BioLink
Jurnal Biologi Lingkungan, Industri, Kesehatan
Available online http://ojs.uma.ac.id/index.php/biolink
1Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Prima Indonesia, Medan
2Jurusan Teknik Kimia, Politeknik Teknologi Kimia Industri, Medan
3Laboratorium Biologi Molekuler, Fakultas Kedokteran, Universitas Prima Indonesia, Medan
Abstrak
Bakteri Asam Laktat (BAL) dapat diisolasi dari berbagai produk makanan fermentasi. Salah satu
sumber potensial BAL adalah dari makanan tradisional yang berbasis fermentasi. Tujuan penelitian ini
adalah mengisolasi dan mengevaluasi aktivitas antimikroba BAL yang diisolasi dari makanan
tradisional khas Batak, “naniura” . Isolat BAL yang telah diisolasi dikarakterisasi berdasarkan
pewarnaan Gram, tipe fermentasi dan uji katalase. Untuk pengujian aktivitas antimikroba BAL terhadap
bakteri patogen digunakan metode difusi cakram. Hasil penelitian menunjukkan sebanyak 6 isolat BAL
yang dipilih secara acak yang diisolasi dari naniura yaitu BN1, BN2, BN3, BN4, BN5 dan BN6
mempunyai karakteristik Gram positif , berbentuk batang dan katalase negatif. Semua isolat terpilih
mempunyai tipe fermentasi heterofermentasi. Sebanyak 4 isolat (BN1, BN2, BN5 dan BN6) dari 6 isolat
BAL mampu menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus, E. coli dan S. typhi dengan diameter zona
hambat berkisar 6,9 cm hingga 12,3 cm. Berdasarkan hasil tersebut maka disimpulkan bahwa BAL yang
diisolasi dari naniura berpotensi sebagai sumber probiotik.
Abstract
Lactic acid bacteria (LAB) could be isolated from various fermented food products. One potential source of
LAB is traditional fermented food. The aim of the study was to isolate and investigate antimicrobial
activity of LAB isolated from traditional Batak food, “naniura”. The LAB isolates were characterized by
Gram staining, fermentation type and catalase test. The investigation of antimicrobial activity of LAB
against pathogenic bacteria were conducted using disc diffusion method. The results showed that 6
isolates of BAL were successfully isolated namely BN1, BN2, BN3, BN4, BN5 and BN6 had characteristics of
Gram positive, rod shaped and catalase negative. All selected isolate have heterofermentation type. Four
isolates (BN1, BN2, BN5 and BN6) were able to inhibit S. aureus, E. coli and S. typhi with inhibition zone
diameters ranging from 6,9 to 12,3 cm. Based on the result, it was concluded that LAB isolated from
naniura has potential as a source of probiotics.
How to Cite: Aloysius, Ulfa, A., Situmorang, A.K.F., Harmileni, Facrial, Edy. (2019). Aktivitas Antimikroba
Bakteri Asam Laktat yang Diisolasi dari Makanan Tradisional Fermentasi Khas Batak “Naniura”, BioLink :
Jurnal Biologi Lingungan, Industri dan Kesehatan, Vol.6 (1): Hal. 8-15
8
Aloysius, Ulfa, A., Situmorang, A.K.F., Harmileni, Facrial, Edy. Aktivitas Antimikroba Bakteri Asam Laktat yang
Diisolasi dari Makanan Tradisional Fermentasi Khas Batak “Naniura”
PENDAHULUAN et al, 2006). Lactobacillus merupakan
Naniura merupakan salah satu boga bagian dari kelompok bakteri asam laktat
budaya etnis yang menyebut dirinya (BAL). Bakteri Asam Laktat yang
“Halak Hita” (suku Batak). Naniura adalah ditemukan dalam makanan tradisional di
makanan khas suku Batak yang berbeda Asia termasuk Lactobacillus plantarum, Lb.
dari makanan tradisional lainnya. Hal pentosus, Lb.brevis, Lb.fermentum, Lb.casei,
mendasar yang menjadi sebuah perbedaan Leuconostoc mesenteroides, leu.kimchi,
besar dari Naniura yaitu jika makanan leu.fallaz, weisella confusa dan Pediococcus
lainnya terdapat proses pemasakan baik pentosacecous, yang sebagian besar
direbus, dikukus, digoreng ataupun merupakan probiotik yang potensial.
