa merupakan
gula pereduksi, sedangkan sukrosa bukan merupakan gula pereduksi
5.2 Saran
- Sebaiknya pada percobaan selanjutnya dapat digunakan sampel lain seperti pati
singkong.
- Sebaiknya pada percobaan selanjutnya dapat digunakan uji reaksi lain seperti uji
fehling.

DAFTAR PUSTAKA

21
Afandi, F.A., Wijaya,C.H., Faridah, D.N., dan Suyatma, N.E.(2019). Hubungan antara
Kandungan Karbohidrat dan Indeks Glikemik pada Pangan Tinggi Karbohidrat.
Pangan. 28(2). Halaman 148
Afriza, R., Ismanilda. (2019). Analisis Perbedaan Kadar Gula Pereduksi Dengan
Metode Lan Eynon Dan Luff Svhoorl Pada Buah Naga Merah ( Hylocereus
polyrhizus). Jurnal Teknologi dan Manajemen Pengolalaan
Laboratorium(Temapela). 2(2). Halaman 91.
Ainun,M. dan Suyati,L.(2018). Bioelectricity of Various Carbon Soures on Series
Circuit from Microbial Fuel Cell System using Lactobacillus plantarum. Jurnal
Kimia Sains dan Aplikasi. 21(2). Halaman 72.
Azhar,M.(2016). Biomolekul Sel karbohidrat, Protein, dan Enzim. Padang : UNP Press.
Halaman 72-75, 86-87,90.
Hasanah, I. (2014). Studi Komparasi Kandungan Karbohidrat Tepung Biji Mangga
Manalagi dan Arumanis Sebagai Alternatif Sumber Karbohidrat Pada
Pembuatan Jenang Pelok. Skripsi . Tidak Diterbitkan. Fakultas Ilmu Tarbiyah
Dan Keguruan. Institut Agama Islam Negeri Walisongo : Semarang. Halaman
96.
Jahangirpuria,H.D., Makwana, S.A., dan Patel, C.G.(2017). Identification Of
Carbohydrates. The world Journal of Engineering and Applied Science. 3(6).
Halaman 3-6.
Kusbandari, A. (2015). Analisis Kualitatif Kandungan Sakarida Dalam Tepung Dan Pati
Umbi Ganyong ( Canna edulis Ker.). Pharmaciana . 5(1). Halaman : 36,38.
Moore, J dan Langley,R.(2008). Biochemistry for Dummies. Indiana : Wiley Publishing.
Halaman 125.
Ngili, Y. (2009). Biokimia Struktur & Fungsi Biomolekul . Yogyakarta : Graha Ilmu.
Halaman 1.
Septorini, R. (2008). Perbedaan Kadar Glukosa Pada Onggok Yang Dihidrolisis Dengan
Asam Klorida, Asam Sulfat, dan Asam Oksalat. Semarang : Universitas
Muhammadiyah . Halaman 11.
Widhyasari, L.M., Putri, N.L.D.D., dan Parwati, P.A.(2017). Penentuan Kadar
Karbohidrat Pada Nasi Putih Dalam Proses Pemanasan Rice Cooker Dengan
Variasi Waktu. Bali Medika Jurnal. 4(2). Halaman 117.

22
 LAMPIRAN
Sampel+ uji Hasil Gambar
Glukosa+uji Cincin Ungu
molish (positif)

Glukosa+ uji Warna sama

Iodium dengan iodin
(negatif)

Glukosa+ uji Endapan

Benedict merah bata
(positif

Sukrosa+ uji Cincin Ungu

molish Melengkung
(positif)

23
Sukrosa + uji Warna sama
iodium dengan iodin
(negatif)

Sukrosa+ uji Hijau

Benedict kehitaman
(negatif)

24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58