BALAI PENGAWAS OBAT DAN MAKANAN No. Bagian : 5.5/IK ALAT.

026/09
DI AMBON Terbitan / Tgl. : 2/03-08-09
Revisi/Tgl : 1/21-04-12
INSTRUKSI KERJA ALAT
Halaman : 1 dari 5
PENGGUNAAN DAN PEMELIHARAAN Disetujui :
SPEKTOFOTOMETER UV-VIS Manajer Mutu
1. Ruang Lingkup : Instruksi kerja ini digunakan untuk Spektrofotometer UV – VIS merek
Shimadzu 1601 PC , 1700 PC 1800 PC
2. Prosedur :
A. PENGGUNAAN
1. Nyalakan tombol ON pada UPS
2. Keluarkan pengering / silika dari kompartemen spektrofotometer
3. Nyalakan spektrofotometer dengan menekan tombol ON pada sisi kiri alat, tunggu
sampai proses inisialisasi selesai.
4. Nyalakan komputer, buka folder UV - PROBE
5. Tekan F4 pada alat spektrofotometer, kemudian hubungkan komputer dengan
spektrofotometer, dengan meng – klik CONECT
6. Klik pada menu Method ( gambar M pada toolbar ), isi parameter panjang gelombang
sesuai dengan contoh yang akan diuji.
7. Masukkan blangko kedalam kuvet (terdiri dari 2 kuvet )
8. Masukkan kuvet kedalam kompartemen sampel.
9. Lakukan Baseline Check, klik BASELINE
10. Ganti kuvet bagian depan yang berisi blangko dengan contoh yang akan diuji, kemudian
klik START
11. Klik menu gambar peak, isi data contoh uji kemudian simpan ke komputer dengan cara
klik FILE, pilih SAVE AS, isi data contoh kemudian klik SAVE
12. Lakukan no. 10 dan 11 sampai semua contoh yang diuji habis terukur
13. Setelah selesai menguji, keluarkan kuvet dari kompartemen sampel, bersihkan dan
simpan kuvet ketempat semula dalam keadaan kering
14. Putuskan hubungan antara komputer dengan spektrofotometer dengan mengklik
DISCONECT
15. Tekan tombol MODE pada spektrofotometer, kemudian matikan dengan menekan
tombol OFF pada sisi kiri alat.

BALAI PENGAWAS OBAT DAN MAKANAN No. Bagian : 5.5/IK ALAT.026/09

Dilarang menggandakan atau menyadur sebagian atau seluruh isi dokumen ini tanpa seijin Kepala Balai POM
di Ambon
 DI AMBON Terbitan / Tgl. : 2/03-08-09
Revisi/Tgl : 1/21-04-12
INSTRUKSI KERJA ALAT
Halaman : 2 dari 5
PENGGUNAAN DAN PEMELIHARAAN Disetujui :
SPEKTOFOTOMETER UV-VIS Manajer Mutu

16. Klik FILE pada komputer kemudian pilih CLOSE, jika ada pertanyaan klik YES,
kemudian matikan komputer.

B. PEMELIHARAAN
1. Bersihkan alat setelah selesai digunakan
2. Bersihkan kuvet dengan aquadest setelah selesai digunakan dan simpan pada tempat
yang bersih dan kering
3. Bersihkan kompartemen sampel apabila kotor
4. Masukkan kembali pengering / silika kedalam kompartemen sampel setiap selesai
digunakan
5. Jagalah kebersihan alat dan isi buku pemakaian alat
6. Lakukan pengecekan alat dan kalibrasi alat secara periodik
a. Harian : Bersihkan kompartemen sampel sebelum dan setelah pemakaian
b. Bulanan : Dapat dilakukan pada spektrofotometer maupun pada komputer
1. Baseline Flatness
1.1 Pada spektrofotometer :
1. Nyalakan alat
2. Dari menu utama pilih ”Utilities” ( 8 )
3. Pilih ”Maintenance” ( 9 )
4. Pilih ”Performance check”, tekan 1 tunggu sampai proses selesai, print
hasil
5. Pilih 2 (Baseline correction), tunggu 15 menit, kembali ke menu utama
6. Pilih Spektrum, isi parameter :
● Meas. Mode : ABS
● Scanning range : 1100 nm – 200 nm
● Rec. Range : - 0,01A – 0,01A
● Scan speed : Medium

BALAI PENGAWAS OBAT DAN MAKANAN No. Bagian : 5.5/IK ALAT.026/09

Dilarang menggandakan atau menyadur sebagian atau seluruh isi dokumen ini tanpa seijin Kepala Balai POM
di Ambon
 DI AMBON Terbitan / Tgl. : 2/03-08-09
Revisi/Tgl : 1/21-04-12
INSTRUKSI KERJA ALAT
Halaman : 3 dari 5
PENGGUNAAN DAN PEMELIHARAAN Disetujui :
SPEKTOFOTOMETER UV-VIS Manajer Mutu