dibakar, tapi naniura tidak melalui proses Bakteri Asam Laktat dalam suatu makanan
pemasakan. Prinsip pembuatan naniura tidak hanya berperan dalam fermentasi
adalah merendam ikan mas dengan tetapi juga memberikan dampak
rendaman jeruk jungga atau asam dan kesehatan yang positif. Dampak positif
dibiarkan beberapa jam (Manalu, 2009). BAL ini dikemukakan oleh Metchnicoff
Penggunaan asam dalam proses (1908) yang menyatakan bahwa
pembuatan naniura bertujuan sebagai mikroorganisme penghasil asam pada
antimikroba. pH yang rendah pada produk makanan dapat memperpanjang
pangan (<4,5) mampu menghambat usia bagi yang mengkonsumsinya
pertumbuhan patogen, sehingga makanan (Nuraida, 2015). Meskipun dalam
dapat disimpan lebih lama dibandingkan sejarahnya makanan fermentasi dengan
makanan dengan pH netral. Bakteri yang BAL adalah berbahan dasar susu, banyak
terdapat pada ikan air tawar pada penelitian mengarah ke eksplorasi BAL
umumnya adalah Aeromonas, Lactobacillus dari makanan tradisional sebagai
dan Streptococcus (Febrian et al, 2016). probiotik yang potensial. Dalam penelitian
Genus Lactobacillus dikenal memiliki ini, peneliti mengisolasi BAL dari makanan
manfaat bagi kesehatan manusia terutama tradisional naniura dan menguji aktivitas
untuk saluran pencernaan. Efek antimikroba yang memberikan efek yang
menguntungkan dari genus Lactobacillus menguntungkan bagi kesehatan manusia.
termasuk menghambat pertumbuhan
bakteri patogen seperti Salmonella, METODE PENELITIAN
Shigella dan Helicobacter. Selain itu Isolasi BAL dari naniura
Lactobacillus juga bermanfaat terhadap Bakteri Asam Laktat dari naniura
reduksi laktosa intoleran (Maragkoudakis diisolasi dengan menggunakan media
9
BioLink : Jurnal Biologi Lingkungan, Industri dan Kesehatan, Vol.6 (1) (2019): hal. 8-15
pertumbuhan spesifik yaitu Man Rogosa ditentukan meliputi uji katalase, Gram
Sharpe (MRS) broth dan MRS agar. staining dan tipe fermentasi.
Sebanyak 1g daging ikan naniura
Aktivitas Antimikroba Terhadap
dilarutkan ke dalam media pertumbuhan
Bakteri Patogen
spesifik MRS broth, divortex hingga Aktivitas antimikroba BAL terhadap
homogen lalu diinkubasi pada suhu 37°C bakteri patogen dilakukan dengan metode
selama 24 jam dalam kondisi anaerob difusi cakram. Sebanyak 1 ose yang terdiri
sehingga larutan menjadi keruh yang dari 3-5 koloni BAL masing-masing isolat
menandakan BAL telah tumbuh. Proses ini dikultur ke 10 mL media MRS broth steril
dinamakan proses enrichment. Setelah dalam tabung reaksi dan diinkubasi pada
inkubasi, dilanjutkan dengan pengenceran suhu 37°C selama 24 jam dalam kondisi
bertingkat. Sebanyak 0,1 mL kultur BAL anaerob. Sebanyak 3-5 koloni bakteri
dicampurkan dengan 0,9 mL MRS broth patogen yang meliputi S. aureus, E. coli dan
steril di dalam microtube 1,5 mL dan S. typhi dikultur ke dalam 10 mL media
dihomogenkan dengan cara dibolak balik. nutrient broth steril di dalam tabung
Ini merupakan pengenceran 10-1. reaksi dan diinkubasi pada suhu 37°C
Pengenceran dilanjutkan hingga 10-7. selama 24 jam pada kondisi aerob. Setelah
Pada pengenceran terakhir ini, sebanyak inkubasi, bakteri patogen disebar ke
0,1 mL kultur BAL disebar ke permukaan permukaan nutrient agar menggunakan
MRS agar dengan menggunakan spreader cotton swab steril. Kertas cakram
dan dilanjutkan dengan inkubasi hingga (diameter 5 mm) dicelupkan ke dalam
48 jam suhu 37°C. Total koloni BAL masing-masing isolat BAL menggunakan
(Colony Forming Unit) dihitung dengan pinset, dan diletakkan ke permukaan
menggunakan rumus : nutrient agar dan diinkubasi selama 48
Colony Forming Unit (CFU/mL) = jam suhu 37°C. Setelah inkubasi, zona
total koloni BAL x x hambat yang terbentuk diukur
menggunakan jangka sorong.
Karakteristik Biokimia
Sebanyak 6 koloni BAL dipilih secara HASIL DAN PEMBAHASAN
acak lalu dikultur pada 6 media MRS agar Isolasi BAL dari Naniura
dengan cara di-streak dan diinkubasi Naniura diperkirakan mengandung
selama 48 jam pada suhu 37°C. Isolat BAL yang berpotensi sebagai probiotik.
diberi nama BN1, BN2, BN3, BN4, BN5 dan Gambar naniura dapat dilihat pada
BN6. Karakteristik biokimia yang Gambar 1.
10
Aloysius, Ulfa, A., Situmorang, A.K.F., Harmileni, Facrial, Edy. Aktivitas Antimikroba Bakteri Asam Laktat yang
Diisolasi dari Makanan Tradisional Fermentasi Khas Batak “Naniura”
(2013) dalam penelitiannya mengenai
karakterisasi BAL dari Bekasam, suatu
ikan fermentasi, melaporkan bahwa total
koloni BAL dari bekasam adalah berkisar
antara 1,4 × 108 hingga 9,0 × 108
CFU/mL. Tayo dan Akpeji (2016)
menyatakan bahwa suatu makanan
probiotik standar harus memiliki
minimal 106 CFU/g organisme yang aktif
Gambar 1. Naniura, yang merupakan salah dan hidup pada saat dikonsumsi.
satu makanan khas Batak
11
BioLink : Jurnal Biologi Lingkungan, Industri dan Kesehatan, Vol.6 (1) (2019): hal. 8-15
12
Aloysius, Ulfa, A., Situmorang, A.K.F., Harmileni, Facrial, Edy. Aktivitas Antimikroba Bakteri Asam Laktat yang
Diisolasi dari Makanan Tradisional Fermentasi Khas Batak “Naniura”
Dari Tabel 2 di atas terlihat bahwa dapat menghambat pertumbuhan S. typhi.
dari semua isolat BAL dapat menghambat Gambar aktivitas antimikroba dapat
pertumbuhan ketiga bakteri indikator, dilihat pada Gambar 3.
kecuali BN4, BN5 dan BN6 yang tidak
13
BioLink : Jurnal Biologi Lingkungan, Industri dan Kesehatan, Vol.6 (1) (2019): hal. 8-15
Asam laktat adalah asam organik utama memiliki aktivitas antimikroba spektrum
fermentasi BAL terjadi kesetimbangan luas. BAL dari naniura ini efektif
antara bentuk terdisosiasi dengan tidak menghambat pertumbuhan bakteri E. coli
terdisosiasi. Asam laktat mengganggu dan S. aureus, tetapi tidak efektif terhadap
potensial membran sel, menghambat S. typhi. Untuk penelitan lanjutan perlu
transport aktif dan menurunkan pH dipelajari mengenai berat molekul dan
intrasel serta menghambat beberapa klasifikasi bakteriosin yang dihasilkan
fungsi metabolik. Asam laktat memiliki oleh BAL dari naniura.
spektrum hambat yang luas, yang mampu
menghambat bakteri Gram positif maupun UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih penulis ucapkan kepada
negatif (Sanlibaba and Gucer, 2015).
Rektor Universitas Prima Indonesia,
Bakteriosin merupakan salah satu faktor
Dr.Chrismis Novalinda Ginting, M.Kes dan
antimikroba yang paling penting dari BAL.
Dekan Fakultas Kedokteran dr. Linda
Bakteriosin adalah protein berukuran
Chiuman, MKM yang telah memfasilitasi
kecil dengan aktivitas bakterisida atau
berupa sarana dan prasarana sehingga
bakteriostatik. Jandaik et al (2013)
penelitian ini dapat diselesaikan dengan
melaporkan Lactococcus spp.
baik. Penulis juga mengucapkan
menghasilkan bakteriosin aktivitas
terimakasih atas kerja keras tim analis lab
antimikroba bakteriosin tersebut efektif
Biologi Molekuler, Michael Alfian Grey and
menghambat pertumbuhan S. aureus, dan
Ditha Paramitha yang membantu dalam
tidak efektif dalam menghambat
pelaksanaan penelitian ini di
pertumbuhan E. coli. Bakteriosin memiliki
laboratorium.
karakteristik berupa 1) inaktif oleh enzim
proteolitik pada saluran pencernaan, 2 ) DAFTAR PUSTAKA
non-toksik terhadap hewan uji, 3) pada Astuti. (2016). Isolation, Characterization, and
Identification Lactic Acid Bacteria from
umumnya termostabil, 4) mempunyai Chicken Waste Faeces that Potentual as
Probiotics. International Journal of Scientific
aktivitas spectrum luas terutama terhadap and Research Publications. 6(5) : 180-191
Chakoosari, M.M. Ghasemi, M.F. Masiha, A.
bakteri Gram positif (Sanliubaba and
Darsanaki, R.K. Amini, A. (2015).