● No. Of scans :1
● Display mode : sequential
7. Tekan “Start”, akan diperoleh hasil kromatogram
8. Apabila penyimpangan > ± 0,005 , ulang kembali dari no. 5 (Baseline
correction).
1.2 Pada komputer :
1. ON kan spektrofotometer, tunggu sampai proses inisialisasi selesai
2. Hidupkan komputer
3. Tekan tombol ”F4” pada spektrofotometer
4. Pilih menu ”UV PROBE”
5. Pada komputer klik ”CONNECT”
6. Pilih menu ”METHOD”, klik Measurement wavelenght  190 nm – 1100
nm, scan speed ”SLOW”, scan range  - 0,01A – 0,01A , klik “OK”
7. Klik pada Instrument Parameter  Measuring Mode  ABSORBAN ,
klik ”OK”
8. Klik ”Baseline” (kompartemen sampel dalam keadaan kosong )
Boleh melakukan Auto zero, boleh juga tidak.
9. Tekan ”START”
10. Lakukan pengulangan sampai hasil yang diinginkan
Syarat Baseline flatness : • untuk UV – VIS 1601 PC > ± 0,002 Abs
• untuk UV – VIS 1700 > ± 0,001 Abs
2. Wavelength Accuracy
2.1 Pada spektrofotometer :
1. Kembali ke menu utama
2. Pilih ”Spektrum” ( 2 )
3. Tekan 1 sebanyak dua kali sampai diperoleh E ( energy )

BALAI PENGAWAS OBAT DAN MAKANAN No. Bagian : 5.5/IK ALAT.026/09

DI AMBON Terbitan / Tgl. : 2/03-08-09
Dilarang menggandakan atau menyadur sebagian atau seluruh isi dokumen ini tanpa seijin Kepala Balai POM
di Ambon
 Revisi/Tgl : 1/21-04-12
INSTRUKSI KERJA ALAT
Halaman : 4 dari 5
PENGGUNAAN DAN PEMELIHARAAN Disetujui :
SPEKTOFOTOMETER UV-VIS Manajer Mutu
4. Isi parameter sebagai berikut :
● Meas. Mode :E
● Scanning range : 490 nm – 480 nm
● Rec. Range : 0E ~ 30E
● Scan speed : Medium
● No. Of scans :1
● Display mode : sequential
● Gain :2
● Light source : D2 lamp
5. Tekan “START”
6. Print kromatogram yang diperoleh.
2.2 Pada komputer :
1. Kembali ke menu utama pilih METHOD
2. Klik Measurement wavelenght 490 nm - 480 nm, scan speed medium, lalu
klik OK
3. Pada instrument parameter, pada measuring mode : Energi, source lamp
D2, SiPD Gain 2, lalu klik OK.
4. Klik “START”, tunggu sampai spektrum keluar, klik menu peak pick
5. Print hasil
6. Ulangi pengukuran wavelength Accuracy pada panjang gelombang 660 nm
– 650 nm, dengan Rec. Range : 0E – 150E
7. Penyimpangan pada panjang gelombang 486,0 dan 656,1 nm :
• untuk UV – VIS 1601 PC < ± 0,5 nm
• untuk UV – VIS 1700 < ± 0,3 nm

Dilarang menggandakan atau menyadur sebagian atau seluruh isi dokumen ini tanpa seijin Kepala Balai POM
di Ambon
BALAI PENGAWAS OBAT DAN MAKANAN No. Bagian : 5.5/IK ALAT.026/09
DI AMBON Terbitan / Tgl. : 2/03-08-09
Revisi/Tgl : 1/21-04-12
INSTRUKSI KERJA ALAT
Halaman : 5 dari 5
PENGGUNAAN DAN PEMELIHARAAN Disetujui :
SPEKTOFOTOMETER UV-VIS Manajer Mutu

Riwayat Perubahan

No. Status Perubahan Dokumen

Lokasi Perubahan Alasan Perubahan
Urut Terbitan/tgl Rev/tgl
1 2/03-08-09 0/- Kolom persetujuan dan Kaji Ulang Dokumen 2012
Penambahan Kolom
Riwayat Perubahan

dst

Diverifikasi oleh :
Personil Lab./Adm. Kelompok Jaminan Mutu
Nama : Nama :
Tanggal : Tanggal :
Paraf : Paraf :

Dilarang menggandakan atau menyadur sebagian atau seluruh isi dokumen ini tanpa seijin Kepala Balai POM
di Ambon