Gucer, 2015). Antimicrobial Effect of Lactic Acid Bacteria
against Common Pathogenic Bacteria.
mljgoums. 9(5) : 1-4
SIMPULAN Desniar, Rusmana, I. Suwanto, A. Mubarik, N.R.
(2013). Characterization of Lactic Acid
Dari penetian ini dapat disimpulkan Bacteria Isolated from an Indonesian
bahwa BAL yang diisolasi dari makanan Fermented Fish (Bekasam) and Their
Antimicrobial Activity Against Pathogenic
tradisional khas Batak, “naniura” Bacteria. Emir. J. Food Agric. 25 (6) : 489-
494
berpotensi sebagai probiotik, dikarenakan
14
Aloysius, Ulfa, A., Situmorang, A.K.F., Harmileni, Facrial, Edy. Aktivitas Antimikroba Bakteri Asam Laktat yang
Diisolasi dari Makanan Tradisional Fermentasi Khas Batak “Naniura”
Fachrial, E.,Adrian, Harmileni. 2018. Isolasi, Computational and Structural
Aktivitas Anti Mikroba Bakteri Asam Laktat Biotechnology Journal. 3(4) : 1-8
dari Fermentasi Nira Kelapa Sawit, Biolink, Ravindran, L. Manjunath, N. (2016). In Vitro Study
Vol.5 (1) : Hal. 51-58 Analysis of Antimicrobial Properties of
Febrian, G.M. Julianti, E. Rusmarilin, H. (2016). Lactic Acid Bacteria Against Pathogens. J.
Pengaruh Berbagai Jenis Asam Jeruk dan Bio. Innov. 5(2) : 262-269
lama Perendaman Terhadap Mutu Ikan Mas Sanlibaba, P and Gucer, Y. (2015). Antimicrobial
Naniura. J.Rekayasa pangan dan Pert. 4(4) : Activity of Lactic Acid Bacteria. Journal of
471-482 International Scientific Publications. 3 : 451-
Jandaik, S. Sharma, M, Kumar, J. Singh, R. (2013). 457
Antimicrobial Activity of Bacteriocin Suganya, K. Murugan, T. Murugan, M. (2013).
Produced by Lactic Acid Bacteria Isolated Isolation and Characterization of Probiotic
from Milk Poducts. Journal of Pure and Lactic Acid Bacteria from Milk and Curd
Applied Microbiology. 7(1) : 603-608 Samples. Int J Pharm Bio Sci. 4 (1) : 317-324
Manalu, M.B.F. (2009). Memperkenalkan Naniura Syah, S.P. Sumantri, C. Arief, I.I. Taufik, E. (2017).
Makanan Khas Batak Sebagai Hidangan Isolation and Identification of Indigenous
Appetizer. Majalah Ilmiah Panorama Lactic Acid Bacteria by Sequencing the 16S
Nusantara. 8 : 52-61 rRNA from Dangke, A Traditional Cheese
Maragkoudakis, P.A. Zoumpopoulou, G. Miaris, C. from Enrekang, South Sulawesi. Pak J.
Kalantzopoulos, G. Pot, B. Tsakalidou, E. Nutr.,16 (5) : 384-392
(2006). Probiotic Potential of Lactobacillus Syukur, S. Fachrial, E. Jamsari. (2014). Isolation,
strains isolated from dairy products. antimicrobial activity and protein
International Dairy Journal. 16: 189-199 bacteriocin characterization of lactic acid
Mezaini, A. and Bouras, A.D. (2010). Antibacterial bacteria isolated from dadih in Solok, West
activity and probiotic properties of some Sumatera, Indonesia. Res. J. Pharm., Biol.
lactic acid bacteria isolated from dairy Chem. Sci. 5(6) : 1096-1104
products. African Journal of Biotechnology. Tayo, A. and Akpeji, S. (2016). Probiotic Viability,
9(26) : 1-8 Physicochemical and Sensory Propertis of
Nuraida, L. (2015). A review : Health promoting Probiotic Pineapple Juice. Fermentation. 2
lactic acid bacteria in traditional (20) : 1-11
Indonesian fermented foods. Food Science Yusra, Azima, F. Periadnadi. (2013). Antimicrobial
and Human Wellness. 4 : 47-55 Activity of Lactic Acid Bacteria Isolated
Papagianni, M. (2012). Metabolic Engineering of from Budu of West Sumatera to Food
Lactic Acid Bacteria for the Production of Preservatives. Pak. J. Nutr.,12 (7) : 628-635.
Industrially Important Compounds.
15